Nous cherchons à fournir un modèle animal réaliste d’embolie pulmonaire aiguë chez les porcs. Le modèle offre l’occasion d’étudier la physiopathologie de l’embolie pulmonaire, mais aussi d’évaluer de nouveaux traitements. De plus, le modèle est bien adapté à la formation pratique des travailleurs de la santé aux procédures interventionnelles.
Le domaine de l’embolie pulmonaire aiguë a connu des changements fondamentaux ces dernières années. De nouvelles thérapies pharmacologiques, et en particulier interventionnelles, sont en cours de développement, et des essais précliniques et le développement dans un cadre réaliste et in vivo sont nécessaires. Les modèles in vivo précédents ont utilisé des matériaux artificiels, tels que de la colle ou des billes de plastique, pour induire une embolie pulmonaire.
Dans ce modèle, nous utilisons le propre sang du porc pour créer des emboles autologues, qui sont donc similaires en taille, forme et texture à ceux trouvés chez les patients. Le modèle est bien caractérisé dans des études antérieures sur la physiopathologie et les interventions. Les évaluations ont porté sur les maillages hémodynamiques invasifs, diverses modalités d’imagerie, l’histologie et la biochimie.
Comme le porc a une anatomie similaire à celle d’un humain adulte et que les embolies et le phénotype hémodynamique sont similaires à ceux d’un patient atteint d’embolie pulmonaire aiguë, le modèle est idéal pour l’investigation des traitements pharmacologiques et interventionnels. Pour commencer, déballez un système d’oxygénation cardiopulmonaire et localisez les tubes en polychlorure de vinyle ou en PVC non recouverts d’héparine. Coupez sept de ces tubes en morceaux d’environ 30 centimètres de long et fermez une extrémité de chaque tube en PVC avec une grande pince hémostatique.
Obtenez un animal anesthésié, établissez un accès intravasculaire guidé par échographie et perfrez les gaines veineuses avec une solution saline. Pour la formation de caillots, faites d’abord une pause dans l’infusion de solution saline isotonique sur l’une des gaines veineuses et prélevez un total de 180 millilitres de sang dans la gaine. Répartissez le sang prélevé dans six tubes en PVC et fermez le haut de chaque tube avec une autre pince hémostatique.
Ensuite, suspendez les tubes verticalement pendant au moins trois heures à température ambiante. Ensuite, rincez la solution saline à travers la gaine et redémarrez l’infusion de solution saline. Pour l’insertion de la gaine 26F, mettez en pause la pompe à perfusion reliée à la gaine dans la veine jugulaire externe droite.
Insérez un long fil de guidage extra rigide dans la gaine. Faites avancer le fil caudalement à travers les veines centrales supérieures, la veine cave supérieure, l’oreillette droite et dans la veine cave inférieure guidée par fluoroscopie. Ensuite, extrayez lentement la gaine tout en observant par fluoroscopie que le fil-guide reste dans la veine cave inférieure.
À l’aide d’une serviette stérile, comprimez le point d’entrée tout en rétractant la gaine. Utilisez la technique Seldinger pour remplacer la gaine par un dilatateur français 16. Étendre l’incision cutanée si nécessaire en cas de résistance pour faire avancer la gaine dans la circulation veineuse sous guidage fluoroscopique.
Utilisez à nouveau la technique Seldinger pour remplacer le dilatateur 16 français par une gaine 26 français. Faites avancer lentement la gaine à travers les grosses veines jusqu’à ce que l’extrémité radio-opaque atteigne la veine cave supérieure. Rétractez soigneusement le dilatateur et le fil-guide hors du porc, en vous assurant que la gaine reste en place.
Prélevez du sang pour confirmer l’emplacement de la gaine et rincez avec 60 millilitres de solution saline pour vous assurer que la gaine est complètement rincée. Ensuite, placez une pile de serviettes stériles sous l’extrémité externe de la gaine et le champ stérile pour l’élever au-dessus du niveau du cœur. Rebranchez la pompe à perfusion et reprenez l’infusion saline.
Pour assembler le dispositif d’administration de l’embolie, déballez le reste du système d’oxygénation cardiopulmonaire dans des conditions stériles. À partir de l’appareil de transfusion automatique, localisez le tube en silicone de 10 centimètres de long fixé au bas du récipient de cardiotomie et la pièce de connecteur de trois pouces sur huit à un pouce sur quatre fixée au tube en silicone. Ensuite, coupez le tube de silicone en deux morceaux de taille égale et mettez de côté la moitié sans le connecteur pour le moment.
Après avoir localisé la ligne d’amorçage rapide, coupez-la à environ 20 centimètres de l’extrémité du verrou Luer et fixez l’extrémité ouverte à l’extrémité d’un pouce sur quatre pouces de la pièce de connecteur. Ensuite, connectez un morceau de trois pouces sur huit à un connecteur d’un à deux pouces avec l’extrémité ouverte du tube en silicone pour compléter la partie A.Pour la partie B, fixez la moitié restante du tube en silicone à l’extrémité distale de la canule de perfusion aortique. Localisez et fixez n’importe quel connecteur de trois pouces sur huit à un connecteur d’un par deux pouces avec l’extrémité ouverte du tube en silicone.
Pour évaluer le caillot, récupérez l’un des tubes en PVC contenant un embole complètement formé et placez doucement l’embole sur une serviette chirurgicale, en jetant le surnageant. Pour induire une embolie pulmonaire aiguë, placez un sac de 1 000 millilitres de solution saline isotonique dans un sac de perfusion sous pression. Insérez un kit de perfusion et gonflez le sac sous pression à au moins 200 millimètres de mercure, mais pas au-delà de la pression recommandée.
Ensuite, connectez la partie A du dispositif d’administration de l’embole à l’orifice latéral du robinet d’arrêt à trois voies, puis connectez le dernier tube en PVC à l’extrémité ouverte de la pièce A.Placez un embole dans le tube et remplissez le système de solution saline. Après avoir fixé la partie B à l’autre extrémité du tube en PVC, insérez le dispositif d’embolie dans la gaine française 26 et ouvrez le flux salin sous pression pendant environ cinq secondes pour infuser l’embole. Enfin, induire l’embolie jusqu’à ce que la pression artérielle pulmonaire moyenne ait doublé par rapport à la ligne de base ou jusqu’à ce que les six emboles aient été induites, et surveiller le porc pour s’assurer qu’il reste stable pendant 30 minutes.
La tomodensitométrie pulmonaire n’a montré aucun signe d’embolie pulmonaire au départ, mais après l’induction, plusieurs embolies étaient visibles, augmentant le pourcentage d’obstruction pulmonaire de 0 à 57,1 %.