Buscamos proporcionar un modelo animal realista de embolia pulmonar aguda en cerdos. El modelo crea una oportunidad para investigar la fisiopatología de la embolia pulmonar, pero también para evaluar nuevos tratamientos. Además, el modelo es muy adecuado para la formación práctica de los trabajadores sanitarios en procedimientos intervencionistas.
El campo de la embolia pulmonar aguda ha experimentado cambios fundamentales en los últimos años. Se están desarrollando nuevas terapias farmacológicas, y especialmente terapias intervencionistas, y se necesitan pruebas preclínicas y desarrollo en un entorno realista in vivo. Los modelos in vivo anteriores han utilizado materiales artificiales, como pegamento o perlas de plástico, para inducir la embolia pulmonar.
En este modelo, utilizamos la propia sangre del cerdo para crear émbolos autólogos, que por lo tanto son similares en tamaño, forma y textura a los que se encuentran en los pacientes. El modelo está bien caracterizado en estudios previos de fisiopatología e intervenciones. Las evaluaciones han incluido mallas hemodinámicas invasivas, varias modalidades de imagen, histología y bioquímica.
Dado que el cerdo tiene una anatomía similar a la de un humano adulto y el émbolo y el fenotipo hemodinámico son similares a los de un paciente con embolia pulmonar aguda, el modelo es ideal para la investigación de tratamientos farmacológicos e intervencionistas. Para empezar, desembale un sistema de oxigenación cardiopulmonar y localice los tubos de cloruro de polivinilo o PVC no recubiertos de heparina. Corta siete de estos tubos en pedazos de aproximadamente 30 centímetros de largo y cierra un extremo de cada tubo de PVC con pinzas hemostáticas grandes.
Obtener un animal anestesiado, establecer un acceso intravascular guiado por ultrasonido e infundir suero fisiológico en las vainas venosas. Para la formación de coágulos, primero detenga la infusión de solución salina isotónica en una de las vainas venosas y extraiga un total de 180 mililitros de sangre de la vaina. Divida la sangre extraída en seis tubos de PVC y cierre la parte superior de cada tubo con otra pinza de hemostático.
Luego, cuelgue los tubos verticalmente durante un mínimo de tres horas a temperatura ambiente. A continuación, enjuague la solución salina a través de la vaina y reinicie la infusión de solución salina. Para la inserción de la vaina 26F, detenga la bomba de infusión conectada a la vaina en la vena yugular externa derecha.
Inserte una guía larga y extra rígida a través de la funda. Avance el alambre caudalmente a través de las venas centrales superiores, la vena cava superior, la aurícula derecha y hacia la vena cava inferior guiado por fluoroscopia. A continuación, extraiga lentamente la vaina mientras observa mediante fluoroscopia que la guía permanece en la vena cava inferior.
Con una servilleta estéril, comprima el punto de entrada mientras retrae la funda. Utilice la técnica de Seldinger para cambiar la vaina por un dilatador francés de 16 pulgadas. Extienda la incisión en la piel si es necesario al encontrar resistencia para avanzar la vaina hacia la circulación venosa bajo guía fluoroscópica.
Emplea de nuevo la técnica de Seldinger para cambiar el dilatador de 16 franceses por una vaina de 26 franceses. Avance lentamente la vaina a través de las venas grandes hasta que la punta radiopaca llegue a la vena cava superior. Retraiga con cuidado el dilatador y la guía del cerdo, asegurándose de que la funda permanezca en su lugar.
Extraiga sangre para confirmar la colocación de la vaina y enjuague con 60 mililitros de solución salina para asegurarse de que la vaina se enjuague por completo. Luego, coloque una pila de servilletas estériles debajo del extremo externo de la funda y la cortina estéril para elevarla por encima del nivel del corazón. Vuelva a conectar la bomba de infusión y reanude la infusión de solución salina.
Para ensamblar el dispositivo de administración de émbolos, desempaque el resto del sistema de oxigenación cardiopulmonar en condiciones estériles. Del equipo de autotransfusión, ubique el tubo de silicona de 10 centímetros de largo conectado a la parte inferior del recipiente de cardiotomía y la pieza de conexión de tres por ocho a una por cuatro pulgadas conectada al tubo de silicona. Luego, corta el tubo de silicona en dos piezas del mismo tamaño y deja a un lado la mitad sin el conector por ahora.
Después de ubicar la línea de cebado rápido, córtela aproximadamente a 20 centímetros del extremo de bloqueo Luer y conecte el extremo abierto al extremo de una por cuatro pulgadas de la pieza del conector. Luego, conecte una pieza de tres por ocho pulgadas a una pieza de conector de una a dos pulgadas con el extremo abierto del tubo de silicona para completar la parte A. Para la parte B, conecte la mitad restante del tubo de silicona al extremo distal de la cánula de perfusión aórtica. Ubique y conecte cualquier conector de tres por ocho pulgadas a un conector de una por dos pulgadas con el extremo abierto del tubo de silicona.
Para evaluar el coágulo, extraiga uno de los tubos de PVC que contiene un émbolo completamente formado y coloque suavemente el émbolo en una servilleta quirúrgica, desechando el sobrenadante. Para inducir una embolia pulmonar aguda, coloque una bolsa de 1.000 mililitros de solución salina isotónica en una bolsa de infusión a presión. Inserte un equipo de infusión e infle la bolsa de presión a por lo menos 200 milímetros de mercurio, pero no más allá de la presión recomendada.
Luego, conecte la parte A del dispositivo de administración de émbolo al puerto lateral de la llave de paso de tres vías, seguido de conectar el último tubo de PVC al extremo abierto de la pieza A. Coloque un émbolo en el tubo y llene el sistema con solución salina. Después de conectar la pieza B al otro extremo del tubo de PVC, inserte el dispositivo de émbolo en la vaina francesa 26 y abra el flujo de solución salina presurizada durante unos cinco segundos para infundir el émbolo. Por último, induzca los émbolos hasta que la presión arterial pulmonar media se haya duplicado con respecto al valor basal o hasta que se hayan inducido los seis émbolos, y controle al cerdo para asegurarse de que permanece estable durante 30 minutos.
La TC pulmonar no mostró signos de embolia pulmonar al inicio del estudio, pero después de la inducción se observaron múltiples émbolos, aumentando el porcentaje de obstrucción pulmonar de 0 a 57,1%La necropsia reveló grandes émbolos autólogos en las arterias pulmonares.
