私たちは、ブタの急性肺塞栓症の現実的な動物モデルを提供しようとしています。このモデルは、肺塞栓症の病態生理学を調査するだけでなく、新しい治療法を評価する機会も生み出します。さらに、このモデルは、インターベンション処置における医療従事者の実践的なトレーニングにも適しています。
急性肺塞栓症の分野は、近年根本的な変化を遂げています。新しい薬理学的、特にインターベンション療法が開発されており、現実的なin vivo環境での前臨床試験と開発が必要です。これまでのin vivoモデルでは、接着剤やプラスチックビーズなどの人工材料を使用して肺塞栓症を誘発していました。
このモデルでは、ブタ自身の血液を使用して自家塞栓を作成するため、サイズ、形状、質感が患者に見られるものと似ています。このモデルは、病態生理学と介入に関する以前の研究で十分に特徴付けられています。評価には、侵襲的な血行動態メッシュ、さまざまなイメージングモダリティ、組織学、および生化学が含まれます。
ブタの解剖学的構造は成人と類似しており、塞栓性および血行動態の表現型は急性肺塞栓症の患者と類似しているため、このモデルは薬理学的および介入的治療の研究に理想的です。まず、心肺酸素システムを開梱し、ヘパリンコーティングされていないポリ塩化ビニルまたはPVCチューブを見つけます。これらのチューブのうち7本を長さ約30cmに切断し、各PVCチューブの一方の端を大きな止血鉗子で閉じます。
麻酔をかけた動物を入手し、超音波ガイド下血管内アクセスを確立し、静脈鞘に生理食塩水を注入します。血栓形成のためには、まず、静脈鞘の1つに等張生理食塩水注入を一時停止し、鞘から合計180ミリリットルの血液を採取します。採取した血液を6本のPVCチューブに分割し、各チューブの上部を別の止血鉗子で閉じます。
次に、チューブを室温で最低3時間垂直に吊るします。次に、生理食塩水をシースを通して洗い流し、生理食塩水の注入を再開します。26Fシースを挿入するには、右外頸静脈のシースに接続されている輸液ポンプを一時停止します。.
長くて硬いガイドワイヤーをシースに挿入します。ワイヤーを上部中央静脈、上大静脈、右心房を通って尾側に進め、透視法によって導かれて下大静脈に入ります。次に、ガイドワイヤーが下大静脈に残っていることを透視法で観察しながら、ゆっくりとシースを取り出します。
滅菌ナプキンを使用して、シースを引っ込めながらエントリーポイントを圧縮します。セルディンガー技術を使用して、シースを16フレンチ拡張器と交換します。抵抗に遭遇した場合は、必要に応じて皮膚切開部を伸ばし、透視指導の下でシースを静脈循環に進めます。
セルディンガー技術を再度使用して、16フレンチディレーターを26フレンチシースに交換します。放射線不透過性の先端が上大静脈に到達するまで、大きな静脈を通して鞘をゆっくりと進めます。拡張器とガイドワイヤーを豚から慎重に引っ込め、シースが所定の位置に留まるようにします。
鞘の配置を確認するために採血し、鞘が完全に洗い流されるように60ミリリットルの生理食塩水で洗い流します。次に、シースと滅菌ドレープの外側の端の下に滅菌ナプキンのスタックを配置して、心臓の高さより上に持ち上げます。輸液ポンプを再接続し、生理食塩水の注入を再開します。
塞栓送達装置を組み立てるには、無菌条件下で心肺酸素化システムの残りの部分を開梱します。.自動輸血セットから、心臓切開容器の底に取り付けられた長さ10センチメートルのシリコンチューブと、シリコンチューブに取り付けられた3×8インチから1×4インチのコネクタピースを見つけます。次に、シリコンチューブを同じサイズの2つにカットし、とりあえずコネクタのない半分を取っておきます。
クイックプライムラインを見つけたら、ルアーロックの端から約20センチメートルのところに切り取り、オープンエンドをコネクタピースの1×4インチの端に取り付けます。次に、3 x 8インチのピースをシリコンチューブの開放端で1〜2インチのコネクタピースに接続し、パートAを完成させます。シリコンチューブの開放端を持つ 1 x 2 インチのコネクタに、3 x 8 インチのコネクタを配置して取り付けます。
血栓を評価するには、完全に形成された塞栓を含むPVCチューブの1つを取り出し、塞栓を手術用ナプキンにそっと置き、上清を捨てます。急性肺塞栓症を誘発するには、1, 000ミリリットルの等張生理食塩水の袋を圧力注入袋に入れます。輸液セットを挿入し、圧力バッグを少なくとも200ミリメートルの水銀柱まで膨らませますが、推奨圧力を超えないようにします。
次に、塞栓送達装置のパーツAを三方ストップコックのサイドポートに接続し、続いて最後のPVCチューブをパーツAの開放端に接続します。パーツBをPVCチューブのもう一方の端に取り付けた後、塞栓装置を26フレンチシースに挿入し、加圧生理食塩水の流れを約5秒間開いて塞栓を注入します。最後に、平均肺動脈圧がベースラインから2倍になるまで、または6つの塞栓すべてが誘導されるまで塞栓を誘導し、ブタを監視して30分間安定していることを確認します。
肺CTスキャンでは、ベースラインでは肺塞栓症の兆候は見られませんでしたが、導入後、複数の塞栓が見られ、肺閉塞率が0から57.1%に増加しました。
