Мы стремимся предоставить реалистичную животную модель острой тромбоэмболии легочной артерии у свиней. Модель дает возможность исследовать патофизиологию тромбоэмболии легочной артерии, а также оценить новые методы лечения. Кроме того, модель хорошо подходит для практического обучения медицинских работников интервенционным процедурам.
Область острой тромбоэмболии легочной артерии претерпела фундаментальные изменения в последние годы. В настоящее время разрабатываются новые фармакологические, и особенно интервенционные методы лечения, а также необходимы доклинические испытания и разработки в реалистичных условиях in vivo. В предыдущих моделях in vivo использовались искусственные материалы, такие как клей или пластиковые шарики, чтобы вызвать тромбоэмболию легочной артерии.
В этой модели мы используем собственную кровь свиньи для создания аутологичных эмболов, которые поэтому похожи по размеру, форме и текстуре на те, которые встречаются у пациентов. Модель хорошо охарактеризована в предыдущих исследованиях патофизиологии и интервенций. Оценки включали инвазивные гемодинамические сетки, различные методы визуализации, гистологию и биохимию.
Поскольку свинья имеет анатомию взрослого человека, а фенотип эмболов и гемодинамики аналогичен фенотипу пациента с острой тромбоэмболией легочной артерии, модель идеально подходит для исследования фармакологических и интервенционных методов лечения. Для начала распакуйте систему сердечно-легочной оксигенации и найдите трубки из поливинилхлорида или ПВХ, не покрытые гепарином. Разрежьте семь таких трубок на части длиной примерно 30 сантиметров и закройте один конец каждой трубки из ПВХ большими щипцами для гемостата.
Получить животное под наркозом, установить внутрисосудистый доступ под контролем УЗИ, ввести в венозные оболочки физиологический раствор. Для образования тромба сначала сделайте паузу в вливании изотонического раствора на одну из венозных оболочек и наберите в общей сложности 180 миллилитров крови из оболочки. Разделите набранную кровь на шесть пробирок из ПВХ и закройте верхнюю часть каждой пробирки еще одним щипцом для гемостата.
Затем подвесьте трубки вертикально минимум на три часа при комнатной температуре. Затем промойте физиологический раствор через оболочку и возобновите инфузию солевого раствора. Для введения тубуса 26F приостановите работу инфузионного насоса, соединенного с тубусом в правой наружной яремной вене.
Вставьте длинную сверхжесткую направляющую проволоку через ножны. Продвигайте проволоку каудально через верхние центральные вены, верхнюю полую вену, правое предсердие и в нижнюю полую вену под контролем рентгеноскопии. Затем медленно извлеките оболочку, наблюдая с помощью рентгеноскопии, что проводник остается в нижней полой вене.
С помощью стерильной салфетки сожмите точку входа, одновременно втягивая влагалище. Используйте технику Сельдингера, чтобы поменять ножны на 16 французский расширитель. При возникновении сопротивления при возникновении сопротивления следует расширить разрез кожи, чтобы продвинуть влагалище в венозный кровоток под рентгеноскопическим контролем.
Снова используйте технику Сельдингера, чтобы обменять 16 французский расширитель на 26 французские ножны. Медленно продвигайте влагалище через крупные вены, пока кончик рентгеноконтраста не достигнет верхней полой вены. Осторожно втяните расширитель и направляющую проволоку из свиньи, следя за тем, чтобы оболочка оставалась на месте.
Возьмите кровь, чтобы подтвердить расположение оболочки, и промойте ее 60 миллилитрами физиологического раствора, чтобы убедиться, что оболочка полностью промыта. Затем положите стопку стерильных салфеток под внешний конец ножен и стерильную простыню, чтобы поднять ее выше уровня сердца. Снова подключите инфузионный насос и возобновите инфузию физиологического раствора.
Для сборки устройства для доставки эмболии распакуйте остальную часть системы сердечно-легочной оксигенации в стерильных условиях. В наборе для автоматического переливания найдите силиконовую трубку длиной 10 сантиметров, прикрепленную к дну кардиотомического контейнера, и соединительный элемент размером от трех на восемь до одного на четыре дюйма, прикрепленный к силиконовой трубке. Затем разрежьте силиконовую трубку на две одинаковые по размеру части и отложите пока половину без разъема.
Найдя быструю основную линию, отрежьте ее примерно в 20 сантиметрах от конца замка Люэра и прикрепите открытый конец к концу соединителя размером один на четыре дюйма. Затем соедините кусок размером три на восемь дюймов с соединительным элементом размером от одного до двух дюймов с открытым концом силиконовой трубки, чтобы завершить часть А. Для части Б прикрепите оставшуюся половину силиконовой трубки к дистальному концу канюли для перфузии аорты. Найдите и прикрепите любой разъем размером три на восемь дюймов к разъему размером один на два дюйма с помощью открытого конца силиконовой трубки.
Чтобы оценить сгусток, извлеките одну из трубок из ПВХ, содержащую полностью сформированный эмбол, и аккуратно положите эмбол на хирургическую салфетку, отбросив надосадочную жидкость. Чтобы вызвать острую тромбоэмболию легочной артерии, поместите пакет изотонического раствора объемом 1000 миллилитров в инфузионный мешок под давлением. Вставьте инфузионный набор и накачайте пресс-мешок не менее чем до 200 миллиметров ртутного столба, но не выше рекомендуемого давления.
Затем подсоедините часть А устройства подачи эмболии к боковому порту трехходового запорного крана, а затем подсоедините последнюю трубку из ПВХ к открытому концу части А. Поместите одну эмбол в трубку и заполните систему физиологическим раствором. После присоединения части B к другому концу трубки из ПВХ вставьте устройство embolus в 26 французских оболочек и откройте поток солевого раствора под давлением примерно на пять секунд, чтобы ввести эмбол. Наконец, вводите эмболы до тех пор, пока среднее давление в легочных артериях не удвоится по сравнению с исходным уровнем или пока не будут индуцированы все шесть эмболов, и следите за тем, чтобы свинья оставалась стабильной в течение 30 минут.
Компьютерная томография легких не показала признаков тромбоэмболии легочной артерии на исходном уровне, но после индукции были видны множественные эмболы, увеличивающие процент легочной обструкции с 0 до 57,1%.
