Procuramos fornecer um modelo animal realista de embolia pulmonar aguda em suínos. O modelo cria uma oportunidade para investigar a fisiopatologia da embolia pulmonar, mas também para avaliar novos tratamentos. Além disso, o modelo é adequado para treinamento prático para profissionais de saúde em procedimentos intervencionistas.
O campo da embolia pulmonar aguda passou por mudanças fundamentais nos últimos anos. Novas terapias farmacológicas e, especialmente, intervencionistas estão sendo desenvolvidas, e são necessários testes pré-clínicos e desenvolvimento em um ambiente realista e in vivo. Modelos in vivo anteriores usaram materiais artificiais, como cola ou contas de plástico, para induzir embolia pulmonar.
Nesse modelo, usamos o próprio sangue do porco para criar êmbolos autólogos, que são, portanto, semelhantes em tamanho, forma e textura aos encontrados nos pacientes. O modelo é bem caracterizado em estudos anteriores de fisiopatologia e intervenções. As avaliações incluíram malhas hemodinâmicas invasivas, várias modalidades de imagem, histologia e bioquímica.
Como o porco tem uma anatomia semelhante à de um ser humano adulto e os êmbolos e fenótipos hemodinâmicos são semelhantes aos de um paciente com embolia pulmonar aguda, o modelo é ideal para investigação de tratamentos farmacológicos e intervencionistas. Para começar, desembale um sistema de oxigenação cardiopulmonar e localize os tubos de cloreto de polivinila ou PVC não revestidos com heparina. Corte sete desses tubos em pedaços de aproximadamente 30 centímetros de comprimento e feche uma extremidade de cada tubo de PVC com uma grande pinça hemostática.
Obtenha um animal anestesiado, estabeleça o acesso intravascular guiado por ultrassom e infunda as bainhas venosas com solução salina. Para a formação de coágulos, primeiro, pause a infusão de solução salina isotônica em uma das bainhas venosas e retire um total de 180 mililitros de sangue da bainha. Divida o sangue coletado em seis tubos de PVC e feche a parte superior de cada tubo com outra pinça hemostática.
Em seguida, pendure os tubos verticalmente por no mínimo três horas em temperatura ambiente. Em seguida, lave a solução salina através da bainha e reinicie a infusão de solução salina. Para a inserção da bainha 26F, pause a bomba de infusão conectada à bainha na veia jugular externa direita.
Insira um fio-guia longo e extra rígido através da bainha. Avance o fio caudalmente através das veias centrais superiores, da veia cava superior, do átrio direito e na veia cava inferior guiada por fluoroscopia. Em seguida, extraia lentamente a bainha enquanto observa por fluoroscopia que o fio-guia permanece na veia cava inferior.
Usando um guardanapo estéril, comprima o ponto de entrada enquanto retrai a bainha. Use a técnica de Seldinger para trocar a bainha por um dilatador de 16 French. Estenda a incisão na pele, se necessário, ao encontrar resistência para avançar a bainha para a circulação venosa sob orientação fluoroscópica.
Empregue a técnica de Seldinger novamente para trocar o dilatador de 16 French por uma bainha de 26 French. Avance lentamente a bainha através das veias grandes até que a ponta radiopaca atinja a veia cava superior. Retraia cuidadosamente o dilatador e o fio-guia para fora do pig, garantindo que a bainha permaneça no lugar.
Retire sangue para confirmar a colocação da bainha e lave com 60 mililitros de solução salina para garantir que a bainha esteja totalmente lavada. Em seguida, coloque uma pilha de guardanapos estéreis sob a extremidade externa da bainha e a cortina estéril para elevá-la acima do nível do coração. Reconecte a bomba de infusão e retome a infusão de solução salina.
Para montar o dispositivo de entrega de êmbolo, desembale o restante do sistema de oxigenação cardiopulmonar em condições estéreis. No conjunto de autotransfusão, localize o tubo de silicone de 10 centímetros de comprimento preso ao fundo do recipiente de cardiotomia e a peça do conector de três por oito a uma por quatro polegadas presa ao tubo de silicone. Em seguida, corte o tubo de silicone em dois pedaços de tamanhos iguais e reserve a metade sem o conector por enquanto.
Depois de localizar a linha de escorva rápida, corte-a a aproximadamente 20 centímetros da extremidade da trava Luer e prenda a extremidade aberta à extremidade de uma por quatro polegadas da peça do conector. Em seguida, conecte uma peça de três por oito polegadas a uma peça de conector de uma a duas polegadas com a extremidade aberta do tubo de silicone para completar a parte A. Para a parte B, conecte a metade restante do tubo de silicone à extremidade distal da cânula de perfusão aórtica. Localize e conecte qualquer conector de três por oito polegadas a um conector de uma por duas polegadas com a extremidade aberta do tubo de silicone.
Para avaliar o coágulo, recupere um dos tubos de PVC contendo um êmbolo totalmente formado e coloque suavemente o êmbolo em um guardanapo cirúrgico, descartando o sobrenadante. Para induzir embolia pulmonar aguda, coloque uma bolsa de 1.000 mililitros de solução salina isotônica em uma bolsa de infusão de pressão. Insira um conjunto de infusão e encha a bolsa de pressão a pelo menos 200 milímetros de mercúrio, mas não além da pressão recomendada.
Em seguida, conecte a parte A do dispositivo de entrega de êmbolo à porta lateral da torneira de três vias, seguida de conectar o último tubo de PVC à extremidade aberta da parte A. Coloque um êmbolo no tubo e encha o sistema com solução salina. Depois de conectar a parte B à outra extremidade do tubo de PVC, insira o dispositivo de êmbolo na bainha de 26 French e abra o fluxo de solução salina pressurizada por cerca de cinco segundos para infundir o êmbolo. Finalmente, induza os êmbolos até que a pressão arterial pulmonar média dobre em relação à linha de base ou até que todos os seis êmbolos tenham sido induzidos e monitore o porco para garantir que ele permaneça estável por 30 minutos.
A TC pulmonar não mostrou sinais de embolia pulmonar no início do estudo, mas após a indução, múltiplos êmbolos foram visíveis, aumentando a porcentagem de obstrução pulmonar de 0 para 57,1%A necropsia revelou grandes êmbolos autólogos nas artérias pulmonares.
