11.1 : Хроматографические методы: терминология

Хроматография — это аналитический метод, широко используемый в таких областях, как химия, биология, экология и фармацевтика, для разделения компонентов смеси и идентификации веществ между ними. Процесс хроматографии основан на взаимодействии двух отдельных фаз: неподвижной и подвижной. Неподвижная фаза фиксируется на месте с помощью поддерживающего материала, в то время как подвижная фаза движется по ней, перенося растворенные вещества. По мере того как подвижная фаза перемещается через неподвижную фазу, компоненты смеси по-разному взаимодействуют с каждой фазой в зависимости от их химических свойств, что приводит к их разделению.

Хроматографию можно разделить на несколько типов в зависимости от природы подвижной и неподвижной фаз, например, газовая хроматография (ГХ), жидкостная хроматография (ЖХ) и тонкослойная хроматография (ТСХ). Каждый тип подходит для определенных применений в зависимости от физического состояния анализируемых веществ и желаемого разрешения разделения.

Жидкость, вытекающая из хроматографической колонки, проходит мимо детектора, который создает сигнал при обнаружении разделяемого растворенного вещества. Затем этот сигнал наносится на график в зависимости от времени элюирования или объема элюированного раствора, что приводит к серии пиков, известных как хроматограмма.

В хроматографии несколько ключевых терминов помогают описать процесс и результаты. Объем удерживания относится к подвижной фазе, необходимой для переноса аналита от точки инъекции до максимума пика на хроматограмме. Тесно связано с ним время удерживания, которое представляет собой продолжительность времени, которое необходимо, чтобы аналит прошёл через систему. Оно рассчитывается путем деления объема удерживания на скорость потока подвижной фазы. Еще одним важным понятием является коэффициент удерживания (часто называемый коэффициентом емкости), который измеряет отношение времени, которое аналит проводит в неподвижной фазе, ко времени, которое он проводит в подвижной фазе.

Кроме того, время мёртвого объёма указывает время, необходимое для выхода несорбируемых веществ из системы. Соответствующий мёртвый объем представляет собой количество подвижной фазы, необходимое для элюирования этих несорбируемых растворенных веществ. При обсуждении пиков на хроматограмме ширина пика, также известная как ширина базовой линии, определяется как ширина пика на его базовой линии, измеренная там, где пик начинает расти и где он возвращается к базовой линии. Наконец, разрешение измеряет степень разделения между двумя соседними пиками, отражая, насколько хорошо компоненты смеси отличаются друг от друга.