11.1 : Méthodes chromatographiques: terminologie

La chromatographie est une technique d'analyse largement utilisée dans des domaines tels que la chimie, la biologie, les sciences de l'environnement et les produits pharmaceutiques pour séparer les composants d'un mélange et identifier les substances entre eux. Le processus de chromatographie repose sur les interactions entre deux phases distinctes : la phase stationnaire et la phase mobile. La phase stationnaire est fixée en place par un matériau de support, tandis que la phase mobile se déplace sur elle, transportant les solutés. Lorsque la phase mobile traverse la phase stationnaire, les composants du mélange interagissent différemment avec chaque phase en fonction de leurs propriétés chimiques, conduisant à leur séparation.

La chromatographie peut être classée en plusieurs types en fonction de la nature des phases mobile et stationnaire, telles que la chromatographie en phase gazeuse (GC), la chromatographie liquide (LC) et la chromatographie sur couche mince (TLC). Chaque type est adapté à des applications spécifiques, en fonction de l'état physique des substances analysées et de la résolution souhaitée de la séparation.

Le liquide qui s'écoule de la colonne de chromatographie passe devant un détecteur, qui crée un signal lorsqu'il détecte le soluté séparé. Ce signal est ensuite tracé en fonction du temps d'élution ou du volume de solution élué, ce qui donne lieu à une série de pics appelés chromatogramme.

En chromatographie, plusieurs termes clés permettent de décrire le processus et les résultats. Le volume de rétention fait référence à la phase mobile nécessaire pour transporter un analyte du point d'injection au pic maximum du chromatogramme. Le temps de rétention est étroitement lié, c'est-à-dire la durée nécessaire à un analyte pour traverser le système. Il est calculé en divisant le volume de rétention par le débit de la phase mobile. Un autre concept important est le facteur de rétention (souvent appelé facteur de capacité), qui mesure le rapport entre le temps que l'analyte passe dans la phase stationnaire et le temps qu'il passe dans la phase mobile.

De plus, le temps de vide indique le temps nécessaire aux solutés non retenus pour s'éluer du système. Le volume de vide correspondant est la quantité de phase mobile nécessaire pour éluer ces solutés non retenus. Lorsqu'on parle des pics d'un chromatogramme, la largeur du pic, également appelée largeur de la ligne de base, est définie comme la largeur du pic à sa ligne de base, mesurée à l'endroit où le pic commence à monter et à l'endroit où il revient à la ligne de base. Enfin, la résolution mesure le degré de séparation entre deux pics adjacents, reflétant la façon dont les composants d'un mélange se distinguent les uns des autres.