JoVE Logo

Sign In

כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית נפוצה המשמשת בתחומים כמו כימיה, ביולוגיה, מדעי הסביבה ורוקחות, לצורך הפרדת מרכיבי תערובת וזיהוי חומרים בתוכה. תהליך הכרומטוגרפיה מבוסס על האינטראקציות בין שתי פאזות נפרדות: הפאזה הנייחת והפאזה הניידת. הפאזה הנייחת קבועה במקומה באמצעות חומר תומך, בעוד הפאזה הניידת נעה מעליה ונושאת את המומסים. כאשר הפאזה הניידת נעה דרך הפאזה הנייחת, רכיבי התערובת מתקשרים באופן שונה עם כל פאזה בהתאם לתכונותיהם הכימיות, מה שמוביל להפרדתם.

ניתן לסווג כרומטוגרפיה לסוגים שונים בהתבסס על אופי הפאזות הניידת והנייחת, כמו כרומטוגרפיה בגזים (GC), כרומטוגרפיה בנוזלים (LC) וכרומטוגרפיה בשכבה דקה (TLC). כל סוג מתאים ליישומים מסוימים בהתאם למצב הפיזי של החומרים הנבדקים ולרזולוציית ההפרדה הרצויה.

הנוזל הזורם מתוך עמודת הכרומטוגרפיה עובר דרך גלאי, שיוצר אות כשהוא מזהה את המומס המופרד. אות זה מוצג בגרף כנגד זמן האלוציה או נפח התמיסה המופרדת, ויוצר סדרת פיקים המכונה כרומטוגרמה.

בכרומטוגרפיה קיימים מונחים מרכזיים המסייעים לתאר את התהליך ואת תוצאותיו. נפח הריטנציה מתייחס לנפח הפאזה הניידת הנדרש לנשיאת האנליט מנקודת ההזרקה לשיא הפיק בכרומטוגרמה. קשור לכך הוא זמן הריטנציה, המייצג את משך הזמן הנדרש לאנליט לנוע דרך המערכת. זמן זה מחושב על ידי חלוקת נפח הריטנציה בקצב הזרימה של הפאזה הניידת. מקדם הריטנציה (או גורם הקיבול) מודד את היחס בין הזמן שבו האנליט שוהה בפאזה הנייחת לבין הזמן שבו הוא שוהה בפאזה הניידת.

בנוסף, זמן החלל הריק מציין את הזמן הנדרש לממסים שאינם מתעכבים לצאת מהמערכת. הנפח המתאים לכך הוא נפח החלל הריק, המייצג את כמות הפאזה הניידת הנדרשת להוצאת מומסים שאינם מתעכבים. בהתייחסות לפיקים בכרומטוגרמה, רוחב הפיק (המכונה גם רוחב הקו הבסיסי) מוגדר כרוחב הפיק בקו הבסיס, ונמדד מהנקודה שבה הפיק מתחיל לעלות ועד לנקודה שבה הוא חוזר לקו הבסיס. לבסוף, רזולוציה מודדת את רמת ההפרדה בין שני פיקים סמוכים ומשקפת עד כמה מרכיבי התערובת מובדלים זה מזה.

Tags

ChromatographyAnalytical TechniqueStationary PhaseMobile PhaseGas ChromatographyLiquid ChromatographyThin layer ChromatographyChromatogramRetention VolumeRetention TimeRetention FactorVoid TimePeak WidthResolution

From Chapter 11:

article

Now Playing

11.1 : שיטות כרומטוגרפיות: מינוח

Principles of Chromatography

643 Views

article

11.2 : שיטות כרומטוגרפיה: סיווג

Principles of Chromatography

736 Views

article

11.3 : ספיחה וחלוקת אנליטים

Principles of Chromatography

528 Views

article

11.4 : דיפוזיה בעמודות כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

360 Views

article

11.5 : רזולוציית כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

298 Views

article

11.6 : יעילות עמודה: תיאוריית הצלחות

Principles of Chromatography

388 Views

article

11.7 : יעילות עמודה: תיאוריית הקצב

Principles of Chromatography

214 Views

article

11.8 : אופטימיזציה של הפרדת כרומטוגרפיה

Principles of Chromatography

290 Views

article

11.9 : כרומטוגרפיית ג'ל סיליקה : סקירה

Principles of Chromatography

823 Views

article

11.10 : כרומטוגרפיה ברובד דק (TLC)

Principles of Chromatography

872 Views

article

11.11 : כרומטוגרפיה גזית: מבוא

Principles of Chromatography

527 Views

article

11.12 : כרומטוגרפיה גזית: סוגי עמודות ופאזות נייחות

Principles of Chromatography

376 Views

article

11.13 : מערכות הזרקת דגימה

Principles of Chromatography

306 Views

article

11.14 : כרומטוגרפיית גז: סקירה של גלאים

Principles of Chromatography

301 Views

article

11.15 : גז כרומטוגרפיה: סוגי גלאים-I

Principles of Chromatography

291 Views

See More

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved