Kuru göz sendromunun güvenilir bir modelini oluşturmaya kendimizi adadık. Sulu eksiklik kuru gözlerin patolojik durumunu, ELG ve ILG'yi gözlerden çıkararak başarılı bir şekilde çoğalttık. ILG'nin derin anatomik yerleşimi nedeniyle, ELG ve ILG'nin kombine eksizyonu daha zor ve invazivdir.
Ayrıca operasyon sırasında kanamaya neden olabilir, bu da çalışma kabiliyetimize yüksek bir talep getirir. Modelimiz, hayvana minimum zarar vererek önemli sulu mizah eksikliği olan kuru gözü başarıyla indükledi ve cerrahi prosedürün önemli ölçüde basitleştirilmesini sağladı. Oluşturulan fare modeli, ilgili araştırmalar için güçlü destek sağlayan Sjögren sendromu ve Stevens-Johnson sendromu gibi şiddetli kuru göz sendromuna oldukça benzer.
Yöntem, sistematik enjeksiyon etkilerinden kaçınır, lokal enjeksiyon etkisinin zayıf dayanıklılığını ele alır, kuru göz modelinin eksikliklerinin üstesinden gelir ve özel bir hayvan ortamına olan ihtiyacı ortadan kaldırarak deneysel süreci basitleştirir. Başlamak için, anestezi uygulanmış fareyi lateral dekübit pozisyonuna getirin ve cerrahi alanı ameliyat mikroskobu altında ortaya çıkarın. Dişli forseps kullanarak, farenin yüzünün sağ tarafındaki cildi sıkıştırın.
Çizginin orta noktasında, dış oracle ve mandibular çizgiyi gözün iç köşesine kesen bir kesi yapın. Daha sonra kas dokusunu açığa çıkarın ve kas üzerinde bulunan ELG'yi dikkatlice çıkarın. Şimdi cilt kesisini gözün iç köşesine kadar uzatın.
Kası künt bir şekilde ayırın ve kasın altındaki açık kırmızı bezi bulun. Sonra soyun ve ILG'yi çıkarın. İğne tutucu, oftalmik cerrahi makas ve forseps ile 5-0 sütür kullanarak kesiyi dikin.
Enfeksiyonu önlemek için operasyonun sonunda loksasin merhem uygulayın. Tek taraflı ELG ve ILG'yi çıkardıktan sonra, fareleri ritmik 12 saatlik aydınlık-karanlık döngüsünün olduğu ve yiyecek ve suya serbest erişimin olduğu bir ortama yerleştirin. Yırtılma ölçümü için iyi paketlenmiş bir fenol kırmızı ipliği alın.
Sulu eksiklik kuru göz faresini uyuşturduktan sonra, ölçülecek gözün alt göz kapağını nazikçe aşağı çekin. Fenol kırmızı ipliğinin üst kısmını alt göz kapağının iç ve dış üçte birlik kısmına yerleştirin ve zamanlayıcıyı hemen başlatın. Ayrılan süreden sonra, alt göz kapağını dikkatlice geri çekin ve fenol kırmızı ipliği dikkatli bir şekilde aşağı doğru çıkarın.
İpliğin tepesinden kırmızı kısmın tamamına kadar ölçmek için fenol kırmızı ipliğin dış torbasında verilen ölçeği kullanın. Testin süresini doğru bir şekilde kaydetmek için elektronik bir kronometre kullanın. Boyama için doku dilimleri hazırlamak için, ötenazi fareden çıkarılan gözbebeklerini alın.
Daha sonra gözbebeklerini optimum bir kesme sıcaklığı bileşiğine gömün ve beş ila yedi mikrometre kalınlığında donma dokusu dilimleri elde etmek için donmuş bir mikrotom kullanın. Kornea mRNA ekstraksiyonu için, mikroskop altında göz küresini arka kutuptan kesmek için makas ve forseps kullanın. Lensi ayırın ve fazla sklera ve irisi temizleyin, ancak 0,5 milimetrelik beyaz sklerayı ve tüm korneayı bırakın.
Gözyaşı bezi rezeksiyonundan iki haftalık bir süre sonra, kuru göz farelerinde gözyaşı salgısı normal gruba göre önemli ölçüde azaldı. Kuru göz grubunun kornea epitelinde ve stromal tabakasında skuamöz metaplazi ve inflamatuar hücre birikimi gözlendi. Keratin 12'nin ekspresyonu, kuru göz grubunun kornea epitel hücrelerinde normal gruba göre anlamlı derecede düşüktü.
Kuru göz grubunun kornea epitel hücrelerinde Pax6 ekspresyonu normal gruba göre önemli ölçüde azalmıştır. Anormal şekilde farklılaşmış kornea epitel hücrelerinin bir belirteci olan Sprr1b'nin ekspresyonu, kuru göz grubunda normal gruba göre anlamlı derecede yüksekti.
