배아 및 유충 제브라피시에서의 고분해능 세포 이식

우리 연구실은 발달 및 재생 과정에서 신경계에서 세포 연결성이 어떻게 패턴화되는지 연구합니다. 우리는 환경 신호가 다른 유전적, 공간적 또는 시간적 환경에 놓일 때 행동이 어떻게 변하는지 다루기 위해 세포 이식을 사용하여 환경 신호가 신경 행동에 어떤 영향을 미치는지 조사합니다. 이식은 제브라피시 배아에서 일반적이지만, 일반적으로 세포가 대부분 분화되지 않은 배반(blastula)과 위(gastrula) 단계에서 수행됩니다.

이것은 유전적 모자이크를 생성하는 데 유용하지만, 공간적 시간적 신호 역학이 이러한 단계를 넘어서는 발달에 어떻게 영향을 미치는지 조사하는 기술의 능력을 제한합니다. 여기에서는 수정 후 최소 7일까지 배아와 유충의 분화된 뉴런을 포함한 세포를 이식할 수 있는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 높은 공간적, 시간적 해상도로 하나의 세포만 이식할 수 있으며 숙주 동물에서 이식된 세포를 장기간 추적하기 위해 유전자 형광 라벨링을 사용할 수 있습니다.

이 프로토콜을 사용하면 다양한 발달 단계에서 세포의 유전적, 공간적, 시간적 환경을 변경할 수 있으며, 발달 및 재생 중 스타일 신호의 원리를 조사할 수 있는 새로운 기회를 열 수 있습니다.