Embriyonik ve Larva Zebra Balıklarında Yüksek Çözünürlüklü Hücre Nakli

Laboratuvarımız, gelişim ve rejenerasyon sırasında sinir sisteminde hücresel bağlantının nasıl şekillendiğini inceler. Farklı genetik, mekansal veya zamansal ortamlara yerleştirildiklerinde davranışlarının nasıl değiştiğini ele almak için hücre nakli kullanarak çevresel sinyallerin sinirsel davranışı nasıl etkilediğini inceliyoruz. Transplantasyon zebra balığı embriyolarında yaygın olmakla birlikte, genellikle hücrelerin büyük ölçüde farklılaşmadığı blastula ve gastrula aşamalarında gerçekleştirilir.

Bu, genetik mozaikler oluşturmak için değerlidir, ancak tekniğin, mekansal zamansal sinyal dinamiklerinin bu aşamaların ötesindeki gelişimi nasıl etkilediğini sorgulama yeteneğini sınırlar. Burada, embriyolarda ve larvalarda farklılaşmış nöronlar da dahil olmak üzere hücrelerin döllenmeden en az yedi gün sonrasına kadar transplantasyonuna izin veren bir protokol sunuyoruz. Yüksek uzamsal ve zamansal çözünürlüğe sahip bir hücre kadar küçük bir hücreyi nakledebilir ve konakçı hayvanda nakledilen hücrelerin uzun süreli izlenmesi için genetik floresan etiketleme kullanabiliriz.

Bu protokol, birçok farklı gelişim aşamasında hücrelerin genetik, mekansal ve zamansal ortamını değiştirmemize izin vererek, gelişim ve rejenerasyon sırasında stil sinyalleme ilkelerini incelemek için yeni fırsatlar sunar.