The authors would like to acknowledge the Infectious Disease Department at Brigham and Women&#8217;s Hospital especially Michael S. Calderwood, MD, MPH for helping us construct this protocol. We would also like to thank the Institution&#8217;s endoscopy center and it&#8217;s leadership team for their support.

참고 :이 원고 발행 시점에서 임상 시험용 신약 (IND) 응용 프로그램이 임상에서 재발 성 CDI에 대한 FMT를 수행 할 필요가 없습니다. FMTs이 연구의 일부로서 또는 다른 표시에 대해 수행되는 경우, 또는 동등한 IND 응용 프로그램 (18)을 요구할 수있다. 규제 기관은 가능성 CDI 및 기타 질환에 적용되는 FMT의 안전성과 유효성을 지속적으로 평가하고 그래서 전에 FMT 프로그램의 시작과 한 번 두 달에 하나 하나에 각각의 위치에 규제 요구 사항을 확인하는 것이 좋습니다 적극적 FMT을 수행하는 단계를 포함한다. 주 후보는 배설물 이식뿐만 아니라 대장 내시경 검사에 동의 기꺼이해야합니다. FMT에 적합한 후보자 1. 확인 <ol><li> 기존의 항생제에 응답하지 않는 재발 CDI 또는 난치성 질환 환자가 환자 appropriat 있습니다FMT의 전자 후보. 참고 : CDI 재발하는 것은 독소 테스트 또는 PCR, 입원이 필요 개의 에피소드에 의해 확인 CDI 3 개 이상의 에피소드의 역사로 정의된다. </li><li> 환자가 안전하게 대장 내시경 검사를 받아야 할 수 있는지 확인하십시오. 이 내시경의의 재량이다. </li></ol> 2. 의자 기증 선택 참고 : 의자 기증 선택 CDI의 치료에 적용 및 기타 장애의 치료에 적용 할 수없는 경우가 있습니다. <ol><li> 환자가 기증자를 식별해야합니다. 잠재적 기증자는 초기 소화기 클리닉 방문시받는 사람으로 존재해야한다. 기부자는 배우자, 가족, 또는 친구가 될 수 있습니다. 기부자 한 다른 기준이 충족되는받는 사람과 동일 거주지에 살고있다. </li></ol> 3. 기증자 적격성 <ol><li> 포함 기준은 : 기증자가 건강한 성인인지 확인 (≥18 세)와 매일 형성 장 m가ovement. </li><li> 제외 기준 : <ol><li> 기증자가 항생제를 복용하지 않거나 이전 3 개월 감염에 대한 약물 치료에 항생제를 촬영하지 않았 음을 확인합니다. </li><li> 기증자가 만성 변비 또는 사용 변비약의 역사를 가지고 있지 않음을 확인합니다. 또한, 염증성 장 질환, 만성 설사, 현미경 대장염, 장 / 대장 암, 또는 위장 / 기타 체중 감소 수술의 역사의 개인 역사의 역사를 가지고 있지 않은 기증자를 확인합니다. </li><li> 감염성 설사이 중요한 영역으로 기증자 최근 (지난 3 개월 이내에) 여행을하지 않은 지 확인하십시오. 그들은 여행과 설사를 경험 한 경우 그들은 exluded해야합니다. </li><li> 기증자가 어떤 면역 억제제를 복용하지 및 전신 화학 요법에없는되어 있는지 확인합니다. </li><li> 기증자가 대사 증후군,자가 면역 조건이나 아토피 질환이 없음을 확인합니다. </li></ol></li><li> 기록 죄수를 얻전에 선별 검사의 민감한 특성상 선별 검사에 기증자와받는 사람에서 보냈습니다. 시험 결과를 상대방과 공유되지 쌍방을 안심. </li></ol> 4. 심사 참고 :이 검사 프로토콜은 브리검 매사추세츠 여성 병원에서 환자에 대한 적응했다, 미국은 이전에 모든 적절한 선별 검사가 고려되었는지 확인하기 위해 FMT 프로토콜을 시작으로 질병 부서 및 병원 감염 관리 감염 컨설팅 고려하십시오. <ol><li> 받는 사람 : <ol><li> 초기 병원 방문시,받는 검사에 대해 다음과 실험실 테스트를 보내 (이 감염성 질환에 대한 기본 검사를 구축하여 미래의 전송에는 문제가 없는지 확인). </li><li> A 형 간염 (IgG에와 IgM 항체), B 형 간염 (HbsAg / Ab의 및 HbcAb), C 형 간염 Ab의, HIV-1 / 2 (Ab의 바이러스 성 부하) 및 매독 (TP-의 IgG) 실험실 혈액 t을 수행ESTS. </li><li> 이 초기 평가에서 식품 알레르기에 대한 철저한 역사를 가져옵니다. </li></ol></li><li> 기증자 : <ol><li> 폐기되지 형성된 대변을 보장하기 위해 심사 전에 미생물학 실험실과 좌표. </li><li> 기증자가 제 3 항에 따라 자격 기준을 충족하는 경우 기증자 선별을 위해 아래의 실험실 테스트를 주문하십시오. </li><li> A 형 간염 (IgG에와 IgM 항체), B 형 간염 (HBsAg / Ab의 및 HBcAb), C 형 간염 Ab의, HIV-1 / 2 (Ab의 바이러스 성 부하) 및 매독 (TP-의 IgG) 실험실 혈액 검사를 수행합니다. </li><li> (문화로) C. 디피 일상 대변 문화, 지아 디아 항원,와 포자충 항원과 난자와 기생충 실험실 의자 테스트를 수행합니다. </li><li> 더 이상 30 일 이상 기증자를 화면 바람직 1~2주 전에 예약 절차. 참고 : 기부자들이 기부에 대한 자격이없는 이상 설사 또는 액체 대변을 개발합니다. </li></ol></li><li> 변호사 식품에 기증자가에 기반을 방지하기 위해받는 사람의 음식에 대한 알레르기. 기증자는받는 사람이 기부하기 전에 오일에 대한 알레르기가되는 음식을 섭취해서는 안된다. </li></ol> 5. 사전 절차 준비 <ol><li> 받는 사람 : <ol><li> 받는 사람이 경구 반코마이신에 이미없는 경우 초기 병원 방문에서, 절차 이전에 적어도 7-10일 125 mg을 매일 6 시간 반코마이신 시작합니다. </li><li> 전 대장 내시경 검사 대장 준비를 위해 내시경 센터의 지침에 수신자를 제공은 예약 절차 전에 일을 수행 할 수 있습니다. 받는 사람은 절차에 앞서 일주일 동안 내시경 센터의 표준식이 지침을 따라야합니다. </li><li> 절차 전날 밤 반코마이신의 마지막 복용량을 수신자에게 지시합니다. </li></ol></li><li> 기증자 : <ol><li> 여러 대변 수집 컵 기증자를 제공합니다. 라벨 화장실 삽입 (모자)와 컵받는 사람의 레이블뿐만 아니라 3 빈 SPecimen 용기. 어떤 의자 컬렉션 이상 6 시간 처리하기 전에 (절차의 시간) 시작하지 않으려면 기증자에게 문의하십시오. 참고 : 기증자가 여러 대변 샘플을 제공하는 경우, 그들은 날짜와 시간으로 표시해야한다. 신선한 샘플을 사용 (하나 가득 표본 컵 충분합니다). </li><li> 에받는 사람이 절​​차에 그들과 함께 기증자의 대변 샘플을 제공합니다 있는지 확인하십시오. </li><li> 실온에서 대변 샘플을 저장합니다. 어떤 무형의 대변을 제외합니다. 위생 하수 시스템에서 사용하지 않는 대변을 폐기 (연구 목적으로 저장하지 않는 한). </li></ol></li></ol> 6. 의자 준비 참고 :이 절차를 확인 논의와 병원의 감염 관리 부서에 의해 승인됩니다. <ol><li> 대변​​을 준비 할 때 개인 보호 장비를 착용 할 것. </li><li> OTH의 오염을 방지 십팔 인치 스플래시 존 존재하는 지정된 작업 영역 내시경 방 자 준비어 재료. </li><li> 병원 승인 살균제로 지정된 영역을 청소 준비를 대변하기 전에. </li><li> 오염을 방지하기 위해 일회용 패드 영역을 커버. </li><li> 십사온스 단일 속도 믹서에 형성 대변을 전송하고 생리 식염수 500 CC를 추가합니다. </li><li> 적어도 1 분 동안 또는 그 액체 슬러리 농도에 도달 할 때까지 내용물을 혼합. 믹서의 뚜껑을 제거 할 때 유출되지 않도록주의해야합니다. </li><li> 어떤 고체 폐기물을 제거하기 위해 플라스틱 팔쿼트 유역에 스트레이너를 통해 솔루션을 붓고. 스트레이너를 폐기하십시오. </li><li> 60 CC 루어 잠금 주사기에 긴장 솔루션 (대장 내시경 검사에 의한 표준 FMT 아홉에 약 8)를 그립니다. 플러시에 대한 생리 식염수의 추가 60 CC를 그립니다. </li></ol> 대장 내시경 검사를 통해 7. 대변 이식 <ol><li> 수행하거나 infusio으로 지원하면서 내시경 단위 정책에 따라 개인 보호 장비를 착용N. </li><li> 가능하면 환자가 시술 후 대변을 유지 협력 할 수있을 수 있도록, 빛 진정 작용을 고려하십시오. </li><li> 회장 말단에 대장 내시경 검사를 수행 (또는까지 기술적으로 가능). colonscope, 세척 및 흡입 잔여 액체 대변의 삽입에. </li><li> 염증하지만 점막 조직 검사의 증거 점막 벽 검사는 정기적으로 FMT 과정에서 수행되지 않습니다. 참고 : 전체 대장 내시경 검사로 인해 염증의 정도에 안전 여부를 확인합니다. 그렇지 않은 경우, 주입과 더 제한된 S 상 결장경 검사 (대변 슬러리의 절반을 사용)을 고려한다. </li><li> 확장 튜브와 생검 채널 캡을 사용하여 colonoscope의 생검 채널을 통해 회장 말단에 한 번 60 CC (한 주사기)를 주입한다. </li><li> 의자 주사기의 응용 프로그램 사이에 막힘을 방지하기 위해 생리 식염수로 채널을 세척하십시오. </li><li> 맹장에 대변의 또 다른 60 CC를 주입 한 다음 오른쪽 C에서 반복olon. </li><li> 균일 미드 횡행 결장에 도달 할 때까지 모든 네 결장 벽 사분면에 슬러리를 분배하는 동안은 30cc마다 5~10cm를 계속 주입. 대변​​ 주사기 사이에 식염수로 세척해야합니다. 참고 : 슬러리는 매우 점성이있는 경우는 주사기에 상당한 힘으로 밀어해야 할 수도 있습니다. 생검 채널 캡 colonoscope에서 분리 대변 내용의 유출이 발생하지 않도록주의해야합니다. 자주 세척 슬러리를 쉽게 통과를 허용 할 것이다. 슬러리를 추진 지속적인 어려움이있는 경우, 두 번째 시간 동안 남은 도너 대변을 재 긴장 또는 생리 식염수로 희석하여 더 고려한다. </li><li> 액체 대변을 흡입하지 않도록주의하면서 주사기 배럴을 변경할 때 철수에 과잉 공기를 기음. 주 : 환자 변실금 알려진 경우, 마지막 주사기 중에 누출 및 사후 절차를 피하기 위해 간만 곡보다 더 낮은 주입되어서는 안된다. </li><li> 일 회FMT와 전자 대장 내시경 검사가 완료되면만큼 그들은 할 수있는 발판을 유지하는 환자를 조언한다. 대장 내시경 검사가 완료된 후 그들은 정규식이 요법과 약물 두 시간 다시 시작할 수 있습니다. </li></ol> FMT 정리 8. 대장 내시경 검사 <ol><li> 병원 프로토콜에 따라 사후 절차 장비 재 처리, 환경 세척 / 소독, 폐기물 처리를 수행합니다. </li><li> 적절한 생물 학적 컨테이너에서 모든 분뇨 처리하십시오. </li><li> 표준 프로토콜 당 루틴 처리를 위해 오염 지역에 colonoscope를 가져와. </li><li> 다른 오염 폐기물과 함께 믹서 및 스트레이너 폐기하십시오. 참고 : 단일 사용 블렌더 및 스트레이너 혼합 방법이 고려 될 수있다 개별 기관의 대체에 적합하지 않은 경우. 하나의 예 : 오토 클레이브 세척 할 수있는 스테인레스 스틸 감자 ricer을 통해 대변을 전달합니다. 우리는 당신의 시설의 감염 관리 DEP와 잠재적 인 방법을 논의하는 것이 좋습니다artment. </li><li> 시설 승인 제품을 사용하는 절차에 사용 된 모든 표면의 오염을 제거. </li></ol> 9. 후속 조치 <ol><li> 약 30 일 FMT 후 환자에 대한 소화기 클리닉 후속 약속을 정렬합니다. </li><li> 변호사 항생제의 미래 코스 C. 디피 재발의 위험에 대한 환자. </li></ol> 이상 반응의보고 (10) <ol><li> FMT는 안전한 절차로 간주되지만, 강하게 모든 부작용은 절차와 관련된 것으로 규정하고 해당 게시판에보고 느낀 추적 할 의뢰한다. </li><li> FMT의 장기 안전을 기록하기 위해, 주기적으로 질의 할 수있는 신뢰성있는 데이터베이스를 유지한다. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose relevant to the material presented in this manuscript.

분변 이식 재발 CDI 대한 치료 효과적​​이고 안전한 것으로 밝혀졌다. 우리는 대장 내시경 검사를 통해 FMT위한 표준 프로토콜을 설명하고 재발 CDI하는 절차를 시행 한 22 명에 대한 우리의 결과를 포함했다. 우리의 결과는 지금까지 단 한 환자가 한 달 후 FMT 반복과 재발 성 질환의 게시 된 데이터와 비교합니다. 절차의 중요한 단계는 도너가 적합한 지 확인하는 사전 선별 방문 및 환자는 ?...

위 막성 대장염의 원인의 치료를위한 대변 이식은 1958에 설명 된 1. 그러나, 다시 빠르면 4 세기 중국이 같은 식중독과 심한 설사 날짜의 치료를 위해 대변을 섭취보고. 분변 미생물 이식 (FMT)는 또한 문헌에 불린다 &quot;분변 bacteriotherapy&quot;, &quot;인간 생균제 투여&quot;, &quot;이식 자&quot;, &quot;장내 마이크로 바이 복원&quot;및 &quot;분변 전송&quot;. 그것은 건강하고 사전 선별 기증자에서 대변을 수집하고 비위 관, esophagogastricduodenoscopy, 대장 내시경, 또는 관장 3를 통해받는 사람의 위장관에 준비된 슬러리를 제공하는 것을 포함한다. 많은 경우 시리즈는 대장 내시경 검사는 안전하고 4 매우 효과적입니다 통해 그러나 최근의 연구는 기증자 의자의 관리를 보여, NGT 및 관장을 통해 관리의 효과를보고있다.이러한 비위 관 관리 같은 다른 방법이보고되었지만, 대장 내시경 검사를 통해 기증자 의자의 전달이 덜 즉각적인 부작용 (예를 들어, 복부 팽만감과 메스꺼움)가 4, 우리는에 의해 수행 될 때 환자가 FMT의 개념의를 받아들이고 있음을 발견 하였다 대장 내시경 검사. 대장 내시경을 통해 FMT의 치료 이점 중 하나는 종래의 절차로 인해 4 행한다 창자 폐포 결장 생물량 감소이다. 여러 연구 기회 병원체 C. 의한 대장염, 설사 등의 치료에 FMT의 역할을 조사 하였다 디피 (CDI). CDI의 발생률은 계속 증가하여 전 세계적으로 큰 경제적 부담과 질병률과 사망률의 중요한 원인이다. CDI에 대한 첫 번째 라인 치료하지만 재발률이 15-35% (5) 사이에보고 된, 항생제 치료로 구성되어 있습니다. 여러 경우 시리즈 및 보고서 수행이항생제 4,6-16 표준 치료에 CDI 내화물에 대한 FMT의 안전성과 효능을 cumented. CDI를위한 대장 내시경 검사를 통해 FMT 후 환자의 장기 추적 관찰을 찾고 연구는 77 명의 환자 (17)의 91 % 차 경화 속도를보고했다. 우리 센터 (브리검과 소화기, 간 장학 및 여성 병원 부문 내시경)에서, 우리는 재발 성 또는 불응 성 CDI 환자 배설물 이식 프로그램을 시작했다. 적절한 후보는 기존의 항생제에 응답하지 않는 난치성 질환 재발의 CDI (입원이 필요한 3 개 이상의 에피소드, 또는 2 에피소드의 역사), 또는 환자를 환자로 정의됩니다. 우리는이 절차의 모든 단계에 대한 체계적인 접근이 효과를 극대화 믿습니다. 이 원고와 첨부 된 비디오에서, 우리는 세부 사항 우리가 환자와 기증자 검사, 대변 준비를 포함 우리 센터에 고용 한 프로토콜 및 대변의 전달대장 내시경 검사 시간을 t. 이 방법은 출간 된 문헌에 비해 긍정적 인 결과를 산출했다. CASE 프리젠 테이션 : 이 환자는 대변 이식에 대한 언급 전형적인 환자를 나타냅니다. 환자는 화학 요법에 추가 처리를 필요로하는 질병의 재발이 있었다 만성 림프 구성 백혈병의 역사를 가진 69 세의 여성입니다. 그녀는 지난 해에 CDI의 3 개의 에피소드로 고통 때문에 FMT 이전에 다시 시작하는 항암 화학 요법의 고려 사항을 위해 우리 병원에 의뢰되었다. CDI 그녀의 첫 번째 에피소드는 2012 년 10 월에 그녀는 어느 한 항에 항생제 없었다고 발생했습니다. 그녀는 패 혈성 쇼크로 제시 한 후 ICU에서 매우 아픈이고 전향 그녀의 질병의 심각성 주어진 경구 반코마이신과 함께 6 주 과정에 대한 관장 반코마이신과 루프 ileostomy를 전환 받았다. 그녀는 그녀의 설사의 해상도로 매우 잘했고, 그녀는 올 수 있었다오프 항생제. 이 반전 그래서 그녀는 그녀의 장루 주위 탈장을 개발했다. 인공 항문 반전은 그녀가 다시 설사를 개발하고 발견 된 직후 다시 C.이어야합니다 남과 어울리지 않는 독소 긍정적. 그녀는 경구 반코마이신의 또 다른 육주 과정을 완료하고 성공적으로 점점 줄 수 있었다. 그러나 몇 달 후, 그녀는 다시 C.이었다 설사를 개발 남과 어울리지 않는 독소 긍정적 인 경구 반코마이신의 그녀의 제 3의 코스에서 시작되었다. 그것은 그녀의 하얀 카운트가&gt; 100으로 증가하고 그녀가 골수 생검에 그녀의 만성 림프 구성 백혈병의 재발이 발견했다고 언급 할 때 그녀는 항생제에 잘되었다. 그녀의 종양 전문의는 그녀의 CDI의 완전한 해결하지 않고 화학 요법을 시작하고 우리가 FMT를 수행했다 걱정했다.

<table><tbody><tr><td>Blender</td><td>Hamilton Beach</td><td>51101</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Hamilton-Beach-51101-Personal-Blender/dp/B00065L6CU/ref=pd_sim_k_2?ie=UTF8&amp;amp;refRID=1Q06MXAE9XKTB4QG0AEN&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Strainer</td><td>Winco</td><td>MS3A-8S</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Winco-MS3A-8S-Strainer-Single-Wooden/dp/B001VZ5E40/ref=sr_1_3?s=home-garden&amp;amp;ie=UTF8&amp;amp;qid=1395001295&amp;amp;sr=1-3&amp;amp;keywords=kitchen+strainer+wooden+handle&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Disposable pads (chux), 17 x 24 in.</td><td>hospital standard</td><td></td><td>one package</td></tr><tr><td>Pink rectangular hospital standard wash basin, 8 quart</td><td>hospital standard</td><td></td><td>1 or 2</td></tr><tr><td>500 cc bottle of sterile normal saline</td><td>hospital standard</td><td></td><td>2</td></tr><tr><td>60 cc luer lock syringes</td><td>hospital standard</td><td></td><td>8 or 9</td></tr><tr><td>Biopsy channel cap with extension</td><td>hospital standard</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

fecal microbiota transplantation via colonoscopy for recurrent c. difficile infection

분변 미생물 이식 (FMT)는 재발 및 불응 C. 안전하고 매우 효과적인 치료 남과 어울리지 않는 감염 (CDI). FMT 투여하는 다양한 방법 비위 관 상부 내시경, 결장경 검사법 및 관장을 포함하여 문헌에보고되어있다. 대장 내시경 검사 수율 우수한 치료율을 통해 FMT와도 잘 허용됩니다. 우리는 환자가 전달이 허용하고 허용 모드를 찾을 것을 발견했다. 우리 센터에서, 우리는 재발 성 또는 불응 성 CDI 환자 배설물 이식 프로그램을 시작했다. 우리는 개정의 반복적 인 프로세스를 사용하여 프로토콜을 개발하고 현재 출간 된 문헌에 비해 성공률과 22 명에 24 대변 이식을 수행했습니다. 환자와 기증자 검사, 대변의 준비, 대변의 전달에 대한 체계적인 접근은 치료의 성공을 극대화 할 수 있습니다. 여기서 상세히 어떤 내시경에서 수행 될 수있다 FMT 프로토콜의 각 단계를 우리안전와 성공 고도 중심.

우리는 위의 프로토콜을 사용하여 우리 센터 (표 1)에서 22 명에 24 FMTs을 수행했습니다. 9 명 동시 IBD (크론 병 여섯 세 궤양 성 대장염)를했다. 모두 아홉 CDI의 해상도를 가지고 있었다. 크론 병 환자 중 하나는 상태가 크론 대장염에 대한 총 절제술을 게시했다. 처음에 그는 그러나 그는 CDI 확인 결과 위 내시경 검사를 통해 두 번째 FMT을 시행 재발 2 주 후 FMT를 경험 한 후 대장 내시경 ?...

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Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

대장 내시경 검사를 통해 분변 미생물 이식은 재발 및 불응 C.difficile 감염에 대한 안전하고 효과적인 치료입니다. 대장 내시경 검사 중 환자와 기증자 선별, 대변의 준비, 대변의 전달에 대한 체계적인 접근은 치료의 성공을 극대화합니다.

재발을위한 대장 내시경 검사를 통해 분변 미생물 이식<em&gt; C. 남과 어울리지 않는</em&gt; 감염

Fecal Microbiota Transplantation (FMT) is a safe and highly effective treatment for recurrent and refractory C. difficile infection (CDI). Various methods ...

fecal-microbiota-transplantation-via-colonoscopy-for-recurrent-c

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

27.0K 조회수.  Brigham and Women‘s Hospital.  대장 내시경 검사를 통해 분변 미생물 이식은 재발 및 불응 C.difficile 감염에 대한 안전하고 효과적인 치료입니다. 대장 내시경 검사 중 환자와 기증자 선별, 대변의 준비, 대변의 전달에 대한 체계적인 접근은 치료의 성공을 극대화합니다. 

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A Genetically Engineered Mouse Model of Sporadic Colorectal Cancer

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations and do not accurately simulate tumor biology and tumor cell dissemination. Genetically engineered mouse models have been introduced to overcome these limitations; however, such models are technically demanding, especially in large organs such as the colon in which only a single tumor is desired.
As a result, an immunocompetent, genetically engineered mouse model of colorectal cancer was developed which develops highly uniform tumors and can be used for tumor biology studies as well as therapeutic trials. Tumor development is initiated by surgical, segmental infection of the distal colon with adeno-cre virus in compound conditionally mutant mice. The tumors can be easily detected and monitored via colonoscopy. We here describe the surgical technique of segmental adeno-cre infection of the colon, the surveillance of the tumor via high-resolution colonoscopy and present the resulting colorectal tumors.

A protocol for the establishment of a genetically engineered mouse model of colorectal cancer by segmental adeno-cre infection and its surveillance via high-resolution colonoscopy is presented.

산발성 대장 암의 유 전적으로 조작 된 마우스 모델

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations ...

연구

암 연구학

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is a significant nosocomial pathogen. C. difficile is notoriously difficult to isolate and cultivate and is extremely sensitive to even low levels of oxygen in the environment. Here, methods for isolating C. difficile from fecal samples and subsequently culturing C. difficile for preparation of glycerol stocks for long-term storage are presented. Techniques for preparing and enumerating spore stocks in the laboratory for a variety of downstream applications including microscopy and animal studies are also described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which maintains a consistent anaerobic environment to ensure proper conditions for optimal C. difficile growth. We provide protocols for transferring materials in and out of the chamber without causing significant oxygen contamination along with suggestions for regular maintenance required to sustain the appropriate anaerobic environment for efficient and consistent C. difficile cultivation.

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a pathogenic bacterium that is a strict anaerobe and causes antibiotic associated diarrhea (AAD). Here, methods for isolating, culturing and maintaining C. difficile vegetative cells and spores are described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which requires regular maintenance to ensure proper conditions for optimal C. difficile cultivation.

배양 및 유지<em&gt; 클로 스트 리듐 디피</em&gt; 혐기성 환경에서

Clostridium  difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium  that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is ...

면역학 및 감염병학

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer being two common examples. Despite the frequency of these procedures, a significant knowledge gap remains in describing the inherent effects of intestinal resection on host physiology and disease pathophysiology. This article provides detailed instructions for an ileocolic resection with primary end-to-end anastomosis in mice, as well as essential aspects of peri-operative care to maximize post-operative success. When followed closely, this procedure yields a 95% long-term survival rate, no failure to thrive, and minimizes post-operative complications of bowel obstruction and anastomotic leak. The technical challenges of performing the procedure in mice are a barrier to its wide spread use in research. The skills described in this article can be acquired without previous surgical experience. Once mastered, the murine ileocolic resection procedure will provide a reproducible tool for studying the effects of intestinal resection in models of human disease.

Ileocolic resection is commonly performed in several human diseases; however, little is known regarding the impact of intestinal resection on surgical illnesses. This article provides instruction on executing the procedure in mice with high success, providing a means to study the effects of ileocolic resection in models of disease.

차 문합와 쥐의 Ileocolic 대장 절제술

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

의학

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and consequently poses an urgent threat to public health. Recurrence of a C. difficile infection (CDI) after successful treatment with antibiotics is high, occurring in 20-30% of patients, thus necessitating the discovery of novel therapeutics against this pathogen. Current animal models of CDI result in high mortality rates and thus do not approximate the chronic, insidious disease manifestations seen in humans with CDI. To evaluate therapeutics against C. difficile, a mouse model approximating human disease utilizing a clinically-relevant strain is needed. This protocol outlines the cefoperazone mouse model of CDI using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Techniques for clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol. Compared to other mouse models of CDI, this model is not uniformly lethal at the dose administered, allowing for the observation of a prolonged clinical course of infection concordant with the human disease. Therefore, this cefoperazone mouse model of CDI proves a valuable experimental platform to assess the effects of novel therapeutics on the amelioration of clinical disease and on the restoration of colonization resistance against C. difficile.

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

This protocol outlines the cefoperazone mouse model of Clostridium difficile infection (CDI) using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Emphasis on clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol.

의 Cefoperazone 처리 된 마우스 모델 임상 관련<em&gt; 클로스 트리 디움 디피</em&gt; 스트레인 R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and ...

Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted considerable attention. Accumulating evidence suggests that dysbiotic microbiota plays an active role in triggering or worsening the inflammatory process in IBD and that fecal microbiota transplantation (FMT) is an attractive therapeutic strategy since transferring a healthy microbiota to IBD patient could restore the appropriate host-microbiota communication. However, the molecular mechanisms are unclear, and the efficacy of FMT has not been very well established. Thus, further studies in animal models of IBD are necessary. In this method, we applied FMT from wild-type C57BL/6J mice to IL-10 deficient mice, a widely used mouse model of colitis. The study elaborates on collecting fecal pellets from the donor mice, making the fecal solution/suspension, administering the fecal solution, and monitoring the disease. We found that FMT significantly mitigated the cardiac impairment in IL-10 knockout mice, underlining its therapeutic potential for IBD management.

The interaction of genetic susceptibility, mucosal immunity, and intestinal microecological environment is involved in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). In this study, we applied fecal microbiota transplantation to IL-10 deficient mice and investigated its impact on colonic inflammation and heart function.

인터루킨 10-결핍 마우스 모델에서 분변 미생물 이식의 치료 평가

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted ...

Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal microbiota transplantation (FMT) is a valuable approach to delineating a direct role of the total microbiota or isolated species in disease pathophysiology. It is a safe treatment option for patients with recurrent Clostridium difficile infection. Preclinical studies demonstrate that manipulating the gut microbiota is a useful tool to study the mechanistic link between dysbiosis and disease. Fecal microbiota transplantation may help elucidate novel gut microbiota-targeted therapeutics for the management and treatment of cardiometabolic disease. Despite a high success rate in rodents, there remains translational changes associated with the transplantation. The goal here is to provide guidance in studying the effects of gut microbiome in experimental cardiovascular disease. In this study, a detailed protocol for the collection, handling, processing, and transplantation of fecal microbiota in murine studies is described. The collection and processing steps are described for both human and rodent donors. Lastly, we describe using a combination of the Swiss-rolling and immunostaining techniques to assess gut-specific morphology and integrity changes in cardiovascular disease and related gut microbiota mechanisms.

The goal here is to outline a protocol to investigate the mechanisms of dysbiosis in cardiovascular disease. This paper discusses how to aseptically collect and transplant murine fecal samples, isolate intestines, and use the "Swiss-roll" method, followed by immunostaining techniques to interrogate changes in the gastrointestinal tract.

쥐 분변 분리 및 미생물군 이식

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal ...

Preparation and Maintenance of Bioexclusion IsoPositive Cage Experiment for Human Fecal Transplantation into Germ-Free Mice

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of the specific role of individuals, defined or complex groups of microorganisms in host response. Traditionally bred and reared in flexible-film or semi-rigid isolators, germ-free mouse husbandry and experimental manipulation are costly and require numerous trained staff and a large space footprint in animal housing facilities. The IsoPositive caging system allows for experimental manipulation of germ-free mice in individual, hermetically-sealed, positive-pressure isolator cages (isocages), reducing cost and enabling greater flexibility in experimental manipulations. 
Here, a protocol is described for transferring germ-free mice from breeding isolators to isocages and subsequent fecal transfer from human donor stool into mice to create stable long-term gut "humanized" mice for future studies. The materials and preparation needed for the utilization of the isocage system are described, including the use of chlorine-dioxide sterilant chemical sterilant to clean cages, supplies, equipment, and personal protective equipment. The methods for confirming the germ-free status of transferred mice and how to determine contamination in the caging system are discussed. The procedure for husbandry, including bedding, food, and water supply, is further discussed. The protocol for human fecal slurry preparation and gavage into germ-free mice to create gut "humanized" mice, along with stool collection to monitor the microbial community composition of these mice, are described. An experiment illustrates that two weeks post-human fecal transplant allows for stable colonization of donor microbiota in the murine hosts, enabling subsequent experimental usage. Furthermore, the collection of humanized mouse feces in viability preservation media, enabling use in further functional experiments, is described. Overall, these methods allow for the safe and effective establishment of humanized mouse communities in experimental gnotobiotic cages for further manipulation.

This protocol describes the best practices for germ-free mouse transfer to and housing in experimental single-cage isolators (isocages) while maintaining sterile conditions. Methods for fecal transplant into germ-free mice and the collection of viable bacteria from these gut "humanized" mice for further applications are discussed.

무균 마우스에 인간 배설물 이식을 위한 Bioexclusion IsoPositive 케이지 실험의 준비 및 유지 관리

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of ...

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the biological function of intestinal bacteria as a whole or at the species level. Several different FMT methods have been published. Here, we present an FMT protocol that successfully depletes gut microbiota in a matter of days, followed by transplantation of fecal microbiota from fresh or frozen donor intestinal contents to conventional mice. Real time-PCR is applied to test the efficacy of bacterial depletion. Sequencing of the 16S ribosomal RNA (rRNA) is then applied to test the relative abundance and identity of gut microbiota in recipient mice. We also present a flow cytometry-based detection method of immunoglobulin A (IgA)-coated bacteria in the gut.

We established an efficient way to deplete intestinal bacteria in three days, and subsequently transplant fecal microbiota via gavage of fecal fluid prepared from fresh or frozen intestinal contents in mice. We also present an optimized method to detect the frequency of IgA-coated bacteria in the gut.

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the ...

생물학

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in alleviating colitis remain undefined. Most analysis methods rely on limited diversity and abundance of gut microorganisms. Therefore, observational studies cannot establish causation. In this study, we applied antibiotic-induced pseudo-germ-free mice to investigate the role of gut microbiota in regulating the probiotic effects of Bacillus&#160;cereus (B. cereus)&#160;on dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. This process allows for evaluating the bidirectional regulating effect of B. cereus&#160;supplementation on health and provides stable and reproducible results. Here, the detailed protocols for B. cereus cultivation, gavage operation, stool collection, and antibiotic clearance treatment on colitis mice are provided. The optimization methods are also applicable for other chronic inflammatory-associated disorders. The results showed that B. cereus administration decreased body weight loss, colon length shortening, disease activity index, and histopathological scores. However, treatment with antibiotics suppressed the positive effect of B. cereus on colitis. These results indicate that gut microbiota are needed for the alleviating effects of B. cereus on colitis. Therefore, exploring the beneficial effects of probiotics in this research is a promising approach for developing novel treatment strategies for alleviating the symptoms of chronic inflammatory-associated disorders.

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Here, we present a protocol to establish the antibiotic-induced pseudo-germ-free dextran sulfate sodium-induced colitis mouse model to investigate the role of gut microbiota in regulating the positive effects of Bacillus cereus on colitis.

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in ...

Generating a Double Humanized BLT (Bone-Marrow, Liver, Thymus) Mouse Model

Source: Daharsh, L. et al., <a href="https://appjove.unicartagenaproxy.elogim.com/v/59773">A Double Humanized BLT-mice Model Featuring a Stable Human-Like Gut Microbiome and Human Immune System.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2019)
This video demonstrates the method for generating a double humanized bone BLT (marrow, liver, and thymus) mouse with a functional human immune system and a stable engrafted human-like gut microbiome.

이중 인간화 BLT(Bone-Marrow, Liver, Thymus) 마우스 모델 생성

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. Mice ...

재발을위한 대장 내시경 검사를 통해 분변 미생물 이식

요약

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산발성 대장 암의 유 전적으로 조작 된 마우스 모델

배양 및 유지

차 문합와 쥐의 Ileocolic 대장 절제술

의 Cefoperazone 처리 된 마우스 모델 임상 관련

인터루킨 10-결핍 마우스 모델에서 분변 미생물 이식의 치료 평가

쥐 분변 분리 및 미생물군 이식

무균 마우스에 인간 배설물 이식을 위한 Bioexclusion IsoPositive 케이지 실험의 준비 및 유지 관리

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

이중 인간화 BLT(Bone-Marrow, Liver, Thymus) 마우스 모델 생성