The authors would like to acknowledge the Infectious Disease Department at Brigham and Women&#8217;s Hospital especially Michael S. Calderwood, MD, MPH for helping us construct this protocol. We would also like to thank the Institution&#8217;s endoscopy center and it&#8217;s leadership team for their support.

HINWEIS: Zum Zeitpunkt der Veröffentlichung dieser Handschrift eine Investigational New Drug (IND) Anwendung ist nicht erforderlich, um eine FMT für wiederkehrende CDI in der klinischen Praxis durchzuführen. Allerdings, wenn FMTs wird als Teil einer Studie oder für eine andere Indikation kann eine IND oder gleichwertige Anwendung erforderlichen 18 werden. Aufsichtsbehörden werden wahrscheinlich auch weiterhin die Sicherheit und Wirksamkeit von FMT beurteilen, um CDI und anderen Erkrankungen angewendet und so ist es ratsam, die regulatorischen Anforderungen in Ihrem jeweiligen Standort vor der Einleitung eines FMT-Programm und jeder ein bis zwei Monate einmal überprüfen aktiv Durchführung FMT. HINWEIS Die Bewerber müssen bereit sein, auf die fäkale Transplantation sowie die Koloskopie einverstanden sein. 1. Bezeichnung des Geeignete Kandidaten für FMT <ol><li> Patienten, die schub CDI oder Patienten mit refraktärer Erkrankung haben, die nicht mehr auf herkömmliche Antibiotika sind appropriate Kandidaten für FMT. HINWEIS: rezidivierende CDI als eine Geschichte von drei oder mehr Episoden von CDI durch Toxintests oder PCR, oder zwei Episoden, die einen Krankenhausaufenthalt erforderlich bestätigt definiert. </li><li> Sicherstellen, dass der Patient in der Lage, eine Koloskopie sicher zu unterziehen. Diese liegen im Ermessen des endoscopist. </li></ol> 2. Hocker Spenderauswahl HINWEIS: Schemel Donor Auswahl bezieht sich auf die Behandlung von CDI und kann nicht für die Behandlung von anderen Erkrankungen. <ol><li> Stellen Sie sicher, der Patient identifiziert einen Spender. Potenzielle Spender sollten mit dem Empfänger zum Zeitpunkt der ersten Klinik für Gastroenterologie Besuch anwesend sein. Spender können Ehepartner, Familienmitglieder oder Freunde. Spender können im selben Haus wie der Empfänger, solange andere Kriterien erfüllt zu leben. </li></ol> 3. Geberberechtigung <ol><li> Einschlusskriterien: Stellen Sie sicher, dass der Spender ein gesunder Erwachsener (≥18 Jahre) und hat eine tägliche gebildet Darm movement. </li><li> Ausschlusskriterien: <ol><li> Stellen Sie sicher, dass der Spender nicht die Einnahme von Antibiotika oder Antibiotika nicht in den vorherigen drei Monaten alle Medikamente für eine Infektion entnommen. </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Spender nicht eine Geschichte von Verstopfung oder Gebrauch von Abführmitteln haben chronisch. Darüber hinaus gewährleisten die Spender nicht eine Geschichte von chronisch entzündlichen Darmerkrankungen, chronischer Durchfall, mikroskopische Kolitis, eine persönliche Geschichte der Darm / Darm Malignität oder einer Vorgeschichte von Magen-Bypass / andere Gewichtsverlust Chirurgie zu haben. </li><li> Sicherstellen, dass die Spender nicht reiste kürzlich (innerhalb der letzten drei Monate) zu einem Bereich, in dem infektiösen Durchfall ist ein Anliegen. Wenn sie bereist und erlebt Durchfall haben sollten Gründen ausgeschlossen werden. </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Spender nicht der Einnahme von Immunsuppressiva und ist nicht auf eine systemische Chemotherapie. </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Spender nicht über das metabolische Syndrom, Autoimmunerkrankungen oder atopischen Erkrankungen. </li></ol></li><li> Erhalten geschrieben conaus dem Spender und Empfänger vor dem Screening berücksichtigt man die Sensibilität der Screening-Tests geschickt. Versichern beide Parteien, die Testergebnisse nicht mit der anderen Partei teilen. </li></ol> 4. Screening HINWEIS: Dieser Screening-Protokoll wurde für die Patienten am Brigham and Womens Hospital in Massachusetts angepasst, USA Betrachten Anhörung der Abteilung für Infektionskrankheiten und Spitalinfektionskontrolle vor Beginn der FMT-Protokoll, um sicherzustellen, dass alle geeigneten Screening-Tests berücksichtigt. <ol><li> Empfänger: <ol><li> Zum Zeitpunkt der ersten Klinikbesuch, senden Sie die folgenden Labortests für die Empfängerüberprüfungen (zur Grundlinie Tests für diese Infektionskrankheiten zu schaffen und sicherzustellen, gibt es keine Frage der Übertragung in der Zukunft). </li><li> Führen Hepatitis A (IgG und IgM), Hepatitis B (HBsAg / Ab und HBcAb), Hepatitis C Ab, HIV-1/2 (Ab und Viruslast) und Syphilis (TP-IgG) Labor Blut tInteressen. </li><li> Besorgen Sie sich eine gründliche Geschichte der Nahrungsmittelallergien bei dieser ersten Einschätzung. </li></ol></li><li> Spender: <ol><li> Koordinieren Sie mit dem mikrobiologischen Labor vor Screening bis geformten Stuhl zu gewährleisten wird nicht verworfen. </li><li> Bestellen Sie die unter Labortests für Spender-Screening, wenn der Spender erfüllt Zulassungskriterien gemäß Abschnitt 3. </li><li> Führen Hepatitis A (IgG und IgM), Hepatitis B (HBsAg / Ab und HBcAb), Hepatitis C Ab, HIV-1/2 (Ab und Viruslast) und Syphilis (TP-IgG) Labor Blutuntersuchungen. </li><li> Führen C. difficile (durch Kultur), Routine Stuhlkultur, Giardia Antigen Cryptosporidium-Antigens und Eizellen und Parasiten Laborstuhltests. </li><li> Bildschirm den Spender nicht mehr als 30 Tage, aber vorzugsweise 1 - 2 Wochen vor der geplanten Vorgehensweise. HINWEIS: Wenn der Spender entwickelt Durchfall oder flüssigen Stuhl sie Anspruch auf Spende nicht mehr. </li></ol></li><li> Counsel der Spender auf Lebensmittel zu vermeiden, auf der GrundlageNahrungsmittelallergien des Empfängers. Der Spender sollte nicht zu sich nehmen Lebensmittel, denen der Empfänger für die 5 Tage vor der Spende allergisch. </li></ol> 5. Pre-Verfahren Vorbereitung <ol><li> Empfänger: <ol><li> Bei der ersten Klinikbesuch, wenn der Empfänger nicht bereits auf Vancomycin oral, starten Vancomycin 125 mg alle 6 Stunden für mindestens sieben bis zehn Tage vor dem Eingriff. </li><li> Geben Sie den Empfänger mit den Anweisungen des Endoskopiezentrum für Pre-Koloskopie Darmvorbereitung, den Tag vor der geplanten Vorgehensweise durchgeführt werden. Die Empfänger sollten nach standardisierten Nahrungs Anweisungen des Endoskopie-Zentrum für die Woche vor dem Eingriff. </li><li> Weisen Sie den Empfänger, um ihre letzten Dosis von Vancomycin in der Nacht vor dem Eingriff zu nehmen. </li></ol></li><li> Spender: <ol><li> Geben Sie den Spender mit mehreren Stuhlentnahmebecher. Marken-Toiletteneinsätze (Hut) und Tassen mit Label des Empfängers sowie 3 leer specimen Containern. Bitten Sie den Geber für Stuhlsammlung nicht mehr als 6 Stunden vor der Verarbeitung (Zeitordnung) beginnen. HINWEIS: Wenn der Geber bietet mehrere Stuhlproben, sollten sie mit Datum und Uhrzeit gekennzeichnet werden. Verwenden Sie die frischesten Probe (eine gefüllte Probenbecher genügt). </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Empfänger auf bringt Stuhlprobe des Spenders mit ihnen auf das Verfahren. </li><li> Bewahren Sie die Stuhlproben bei Raumtemperatur. Schließen Sie alle mögliche ungeformten Stuhl. Nicht verwendete Stuhl in einer Kanalisation gelangen (es sei denn, sparen zu Forschungszwecken). </li></ol></li></ol> 6. Hocker Vorbereitung HINWEIS: Achten Sie darauf, dieses Verfahren wird diskutiert und durch das Krankenhaus der Infektionskontrolle Abteilung genehmigt. <ol><li> Persönliche Schutzausrüstung tragen bei der Erstellung der Hocker. </li><li> Bereiten Stuhl in der Endoskopie Raum in einem bestimmten Arbeitsbereich, in dem es eine achtzehn Zoll Splash-Zone, die eine Kontamination der other Materialien. </li><li> Vor der Zubereitung Hocker, reinigen Sie den vorgesehenen Bereich mit Krankenhaus-zugelassenen Desinfektionsmittel. </li><li> Decken Sie den Bereich mit einem Einweg-Pad, um Verunreinigungen zu vermeiden. </li><li> Übertragen Sie die geformten Stuhl in eine 14 Unzen Single Speed ​​Mixer und fügen 500 ml physiologischer Kochsalzlösung. </li><li> Mischung der Inhalte für mindestens eine Minute, oder bis es einer flüssigen Aufschlämmung Konsistenz erreicht. Achten Sie darauf, um das Auslaufen zu vermeiden, wenn Sie den Deckel des Mixers. </li><li> Füllen Sie die Lösung durch das Sieb in einen Plastik acht Liter Becken, jede feste Abfälle zu beseitigen. Entsorgen Sie das Sieb. </li><li> Ziehen Sie den angespannten Lösung in 60 ml Luer-Lock-Spritzen (etwa acht bis neun für eine Standard-FMT durch Koloskopie). Erstellen Sie eine zusätzliche 60 ml physiologischer Kochsalzlösung für Wallungen. </li></ol> 7. Fecal Transplant über Koloskopie <ol><li> Persönliche Schutzausrüstung nach den Endoskopie-Einheit Politik während der Durchführung oder Unterstützung bei der infusion. </li><li> Betrachten Licht Sedierung, falls möglich, so dass der Patient in der Lage, mit Halte den Stuhl nach dem Verfahren kooperieren. </li><li> Führen Sie eine Koloskopie zur terminalen Ileum (oder, soweit technisch möglich). Beim Einstecken des colonscope, Lavage und Absaugung der restliche flüssigen Stuhl. </li><li> Überprüfen Sie die Schleimhautwände auf Beweise von Entzündung aber Schleimhaut-Biopsien während der FMT Verfahren nicht routinemäßig durchgeführt. HINWEIS: Stellen Sie fest, ob eine vollständige Koloskopie ist sicher wegen der Grad der Entzündung. Wenn nicht, sollten Sie ein begrenzter flexible Sigmoidoskopie mit Infusions (verwenden Sie die Hälfte der Stuhl Slurry). </li><li> Die Infusion 60 ml (eine Spritze) einmal im terminalen Ileum über den Biopsiekanal des Koloskop mit dem Biopsiekanal Kappe mit Verlängerungsschlauch. </li><li> Zwischen Anwendungen von Stuhl Spritzen, spülen Sie den Kanal mit physiologischer Kochsalzlösung, um Verstopfungen zu vermeiden. </li><li> Infuse einen weiteren 60 ccm Hocker in den Blinddarm und dann in die richtige c wiederholenolon. </li><li> Die Infusion 30 ccm alle fünf bis zehn cm, während die gleichmäßige Verteilung des Schlamms auf allen vier Quadranten Darmwand bis zur Mitte des Colon transversum erreicht ist. Vergessen Sie nicht, mit Kochsalzlösung zwischen Stuhl Spritzen spülen. HINWEIS: Wenn die Aufschlämmung sehr viskos kann es notwendig sein, mit erheblicher Kraft auf die Spritze zu drücken. Achten Sie darauf, dass die Biopsiekanal Kappe nicht aus dem Koloskop zu trennen und zu verschüttetes Hocker Inhalte. Häufige Spülung für leichtere Passage des Schlamms zu ermöglichen. Wenn es anhaltende Schwierigkeiten bei Drücken der Gülle, in Erwägung ziehen, belasten die übrigen Geber Stuhl ein zweites Mal oder mit physiologischer Kochsalzlösung weiter verdünnt. </li><li> Saugen Sie überschüssige Luft beim Herausziehen beim Wechsel Spritzenzylinder, während sie vorsichtig, dass kein flüssiger Stuhl abzusaugen. HINWEIS: Wenn der Patient Stuhlinkontinenz bekannt, die letzte Spritze sollte nicht weniger als der Flexur infundiert werden, um ein Auslaufen während und nach dem Eingriff zu vermeiden. </li><li> Sobald the-Koloskopie mit FMT abgeschlossen ist, teilen Sie dem Patienten, den Stuhl so lange wie möglich zu behalten. Sie können ihre regelmäßige Ernährung und Medikamente 2 Stunden fortgesetzt, nachdem die Koloskopie ist abgeschlossen. </li></ol> 8. Koloskopie mit FMT Clean Up <ol><li> Führen Sie nach dem Eingriff Ausrüstung Wiederaufarbeitung, Umwelt Reinigung / Desinfektion und Entsorgung gemäß Krankenhausprotokoll. </li><li> Entsorgen Sie alle Fäkalien in dem entsprechenden Behälter für biologischen Sondermüll. </li><li> Bringen Sie das Koloskop zur Dekontamination Bereich für Routineverarbeitung gemäß dem Standardverfahren. </li><li> Entsorgen Sie den Mixer und Sieb mit einer anderen verschmutzten Abfällen. HINWEIS: Bei Einzelnutzung Mixer und Siebe nicht durchführbar sind an einer einzelnen Institution alternativen Mischverfahren berücksichtigt werden können. Ein Beispiel: Leiten des Stuhl durch ein Edelstahl-Kartoffelpresse, die in einem Autoklaven zu reinigen sind. Wir raten Ihnen, potenzielle Methoden mit Ihrer Einrichtung zur Infektionskontrolle department. </li><li> Dekontaminieren Sie alle Oberflächen, die für das Verfahren mit Hilfe der Anlage zugelassene Produkte verwendet wurden. </li></ol> 9. Follow Up <ol><li> Vereinbaren Sie einen Follow-up-Termin in der Gastroenterologie Klinik für den Patienten etwa 30 Tage nach der FMT. </li><li> Counsel der Patient über das Risiko von C. difficile Rezidiv mit zukünftigen Kurse von Antibiotika. </li></ol> 10. Meldung von Nebenwirkungen <ol><li> Obwohl FMT gilt als ein sicheres Verfahren ist, wird dringend empfohlen, den Überblick zu behalten über alle Nebenwirkungen, mit dem Verfahren verbunden werden und an den zuständigen Aufsichts Boards berichten fühlte. </li><li> Um die langfristige Sicherheit der FMT dokumentieren, halten Sie eine zuverlässige Datenbank, die regelmäßig abgefragt werden können. </li></ol>

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S., Khoruts, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidance+on+preparing+an+investigational+new+drug+application+for+fecal+microbiota+transplantation+studies.">Guidance on preparing an investigational new drug application for fecal microbiota transplantation studies.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 12 (2), 283-288 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose relevant to the material presented in this manuscript.

Fecal Transplantate wurde gezeigt, daß eine wirksame und sichere Behandlung von rezidivierenden CDI werden. Wir haben ein Standardprotokoll für FMT über Koloskopie skizziert und enthalten unsere Ergebnisse für die 22 Patienten, die das Verfahren für die wiederkehrende CDI unterzog. Unsere bisherigen Ergebnisse sind mit nur einem Patienten wiederkehr einen Monat nach der FMT vergleichbar mit veröffentlichten Daten für die wiederkehrende Krankheit. Ein entscheidender Schritt der Prozedur ist die Vorschaltu...

Fecal Transplantationen zur Behandlung von Colitis pseumembranous wurden erstmals im Jahr 1958 beschrieben 1. Allerdings berichtet der Einnahme von Fäkalien zur Behandlung von Lebensmittelvergiftungen und schweren Durchfall stammen bereits vierten Jahrhundert China 2. Fecal Mikrobiota Transplantation (FMT) wird in der Literatur auch als &quot;Übertragung der Darmflora&quot;, &quot;menschlich probiotischen Infusion&quot;, &quot;Stuhl-Transplantation&quot;, &quot;Darm microbiome Wiederherstellung&quot; und &quot;fäkale Übertragung&quot;. Es geht um das Sammeln Hocker von einem gesunden, sorgfältig geprüften Spender und liefert eine hergestellte Aufschlämmung in den Gastrointestinaltrakt des Empfängers via Magensonde, esophagogastricduodenoscopy, Koloskopie oder Einlauf 3. Viele Fallserien haben die Wirksamkeit von Verwaltung über NGT und Einlauf berichtet jedoch neuere Studien, dass die Verabreichung von Spender Hocker gezeigt über eine Darmspiegelung ist sicher und hochwirksam 4.Obwohl andere Verfahren, wie Magensonde Verabreichung berichtet, Lieferung von Spender Hocker über Koloskopie weniger unmittelbare Nebenwirkungen (zB Blähungen, Übelkeit) 4 und wir haben gefunden, dass die Patienten mehr Akzeptanz des Begriffs FMT, wenn es durchgeführt wird durch Koloskopie. Eine der therapeutischen Vorteile FMT über Koloskopie ist die Verringerung colonic Biomasse durch Spülen des Darmes, die vor dem Verfahren 4 durchgeführt wird. Mehrere Studien haben die Rolle der FMT für die Behandlung von Colitis und Durchfall durch das opportunistisch pathogene C. verursacht untersucht difficile (CDI). Die Inzidenz von CDI steigt weiter und ist eine Hauptursache für Morbidität und Mortalität mit einer großen wirtschaftlichen Belastung der ganzen Welt. First-Line Behandlung für CDI besteht aus Antibiotika-Therapie jedoch Rezidivraten zwischen 15 bis 35% 5 berichtet. Mehrere Fallserien und Berichte haben zu tuncumented die Sicherheit und Wirksamkeit von FMT für CDI refraktär medizinische Standardbehandlung mit Antibiotika 4,6-16. Eine Studie, die langfristigen Follow-up von Patienten nach FMT über Koloskopie für CDI berichtet eine 91% primäre Heilungsrate bei 77 Patienten 17. In unserem Center (Brigham and Womens Hospital Abteilung für Gastroenterologie, Hepatologie und Endoskopie), haben wir ein fäkale Transplantation Programm für Patienten mit rezidivierendem oder refraktärem CDI. Geeignete Kandidaten werden als Patienten, die wiederkehrende CDI (eine Geschichte von 3 oder mehr Episoden oder 2 Episoden, die einen Krankenhausaufenthalt erforderlich) oder Patienten mit refraktärer Erkrankung, die nicht mehr auf herkömmliche Antibiotika haben definiert. Wir glauben, dass ein systematischer Ansatz für alle Phasen des Verfahrens maximiert Wirksamkeit. In diesem Manuskript und dazugehörige Video, die wir ausführlich das Protokoll wir in unserem Center, das Patienten und Spender-Screening, Stuhl Vorbereitung umfasst beschäftigt haben, und die Lieferung von Stuhl eint die Zeit der Koloskopie. Dieses Verfahren hat positive Ergebnisse vergleichbar mit der veröffentlichten Literatur lieferte. Falldarstellung: Dieser Patient stellt einen typischen Patienten auf fäkales Transplantation bezeichnet. Der Patient ist ein 69 Jahre alte Frau mit einer Geschichte von chronischer lymphatischer Leukämie, der Rückfall der Erkrankung erfordern eine weitere Behandlung mit einer Chemotherapie hatte. Sie litt unter drei Folgen der CDI im vergangenen Jahr, und wurde daher in unsere Klinik zur Behandlung von FMT vor der erneuten Einleitung der Chemotherapie bezeichnet. Ihre erste Episode von CDI erfolgte im Oktober 2012 hatte sie keine vorstehenden Antibiotika hatte. Sie war sehr krank auf der Intensivstation nach der Präsentation mit septischem Schock und unterzog sich abzulenken Schleife Ileostomie mit ante Vancomycin Einläufe für einen 6-Wochen-Kurs in Kombination mit oralen Vancomycin angesichts der Schwere ihrer Krankheit. Sie haben sehr gut mit einer Auflösung von ihrem Durchfall und sie in der Lage zu kommen, waroff Antibiotika. Sie entwickelte eine Hernie um sie Stoma so dass es umgekehrt wurde. Kurz nach dem Stoma Umkehrung sie wieder entwickelt Durchfall und wurde wieder gefunden zu sein C difficile Toxin positiv. Sie absolvierte einen weiteren 6 Wochen Behandlung mit oralen Vancomycin und konnte es erfolgreich auslaufen. Doch einige Monate später wieder bekam sie Durchfall C betrug difficile Toxin positiv und lag auf dem dritten Behandlung mit oralen Vancomycin gestartet. Sie war gut auf Antibiotika zu tun, wenn es wurde festgestellt, dass ihre weißen Zahl erhöhte sich auf&gt; 100, und sie hat festgestellt, um eine Wiederholung ihres CLL auf Knochenmark-Biopsie haben. Ihre Onkologen waren besorgt über die Einleitung einer Chemotherapie ohne vollständige Auflösung ihres CDI und so wurden wir gebeten, FMT durchzuführen.

<table><tbody><tr><td>Blender</td><td>Hamilton Beach</td><td>51101</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Hamilton-Beach-51101-Personal-Blender/dp/B00065L6CU/ref=pd_sim_k_2?ie=UTF8&amp;amp;refRID=1Q06MXAE9XKTB4QG0AEN&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Strainer</td><td>Winco</td><td>MS3A-8S</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Winco-MS3A-8S-Strainer-Single-Wooden/dp/B001VZ5E40/ref=sr_1_3?s=home-garden&amp;amp;ie=UTF8&amp;amp;qid=1395001295&amp;amp;sr=1-3&amp;amp;keywords=kitchen+strainer+wooden+handle&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Disposable pads (chux), 17 x 24 in.</td><td>hospital standard</td><td></td><td>one package</td></tr><tr><td>Pink rectangular hospital standard wash basin, 8 quart</td><td>hospital standard</td><td></td><td>1 or 2</td></tr><tr><td>500 cc bottle of sterile normal saline</td><td>hospital standard</td><td></td><td>2</td></tr><tr><td>60 cc luer lock syringes</td><td>hospital standard</td><td></td><td>8 or 9</td></tr><tr><td>Biopsy channel cap with extension</td><td>hospital standard</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

fecal microbiota transplantation via colonoscopy for recurrent c. difficile infection

Fecal Microbiota Transplantation (FMT) ist eine sichere und hochwirksame Behandlung für wiederkehrende und feuerfesten C. difficile-Infektion (CDI). Verschiedene Methoden der FMT Verwaltung sind in der Literatur berichtet worden, einschließlich Magensonde, oberen Endoskopie, Einlauf und Koloskopie. FMT über Koloskopie liefert hervorragende Heilungsraten und ist auch gut vertragen. Wir haben festgestellt, dass Patienten finden dies eine akzeptable und erträglich Art der Lieferung. In unserem Zentrum haben wir eine fäkale Transplantation Programm für Patienten mit rezidivierendem oder refraktärem CDI eingeleitet. Wir haben ein Protokoll entwickelt, in einem iterativen Prozess der Überprüfung und haben 24 fäkale Transplantation auf 22 Patienten mit Erfolgsraten vergleichbar mit der aktuellen Fachliteratur durchgeführt. Ein systematischer Ansatz, um Patienten und Spender-Screening, Vorbereitung der Stuhl, und die Lieferung des Stuhl maximiert Therapieerfolg. Hier die einzelnen Schritte des FMT-Protokoll, das bei jeder Endoskopie durchgeführt werden können wir DetailZentrum mit einem hohen Grad an Sicherheit und Erfolg.

Wir haben 24 FMTs an 22 Patienten in unserem Center (Tabelle 1) unter Verwendung des obigen Protokoll. Neun Patienten hatten gleichzeitige IBD (sechs mit Morbus Crohn und drei mit Colitis ulcerosa). Alle neun hatten Auflösung von CDI. Einer der Patienten mit Morbus Crohn war Status veröffentlichen insgesamt Kolektomie für Morbus ulcerosa. Er unterzog sich zunächst FMT über Koloskopie jedoch nach erleben eine Wiederholung zu 2 Wochen nach der FMT er unterzog sich einer zweiten FMT über obere Endosk...

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Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

Fecal Mikrobiota Transplantation über Koloskopie ist eine sichere und wirksame Behandlung für wiederkehrende und feuerfesten C.difficile Infektion. Während der Koloskopie Ein systematischer Ansatz für Patienten und Spender-Screening, Vorbereitung der Stuhl, und die Lieferung des Stuhls wird den Therapieerfolg zu maximieren.

Fecal Mikrobiota Transplantation über Koloskopie für Recurrent<em&gt; C. difficile</em&gt; Infektions

Fecal Microbiota Transplantation (FMT) is a safe and highly effective treatment for recurrent and refractory C. difficile infection (CDI). Various methods ...

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Universidad de Cartagena UDEC

Research

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Medicine

Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

27.0K Aufrufe.  Brigham and Women‘s Hospital.  Fecal Mikrobiota Transplantation über Koloskopie ist eine sichere und wirksame Behandlung für wiederkehrende und feuerfesten C.difficile Infektion. Während der Koloskopie Ein systematischer Ansatz für Patienten und Spender-Screening, Vorbereitung der Stuhl, und die Lieferung des Stuhls wird den Therapieerfolg zu maximieren. 

Serie: Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

A Genetically Engineered Mouse Model of Sporadic Colorectal Cancer

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations and do not accurately simulate tumor biology and tumor cell dissemination. Genetically engineered mouse models have been introduced to overcome these limitations; however, such models are technically demanding, especially in large organs such as the colon in which only a single tumor is desired.
As a result, an immunocompetent, genetically engineered mouse model of colorectal cancer was developed which develops highly uniform tumors and can be used for tumor biology studies as well as therapeutic trials. Tumor development is initiated by surgical, segmental infection of the distal colon with adeno-cre virus in compound conditionally mutant mice. The tumors can be easily detected and monitored via colonoscopy. We here describe the surgical technique of segmental adeno-cre infection of the colon, the surveillance of the tumor via high-resolution colonoscopy and present the resulting colorectal tumors.

A protocol for the establishment of a genetically engineered mouse model of colorectal cancer by segmental adeno-cre infection and its surveillance via high-resolution colonoscopy is presented.

Ein genetisch manipuliertes Mausmodell des sporadischen Darmkrebses

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations ...

Forschung

Krebsforschung

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is a significant nosocomial pathogen. C. difficile is notoriously difficult to isolate and cultivate and is extremely sensitive to even low levels of oxygen in the environment. Here, methods for isolating C. difficile from fecal samples and subsequently culturing C. difficile for preparation of glycerol stocks for long-term storage are presented. Techniques for preparing and enumerating spore stocks in the laboratory for a variety of downstream applications including microscopy and animal studies are also described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which maintains a consistent anaerobic environment to ensure proper conditions for optimal C. difficile growth. We provide protocols for transferring materials in and out of the chamber without causing significant oxygen contamination along with suggestions for regular maintenance required to sustain the appropriate anaerobic environment for efficient and consistent C. difficile cultivation.

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a pathogenic bacterium that is a strict anaerobe and causes antibiotic associated diarrhea (AAD). Here, methods for isolating, culturing and maintaining C. difficile vegetative cells and spores are described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which requires regular maintenance to ensure proper conditions for optimal C. difficile cultivation.

Kultivierung und Pflege<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; In einer anaeroben Umgebung

Clostridium  difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium  that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is ...

Immunologie und Infektion

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer being two common examples. Despite the frequency of these procedures, a significant knowledge gap remains in describing the inherent effects of intestinal resection on host physiology and disease pathophysiology. This article provides detailed instructions for an ileocolic resection with primary end-to-end anastomosis in mice, as well as essential aspects of peri-operative care to maximize post-operative success. When followed closely, this procedure yields a 95% long-term survival rate, no failure to thrive, and minimizes post-operative complications of bowel obstruction and anastomotic leak. The technical challenges of performing the procedure in mice are a barrier to its wide spread use in research. The skills described in this article can be acquired without previous surgical experience. Once mastered, the murine ileocolic resection procedure will provide a reproducible tool for studying the effects of intestinal resection in models of human disease.

Ileocolic resection is commonly performed in several human diseases; however, little is known regarding the impact of intestinal resection on surgical illnesses. This article provides instruction on executing the procedure in mice with high success, providing a means to study the effects of ileocolic resection in models of disease.

Murine Ileocolische Darmresektion mit primärer Anastomose

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

Medizin

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and consequently poses an urgent threat to public health. Recurrence of a C. difficile infection (CDI) after successful treatment with antibiotics is high, occurring in 20-30% of patients, thus necessitating the discovery of novel therapeutics against this pathogen. Current animal models of CDI result in high mortality rates and thus do not approximate the chronic, insidious disease manifestations seen in humans with CDI. To evaluate therapeutics against C. difficile, a mouse model approximating human disease utilizing a clinically-relevant strain is needed. This protocol outlines the cefoperazone mouse model of CDI using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Techniques for clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol. Compared to other mouse models of CDI, this model is not uniformly lethal at the dose administered, allowing for the observation of a prolonged clinical course of infection concordant with the human disease. Therefore, this cefoperazone mouse model of CDI proves a valuable experimental platform to assess the effects of novel therapeutics on the amelioration of clinical disease and on the restoration of colonization resistance against C. difficile.

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

This protocol outlines the cefoperazone mouse model of Clostridium difficile infection (CDI) using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Emphasis on clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol.

Cefoperazon behandelten Maus-Modell der klinisch relevanten<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; Dehnungs R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and ...

Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted considerable attention. Accumulating evidence suggests that dysbiotic microbiota plays an active role in triggering or worsening the inflammatory process in IBD and that fecal microbiota transplantation (FMT) is an attractive therapeutic strategy since transferring a healthy microbiota to IBD patient could restore the appropriate host-microbiota communication. However, the molecular mechanisms are unclear, and the efficacy of FMT has not been very well established. Thus, further studies in animal models of IBD are necessary. In this method, we applied FMT from wild-type C57BL/6J mice to IL-10 deficient mice, a widely used mouse model of colitis. The study elaborates on collecting fecal pellets from the donor mice, making the fecal solution/suspension, administering the fecal solution, and monitoring the disease. We found that FMT significantly mitigated the cardiac impairment in IL-10 knockout mice, underlining its therapeutic potential for IBD management.

The interaction of genetic susceptibility, mucosal immunity, and intestinal microecological environment is involved in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). In this study, we applied fecal microbiota transplantation to IL-10 deficient mice and investigated its impact on colonic inflammation and heart function.

Therapeutische Bewertung der fäkalen Mikrobiota-Transplantation in einem Interleukin-10-defizienten Mausmodell

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted ...

Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal microbiota transplantation (FMT) is a valuable approach to delineating a direct role of the total microbiota or isolated species in disease pathophysiology. It is a safe treatment option for patients with recurrent Clostridium difficile infection. Preclinical studies demonstrate that manipulating the gut microbiota is a useful tool to study the mechanistic link between dysbiosis and disease. Fecal microbiota transplantation may help elucidate novel gut microbiota-targeted therapeutics for the management and treatment of cardiometabolic disease. Despite a high success rate in rodents, there remains translational changes associated with the transplantation. The goal here is to provide guidance in studying the effects of gut microbiome in experimental cardiovascular disease. In this study, a detailed protocol for the collection, handling, processing, and transplantation of fecal microbiota in murine studies is described. The collection and processing steps are described for both human and rodent donors. Lastly, we describe using a combination of the Swiss-rolling and immunostaining techniques to assess gut-specific morphology and integrity changes in cardiovascular disease and related gut microbiota mechanisms.

The goal here is to outline a protocol to investigate the mechanisms of dysbiosis in cardiovascular disease. This paper discusses how to aseptically collect and transplant murine fecal samples, isolate intestines, and use the "Swiss-roll" method, followed by immunostaining techniques to interrogate changes in the gastrointestinal tract.

Fäkalisolierung der Maus und Mikrobiota-Transplantation

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal ...

Preparation and Maintenance of Bioexclusion IsoPositive Cage Experiment for Human Fecal Transplantation into Germ-Free Mice

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of the specific role of individuals, defined or complex groups of microorganisms in host response. Traditionally bred and reared in flexible-film or semi-rigid isolators, germ-free mouse husbandry and experimental manipulation are costly and require numerous trained staff and a large space footprint in animal housing facilities. The IsoPositive caging system allows for experimental manipulation of germ-free mice in individual, hermetically-sealed, positive-pressure isolator cages (isocages), reducing cost and enabling greater flexibility in experimental manipulations. 
Here, a protocol is described for transferring germ-free mice from breeding isolators to isocages and subsequent fecal transfer from human donor stool into mice to create stable long-term gut "humanized" mice for future studies. The materials and preparation needed for the utilization of the isocage system are described, including the use of chlorine-dioxide sterilant chemical sterilant to clean cages, supplies, equipment, and personal protective equipment. The methods for confirming the germ-free status of transferred mice and how to determine contamination in the caging system are discussed. The procedure for husbandry, including bedding, food, and water supply, is further discussed. The protocol for human fecal slurry preparation and gavage into germ-free mice to create gut "humanized" mice, along with stool collection to monitor the microbial community composition of these mice, are described. An experiment illustrates that two weeks post-human fecal transplant allows for stable colonization of donor microbiota in the murine hosts, enabling subsequent experimental usage. Furthermore, the collection of humanized mouse feces in viability preservation media, enabling use in further functional experiments, is described. Overall, these methods allow for the safe and effective establishment of humanized mouse communities in experimental gnotobiotic cages for further manipulation.

This protocol describes the best practices for germ-free mouse transfer to and housing in experimental single-cage isolators (isocages) while maintaining sterile conditions. Methods for fecal transplant into germ-free mice and the collection of viable bacteria from these gut "humanized" mice for further applications are discussed.

Vorbereitung und Durchführung eines IsoPositiv-Käfig-Experiments zur Stuhltransplantation von Menschen in keimfreie Mäuse

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of ...

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the biological function of intestinal bacteria as a whole or at the species level. Several different FMT methods have been published. Here, we present an FMT protocol that successfully depletes gut microbiota in a matter of days, followed by transplantation of fecal microbiota from fresh or frozen donor intestinal contents to conventional mice. Real time-PCR is applied to test the efficacy of bacterial depletion. Sequencing of the 16S ribosomal RNA (rRNA) is then applied to test the relative abundance and identity of gut microbiota in recipient mice. We also present a flow cytometry-based detection method of immunoglobulin A (IgA)-coated bacteria in the gut.

We established an efficient way to deplete intestinal bacteria in three days, and subsequently transplant fecal microbiota via gavage of fecal fluid prepared from fresh or frozen intestinal contents in mice. We also present an optimized method to detect the frequency of IgA-coated bacteria in the gut.

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the ...

Biologie

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in alleviating colitis remain undefined. Most analysis methods rely on limited diversity and abundance of gut microorganisms. Therefore, observational studies cannot establish causation. In this study, we applied antibiotic-induced pseudo-germ-free mice to investigate the role of gut microbiota in regulating the probiotic effects of Bacillus&#160;cereus (B. cereus)&#160;on dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. This process allows for evaluating the bidirectional regulating effect of B. cereus&#160;supplementation on health and provides stable and reproducible results. Here, the detailed protocols for B. cereus cultivation, gavage operation, stool collection, and antibiotic clearance treatment on colitis mice are provided. The optimization methods are also applicable for other chronic inflammatory-associated disorders. The results showed that B. cereus administration decreased body weight loss, colon length shortening, disease activity index, and histopathological scores. However, treatment with antibiotics suppressed the positive effect of B. cereus on colitis. These results indicate that gut microbiota are needed for the alleviating effects of B. cereus on colitis. Therefore, exploring the beneficial effects of probiotics in this research is a promising approach for developing novel treatment strategies for alleviating the symptoms of chronic inflammatory-associated disorders.

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Here, we present a protocol to establish the antibiotic-induced pseudo-germ-free dextran sulfate sodium-induced colitis mouse model to investigate the role of gut microbiota in regulating the positive effects of Bacillus cereus on colitis.

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in ...

Generating a Double Humanized BLT (Bone-Marrow, Liver, Thymus) Mouse Model

Source: Daharsh, L. et al., <a href="https://appjove.unicartagenaproxy.elogim.com/v/59773">A Double Humanized BLT-mice Model Featuring a Stable Human-Like Gut Microbiome and Human Immune System.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2019)
This video demonstrates the method for generating a double humanized bone BLT (marrow, liver, and thymus) mouse with a functional human immune system and a stable engrafted human-like gut microbiome.

Generierung eines doppelt humanisierten BLT-Mausmodells (Knochenmark, Leber, Thymus)

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. Mice ...

Fecal Mikrobiota Transplantation über Koloskopie für Recurrent

Zusammenfassung

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Ein genetisch manipuliertes Mausmodell des sporadischen Darmkrebses

Kultivierung und Pflege

Murine Ileocolische Darmresektion mit primärer Anastomose

Cefoperazon behandelten Maus-Modell der klinisch relevanten

Therapeutische Bewertung der fäkalen Mikrobiota-Transplantation in einem Interleukin-10-defizienten Mausmodell

Fäkalisolierung der Maus und Mikrobiota-Transplantation

Vorbereitung und Durchführung eines IsoPositiv-Käfig-Experiments zur Stuhltransplantation von Menschen in keimfreie Mäuse

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Generierung eines doppelt humanisierten BLT-Mausmodells (Knochenmark, Leber, Thymus)