The authors would like to acknowledge the Infectious Disease Department at Brigham and Women&#8217;s Hospital especially Michael S. Calderwood, MD, MPH for helping us construct this protocol. We would also like to thank the Institution&#8217;s endoscopy center and it&#8217;s leadership team for their support.

NOTE: Au moment de cette publication un manuscrit Investigational New Drug (IND) application ne est pas nécessaire d&#39;effectuer une FMT pour CDI récurrent dans la pratique clinique. Toutefois, si FMTS sont effectuées dans le cadre d&#39;une étude ou pour une autre indication, un IND ou l&#39;application équivalent peut être exigé 18. Les organismes de réglementation devraient continuer d&#39;évaluer l&#39;innocuité et l&#39;efficacité de FMT appliquée à des conditions médicales CDI et d&#39;autres et il est donc conseillé de vérifier les exigences réglementaires dans votre emplacement respectif avant l&#39;initiation d&#39;un programme de FMT et chaque un à deux mois, une fois effectuer activement FMT. Les candidats NOTE doivent être prêts à consentir à la transplantation fécale ainsi que la coloscopie. 1. Identification de candidats appropriés pour FMT <ol><li> Les patients qui ont CDI récurrente ou réfractaire patients atteints de maladie qui ne répond pas aux antibiotiques traditionnels sont appropriatcandidats e pour FMT. REMARQUE: rechute CDI est défini comme une histoire de trois épisodes ou plus de CDI confirmés par des tests de toxine ou PCR, ou deux épisodes qui ont nécessité une hospitalisation. </li><li> Se assurer que le patient est capable de subir une coloscopie en toute sécurité. Ce est à la discrétion de l&#39;endoscopiste. </li></ol> 2. Sélection des donneurs Tabouret REMARQUE: La sélection des donneurs Tabouret se applique au traitement des CDI et peut ne pas être applicable au traitement d&#39;autres troubles. <ol><li> Assurez-vous que le patient identifie un donneur. Les donneurs potentiels doivent être présents avec le bénéficiaire au moment de la première visite de la gastro-entérologie clinique. Les donateurs peuvent être des conjoints, membres de la famille ou des amis. Les donateurs peuvent vivre dans la même résidence que le destinataire tant que d&#39;autres critères sont respectés. </li></ol> Admissibilité 3. des donateurs <ol><li> Critères d&#39;inclusion: Veiller à ce que le donneur est un adulte en bonne santé (ancienne ≥18 ans) et a un jour formé intestinale mOUVEMENT. </li><li> Critères d&#39;exclusion: <ol><li> Assurez-vous que le donneur ne est pas la prise d&#39;antibiotiques ou n&#39;a pas pris des antibiotiques au cours des trois mois précédents ou de médicaments pour une infection. </li><li> Veiller à ce que le donneur n&#39;a pas une histoire de constipation chronique ou utiliser des laxatifs. En outre, d&#39;assurer le donateur n&#39;a pas une histoire de maladie intestinale inflammatoire, la diarrhée chronique, colite microscopique, des antécédents personnels de intestinale / cancer du côlon, ou une histoire de / autre chirurgie de perte de poids de pontage gastrique. </li><li> Assurer le donateur n&#39;a pas voyagé récemment (dans les trois derniers mois) dans une région où la diarrhée infectieuse est une préoccupation. Se ils ont voyagé et connu la diarrhée, ils devraient être laissées en dehors. </li><li> Assurez-vous que le donneur ne prend aucune agents immunosuppresseurs et ne est pas sur la chimiothérapie systémique. </li><li> Veiller à ce que le donneur n&#39;a pas de syndrome métabolique, maladies auto-immunes ou de maladies atopiques. </li></ol></li><li> Obtenir con écriteenvoyé par le donneur et le receveur avant le dépistage étant donné la nature sensible des tests de dépistage. Rassurer les deux parties que les résultats des tests ne seront pas partagés avec l&#39;autre partie. </li></ol> 4. dépistage NOTE: Ce protocole de dépistage a été adapté pour les patients à l&#39;hôpital Brigham and Women in Massachusetts, USA envisager de consulter le département de la maladie et le contrôle des infections à l&#39;hôpital infectieuse avant de lancer le protocole de FMT pour se assurer que tous les tests de dépistage appropriés ont été considérés. <ol><li> Destinataire: <ol><li> Au moment de la première visite de la clinique, envoyer les tests de laboratoire suivants pour le dépistage du destinataire (pour établir les tests de base pour ces maladies infectieuses et pour se assurer qu&#39;il ne est pas question de la transmission dans l&#39;avenir). </li><li> Effectuer l&#39;hépatite A (IgG et IgM), l&#39;hépatite B (Ag HBs / Ab et HBcAb), l&#39;hépatite C Ab, le VIH-1/2 (Ab et la charge virale) et de la syphilis (TP-IgG) le sang de laboratoire tintérêts. </li><li> Obtenir une histoire approfondie des allergies alimentaires à ce évaluation initiale. </li></ol></li><li> Donateur: <ol><li> Coordonner avec le laboratoire de microbiologie avant de dépistage pour se assurer selles formées ne est pas écartée. </li><li> Commandez les tests de laboratoire ci-dessous pour la sélection des donneurs si le donneur répond aux critères d&#39;admissibilité conformément à l&#39;article 3. </li><li> Effectuer l&#39;hépatite A (IgG et IgM), hépatite B (HBsAg / Ab et HBcAb), l&#39;hépatite C Ab, le VIH-1/2 (Ab et charge virale) et de la syphilis (TP-IgG) des tests sanguins de laboratoire. </li><li> Effectuer C. difficile (par la culture), la culture des selles de routine, antigène de Giardia, Cryptosporidium et l&#39;antigène tests de selles laboratoire œufs et de parasites. </li><li> Screen donneur pas plus de 30 jours mais de préférence 1 à 2 semaines avant la procédure prévue. NOTE: Si le donateur développe diarrhée ou selles liquides qu&#39;ils ne sont plus éligibles pour le don. </li></ol></li><li> L&#39;avocat du donateur sur les aliments à éviter basée surLes allergies alimentaires du destinataire. Le donneur doit pas ingérer des aliments à laquelle le destinataire est allergique pour les 5 jours avant le don. </li></ol> 5. Pré-procédure Préparation <ol><li> Destinataire: <ol><li> À la visite initiale de la clinique, si le destinataire ne est pas déjà sur la vancomycine par voie orale, commencer la vancomycine 125 mg toutes les 6 h pendant au moins sept à dix jours avant la procédure. </li><li> Fournir au destinataire les instructions du centre d&#39;endoscopie pour la préparation de l&#39;intestin pré-coloscopie à faire le jour avant la procédure prévue. Les bénéficiaires doivent également suivre les instructions alimentaires standards du centre d&#39;endoscopie pour la semaine avant la procédure. </li><li> Demandez au destinataire de prendre leur dernière dose de vancomycine la nuit avant la procédure. </li></ol></li><li> Donateur: <ol><li> Fournir au donateur plusieurs tasses de collecte de selles. Inserts étiquette de toilette (chapeaux) et les tasses avec l&#39;étiquette du destinataire ainsi que 3 vide specimen conteneurs. Demandez au donateur de commencer la collecte des selles pas plus de 6 heures avant le traitement (temps de la procédure). NOTE: Si le donateur fournit de multiples échantillons de selles, ils doivent être étiquetés avec les dates et heures. Utilisez l&#39;exemple le plus frais (un rempli Gobelet échantillon suffira). </li><li> Assurez-vous que le destinataire apporte l&#39;échantillon de selles du donneur avec eux à la procédure. </li><li> Stocker les échantillons de selles à la température ambiante. Exclure toute selle non moulée. Jeter toute tabouret utilisé dans un système d&#39;égout sanitaire (moins l&#39;épargne pour des fins de recherche). </li></ol></li></ol> 6. Tabouret Préparation REMARQUE: Veiller à cette procédure est discuté et approuvé par le département de contrôle des infections de l&#39;hôpital. <ol><li> Porter un équipement de protection individuelle lors de la préparation du tabouret. </li><li> Préparer tabouret dans la salle d&#39;endoscopie dans une zone de travail désigné dans lequel il ya une zone d&#39;accueil de dix-huit pouces qui empêche la contamination du OTHmatériaux ER. </li><li> Avant la selle préparation, nettoyer la zone désignée avec un désinfectant approuvé par l&#39;hôpital. </li><li> Couvrir la zone avec une lingette jetable pour éviter toute contamination. </li><li> Transférer le tabouret formé dans un quatorze onces mélangeur à vitesse unique et ajouter 500 cc de solution saline normale. </li><li> Mélanger le contenu pendant au moins une minute ou jusqu&#39;à ce qu&#39;il atteigne une consistance de bouillie liquide. Soyez prudent pour éviter de renverser lorsque vous retirez le couvercle du mélangeur. </li><li> Verser la solution à travers le tamis dans un bassin de huit quart de plastique pour éliminer tous les déchets solides. Jeter la crépine. </li><li> Dresser la solution tendues en 60 cc seringues luer lock (environ huit à neuf pour une FMT standard en coloscopie). Dresser un supplément de 60 cc de solution saline normale pour les bouffées. </li></ol> 7. transplantation fécale par coloscopie <ol><li> Porter un équipement de protection individuelle conformément aux politiques de l&#39;unité d&#39;endoscopie en exécutant ou en aidant à la Infusion. </li><li> Considérez sédation légère, si possible, de sorte que le patient peut être en mesure de coopérer avec conservant les selles après la procédure. </li><li> Effectuer une coloscopie à l&#39;iléon terminal (ou que cela est techniquement possible). Lors de l&#39;insertion de la colonscope, un lavage et d&#39;aspiration tout liquide résiduel selles. </li><li> Inspectez les murs muqueuses des preuves de l&#39;inflammation des muqueuses, mais les biopsies ne sont pas systématiquement effectuée lors de la procédure FMT. NOTE: Déterminer si oui ou non une coloscopie complète est sûr en raison du degré de l&#39;inflammation. Si non, pensez à une sigmoïdoscopie flexible plus limitée à la perfusion (utiliser la moitié de la suspension de selles). </li><li> Infuser 60 cc (une seringue) une fois dans l&#39;iléon terminal via le canal de biopsie du coloscope avec le capuchon de canal à biopsie avec des tubes d&#39;extension. </li><li> Entre les applications de seringues de selles, rincer le canal avec une solution saline normale pour éviter le colmatage. </li><li> Infuser une autre 60 cc de selles dans le caecum, puis répéter dans la bonne colon. </li><li> Continuer infuser 30 cc tous les cinq à dix cm tout en répartissant uniformément la bouillie sur les quatre quadrants de la paroi du côlon jusqu&#39;à la mi-colon transversal est atteint. Ne oubliez pas de rincer avec une solution saline entre les seringues de selles. NOTE: Si la suspension est très visqueux, il peut être nécessaire de pousser avec une force considérable sur la seringue. Veillez à ce que le bouchon du canal de biopsie ne se sépare pas de la coloscope et provoquer déversement du contenu de selles. Rinçage fréquent facilitera le passage de la suspension. Se il ya difficulté persistante à pousser la boue, envisager un nouveau forcer les selles donneur restant pour une deuxième fois ou diluant davantage avec une solution saline normale. </li><li> Aspirer excès d&#39;air au moment du retrait lors du changement de corps de seringue tout en faisant attention de ne pas aspirer toute selles liquides. NOTE: Si le patient a connu incontinence fécale, la dernière seringue doit être perfusé pas inférieure à la angle hépatique pour éviter les fuites pendant et après la procédure. </li><li> Une fois èmee coloscopie avec FMT est terminée, informer le patient de garder les selles aussi longtemps qu&#39;ils le peuvent. Ils peuvent reprendre leur régime alimentaire normal et les médicaments deux heures après la coloscopie est terminée. </li></ol> 8. La coloscopie avec FMT Clean Up <ol><li> Exécutez la procédure de poste équipements de retraitement, l&#39;environnement de nettoyage / désinfection et l&#39;élimination des déchets selon le protocole de l&#39;hôpital. </li><li> Éliminer tous les matières fécales dans le container prévu appropriée. </li><li> Apportez le coloscope à la zone de décontamination pour le traitement de routine selon le protocole standard. </li><li> Éliminer le mélangeur et crépine avec tout autre déchet souillés. NOTE: Si les mélangeurs et les filtres à usage unique ne sont pas réalisables dans un établissement autre individu méthodes de mélange peuvent être envisagées. Un exemple: en passant le tabouret à travers un presse-purée de pommes de terre en acier inoxydable qui peut être nettoyé dans un autoclave. Nous vous recommandons de discuter des méthodes potentielles avec contrôle de l&#39;infection dep de votre établissementartment. </li><li> Décontaminer toutes les surfaces qui ont été utilisés pour la procédure en utilisant les produits de l&#39;établissement approuvé. </li></ol> 9. Suivi <ol><li> Prendre un rendez en gastroentérologie clinique de suivi pour le patient environ 30 jours après la FMT. </li><li> Conseiller le patient sur ​​le risque de récidive C. difficile avec des cours futurs des antibiotiques. </li></ol> 10. déclaration des événements indésirables <ol><li> Bien que FMT est considéré comme une procédure sûre, il est fortement conseillé de garder une trace de tous les événements indésirables ressentis d&#39;être associé à la procédure et de les signaler aux organismes de réglementation appropriés. </li><li> Afin de documenter la sécurité à long terme de FMT, garder une base de données fiable qui peut être interrogé périodiquement. </li></ol>

<ol>
	<li>Eiseman, B., Silen, W., Bascom, G. S., Kauvar, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+enema+as+an+adjunct+in+the+treatment+of+pseudomembranous+enterocolitis.">Fecal enema as an adjunct in the treatment of pseudomembranous enterocolitis.</a> Surgery. 44 (5), 854-859 (1958).</li><li>Zhang, F., Luo, W., Shi, Y., Fan, Z., Ji, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Should+we+standardize+the+1,700-year-old+fecal+microbiota+transplantation.">Should we standardize the 1,700-year-old fecal microbiota transplantation.</a> Am J Gastroenterol. 107 (11), 1755-1710 (2012).</li><li>Borody, T. J., Paramsothy, S., Agrawal, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+microbiota+transplantation:+indications,+methods,+evidence,+and+future+directions.">Fecal microbiota transplantation: indications, methods, evidence, and future directions.</a> Curr Gastroenterol Rep. 15 (8), 337 (2013).</li><li>Mattila, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+transplantation,+through+colonoscopy,+is+effective+therapy+for+recurrent+Clostridium+difficile+infection.">Fecal transplantation, through colonoscopy, is effective therapy for recurrent Clostridium difficile infection.</a> Gastroenterology. 142 (3), 490-496 (2012).</li><li>Brandt, L. J., Aroniadis, O. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+fecal+microbiota+transplantation:+techniques,+indications,+and+outcomes.">An overview of fecal microbiota transplantation: techniques, indications, and outcomes.</a> Gastrointest Endosc. 78 (2), 240-249 (2013).</li><li>Aas, J., Gessert, C. E., Bakken, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recurrent+Clostridium+difficile+colitis:+case+series+involving+18+patients+treated+with+donor+stool+administered+via+a+nasogastric+tube.">Recurrent Clostridium difficile colitis: case series involving 18 patients treated with donor stool administered via a nasogastric tube.</a> Clin Infect Dis. 36 (5), 580-585 (2003).</li><li>Garborg, K., Waagsbo, B., Stallemo, A., Matre, J., Sundoy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+faecal+donor+instillation+therapy+for+recurrent+Clostridium+difficile-associated+diarrhoea.">Results of faecal donor instillation therapy for recurrent Clostridium difficile-associated diarrhoea.</a> Scand J Infect Dis. 42 (11-12), 857-861 (2010).</li><li>Kassam, Z., Lee, C. H., Yuan, Y., Hunt, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+microbiota+transplantation+for+Clostridium+difficile+infection:+systematic+review+and+meta-analysis.">Fecal microbiota transplantation for Clostridium difficile infection: systematic review and meta-analysis.</a> Am J Gastroenterol. 108 (4), 500-508 (2013).</li><li>Kelly, C. R., de Leon, L., Jasutkar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+microbiota+transplantation+for+relapsing+Clostridium+difficile+infection+in+26+patients:+methodology+and+results.">Fecal microbiota transplantation for relapsing Clostridium difficile infection in 26 patients: methodology and results.</a> J Clin Gastroenterol. 46 (2), 145-149 (2012).</li><li>Lund-Tonnesen, S., Berstad, A., Schreiner, A., Midtvedt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clostridium+difficile-associated+diarrhea+treated+with+homologous+feces.">Clostridium difficile-associated diarrhea treated with homologous feces.</a> Tidsskr Nor Laegeforen. 118 (7), 1027-1030 (1998).</li><li>MacConnachie, A. A., Fox, R., Kennedy, D. R., Seaton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Faecal+transplant+for+recurrent+Clostridium+difficile-associated+diarrhoea:+a+UK+case+series.">Faecal transplant for recurrent Clostridium difficile-associated diarrhoea: a UK case series.</a> QJM. 102 (11), 781-784 (2009).</li><li>Mellow, M. H., Kanatzar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonoscopic+fecal+bacteriotherapy+in+the+treatment+of+recurrent+Clostridium+difficile+infection--results+and+follow-up.">Colonoscopic fecal bacteriotherapy in the treatment of recurrent Clostridium difficile infection--results and follow-up.</a> J Okla State Med Assoc. 104 (3), 89-91 (2011).</li><li>Polak, P., Freibergerova, M., Jurankova, J., Kocourkova, H., Mikesova, L., Svacina, R., Husa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+experiences+with+faecal+bacteriotherapy+in+the+treatment+of+relapsing+pseudomembranous+colitis+due+to+Clostridium+difficile.">First experiences with faecal bacteriotherapy in the treatment of relapsing pseudomembranous colitis due to Clostridium difficile.</a> Klin Mikrobiol Infekc Lek. 17 (6), 214-217 (2011).</li><li>Rohlke, F., Surawicz, C. M., Stollman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+flora+reconstitution+for+recurrent+Clostridium+difficile+infection:+results+and+methodology.">Fecal flora reconstitution for recurrent Clostridium difficile infection: results and methodology.</a> J Clin Gastroenterol. 44 (8), 567-570 (2010).</li><li>Sekirov, I., Russell, S. L., Antunes, L. C., Finlay, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gut+microbiota+in+health+and+disease.">Gut microbiota in health and disease.</a> Physiol Rev. 90 (3), 859-904 (2010).</li><li>Yoon, S. S., Brandt, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+refractory/recurrent+C.+difficile-associated+disease+by+donated+stool+transplanted+via+colonoscopy:+a+case+series+of+12+patients.">Treatment of refractory/recurrent C. difficile-associated disease by donated stool transplanted via colonoscopy: a case series of 12 patients.</a> J Clin Gastroenterol. 44 (8), 562-566 (2010).</li><li>Brandt, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+follow-up+of+colonoscopic+fecal+microbiota+transplant+for+recurrent+Clostridium+difficile+infection.">Long-term follow-up of colonoscopic fecal microbiota transplant for recurrent Clostridium difficile infection.</a> Am J Gastroenterol. 107 (7), 1079-1087 (2012).</li><li>Kelly, C. R., Kunde, S. S., Khoruts, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidance+on+preparing+an+investigational+new+drug+application+for+fecal+microbiota+transplantation+studies.">Guidance on preparing an investigational new drug application for fecal microbiota transplantation studies.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 12 (2), 283-288 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose relevant to the material presented in this manuscript.

Greffes fécaux ont été montré pour être un traitement efficace et sûr pour CDI récurrente. Nous avons décrit un protocole standard pour FMT via coloscopie et inclus nos résultats pour 22 patients qui ont subi la procédure de CDI récurrente. Nos résultats sont donc bien comparables aux données publiées pour une maladie récurrente avec un seul patient récurrents après FMT un mois. Une étape cruciale de la procédure est la visite de présélection pour se assurer que le donneur est approprié et...

Greffes fécaux pour le traitement de la colite pseumembranous ont été décrits en 1958 1. Cependant, les rapports de l&#39;ingestion de matières fécales pour le traitement de l&#39;intoxication alimentaire sévère et date de la diarrhée retour dès quatrième siècle, la Chine 2. Fécale microbiote transplantation (FMT) est également appelé dans la littérature &quot;bactériothérapie fécale», «perfusion probiotique humain», «tabouret greffe», «intestinale restauration microbiome&quot;, et &quot;le transfert fécale&quot;. Il se agit de la collecte de selles, un donneur présélectionnés bonne santé et procurant une suspension préparée dans le tractus gastro-intestinal du destinataire par sonde nasogastrique, esophagogastricduodenoscopy, coloscopie ou lavement 3. Beaucoup de séries de cas ont rapporté l&#39;efficacité de l&#39;administration par NGT et lavement, cependant études plus récentes ont montré que l&#39;administration de selles des bailleurs de fonds via une coloscopie est sûr et très efficace 4.Alors que d&#39;autres méthodes telles que l&#39;administration de sonde nasogastrique ont été signalés, la livraison des selles des donateurs via coloscopie a moins d&#39;effets secondaires immédiats (par exemple, des ballonnements abdominaux et des nausées) 4 et nous avons trouvé que les patients sont plus accepter de la notion de FMT quand il est effectué par coloscopie. L&#39;un des avantages thérapeutiques de FMT par coloscopie est la réduction de la biomasse due à la colique lavage de l&#39;intestin qui est effectuée avant la procédure 4. De multiples études ont examiné le rôle de la FMT pour le traitement de la colite et la diarrhée causée par l&#39;agent pathogène opportuniste C. difficile (ICD). L&#39;incidence de la CDI continue d&#39;augmenter et est une cause majeure de morbidité et de mortalité avec un lourd fardeau économique à travers le monde. Le traitement de première ligne pour les CDI se compose de l&#39;antibiothérapie, mais les taux de récidive ont été signalés entre 15-35% 5. Plusieurs séries de cas et des rapports ont-cumented la sécurité et l&#39;efficacité de FMT pour CDI réfractaire au traitement médical standard avec des antibiotiques 4,6-16. Une étude regardant suivi à long terme des patients après FMT via la coloscopie pour le CDI a rapporté un taux de guérison primaire de 91% chez 77 patients 17. Lors de notre Centre (Brigham and Women &#39;s Hospital Division de gastro-entérologie, hépatologie et endoscopie), nous avons lancé un programme de transplantation fécale pour les patients en rechute ou réfractaire CDI. Candidats appropriés sont définis comme des patients qui ont CDI récurrente (une histoire de trois épisodes ou plus, ou deux épisodes ayant nécessité une hospitalisation), ou chez les patients avec une maladie réfractaire qui ne répond pas aux antibiotiques traditionnels. Nous croyons qu&#39;une approche systématique à toutes les phases de cette procédure maximise l&#39;efficacité. Dans ce manuscrit et la vidéo qui l&#39;accompagne, nous détaillons le protocole que nous avons utilisé dans notre centre, qui comprend patient et le donneur le dépistage, la préparation des selles, et la livraison des selles unt le temps de la coloscopie. Cette méthode a donné des résultats positifs comparables à la littérature publiée. Présentation de cas: Ce patient représente un patient typique visée pour la transplantation fécale. La patiente est une femme de 69 ans avec une histoire de la leucémie lymphoïde chronique qui avait rechute de maladie nécessitant un traitement ultérieur avec la chimiothérapie. Elle souffrait de trois épisodes de CDI dans l&#39;année écoulée, et a donc été renvoyée à notre clinique pour l&#39;examen des FMT avant la chimiothérapie de re-lancement. Son premier épisode de CDI eu lieu en Octobre 2012. Elle ne avait pas eu d&#39;antibiotiques précédentes. Elle était très malade aux soins intensifs après avoir présenté un choc septique et a subi détournant iléostomie avec antérograde vancomycine lavements pour un cours de six semaines en combinaison avec la vancomycine par voie orale étant donné la gravité de sa maladie. Elle a très bien fait avec une résolution de son diarrhée et elle était en mesure de venirantibiotiques hors. Elle a développé une hernie autour de sa stomie de sorte qu&#39;il se est inversée. Peu de temps après le renversement de stomie elle a de nouveau développé la diarrhée et a été retrouvé à être C. toxine difficile positive. Elle a terminé un autre cours de 6 semaines de vancomycine par voie orale et a réussi à se estomper du succès. Toutefois, plusieurs mois plus tard, elle a de nouveau développé la diarrhée était C. toxine difficile positif et a été lancé sur son troisième cours de vancomycine par voie orale. Elle se portait bien sur les antibiotiques quand il a été noté que son nombre de globules blancs a augmenté à&gt; 100 et elle a trouvé à une rechute de sa CLL sur la biopsie de la moelle osseuse. Ses oncologues étaient préoccupés initier une chimiothérapie sans résolution complète de son CDI et nous a demandé de réaliser FMT.

<table><tbody><tr><td>Blender</td><td>Hamilton Beach</td><td>51101</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Hamilton-Beach-51101-Personal-Blender/dp/B00065L6CU/ref=pd_sim_k_2?ie=UTF8&amp;amp;refRID=1Q06MXAE9XKTB4QG0AEN&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Strainer</td><td>Winco</td><td>MS3A-8S</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.amazon.com/Winco-MS3A-8S-Strainer-Single-Wooden/dp/B001VZ5E40/ref=sr_1_3?s=home-garden&amp;amp;ie=UTF8&amp;amp;qid=1395001295&amp;amp;sr=1-3&amp;amp;keywords=kitchen+strainer+wooden+handle&quot; target=&quot;_blank&quot;&gt;Link to Amazon.com&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Disposable pads (chux), 17 x 24 in.</td><td>hospital standard</td><td></td><td>one package</td></tr><tr><td>Pink rectangular hospital standard wash basin, 8 quart</td><td>hospital standard</td><td></td><td>1 or 2</td></tr><tr><td>500 cc bottle of sterile normal saline</td><td>hospital standard</td><td></td><td>2</td></tr><tr><td>60 cc luer lock syringes</td><td>hospital standard</td><td></td><td>8 or 9</td></tr><tr><td>Biopsy channel cap with extension</td><td>hospital standard</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

fecal microbiota transplantation via colonoscopy for recurrent c. difficile infection

Fécale microbiote transplantation (FMT) est un traitement sûr et très efficace pour récurrente et réfractaire C. infection difficile (ICD). Diverses méthodes d&#39;administration FMT ont été rapportés dans la littérature, y compris sonde nasogastrique, endoscopie haute, lavement et la coloscopie. FMT via rendements coloscopie excellents taux de guérison et est également bien toléré. Nous avons constaté que les patients trouvent cela un mode de livraison acceptable et tolérable. Dans notre centre, nous avons lancé un programme de transplantation fécale pour les patients en rechute ou réfractaire CDI. Nous avons élaboré un protocole en utilisant un processus itératif de la révision et avons effectué 24 transplantations fécales sur 22 patients avec des taux comparables à la littérature publiée actuelle de réussite. Une approche systématique de dépistage des patients et des donateurs, la préparation des selles, et la livraison du tabouret maximise succès thérapeutique. Ici, nous en détail chaque étape du protocole de FMT qui peut être effectué à tout endoscopiecentrer avec un degré élevé de sécurité et de succès.

Nous avons effectué 24 FMTS sur 22 patients dans notre centre (tableau 1) en utilisant le protocole ci-dessus. Neuf patients ont eu IBD concurrente (six avec la maladie de Crohn et la colite ulcéreuse trois). Tout neuf avaient résolution du CDI. Un des patients atteints de la maladie de Crohn était le statut poster un colectomie totale pour la colite de Crohn. Il a d&#39;abord subi FMT via coloscopie mais après avoir connu une récidive deux semaines après FMT il a subi une seconde FMT via endosco...

Watch this Scientific Journal Video about Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection at JoVE.com

Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

Fécale microbiote transplantation par coloscopie est un traitement sûr et efficace de l&#39;infection à C. difficile récurrent et réfractaire. Une approche systématique de patient et la sélection des donneurs, la préparation des selles, et la livraison des selles pendant la coloscopie permettra de maximiser le succès thérapeutique.

Fécale microbiote transplantation par coloscopie pour Recurrent<em&gt; C. difficile</em&gt; Infection

Fecal Microbiota Transplantation (FMT) is a safe and highly effective treatment for recurrent and refractory C. difficile infection (CDI). Various methods ...

fecal-microbiota-transplantation-via-colonoscopy-for-recurrent-c

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

27.0K vues.  Brigham and Women‘s Hospital.  Fécale microbiote transplantation par coloscopie est un traitement sûr et efficace de l'infection à C. difficile récurrent et réfractaire. Une approche systématique de patient et la sélection des donneurs, la préparation des selles, et la livraison des selles pendant la coloscopie permettra de maximiser le succès thérapeutique. 

Vidéo: Fecal Microbiota Transplantation via Colonoscopy for Recurrent C. difficile Infection

A Genetically Engineered Mouse Model of Sporadic Colorectal Cancer

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations and do not accurately simulate tumor biology and tumor cell dissemination. Genetically engineered mouse models have been introduced to overcome these limitations; however, such models are technically demanding, especially in large organs such as the colon in which only a single tumor is desired.
As a result, an immunocompetent, genetically engineered mouse model of colorectal cancer was developed which develops highly uniform tumors and can be used for tumor biology studies as well as therapeutic trials. Tumor development is initiated by surgical, segmental infection of the distal colon with adeno-cre virus in compound conditionally mutant mice. The tumors can be easily detected and monitored via colonoscopy. We here describe the surgical technique of segmental adeno-cre infection of the colon, the surveillance of the tumor via high-resolution colonoscopy and present the resulting colorectal tumors.

A protocol for the establishment of a genetically engineered mouse model of colorectal cancer by segmental adeno-cre infection and its surveillance via high-resolution colonoscopy is presented.

Un modèle de souris génétiquement modifiée de cancer colorectal sporadique

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations ...

Recherche

Recherche en cancérologie

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is a significant nosocomial pathogen. C. difficile is notoriously difficult to isolate and cultivate and is extremely sensitive to even low levels of oxygen in the environment. Here, methods for isolating C. difficile from fecal samples and subsequently culturing C. difficile for preparation of glycerol stocks for long-term storage are presented. Techniques for preparing and enumerating spore stocks in the laboratory for a variety of downstream applications including microscopy and animal studies are also described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which maintains a consistent anaerobic environment to ensure proper conditions for optimal C. difficile growth. We provide protocols for transferring materials in and out of the chamber without causing significant oxygen contamination along with suggestions for regular maintenance required to sustain the appropriate anaerobic environment for efficient and consistent C. difficile cultivation.

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a pathogenic bacterium that is a strict anaerobe and causes antibiotic associated diarrhea (AAD). Here, methods for isolating, culturing and maintaining C. difficile vegetative cells and spores are described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which requires regular maintenance to ensure proper conditions for optimal C. difficile cultivation.

La culture et entretien<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; Dans un environnement anaérobie

Clostridium  difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium  that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is ...

Immunologie et infection

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer being two common examples. Despite the frequency of these procedures, a significant knowledge gap remains in describing the inherent effects of intestinal resection on host physiology and disease pathophysiology. This article provides detailed instructions for an ileocolic resection with primary end-to-end anastomosis in mice, as well as essential aspects of peri-operative care to maximize post-operative success. When followed closely, this procedure yields a 95% long-term survival rate, no failure to thrive, and minimizes post-operative complications of bowel obstruction and anastomotic leak. The technical challenges of performing the procedure in mice are a barrier to its wide spread use in research. The skills described in this article can be acquired without previous surgical experience. Once mastered, the murine ileocolic resection procedure will provide a reproducible tool for studying the effects of intestinal resection in models of human disease.

Ileocolic resection is commonly performed in several human diseases; however, little is known regarding the impact of intestinal resection on surgical illnesses. This article provides instruction on executing the procedure in mice with high success, providing a means to study the effects of ileocolic resection in models of disease.

Murin iléocoliques résection du côlon avec anastomose primaire

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

Médecine

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and consequently poses an urgent threat to public health. Recurrence of a C. difficile infection (CDI) after successful treatment with antibiotics is high, occurring in 20-30% of patients, thus necessitating the discovery of novel therapeutics against this pathogen. Current animal models of CDI result in high mortality rates and thus do not approximate the chronic, insidious disease manifestations seen in humans with CDI. To evaluate therapeutics against C. difficile, a mouse model approximating human disease utilizing a clinically-relevant strain is needed. This protocol outlines the cefoperazone mouse model of CDI using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Techniques for clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol. Compared to other mouse models of CDI, this model is not uniformly lethal at the dose administered, allowing for the observation of a prolonged clinical course of infection concordant with the human disease. Therefore, this cefoperazone mouse model of CDI proves a valuable experimental platform to assess the effects of novel therapeutics on the amelioration of clinical disease and on the restoration of colonization resistance against C. difficile.

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

This protocol outlines the cefoperazone mouse model of Clostridium difficile infection (CDI) using a clinically-relevant and genetically-tractable strain, R20291. Emphasis on clinical disease monitoring, C. difficile bacterial enumeration, toxin cytotoxicity, and histopathological changes throughout CDI in a mouse model are detailed in the protocol.

Céfopérazone traité Souris Modèle de Cliniquement pertinentes<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; Strain R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and ...

Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted considerable attention. Accumulating evidence suggests that dysbiotic microbiota plays an active role in triggering or worsening the inflammatory process in IBD and that fecal microbiota transplantation (FMT) is an attractive therapeutic strategy since transferring a healthy microbiota to IBD patient could restore the appropriate host-microbiota communication. However, the molecular mechanisms are unclear, and the efficacy of FMT has not been very well established. Thus, further studies in animal models of IBD are necessary. In this method, we applied FMT from wild-type C57BL/6J mice to IL-10 deficient mice, a widely used mouse model of colitis. The study elaborates on collecting fecal pellets from the donor mice, making the fecal solution/suspension, administering the fecal solution, and monitoring the disease. We found that FMT significantly mitigated the cardiac impairment in IL-10 knockout mice, underlining its therapeutic potential for IBD management.

The interaction of genetic susceptibility, mucosal immunity, and intestinal microecological environment is involved in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). In this study, we applied fecal microbiota transplantation to IL-10 deficient mice and investigated its impact on colonic inflammation and heart function.

Évaluation thérapeutique de la transplantation de microbiote fécal dans un modèle murin déficient en interleukine 10

With the development of microecology in recent years, the relationship between intestinal bacteria and inflammatory bowel disease (IBD) has attracted ...

Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal microbiota transplantation (FMT) is a valuable approach to delineating a direct role of the total microbiota or isolated species in disease pathophysiology. It is a safe treatment option for patients with recurrent Clostridium difficile infection. Preclinical studies demonstrate that manipulating the gut microbiota is a useful tool to study the mechanistic link between dysbiosis and disease. Fecal microbiota transplantation may help elucidate novel gut microbiota-targeted therapeutics for the management and treatment of cardiometabolic disease. Despite a high success rate in rodents, there remains translational changes associated with the transplantation. The goal here is to provide guidance in studying the effects of gut microbiome in experimental cardiovascular disease. In this study, a detailed protocol for the collection, handling, processing, and transplantation of fecal microbiota in murine studies is described. The collection and processing steps are described for both human and rodent donors. Lastly, we describe using a combination of the Swiss-rolling and immunostaining techniques to assess gut-specific morphology and integrity changes in cardiovascular disease and related gut microbiota mechanisms.

The goal here is to outline a protocol to investigate the mechanisms of dysbiosis in cardiovascular disease. This paper discusses how to aseptically collect and transplant murine fecal samples, isolate intestines, and use the "Swiss-roll" method, followed by immunostaining techniques to interrogate changes in the gastrointestinal tract.

Isolement fécal murin et transplantation de microbiote

Gut microbiota dysbiosis plays a role in the pathophysiology of cardiovascular and metabolic disorders, but the mechanisms are not well understood. Fecal ...

Preparation and Maintenance of Bioexclusion IsoPositive Cage Experiment for Human Fecal Transplantation into Germ-Free Mice

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of the specific role of individuals, defined or complex groups of microorganisms in host response. Traditionally bred and reared in flexible-film or semi-rigid isolators, germ-free mouse husbandry and experimental manipulation are costly and require numerous trained staff and a large space footprint in animal housing facilities. The IsoPositive caging system allows for experimental manipulation of germ-free mice in individual, hermetically-sealed, positive-pressure isolator cages (isocages), reducing cost and enabling greater flexibility in experimental manipulations. 
Here, a protocol is described for transferring germ-free mice from breeding isolators to isocages and subsequent fecal transfer from human donor stool into mice to create stable long-term gut "humanized" mice for future studies. The materials and preparation needed for the utilization of the isocage system are described, including the use of chlorine-dioxide sterilant chemical sterilant to clean cages, supplies, equipment, and personal protective equipment. The methods for confirming the germ-free status of transferred mice and how to determine contamination in the caging system are discussed. The procedure for husbandry, including bedding, food, and water supply, is further discussed. The protocol for human fecal slurry preparation and gavage into germ-free mice to create gut "humanized" mice, along with stool collection to monitor the microbial community composition of these mice, are described. An experiment illustrates that two weeks post-human fecal transplant allows for stable colonization of donor microbiota in the murine hosts, enabling subsequent experimental usage. Furthermore, the collection of humanized mouse feces in viability preservation media, enabling use in further functional experiments, is described. Overall, these methods allow for the safe and effective establishment of humanized mouse communities in experimental gnotobiotic cages for further manipulation.

This protocol describes the best practices for germ-free mouse transfer to and housing in experimental single-cage isolators (isocages) while maintaining sterile conditions. Methods for fecal transplant into germ-free mice and the collection of viable bacteria from these gut "humanized" mice for further applications are discussed.

Préparation et maintenance d’une expérience de cage bio-exclusion isopositive pour la transplantation fécale humaine chez des souris exemptes de germes

Germ-free mice are an important investigation tool for understanding the contribution of microorganisms in host health and disease, enabling assessment of ...

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the biological function of intestinal bacteria as a whole or at the species level. Several different FMT methods have been published. Here, we present an FMT protocol that successfully depletes gut microbiota in a matter of days, followed by transplantation of fecal microbiota from fresh or frozen donor intestinal contents to conventional mice. Real time-PCR is applied to test the efficacy of bacterial depletion. Sequencing of the 16S ribosomal RNA (rRNA) is then applied to test the relative abundance and identity of gut microbiota in recipient mice. We also present a flow cytometry-based detection method of immunoglobulin A (IgA)-coated bacteria in the gut.

We established an efficient way to deplete intestinal bacteria in three days, and subsequently transplant fecal microbiota via gavage of fecal fluid prepared from fresh or frozen intestinal contents in mice. We also present an optimized method to detect the frequency of IgA-coated bacteria in the gut.

Gut microbiota exert pleiotropic roles in human health and disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) is an effective method to investigate the ...

Biologie

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in alleviating colitis remain undefined. Most analysis methods rely on limited diversity and abundance of gut microorganisms. Therefore, observational studies cannot establish causation. In this study, we applied antibiotic-induced pseudo-germ-free mice to investigate the role of gut microbiota in regulating the probiotic effects of Bacillus&#160;cereus (B. cereus)&#160;on dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. This process allows for evaluating the bidirectional regulating effect of B. cereus&#160;supplementation on health and provides stable and reproducible results. Here, the detailed protocols for B. cereus cultivation, gavage operation, stool collection, and antibiotic clearance treatment on colitis mice are provided. The optimization methods are also applicable for other chronic inflammatory-associated disorders. The results showed that B. cereus administration decreased body weight loss, colon length shortening, disease activity index, and histopathological scores. However, treatment with antibiotics suppressed the positive effect of B. cereus on colitis. These results indicate that gut microbiota are needed for the alleviating effects of B. cereus on colitis. Therefore, exploring the beneficial effects of probiotics in this research is a promising approach for developing novel treatment strategies for alleviating the symptoms of chronic inflammatory-associated disorders.

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Here, we present a protocol to establish the antibiotic-induced pseudo-germ-free dextran sulfate sodium-induced colitis mouse model to investigate the role of gut microbiota in regulating the positive effects of Bacillus cereus on colitis.

Gut microbiota dysbiosis is thought to exert a role in the progression of colitis. However, the precise standards for probiotic administration in ...

Generating a Double Humanized BLT (Bone-Marrow, Liver, Thymus) Mouse Model

Source: Daharsh, L. et al., <a href="https://appjove.unicartagenaproxy.elogim.com/v/59773">A Double Humanized BLT-mice Model Featuring a Stable Human-Like Gut Microbiome and Human Immune System.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2019)
This video demonstrates the method for generating a double humanized bone BLT (marrow, liver, and thymus) mouse with a functional human immune system and a stable engrafted human-like gut microbiome.

Génération d’un modèle murin BLT (Os-Marrow, Foie, Thymus) doublement humanisé

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. Mice ...

Fécale microbiote transplantation par coloscopie pour Recurrent

Résumé

Explorer plus de vidéos

Chapitres dans cette vidéo

Un modèle de souris génétiquement modifiée de cancer colorectal sporadique

La culture et entretien

Murin iléocoliques résection du côlon avec anastomose primaire

Céfopérazone traité Souris Modèle de Cliniquement pertinentes

Évaluation thérapeutique de la transplantation de microbiote fécal dans un modèle murin déficient en interleukine 10

Isolement fécal murin et transplantation de microbiote

Préparation et maintenance d’une expérience de cage bio-exclusion isopositive pour la transplantation fécale humaine chez des souris exemptes de germes

Fecal Microbiota Transplantation and Detection of Prevalence of IgA-Coated Bacteria in the Gut

Investigating the Alleviating Effects of Bacillus cereus Administration on Colitis through Gut Microbiota Modulation

Génération d’un modèle murin BLT (Os-Marrow, Foie, Thymus) doublement humanisé