고성능 액체 크로마토그래피 또는 HPLC는 고압에서 액체 표본을 분리하는 분석 기술입니다. HPLC 기기는 이동상 저장소라고 하는 용매를 보관하기 위한 유리 병으로 구성됩니다. HPLC 등급 용매는 고순도를 유지하는 데 사용되고, 용해된 가스는 진공 펌핑 시스템이나 헬륨 스파징과 같은 탈기기를 사용하여 제거됩니다. 그런 다음 용매는 나사 구동 주사기 또는 왕복 펌프를 사용하여 분석 컬럼으로 펌핑됩니다. 대부분의 최신 HPLC 기기는 펄스 이동상 흐름을 생성하는 왕복 피스톤 펌프를 사용하며, 펄스 댐퍼에 연결하여 부드럽게 합니다. 일부 분석에서는 그래디언트 용출이 사용됩니다. 이 기술은 이동상의 구성을 점진적으로 변경하는 것을 포함하며, 이는 극성에 따라 복잡한 혼합물의 분리를 향상시킬 수 있습니다. 그래디언트 컨트롤러는 이 과정 동안 용매의 유량을 유지하는 데 사용됩니다.
이동상이 컬럼에 도달하기 전에 표본이 루프 주입기 또는 자동 주입기에 주입됩니다. 이동상은 표본과 함께 컬럼에 들어가고, 컬럼은 고정상으로 채워집니다. 분석 컬럼은 컬럼 오븐에 넣어 일정한 온도를 유지합니다. 때때로, 스캐빈저 및 가드 컬럼과 같은 프리 컬럼을 사용하여 컬럼의 수명을 보호합니다. 분석물 성분이 분리되면 검출기로 이동하여 이를 식별하고 결과를 컴퓨터가 표시하는 크로마토그램으로 변환합니다. 마지막으로, 분리된 성분을 운반하는 용매인 용출액은 폐기물로 들어가거나 분획 수집기에서 수집됩니다.
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