11.19 : כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים: מכשור

כרומטוגרפיה נוזלית בביצועים גבוהים (HPLC) היא טכניקה אנליטית המפרידה דוגמאות נוזליות בלחצים גבוהים. מערכת HPLC מורכבת מבקבוקי זכוכית לאחסון ממסים, הנקראים מאגרי הפאזה הניידת. ממסים בדרגת HPLC משמשים לשמירה על טוהר גבוה, וגזים מומסים מוסרים בעזרת מערכת דה-גזינג, כגון משאבת ואקום או תהליך ספארג'ינג עם הליום. לאחר מכן, הממסים מוזרמים לעמודה האנליטית באמצעות משאבות בוכנה הדדיות או מזרקים מונעי בורג. רוב מערכות HPLC המודרניות משתמשות במשאבות בוכנה הדדיות היוצרות זרימה פולסיבית של הפאזה הניידת, המוחלקת באמצעות חיבורן למרסן פולסים. בחלק מהניתוחים משתמשים באילוציה גרדיאנטית, טכניקה המשנה בהדרגה את הרכב הפאזה הניידת, ומשפרת את הפרדת התערובות המורכבות בהתבסס על קוטביותן. בקרי גרדיאנט משמשים לשמירה על קצב זרימת הממסים במהלך תהליך זה.

לפני שהפאזה הניידת מגיעה לעמודה, הדגימה מוזרקת דרך מזרק לולאה או מערכת הזרקה אוטומטית (אוטו-אינג'קטור). הפאזה הניידת יחד עם הדגימה נכנסת לעמודה, המלאה בפאזה נייחת. העמודה האנליטית ממוקמת בתנור עמודות לשמירה על טמפרטורה קבועה. לעיתים משתמשים בעמודות מקדימות, כמו עמודות בעירה (עמודות scavenger ) ושמירה, כדי להגן על אורך חיי העמודה. לאחר רכיבי הדגימה מופרדים, הם עוברים לגלאי, שמזהה אותם וממיר את התוצאות לכרומטוגרמה שמוצגת על המחשב. לבסוף, האלואנט - הממס הנושא את הרכיבים המופרדים - מגיע לפסולת או נאסף באספן פרקציות.