L’étude examine les effets cardioprotecteurs de Munziq sur les lésions de perfusion myocardique chez les rats, en particulier ceux dont les fluides corporels sont anormaux. Notre objectif est de déterminer si le prétraitement de Munziq peut atténuer les lésions d’ischémie-reperfusion myocardique, induire des changements pathologiques, protéger la fonction cardiaque et explorer ses mécanismes, en particulier via la voie de signalisation NF-kappa B. Notre groupe de recherche s’est concentré sur l’étude des lésions d’ischémie-reperfusion myocardique.
Notre résultat suggère que l’inhibition de la voie NF-kappa B peut atténuer les lésions d’ischémie-reperfusion myocardique, ce qui peut atténuer les lésions d’ischémie-reperfusion myocardique en inhibant la voie NF-kappa B, affectant la fonction mitochondriale et le métabolisme myocardique. Notre recherche identifie Munziq comme une thérapie potentielle pour les lésions d’ischémie-reperfusion myocardique, faisant progresser le domaine en explorant une approche de médecine naturelle. Cette découverte est importante car elle cible la voie NF-kappa B, un nouveau mécanisme pour le traitement des lésions d’ischémie-reperfusion myocardique.
Nos résultats ouvrent la voie à d’autres applications cliniques de la médecine traditionnelle dans la gestion des maladies cardiovasculaires. Pour commencer, logez les rats dans le liquide corporel anormal, ou groupe ABF, dans un environnement contrôlé à l’intérieur de boîtes climatiques et fournissez de la nourriture ordinaire. Fournissez aux rats des aliments ordinaires mélangés à de la nourriture froide sèche, à savoir des graines d’orge et de coriandre, pendant 21 jours pour établir le modèle ABF.
À l’aide d’une technique d’administration intragastrique, administrer cinq grammes par kilogramme de Munziq aux rats du groupe Munziq pendant 21 jours avant une lésion d’ischémie-reperfusion myocardique ou une chirurgie MIRI. Pour établir le modèle MIRI, après 21 jours de prétraitement, placez le rat anesthésié sur une table d’opération stérile. Effectuez une trachéotomie pour permettre la respiration assistée par ventilateur chez le rat.
Avant d’ouvrir la poitrine, lavez le site chirurgical à l’eau savonneuse, rasez la zone et désinfectez-la avec une solution iodée. Ensuite, à l’aide de ciseaux, de pinces et d’écarteurs stériles, ouvrez la paroi thoracique pour exposer le cœur et identifier l’artère descendante antérieure gauche, qui se trouve à la surface du cœur. À l’aide d’une suture 6-0, ligaturez l’artère pour induire une ischémie régionale pendant 30 minutes.
Confirmez l’occlusion efficace en observant une couleur pâle dans le myocarde. Après 30 minutes, relâchez la ligature et laissez la reperfusion pendant 120 minutes. Confirmez la reperfusion du myocarde lorsqu’il reprend une couleur rouge vif.
Après la reperfusion, utilisez un tube de prélèvement sanguin sous vide pour prélever un à deux millilitres de sang de l’aorte abdominale. Après avoir euthanasié le rat, utilisez des pinces et des ciseaux stériles pour prélever du tissu myocardique dans la zone de l’infarctus dans le ventricule gauche. Placez le tissu prélevé dans un récipient stérile pour une analyse plus approfondie.
Après avoir prélevé un infarctus du myocarde chez le rat MIRI, utilisez des ciseaux stériles et une lame pour transecter le cœur horizontalement en deux moitiés le long du point médian du grand axe ventriculaire gauche, perpendiculaire à la direction du cœur. Divisez la moitié de la partie apicale en deux portions. Conserver une portion de paraformaldéhyde à 4 % à température ambiante pendant deux à 24 heures pour l’examen morphologique.
Placez l’autre portion dans du glutaraldéhyde à quatre degrés Celsius pendant une à quatre heures pour la microscopie électronique. Ensuite, divisez la partie inférieure du cœur, y compris les zones ischémiques et non ischémiques, en deux parties. Placez une portion dans un flacon cryogénique et congelez-la rapidement dans de l’azote liquide.
Transférez les tissus congelés dans un congélateur à moins 80 degrés Celsius pour des tests de biologie moléculaire. Centrifugez le sang prélevé dans la veine cave inférieure à 1 000 G pendant 10 minutes. Conservez le sérum séparé dans un congélateur à moins 80 degrés Celsius.
Placez les sections de tissu fixées au formaldéhyde dans un incubateur à 65 degrés Celsius pour cuire pendant 1,5 à deux heures. Plongez les sections de tissu cuites dans du xylène pendant 10 minutes. Ensuite, immergez séquentiellement les sections de tissu dans de l’alcool anhydre un et deux pendant cinq minutes chacune, puis dans de l’alcool à 95 %, 90 %, 80 % et 70 %, et enfin dans de l’eau distillée pendant cinq minutes chacune.
Teignez les sections de tissus avec de l’hématoxyline pendant trois minutes. Effectuez la différenciation acide en immergeant brièvement les sections de tissu dans une solution d’alcool d’acide chlorhydrique pendant une à deux secondes. Mettez fin à la différenciation en rinçant à l’eau du robinet pendant cinq minutes.
Ensuite, plongez les sections de tissu dans de l’eau distillée, puis dans 70 %, 80 %, 90 % et 95 % d’alcool pendant trois minutes chacune. Après avoir immergé la section dans de l’alcool anhydre un et deux, colorez les sections avec 0,5 % d’éosine dans de l’éthanol pendant une minute. Maintenant, rincez les sections à l’éthanol à 95 % pour enlever l’excès de couleur rouge.
Ensuite, plongez les sections dans de l’éthanol anhydre pendant cinq minutes, puis plongez dans du xylène un et deux pendant cinq minutes chacune. Montez les sections tachées avec du baume neutre. Observez les changements pathologiques dans les tissus au microscope.
Le tissu myocardique du groupe placebo présentait une dégénérescence granulaire et vacuolaire, une infiltration limitée de globules rouges et de lymphocytes, ainsi qu’une dilatation et une congestion vasculaires occasionnelles. Dans le groupe MIRI, il y avait de graves lésions du tissu myocardique avec une dégénérescence granulaire et vacuolaire étendue. Les lésions myocardiques étaient notablement graves dans le groupe ABF MIRI par rapport au groupe témoin MIRI, montrant des signes amplifiés de dégénérescence et d’infiltration tissulaires.
Les cellules myocardiques traitées avec Munziq dans les groupes témoins et ABF MIRI ont montré une réduction de la dégénérescence granulaire et vacuolaire avec moins de globules rouges, d’infiltration lymphocytaire et de congestion. Les cellules myocardiques du groupe placebo ont conservé une structure myofibrillaire intacte, une longueur de sarcomère uniforme et de nombreuses mitochondries. Dans le groupe MIRI, les cellules myocardiques présentaient un gonflement, une longueur de sarcomère variable et des myofilaments perturbés, avec des lésions mitochondriales étendues.
Le traitement Munziq a réduit l’enflure des cellules myocardiques et préservé la structure myofibrille, sarcomère et mitochondriale, similaire aux conditions fictives. Les taux sériques de cTn-T, CK-MB et ICAM-1 étaient significativement plus élevés dans le groupe MIRI ABF que dans le groupe MIRI témoin. Le prétraitement de Munziq a considérablement réduit les taux de cTn-T, CK-MB et ICAM-1 dans les groupes ABF et MIRI témoin.
Le groupe MIRI ABF a montré une augmentation des taux de malondialdéhyde et une diminution des taux d’oxyde nitrique dans le tissu myocardique par rapport au groupe MIRI témoin. Le prétraitement Munziq a considérablement réduit la teneur en lactate déshydrogénase et en malondialdéhyde tout en augmentant les niveaux d’oxyde nitrique dans le myocarde ischémique. Le groupe ABF MIRI présentait des taux élevés d’interleukine un bêta, d’interleukine six et de TNF alpha, en particulier aux niveaux de protéines.
Le prétraitement de Munziq a réduit les taux sériques et d’ARNm de l’interleukine 1 bêta, de l’interleukine 6 et du TNF alpha, en particulier aux niveaux protéiques du myocarde. Les marqueurs de la voie NF-kappa B ont été régulés à la hausse dans le tissu MIRI, indiquant une inflammation. Le traitement par Munziq a diminué l’expression des marqueurs de voie, indiquant une réduction de l’activation de la voie NF-kappa B.
