この研究では、ラット、特に体液が異常なラットの心筋灌流障害に対するムンジクの心臓保護効果を調査しています。私たちは、Munziq 前処理が心筋虚血再灌流障害を軽減し、病理学的変化を誘発し、心機能を保護し、特に NF-κB シグナル伝達経路を介してそのメカニズムを探索できるかどうかを判断することを目指しています。当研究グループでは、心筋虚血再灌流障害の研究に注力してきました。
私たちの発見は、NF-κB経路を阻害すると、心筋虚血再灌流障害を緩和できることを示唆しています。これにより、NF-κB経路を阻害することにより心筋虚血再灌流障害が軽減され、ミトコンドリア機能と心筋代謝に影響を与える可能性があります。私たちの研究では、Munziqが心筋虚血再灌流障害治療薬としての可能性を特定し、自然医学のアプローチを探求することでこの分野を前進させています。この発見は、心筋虚血再灌流障害治療の新規メカニズムであるNF-κB経路を標的としているため、重要です。
私たちの発見は、心血管疾患管理における伝統医学のさらなる臨床応用への道を開きます。まず、ラットを異常な体液、またはABFグループ、つまり気候ボックス内の制御された環境に収容し、通常の飼料を提供します。ラットに乾燥した冷たい食べ物、すなわち大麦とコリアンダーの種子を混ぜた通常の飼料を21日間提供して、ABFモデルを確立します。
胃内投与技術を使用して、心筋虚血再 ?? 流障害またはMIRI手術の21日前の21日間、ムンジクグループラットにムンジク1キログラムあたり5グラムを投与します。.MIRIモデルを確立するには、21日間の前処理後、麻酔をかけたラットを滅菌手術台に置きます。気管切開を行い、ラットの人工呼吸器補助呼吸を可能にします。
胸部を開く前に、手術部位を石鹸水で洗い、その部分を剃り、ヨウ素溶液で消毒します。次に、滅菌ハサミ、鉗子、リトラクターを使用して胸壁を開き、心臓を露出させ、心臓の表面にある左前下行動脈を特定します。6-0縫合糸を使用して、動脈を結紮し、30分間局所虚血を誘発します。
心筋の淡い色を観察することで、効果的な閉塞を確認します。30分後、結紮糸を放出し、120分間再灌流します。心筋が明るい赤色に戻ったときに、心筋の再灌流を確認します。
再灌流後、真空採血管を使用して腹部大動脈から1〜2ミリリットルの血液を採取します。ラットを安楽死させた後、滅菌鉗子とハサミを使用して、左心室の梗塞領域から心筋組織を採取します。収集した組織を滅菌容器に入れて、さらに分析します。
MIRI樹立ラットから心筋梗塞性心臓を採取した後、滅菌ハサミと刃物を使用して、心臓の方向に垂直な左心室長軸の中点に沿って心臓を水平に2つに分割します。頂端部分の半分を2つに分けます。4%パラホルムアルデヒド中の1部を室温で2〜24時間保存し、形態学的検査を行います。
他の部分をグルタルアルデヒドに摂氏4度で1〜4時間置き、電子顕微鏡検査を行います。次に、虚血性領域と非虚血性領域の両方を含む心臓の基部を2つの部分に分割します。一部をクライオバイアルに入れ、液体窒素で急速に凍結します。
凍結した組織をマイナス80°Cの冷凍庫に移し、分子生物学的試験を行います。下大静脈から採取した血液を1, 000 Gで10分間遠心分離します。分離した美容液をマイナス80°Cの冷凍庫で保存します。
ホルムアルデヒドで固定した組織切片を摂氏65度のインキュベーターに入れ、1.5〜2時間焼きます。焼きたてのティッシュ切片をキシレンに10分間浸します。次に、組織切片を無水アルコール1および2にそれぞれ5分間、続いて95%90%80%および70%アルコールに順次浸漬し、最後に蒸留水に各5分間浸します。
組織切片をヘマトキシリンで3分間染色します。組織切片を塩酸アルコール溶液に1〜2秒間短時間浸すことにより、酸性分化を行います。水道水で5分間すすいで分化を終了します。
次に、組織切片を蒸留水に浸し、次に70%80%90%および95%アルコールにそれぞれ3分間浸します。切片を無水アルコール1および2に浸した後、切片を0.5%エオシンでエタノールに1分間染色します。次に、切片を95%エタノールですすいで、余分な赤い色を取り除きます。
次に、切片を無水エタノールに5分間浸漬し、続いてキシレン1と2にそれぞれ5分間浸します。汚れた部分を中性バルサムで取り付けます。顕微鏡下で組織の病理学的変化を観察します。
偽群の心筋組織は、顆粒状および液胞変性、赤血球およびリンパ球の浸潤の制限、および時折の血管拡張および鬱血を示した。MIRIグループでは、広範囲の顆粒および液胞変性を伴う重度の心筋組織の損傷がありました。心筋損傷は、対照群のMIRI群と比較してABF MIRI群で著しく深刻であり、組織の変性と浸潤の増幅された徴候を示しました。
対照群とABF MIRI群の両方でMunziqで治療された心筋細胞は、赤血球、リンパ球浸潤、およびうっ血が減少し、顆粒化および液胞変性が減少しました。偽グループの心筋細胞は、無傷の筋原線維構造、均一なサルコメアの長さ、および多数のミトコンドリアを維持していました。MIRIグループでは、心筋細胞は腫脹、サルコメアの長さの変化、およびミオフィラメントの破壊を示し、ミトコンドリアの広範な損傷を示しました。
Munziq治療は、心筋細胞の腫脹を抑え、偽の疾患と同様に筋原線維、サルコメア、ミトコンドリアの構造を維持しました。血清cTn-T、CK-MB、およびICAM-1レベルは、対照MIRIグループよりもABF MIRIグループで有意に高かった。Munziqの前処理は、ABF群と対照MIRI群の両方でcTn-T、CK-MB、およびICAM-1のレベルを著しく低下させました。
ABF MIRIグループは、対照のMIRIグループと比較して、心筋組織のマロンジアルデヒドレベルの増加と一酸化窒素レベルの減少を示しました。Munziqの前処理は、虚血性心筋の一酸化窒素レベルを増加させながら、乳酸デヒドロゲナーゼとマロンジアルデヒドの含有量を大幅に低下させました。ABF MIRIグループは、特にタンパク質レベルで、インターロイキン1ベータ、インターロイキン6ベータ、およびTNFアルファレベルの上昇を示しました。
Munziq前処理は、特に心筋のタンパク質レベルで、インターロイキン1ベータ、インターロイキン6、およびTNFアルファの血清およびmRNAレベルを低下させました。NF-κB経路マーカーはMIRI組織でアップレギュレーションされ、炎症を示しました。ムンジク治療はパスウェイマーカーの発現を減少させ、NF-κB経路の活性化が減少したことを示しています。
