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11.17 : 高效液相色谱法:简介

高效液相色谱法 (HPLC),以前称为高压液相色谱法,是一种用于分离、识别和量化复杂混合物中成分的强大技术。术语“高压”是指使用高压将液体流动相推过紧密填充的色谱柱。

在 HPLC 中,两个相在分离过程中起着关键作用:

  • 流动相:这是一种流经系统的液体溶剂,携带样品。溶剂的选择基于其极性,以优化与分析物和固定相的相互作用。“极性指数”可作为选择适合分离的溶剂的指南。
  • 固定相:固定相是一种固体材料,通常是二氧化硅基的,填充在色谱柱内。在反相 HPLC 中,固定相通常是衍生二氧化硅,例如十八烷基 (C18) 二氧化硅。填充材料的粒径小,表面积大,增强了与分析物的相互作用。为了减少不良相互作用,例如未反应的硅醇基团的相互作用,固定相通常用三甲基氯硅烷等试剂封端

由于分析物与流动相和固定相的相互作用不同(具体取决于它们的化学性质),因此会发生分离,从而导致通过色谱柱的差异迁移。

有时,溶质分子不可逆地与固定相结合,堵塞分析柱并降低其性能。为了防止这种情况,在分析柱前放置一个保护柱。在流动相储液器和进样器之间还可以放置一个称为清除柱的预柱。这可确保溶剂进入已经被清除柱中的二氧化硅饱和的分析柱,从而防止不必要的反应并延长分析柱的使用寿命。

分离后,根据化合物的特性,通过各种检测器检测分析物。结果以色谱图的形式可视化,各个峰对应于混合物的不同成分。这提供了有关样本的定性和定量数据。

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High Performance Liquid ChromatographyHPLCMobile PhaseStationary PhasePolarity IndexSilica based Stationary PhaseReverse phase HPLCDifferential MigrationGuard ColumnScavenger ColumnChromatogramsAnalytesQualitative DataQuantitative Data

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