Name: straightforward assay for quantification of social avoidance in drosophila melanogaster
Uploaded: 2014-12-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster at JoVE.com

We thank Rachelle Kanippayoor for her help in identifying the new wild-type strain as being of the melanogaster species. R.W.F, O.F. and A.F.S were responsible for research design; R.W.F, M.N. and O.F. performed the experiments. R.W.F, M.N., O.F. and A.F.S. analyzed the data; R.W.F., I.S.M. and A.F.S. wrote the manuscript. 
This work was supported by PSC-CUNY research awards, jointly funded by The Professional Staff Congress and The City University of New York to A.F.S.; by internal funding from Western University to A.F.S. and I.S.M.; by a training support from the National Alliance for Hispanic Health&#8217;s Alliance/Merck Ciencia (Science) Hispanic Scholars Program and a University Fellowship from the Yale Graduate School of Arts and Sciences to R.W.F.

1. 장비 및 사내 만든 시약 (다른 사람을위한 재료의 목록을 참조하십시오) <ol><li> 플라이 작업을 수행 할 수있는 초파리 차가운 마취 장치를 준비합니다. <ol><li> 작은 플라스틱 상자 (10.2 cm, 폭 12.7 cm 길이), 피펫 팁 상자의 일반적으로 상단 커버 (3.8 cm 깊이 10.2 cm, 폭 12.7 cm 길이)을 충당하기 위해 다공성 폴리에틸렌 시트를 잘라. </li><li> 짓 눌린 얼음 상자 채우기, 다공성 폴리에틸렌 시트 커버. </li></ol></li><li> T-미로 장치를 준비; 이전에 설명 된 세부 28-31 장치 적응. </li><li> (32) 기술로 플라이 흡인기를 준비합니다. </li><li> 및 테스트 튜브의 스트레스없이 파리를 대체하는 phototaxis 응답 장치를 준비합니다 <ol><li> 29,33에 의해 설명 된 바와 같이, 역류 장치를 사용합니다. </li></ol></li></ol> 참고 : 28에 의해 기술 된 바와 같이 T 미로 또한, 다른 목적을 위해 이용 될 수있다. <ol start="5"><li> 동음 확인ogeneous 조명 조건 : 흰색 벤치 커버로 덮여 벤치에 실험을 수행하고, 화이트 보드 앞에. 참고 :이 실험을 위해 사용 된 플라이 균주는 초파리는 야생 유형을 melanogaster의했다 : 광저우-S, 오레곤과 사마르 칸트는 우리의 실험실 주식 34에서 날아; 엘우드 파리는 롱 아일랜드, 뉴욕, 미국에, 헌팅턴의 엘우드 동네에서 2011 년 가을에 수집되었다. </li></ol> 2. 실험 전에 파리를 준비 실험을 수행하기 전에 1-2일 : <ol><li> 12 시간 빛 / 어둠주기에 25 ° C에서 표준 옥수수 가루 한천 - 당밀 효모 매체에 파리를 유지한다. </li><li> 실험을 수행하는 1 ~ 2 일 전에 차가운 마취하에 응답자 파리를 수집 <ol><li> 그들은 깔때기를 사용하여, 50 ㎖ 팔콘 튜브에 제기되고있다있는 병에서 파리를 전송합니다. </li><li> 로, 얼음 수준에서 파리와 팔콘 튜브를 놓습니다절연 얼음 양동이. </li><li> -4 C가 진정 ° 분쇄 얼음으로 냉각 마취 장치를 놓습니다. </li><li> 파리 냉각 혼수를 입력 할 수 5 분을 기다립니다. </li><li> 추위 마취 장치의 다공성 폴리에틸렌 시트에 파리를 전송합니다. </li><li> 추위 마취 장치에 응답자의 파리를 수집합니다. RT에서, 실체 현미경, 여성 파리 3-7 일 이전 남성을 분리하고 (40)의 그룹이 파리를 유지한다. </li></ol></li><li> 실험을 수행하기 1-2 일 전에 이미 터 파리를 수집합니다. <ol><li> 부드럽게 광저우-S 혼합 성이 자신의 번호를 제어, 입 흡입기를 사용하여, 자신의 병에서 파리 수집합니다. </li><li> 그들이 방출되는 바와 같이, 60 ~ 100의 그룹이 파리를 유지한다. </li><li> 데이터 포인트는 필요에 따라 방출의 많은 샘플을 준비합니다. </li></ol></li><li> 추위 마취의 혼란 효과를 최소화하기 위해, 대응 및 이미 터의 수집 후 회복 중 적어도 밤 허용행동에 입 흡입기 모음. </li><li> 적어도 일일 전에 실험, 신선한 공기로 대체 할 수있는 가방에 오래된 플라스틱 냄새가 공기 수 있도록, 테스트 튜브의 가방을 엽니 다. </li></ol> 실험을 수행하기 전에 2 시간 : <ol start="6"><li> 심지어 빛, 실험이 수행 된 실내 온도가 약 23 ~ 25 ° C에 있는지 확인하고, 상기 습도 30 %. </li><li> 이 파리는 굶어되지 않도록 신선한 식품 유리 병에 대응하고 방출 과일 파리를 전송합니다. </li><li> 초파리 실험이 수행 될에 벤치에 2 시간 동안 환경에 적응하자. </li></ol> 3. 사회 회피 실험 수행 <ol><li> Zeitgeber 시간 ZT5 ZT9과 오후 사이에서 3-4 시간의 범위로, 하루 중 동시에 각 실험을 수행한다. </li><li> 타격 패드 T-미로를 놓고 t 그래서 나사 클립을 조그는 엘리베이터 안정적​​이다. </li><li> 신선한 테스트 유리 병에 응답자의 파리를 전송합니다. T-미로의 상단 부분에 응답자의 파리를 포함하는이 병을 스냅. </li><li> T-미로 장치를 경사와 초파리가 엘리베이터에 빠지지 않도록 두근 두근 매트를 누릅니다. </li><li> 파리는 T-미로의 상단과 하단 부분 사이 있도록 아래로 엘리베이터의 상단 부분을 이동하지만, 선택 포인트 이상의 엘리베이터를 유지하기 위해주의 - 탈출 파리를 방지하기 위해. </li><li> DSO (이전에 파리에 의해 점유 된 DSO없는 튜브를 생성하는 제 5 절 참조) 병을 얻습니다. <ol><li> 응답자 파리는이 새로운 환경에 적응하는 동안, 테스트 유리 병에 터 파리를 배치합니다. </li><li> 초파리 탈출하지 않도록 유리 병을 닫습니다면의 조각을 놓습니다. </li><li> 15 초 동안 소용돌이를 5 초 동안 소용돌이에서 유리 병을 제거 : 기계적으로 다음과 같이 미니 소용돌이에이 병을 선동. 55 초 총 3 번 반복합니다. </li><li> 렘식품 유리 병에 전송하여 - - 신선한 유리 병에서 이미 터 파리를 비켜 빠르게 T-미로 장치의 두 측면 중 하나에이 DSO 채워진 유리 병을 배치합니다. </li><li> 각각의 새로운 실행에 DSO 채워진 유리 병에 대한 배치의 측면을 교대한다. </li></ol></li><li> T-미로의 반대편에 신선한 테스트 유리 병을 놓습니다. </li><li> 초파리는 신선한 테스트 유리 병 및 DSO 테스트 유리 병 사이에 선택할 수 있도록 완전히 엘리베이터를 가지고, 그리고 타이머를 시작합니다. </li><li> 다른 설명이없는 파리, 1 분 동안 신선한 유리 병 및 DSO 유리 병 사이에서 선택할 수 있습니다. </li><li> 1 분 후, 신선한 유리 병, DSO 유리 병, 엘리베이터에 갇혀 사람들의 파리를 분리하기 위해 엘리베이터를 이동합니다. </li><li> 각각의 유리 병에 파리의 수를 계산하고 엘리베이터에. </li><li> 각각의 유전자형 / 조건에 대해이 작업을 반복합니다. </li></ol> 4. 사회 회피 데이터 분석 <ol><li> 각 genot 각 유리 병에 과일 파리의 수를 계산YPE 및 스프레드 시트에 데이터를 전송. </li><li> 스프레드 시트 프로그램을 사용하여, 파리의 총 개수로 나누어 다음 DSO없는 유리 병에 파리 번호에서 DSO 바이알 파리의 수를 감산하고, 각 유전자형에 대한 성능 지수 (PI)를 계산한다. </li><li> 결과의 통계적인 분석을위한 분석 소프트웨어를 이용하여 PI들 &#39;비교 수단. <ol><li> 이상적으로, 각 실험 2-3 내부 반복, 3 독립적 인 반복을 준비, 다른 병으로, 다른 일을 수행 또는 (30) 십자가. </li><li> 데이터가 정규 분포를 따르는 것처럼, 가우스 분포의 통계 시험을 사용한다. </li><li> 하나의 효과를 테스트 할 때 (즉, 밀도 - 그림 2), 컨트롤에 각각의 결과를 비교하기 위해 (열을 기준으로 열) 다중 비교에 대한 시험 후, 또는 간단한 t-test로, 일원 분산 분석을 사용합니다. </li><li> 그룹의 실험이 수행 될 때, 조건 및 성별 (빈 유리 병을 모두 테스트 강조D 않은 스트레스 파리; 성별 효과 - 그림 1), 양방향 ANOVA를 사용하여. </li></ol></li></ol> 5. 이전에 강세 파리 점령 튜브를 생성 - 대신 3.5-3.6의 수행 <ol><li> 대조군으로 강조되지 않은 파리에 의해 점유 된 유리 병을 준비하는 phototaxis을 사용합니다. </li><li> 반대 위치에 신선한 빈 유리 병으로, 테스트 유리 병에 파리를 전송하고, 역류 장치에 끼워 넣습니다. </li><li> 직접 15 W 형광 차가운 백색 빛의 앞에 말단 유리 병에 수평으로 장치를 마련하고, 검은 천으로 커버. </li><li> 파리 부드럽게 신선한 유리 병으로 이동하자. 이 작업은 몇 분 정도 걸릴 수 있습니다. 파리의 대부분이 말단 유리 병에 빛을 향해 걷고되면, 1 분 타이머를 시작합니다. </li><li> 부드럽게, 빛의 위치를​​ 온, 검은 천으로 제거 검은 천으로 복구하고, 파리 테스트 유리 병을 떠날 수 있습니다. </li><li> 그 때, 나는3.2-3.5에서와 같이 선택 실험을 nitiate. 3.6 및 3.7를 건너 뜁니다. </li><li> 다른 측면에서 테스트 바이알을 비웠다 파리를 분리하는 장치의 슬라이더를 이동. </li><li> 바로 선택 실험, 3.7에서와 T-미로에서 물러 테스트 유리 병을 사용합니다. </li></ol>

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The authors declare that they have no competing financial interests.

이 프로토콜은 사회적 회피 분석에 대한 자세한 절차를 설명합니다. 광저우-S는 이전에 기계적으로되어 강조했다 날아간 유리 병을 방지하며, 응답자의 성별과 수는 사회적 회피 성능 것이 영향을주지 않습니다. 그러나 응답자의 유전 적 배경이 큰 영향을 미친다. 성공적으로이 실험을 수행하기위한 몇 가지 중요한 단계를 다음과 같습니다 : 1) 항상 실험 전에 파리 2 시간을 ...

이 방법의 목적은 쉽게 구애와 침략에서 독립적 인 초파리에서 간단한 사회적 행동의 새로운 측면을 정량화하는 것입니다. 사회적 상호 작용은 적절한 발전과 개인의 건강 사회에서뿐만 아니라 전체 사회 집단의 기능에 중요하다. 이러한 상호 작용의 높은 복잡도가 큰 샘플 크기 및 사회적 행동의 유전 적 신경 염기 여전히 제대로 이해되는 바와 같이 동작의 단순화를 허용하는 시스템을 필요로한다. 초파리는 유전자를 식별하는 데 사용될 수있는 강력한 유전 적 모델이고 사회적 상호 작용의 신경 기지. 사실, D. melanogaster의 복잡한 사회적 행동의 레퍼토리를 가지고 있으며, 사회화의 일부 직접 측정은 이미 1-7을 수행하고있다. 그러나, 이러한 노력의 대부분은 상대적으로 복잡한 aggres 사회적 행동에 집중되어왔다시브 상호 작용 3,6, 구애 3,8-12의 다양한 측면, 어떻게 사회적 경험은 학습, 또는 일주기 리듬 13-17 다른 행동에 영향을 미친다. 또한, 이들 분석법은 많은, 파리의 기의 복잡한 상호 작용 패턴을 분석하고 결과 데이터를 분석하는 풍부한 비디오 추적 및 컴퓨터 소프트웨어를 사용에 의존한다. 이러한 분석은 매우 중요하며, 이러한 그룹 7 플라이 플라이 상호 작용의 동적 중요한 새로운 통찰로 이어집니다. 한 가지 제한은, 그러나, 크게는 지역 사회에 이러한 분석의 어려움, 그리고 다른 사람의 인식의 기초가되는 메커니즘의 제한된 지식입니다. 즉, 다른 한 개인에 의해 인식으로 그 신호의 방출에 기초하여 여전히 저조한 18 이해된다. D. : 반면에, 또한 간단한 동작, 개인이 스트레스를 파리에 의해 방출 신호에서 벗어나 사회적 회피, 전시 파리 MELAN스트레스 후각 또는 DSO (19) ogaster. 높은 처리량 분석에서,이 동작은 다른 파리, 또는 사회적 회피 (19)에 의해 방출 된 신호의 응력을 회피 정량화 할 수있다. 파리 T 미로 장치에 넣고 DSO 함유 바이알을 피하기 위해 선택 주어진다. 이 분석을 이용하여, CO 2 2 19 해부 하였다 CO에 응답하도록 필요한 신경 회로 DSO의 성분, 및 일부가 도시되었다. 여기에 제시된 사회적 회피 분석은 복잡한 행동 (20)를 해부 연구자의 ​​세대를 활성화 모어 Benzer의 연구실에서 개발 된 간단한 행동 분석 개념적으로 유사하다. 사회적 회피 분석 경제적 사회적 행동의 더 광범위한 연구를 허용 T 미로 분석을 이용하여 수행 될 수있다. 예를 들어,이 분석을 사용하여 우리는 최근에 보여 자폐증에 대해 서로 다른 유전 적 위험 사회 B의 대조 효과를 가지고ehavior 분석. 21, 22 neurobeachin - - 자폐증에 대한 후보 유전자에 대한 돌연변이 존재하는 결함은 모두 사회적 공간에서 (다른 곳에서 23 설명), 사회적 회피 (24). 이상 도파민 시그널링은 또한 인간 25,26 자폐증의 병인에서 역할을하는 것으로 제안된다. neurobeachin 얻어진 결과와 대조적으로, 우리는 증가 또는 도파민 세포 초파리 소낭 모노 아민 전송기 (VMAT)의 수준을 감소함으로써 사회적 공간 직접 VMAT (27)의이 수준과 상관되었지만 사회적 회피 성능이 영향을받지 않는 것을 발견했다. neurobeachin 및 VMAT 얻은 대조 결과를 따라서 다양한 비 사교적 행동 양식 및 다른 사람에게 응답을 변조하는 다른 기본 신경 회로들을 식별 가능성을 강조한다.

<table><tbody><tr><td>Stereo Zoom Microscope&amp;nbsp;</td><td>Nikon&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>SMZ-645</td><td>Any other standard scope for fly handling would work</td></tr><tr><td>Small paint brushes&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td>for pushing flies</td></tr><tr><td>Porous Polyethylene, 12&quot; x 12&quot; Sheet</td><td>Flystuff - Genesee</td><td>46-100</td><td>http://www.flystuff.com/ProductInfo.php?productID=46-100&lt;br/&gt; Porous Plastic sheet for the cold anesthesia box</td></tr><tr><td>Mini-Alarm Timer/Stopwatch</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sharpie pens</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adhesive Tape</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mini vortex</td><td>Fisher</td><td>14-955-151&amp;nbsp;</td><td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail&lt;br/&gt; For mechanical agitation of the flies - any vortex would work.</td></tr><tr><td>Corning Life Sciences DL No.:352017, Falcon test tube; round bottom; disposable; no closure, 14 ml; 17 x 100 mm</td><td>Fisher</td><td>14-959-8 &amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?storeId=10652&amp;amp;langId=-1&amp;amp;catalogId=29104&amp;amp;productId=2771811&amp;amp;distype=0&amp;amp;highlightProductsItemsFlag=Y&amp;amp;fromSearch=1&amp;amp;searchType=PROD&amp;amp;hasPromo=0&lt;br/&gt; These snap in place in the in-house made T-maze and counter-current apparatus (see text)</td></tr><tr><td>cotton balls</td><td></td><td></td><td>to close the vials after the experiment.</td></tr><tr><td>trifold board and white bench cover</td><td></td><td></td><td>to provide a white background, and a homogeneous light.</td></tr><tr><td>white bench cover</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pounding pad</td><td></td><td></td><td>any mouse pad works.</td></tr><tr><td>large black cloth</td><td></td><td></td><td>to cover the counter-current apparatus in phototaxis response.</td></tr><tr><td>cool-white light&amp;nbsp;</td><td>Home Depot</td><td>1000516563</td><td>http://www.homedepot.ca/product/illume-26-fluorescent-plug-in-linear/911423&lt;br/&gt; any similar linear light with fluorescent light bulb cool-white at 13-15 W would work</td></tr></tbody></table>

straightforward assay for quantification of social avoidance in drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

사회적 회피 분석은 다른 플라이에서 방출 응력 신호를 인식 초파리 melanogaster의 능력 (DSO)을 정량화하고, 따라서 사회적 상호 작용의 일 양상을 평가 강력한 시험이다. 분석은 일반적으로 두 가지 옵션 사이에서 선택과 파리를 제시 T-미로로 알려진 다양한 행동 분석에 사용 된 장치를 사용하여 수행됩니다 - 왼쪽 또는 오른쪽으로 19,28-31. 이 경우, 파리 DSO를 방지하는 계산 효율 및 ?...

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Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

straightforward-assay-for-quantification-social-avoidance-drosophila

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

11.2K 조회수.  Yale University. Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

비디오: Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of these diseases, including Alzheimer's, Parkinson's and Huntington's disease are characterized by age-dependent deterioration in learning and memory functions and movement coordination2. Here we use behavioral assays, including the negative geotaxis assay3 and the aversive phototaxic suppression assay (APS assay)4,5, to show that some of the behavior characteristics associated with human neurodegeneration can be recapitulated in flies. In the negative geotaxis assay, the natural tendency of flies to move against gravity when agitated is utilized to study genes or conditions that may hinder locomotor capacities. In the APS assay, the learning and memory functions are tested in positively-phototactic flies trained to associate light with aversive bitter taste and hence avoid this otherwise natural tendency to move toward light. Testing these trained flies 6 hours post-training is used to assess memory functions. Using these assays, the contribution of any genetic or environmental factors toward developing neurodegeneration can be easily studied in flies.

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Behavior assays for measuring locomotor functions, learning, and memory abilities in Drosophila.

에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila</emNeurodegeneration의> 모델

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of ...

연구

신경과학

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular disease and various neurological diseases1. We have optimized simple and robust behavioral assays for determining larval locomotion, adult climbing ability (RING assay), and courtship behaviors of Drosophila. These behavioral assays are widely applicable for studying the role of genetic and environmental factors on fly behavior. Larval crawling ability can be reliably used for determining early stage changes in the crawling abilities of Drosophila larvae and also for examining effect of drugs or human disease genes (in transgenic flies) on their locomotion. The larval crawling assay becomes more applicable if expression or abolition of a gene causes lethality in pupal or adult stages, as these flies do not survive to adulthood where they otherwise could be assessed. This basic assay can also be used in conjunction with bright light or stress to examine additional behavioral responses in Drosophila larvae. Courtship behavior has been widely used to investigate genetic basis of sexual behavior, and can also be used to examine activity and coordination, as well as learning and memory. Drosophila courtship behavior involves the exchange of various sensory stimuli including visual, auditory, and chemosensory signals between males and females that lead to a complex series of well characterized motor behaviors culminating in successful copulation. Traditional adult climbing assays (negative geotaxis) are tedious, labor intensive, and time consuming, with significant variation between different trials2-4. The rapid iterative negative geotaxis (RING) assay5 has many advantages over more widely employed protocols, providing a reproducible, sensitive, and high throughput approach to quantify adult locomotor and negative geotaxis behaviors. In the RING assay, several genotypes or drug treatments can be tested simultaneously using large number of animals, with the high-throughput approach making it more amenable for screening experiments.

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster is a genetically and behaviorally tractable model system that has been used to understand the molecular and cellular basis of many important biological processes for over a century 1. Drosophila has been well exploited to gain insights into the genetic basis of fly behavior.

분석의 방법 Drosophila 행동

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에<em&gt; 초파리</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to passive avoidance behavior in laboratory rodents in which animals learn to avoid a compartment where they have previously received an electric shock. The assay takes advantage of negative geotaxis in flies, which manifests as an urge to climb up when they are placed on a vertical surface. The setup consists of vertically oriented upper and lower compartments. On the first trial, a fly is placed into a lower compartment from where it usually exits&#160;within 3-15 s, and steps into the upper compartment where it receives an electric shock. During the second trial, 24 h later, the latency is significantly increased. At the same time, the number of shocks is decreased compared to the first trial, indicating that flies formed long-term memory about the upper compartment. The recordings of latencies and number of shocks could be performed with a tally counter and a stopwatch or with an Arduino-based simple device. To illustrate how the assay can be used, the passive avoidance behavior of D. melanogaster and D. simulans male and female were characterized here. Comparison of latencies and number of shocks revealed that both D. melanogaster and D. simulans flies efficiently learned the passive avoidance behavior. No statistical differences were observed between male and female flies. However, males were a little faster while entering the upper compartment on the first trial, while females received a slightly higher number of shocks in every retention trial. The Western diet (WD) significantly impaired learning and memory in male flies while flight exercise counterbalanced this effect. Taken together, the passive avoidance behavior in flies offers a simple and reproducible assay that could be used for studying basic mechanisms of learning and memory.

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

This work describes a simple behavioral paradigm that allows the analysis of aversive associative learning in adult fruit flies. The method is based on suppressing the innate negative geotaxis behavior due to the association formed between a specific environmental context and an electric shock.

초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to ...

행동분석학

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and diverse behavioral features. Identifying behavioral deficiency in animal models is a crucial measure of disease severity, for example, in neurodegenerative diseases where patients often experience impairments in motor function. However, with the availability of various systems to track and assess motor deficits in fly models, such as drug-treated or transgenic individuals, an economical and user-friendly system for precise evaluation from multiple angles is still lacking. A method based on the AnimalTracker application programming interface (API) is developed here, which is compatible with the Fiji image processing program, to systematically evaluate the movement activities of both adult and larval individuals from recorded video, thus allowing for the analysis of their tracking behavior. This method requires only a high-definition camera and a computer peripheral hardware integration to record and analyze behavior, making it an affordable and effective approach for screening fly models with transgenic or environmental behavioral deficiencies. Examples of behavioral tests using pharmacologically treated flies are given to show how the techniques can detect behavioral changes in both adult flies and larvae in a highly repeatable manner.

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

The present protocol assesses the locomotor activity of Drosophila by tracking and analyzing the movement of flies in a hand-made arena using open-source software Fiji, compatible with plugins to segment pixels of each frame based on high-definition video recording to calculate parameters of speed, distance, etc.

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and ...

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a straightforward manner. As we previously demonstrated 1, in a two-dimensional chamber, we first force the flies to form a tight group, subsequently allowing them to take their preferred distance from each other. After the flies have settled, we measure the distance to the closest neighbor (or social space), processing a static picture with free online software (ImageJ). The analysis of the distance to the closest neighbor allows researchers to determine the effects of genetic and environmental factors on social interaction, while controlling for potential confounding factors. Diverse factors such as climbing ability, time of day, sex, and number of flies, can modify social spacing of flies. We thus propose a series of experimental controls to mitigate these confounding effects. This assay can be used for at least two purposes. First, researchers can determine how their favorite environmental shift (such as isolation, temperature, stress or toxins) will impact social spacing 1,2. Second, researchers can dissect the genetic and neural underpinnings of this basic form of social behavior 1,3. Specifically, we used it as a diagnostic tool to study the role of orthologous genes thought to be involved in social behavior in other organisms, such as candidate genes for autism in humans 4.

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

사회적 공간에 영향을 미치는 조건<em&gt; 초파리</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다<em&gt; 노랑 초파리</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

초파리 자폐 스펙트럼 장애의 유전 및 행동 특성에 대한 모델

Paradigms for Behavioral Assessment in Drosophila Model of Autism Spectrum Disorder

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in social interaction and ability for communication, enhanced restricted or repetitive behaviors, and also, in some cases, learning disability and motor deficit. Drosophila has served as an unparalleled model organism for modeling a great number of human diseases. As many genes have been implicated in ASD, fruit flies have emerged as a powerful and efficient way to test the genes putatively involved with the disorder. As hundreds of genes, with varied functional roles, are implicated in ASD, a single genetic fly model of ASD is unfeasible; instead, individual genetic mutants, gene knockdowns, or overexpression-based studies of the fly homologs of ASD-associated genes are the common means for gaining insight regarding molecular pathways underlying these gene products. A host of behavioral techniques are available in Drosophila which provide easy readout of deficits in specific behavioral components. Social space assay and aggression and courtship assays in flies have been shown to be useful in assessing defects in social interaction or communication. Grooming behavior in flies is an excellent readout of repetitive behavior. Habituation assay is used in flies to estimate the ability for habituation learning, which is found to be affected in some ASD patients. A combination of these behavioral paradigms can be utilized to make a thorough assessment of the human ASD-like disease state in flies. Using Fmr1 mutant flies, recapitulating Fragile-X syndrome in humans, and POGZ-homolog row knockdown in fly neurons, we have shown quantifiable deficits in social spacing, aggression, courtship behavior, grooming behavior, and habituation. These behavioral paradigms are demonstrated here in their simplest and straightforward forms with an assumption that it would facilitate their widespread use for research on ASD and other neurodevelopmental disorders in fly models.

저자 스포트라이트: 초파리의 자폐 스펙트럼 장애 증상 탐구 - 유전자 모델 및 행동 검사

Autism Spectrum Disorder (ASD) is associated with impaired social and communicative behavior and the emergence of repetitive behavior. For studying the interrelation between ASD genes and behavioral deficits in the Drosophila model, five behavioral paradigms are described in this paper for assaying social spacing, aggression, courtship, grooming, and habituation behavior.

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in ...

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석

요약

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에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila 모델

분석의 방법 Drosophila 행동

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에

초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

사회적 공간에 영향을 미치는 조건

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임