היי, אני ד"ר ג'יהאד, מנהל מעבדת Center P. המטרה היום של סרטון זה היא להראות מעבד תאים מקורר מותאם המשמש במתקן בידוד לולאות ללא השפעה על הסביבה כמו גם על התאוששות התאים. התחל בקירור מראש של שיפועי הצפיפות הקלים והכבדים וערכת מעבד התאים בארבע מעלות צלזיוס.
לאחר מכן, הכינו את מעבד התאים על ידי קירור מראש למשך 45 דקות. הכנס את ערכת מעבד התאים הקירור מראש למעבד התא עבור יצרנית השיפוע הכפולה המקוררת באתנול הסטנדרטית. חבר את שני תאי הזכוכית והנח אותם על ערבוב מגנטי מהדק את הצינור בין שני התאים. קריר.
יצרנית השיפוע עם צ'ילר אתנול במחזור באפס מעלות צלזיוס לאחר הקירור. הגדר את מהירות המשאבה ל-150 מיליליטר לדקה כדי למלא את החדר ב-130 מיליליטר של שיפוע צפיפות כבד בתחתית השקית. ברגע שהשיפוע הכבד נמצא בתיק, סגור את המוסטט בין שני תאים.
לאחר מכן הוסף 130 מיליליטר של צפיפות גבוהה לכוס הקדמית ו -140 מיליליטר של שיפועים בצפיפות נמוכה לכוס האחורית.דצמבר. מהדק את המוסטט בין שני התאים, ואז הגדר מהירות משאבה של 50 מיליליטר לדקה כדי ליצור שיפוע רציף בין שני תאים. לאחר מכן, הכינו תאי מעיל באפי חד-גרעיניים אנושיים לטיהור ממספר פרוות באפי אנונימיות שנאספו ממוצרי פסולת דם מלאים המסופקים על ידי בנק הדם.
לאחר ההפרדה, הוסף חמישה מיליליטר של משקל סגולי הדומה לתרחיף תאים חד-גרעיניים בצפיפות נמוכה לתוך 95 מיליליטר של מדיום שיפוע בצפיפות גבוהה בשקית העברה באמצעות משאבה פריסטלטית המוגדרת על 25 מיליליטר לדקה. טען למעלה את השיפוע המעוצב מראש עם 30 מיליליטר של מתלה תאים חד-גרעיניים באמצעות בדיקה תרמו מכוילת מראש. ברציפות. מדוד את הטמפרטורה בתוך מעבד התא באמצעות צמד תרמי דיגיטלי המחובר לבדיקה תרמית סטרילית.
עקוב אחר הטמפרטורה של שיפועים ותאים במהלך התהליך. בתום טעינת השיפוע, הגדר את מעבד התא על 537 G כדי למזער את החום שנוצר על ידי הרוטור. כבה את מעבד התאים כדי לאפשר למערכת ההידראולית לחזור לרמות שלפני הריצה ולשחרר אוויר.
לאחר מכן הפעל מחדש את מעבד התא ב-537 G והוסף 130 מיליליטר של שיפועים כבדים ו-140 מיליליטר של שיפועים בצפיפות נמוכה כדי ליצור שיפוע צפיפות רציף בקצב זרימה של 50 מיליליטר לדקה ו-4.3 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, טען 30 מיליליטר של מתלה תאי מעיל באפי על גבי שיפוע צפיפות עומס בקצב זרימה של 25 מיליליטר לדקה ושש מעלות צלזיוס. לאחר טעינת התאים, הוסף 50 מיליליטר תמיסת כביסה למעבד התאים לאחר חמש דקות.
אסוף את השיפוע המסתובב ב-12 בקבוקים בקצב זרימה של 100 מיליליטר לדקה וצינור מילוי של חמש מעלות צלזיוס, אחד עם 100 מיליליטר של חומרי כביסה ו-150 מיליליטר תאים. לאחר מכן מלאו צינורות שניים עד 12 עם 225 מיליליטר של חומרי כביסה ו -25 מיליליטר תאים. הערכת החלקיקים הנישאים באוויר בסביבת חדר נקי, דרגה C ודרגה B הראתה כי לא היה עודף של 0.5 וחמישה מיקרון חלקיקים הנישאים באוויר לפי תקני חדר נקי, GMP דרגה C, דרגה B ו-BSL שלושה.
לא נצפה הבדל משמעותי בטמפרטורות השיפוע במהלך ארבעת השלבים הראשונים, כאשר שני המעבדים שמרו על כ-4.5 מעלות צלזיוס. עם זאת, לאחר צנטריפוגה ובמהלך שלבי האיסוף, הטמפרטורה עלתה בתחילת ובסוף שלבי האיסוף עבור שני המעבדים. יתר על כן, מעבדי התאים המקוררים משפיעים על טיהור התאים האנושיים.
היעילות והכדאיות נקבעו לאחר צנטריפוגה. טמפרטורת התאים שנאספו עלתה מעט ל-8.5 מעלות צלזיוס. דגימת אוויר פעילה ובדיקת סטריליות לא הראו צמיחה.
