סרטון זה מדגים הליך יעיל שפותח כדי לבצע מחקרי כבד מטבוליים עם מספיק קפדנות ויכולת שכפול, אשר יכול לשמש כמדריך לביצוע כריתת כבד עבור מחקרי ה-vivo perfusion שלו. הטכניקה מיושמת בצורה הטובה ביותר על חילוף חומרים בזמן אמת כדי לזהות את הפונקציה, במטבוליטים תחלופתיים במודלים של מחלות. פרפוזיה מאפשרת שליטה מדויקת בחומרים מזינים ובהורמונים הזמינים לכבד.
למרות שהטכניקה אינה מכוונת לטיפול, זלזול בכבד יכול לסייע בהבנת האטיולוגיה וההשפעה של מחלות, כגון סוכרת, NAFLD ו- NASH על חילוף החומרים בכבד. עם פיתוח תרופות חדשות, שיטות להערכת חילוף החומרים של האנרגיה המרכזית בכבד הופכות חיוניות. שיטה זו יכולה לשמש עם מודלים של מספר מחלות, כולל סרטן ובמספר שלבים שונים של התקדמות המחלה.
ראשית, מניחים את אפו של העכבר לתוך חרוט אף לאחר אינדוקציה של הרדמה, ומקישים על כפותיו. מתן לידוקאין באמצעות הזרקה תת עורית דו-צדדית באזור הפסגה האיליאק הקדמית. בצע בדיקת צביטה בבוהן כדי לאשר את היעדרם של כל רפלקסי הכאב.
בצע celiotomy כדי לחשוף את האיברים הפנימיים על ידי ביצוע חתך ברוחב שלושה סנטימטרים. הרחב את החתך באמצעות המוסטאט המושך את האחיזה על ידי הידוק התהליך הקסיפאואידי. השתמשו באפליקטור עם קצה כותנה כדי לנקות את המעי הדק והמעיים הגסים המכסים את וריד הפורטל.
מקם תפר משי מתחת לקשת של וריד הפורטל פרוקסימלי לכבד. מניחים את תפר המשי השני פרוקסימלי או דיסטלי של הדיסטלי של הווריד המזנטרי הנחות מהכבד באמצעות תפר 2-0. לאחר שהתפרים נמצאים במקומם, ניתן לתמרן את וריד הפורטל באמצעות צנתר של 22 מדים, תוך שמירה על ההצבעה על השיפוי כלפי מעלה.
הזן את וריד הפורטל בזווית של לא יותר מ-15 מעלות. קשרו את התפר הראשון על פני טאפר הצנתר. לאחר שווריד הפורטל משומר, מעגנים את הצנתר שניים עד שלושה מילימטרים דיסטליים מענף וריד הפורטל עם תפר המשי.
מאבטחים את החלק התחתון של הצנתר עם התפר השני. קשרו קשר עם התפר כדי להדק את הצנתר לחלק הדיסטלי של וריד הפורטל והרקמה הסובבת אותו. לאחר אבטחת הצנתר, יש להחדיר מזרק מיליליטר אחד עם מחט בעלת 27 מדים באורך 38.1 מילימטרים לתוך הצנתר כדי לשטוף בועות דם ואוויר.
השתמש בקוטר פנימי של 1 מילימטר אחד ובצינור סיליקון בקוטר חיצוני של חמישה מילימטרים עם זין עצירה קבוע כדי להצמיד את עמוד הזלוף לצנתר, מה שמאפשר את זרימת החיץ לתוך הכבד, ומסמן את תחילת הזלוף. לאחר הפעלת טיימר, להקל על לחץ כלי הדם המוגבר על ידי חתך באמצעות מספריים לתוך הווריד הנבוב התחתון cava. אשרו את זרימת ההדבקה דרך הכבד על ידי התבוננות בשינוי הומוגני בצבע הכבד מוורוד או אדום לצהוב חיוור.
לאחר אישור הזרימה, יש לבלות את הקיבה, המעי הדק, המעי הגס והכליה הימנית מהרקמה הסובבת. בעזרת העוזר הכירורגי, תמרן את הכבד סביב חלל הבטן ובית החזה כאשר המנתח חותך דרך הצפק הקודקודי ורקמת בית החזה כדי לנתח את הכבד. הרימו את הכבד כלפי מעלה וחתכו את רקמות החיבור הנותרות המחזיקות את הכבד במקומו עם מספריים.
לאט לאט לתמרן את הכבד כדי להקל על הראייה. מדידות קצב הזרימה וצריכת החמצן חיוניות לניטור בריאותו ותפקודו של הכבד. לעתים קרובות יש הבדל קל בצריכת החמצן בין כבדים ניזונים לצום, אשר ניתן לייחס לדרישות אנרגיה מוגברות המוטלות על ידי גלוקוגנזה בכבד הצום.
השלבים החשובים ביותר כוללים החדרת הצנתר בזווית של 15 מעלות, הדמיית קצה הצנתר, גלגול שורש כף היד והכתפיים בעת קשירת התפר, והימנעות מפיתול בווריד הפורטל. ניתן לחקור את הרקמה שנכרתה לאחר הזלוף עם כל מספר של גישות ביוכימיות או אנליטיות. פרפוזיות Ex vivo בשילוב עם MRI בזמן אמת וספקטרוסקופיה מאפשרות מדידה של שטפים מטבוליים בזמן אמת.
באופן טבעי, זה משתרע על הפרעה של שטף ממצב בקרה בתגובה למחלות.
