אנו מודים Hisayoshi Nozaki (אוניברסיטת טוקיו), טאקאשי Nakada (אוניברסיטת קיו), יוקה Marukawa השימוטו (אוניברסיטת של יפן נשים) ו הירויוקי Sekimoto (אונ' יפן לנשים). אנחנו רוצים להודות הבודקים להערות שלהם. מחקר זה נתמך על ידי מענק של הסיוע למחקר מדעי (מס 26440223 ו- 15H 04413) מן האגודה יפן עבור קידום של המדע, יפן, על ידי מענק מטעם קרן פיתוח טכנולוגיה חדשה יוקי Tsuchikane.

1. אוסף של דגימת מים המכילים אצות
הערה: conjugatophytes חד־תאיות לגדול באזורים קיפאון מים מתוקים, כמו אגמים, ביצות ושדות אורז. דוגמה מים המכילים אצות נאסף מאחד סביבות אלה לייצר זן תרבות. הפריטים הבאים נדרשים לפני תחילת התהליך: פלנקטון נטו, על פיפטה חד פעמיות, ואת בקבוק או שפופרת 50 מ"ל. לאיסוף דגימות מים.
<ol><li>משתמשים פלנקטון נטו בסביבת אגם לאיסוף אצות מן המים. השתמש של הרשת המתאים, בהתאם למטרה. הערה: החלק העליון של הרשת הוא חדיר למים. האצות נתפס על ידי הרשת מרוכזים לתוך המיכל התחתון פלנקטון נטו. רשת גס מאפשר אצות קטן לעבור. רשת קנס מקבל סתומות בקלות.</li>
	<li>להעביר את המים (כ- 50 מ"ל) ברכבת התחתית 50 מ ל או בקבוק פלסטיק 100 מ. להביא דגימת מים מרוכז המעבדה.</li>
	<li>Conjugatophytes חד־תאיות לגדול גם ביצות או שדות האורז. באזורים אלה מים רדודים, דגימת מים המכילים אצות ניתן לטעום ישירות עם טפי. לאחר מכן, להעביר את המים (30-50 מ"ל) ברכבת התחתית 50 מ ל או בקבוק פלסטיק 50 מל. הערה: המים בזהירות שנדגמו מעל פני האדמה, כך המדגם אינו מכיל שום קרקע.</li>
</ol>2. אישור של אצות
הערה: הפריטים הבאים נדרשים: עם זכוכית מגדלת או מיקרוסקופ נייד ו- 60 מ"מ דיש להשגחה.
<ol><li>כדי לאשר את הנוכחות של אצות במדגם בעוד הוא נמצא פיפטה חד פעמיות, להשתמש זכוכית מגדלת כדי לבחון את הדגימה ישירות. הערה: תאים גדול יותר של 400-1, 000 מיקרומטר באורכו (למשל, Closterium ehrenbergii) יכולה בקלות להיות שנצפו בשיטה זו.</li>
	<li>כדי לאשר אצות תחת המיקרוסקופ נייד, יוצקים דגימת מים בצלחת פלסטיק מעבדה.<ol>
<li>שים המדגם (בערך 3 מ ל) על החלק הפנימי של החצי העליון (מכסה) 60 מ מ פטרי, אז במקום החצי התחתון, עם חלקו התחתון מול החלק הפנימי של המכסה, על העליונה. הערה: בשיטה זו מונע את הדגימה נע ומקל על התצפית.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. הכנה של פיפטה נימי זכוכית מ פיפטה פסטר הבידוד
הערה: לפני תחילת התהליך, הפריטים הבאים נדרשים: עיקור פיפטות פסטר, ארון תקשורת עבור מנורה רוח, מתנול עבור המנורה רוח, מצית, מלקחיים, פח אשפה לזכוכית, דרך הנורה גומי, כפפות, פיפטות פסטר את, חדר נקי או למינריות הוד זרימה (במקרה הצורך).
<ol><li>להצית צורב אלכוהול.<ol>
<li>כדי לייצר פיפטה נימי זכוכית עבור הבידוד, ודא שהלהבה לא מהבהבת. לחדד את הלהבה, להמיס את פיפטה פסטר בקצהו.</li>
	</ol>
</li>
	<li>חום זכוכית סטריליים פסטר פיפטה על הלהבה, תמיכה בצד של הנורה גומי בעבודת יד, בצד קצה באמצעות מלקחיים.</li>
	<li>. קח את פיפטה פסטר את הלהבה ולמתוח אותו.<ol>
<li>כאשר הזכוכית נמס, להסיר במהירות את פיפטה פסטר מתחנת הלהבה ולאחר מכן משוך. הערה: בניסוי זה, פיפטה פסטר הוארך על ידי 15-20 ס מ. ודא בטוח זה את הלהבה פיפטה במהלך הוצאת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לשבור את קצה פיפטה נימי זכוכית באורך המתאים. כיוון שחלק התקשתות הטובים ביותר, זה אידיאלי על הטיפ. הערה: מחקר זה פיפטה נימי זכוכית עם טיפ של 5-10 ס מ הוכן.<ol>
<li>הקפד לבטל את נימי לאחר נמס זה, וודא כי הלהבה יצא החוצה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הבועות שוחררו על פיפטה נימי זכוכית מציינים את הגודל של קצה פתיחת. בחר את גודל תקין של התא תהיה מבודדת. כ- 1 מ מ של בועות הוא הולם ניתוקה של מינים Closterium , עם תא רוחב של 10-20 מיקרומטר.</li>
</ol>4. החד-תאיים בידוד באמצעות פיפטה נימי זכוכית
הערה: הפריטים הבאים נדרשים לפני שמתחילים: מיקרוסקופ אור הפוך, שעונים משקפיים, צלחת פלסטיק ו סטרילי משורשרות מבחנות המכילות בינוני CA (טבלה 1) או ממוזגים CA בינוני7.
<ol><li>להכין לצפות כמה כוסות (22 מ מ בקוטר של 1 מ מ עומק), המכיל כל 1 מ"ל של אמצעי CA סטרילי.</li>
	<li>לבודד את תא היעד דגימת מים שנאספו בשטח.<ol>
<li>יוצקים את דגימת מים (בערך 30-40 מ"ל) המכיל תאי היעד לתוך קערה מפלסטיק.</li>
		<li>תוך כדי התבוננות המדגם בצלחת פלסטיק תחת מיקרוסקופ אור הפוך, לאסוף תאים בודדים באמצעות פיפטה נימי את הזכוכית.</li>
		<li>להביא את פיפטה נימי זכוכית ליד התא כדי להקל על השאיפה של התא על ידי נימיות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>העבר את התאים לתוך כוס שעון המכיל 1 מ"ל של CA בבסיס, אמצעי סטרילי (איור 1 א').</li>
	<li>לאסוף את התאים שוב באמצעות חדש זכוכית נימי פיפטה של המדיום CA סטרילי, להעביר אותו זכוכית השעון השני המכיל אמצעי CA סטרילי (איור 1b). הערה: תהליך זה חוזר על עצמו עד לתא בודד מבודד בצלחת ספוט (איור 1 c).</li>
	<li>לאסוף את התא הבודד באמצעות פיפטה נימי זכוכית חדשה ולאחר לבסוף להעביר אותו למבחנה המכילה 14 מ של CA בינוני או CA ממוזגים בינוני (איור 1-d). דגירה המדגם ב 23 ° C תחת אור: 8 16-ה-h כהה מחזור בשבועיים הקרובים. הערה: factor(s) לא ידוע על התפשטות תאים, אשר מופרשים מן גדל התאים לתוך הסביבה, כלולים המדיום ממוזגים כדי להקל על חלוקת התא4. אם נוצרת תרבות המשובטים, להכין האמצעי CA ממוזגים תרבות בינוני4. התרבות יהפוך לירוק אם מוצלחת.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wickett, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phylotranscriptomic+analysis+of+the+origin+and+early+diversification+of+land+plants.">Phylotranscriptomic analysis of the origin and early diversification of land plants.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 111, E4859-E4868 (2014).</li><li>Delwiche, C. F., Cooper, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolutionary+origin+of+a+terrestrial+flora.">The evolutionary origin of a terrestrial flora.</a> Current Biology. 25, R899-R910 (2015).</li><li>Daste, P., Neuville, D., Victor-Baptiste, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+procedure+for+obtaining+clonal+isolation+of+diatoms.">A simple procedure for obtaining clonal isolation of diatoms.</a> British Journal of Psychology. 18, 1-3 (1983).</li><li>Pringsheim, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pure Cultures of Algae: Their Preparation and Maintenance. , 119 (1946).</li><li>Sieracki, M., Poulton, N., Crosbie, N., Andersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+isolation+techniques+for+microalgae.">Automated isolation techniques for microalgae.</a> Algal Culturing Techniques: Automated isolation techniques for microalgae. , 101-116 (2005).</li><li>Andersen, R. A., Kawachi, M., Andersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+microalgae+isolation+techniques.">Traditional microalgae isolation techniques.</a> Algal Culturing Techniques: Traditional micro algae isolation techniques. , 83-100 (2005).</li><li>Abe, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stable+nuclear+transformation+of+the+Closterium+peracerosum-strigosum-littorale+complex.">Stable nuclear transformation of the Closterium peracerosum-strigosum-littorale complex.</a> Plant and Cell physiology. 52, 1676-1685 (2011).</li><li>Tsuchikane, Y., Tsuchiya, M., Kokubun, Y., Abe, J., Sekimoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjugation+processes+of+Penium+margaritaceum+(Zygnemophyceae,+Charophyta).">Conjugation processes of Penium margaritaceum (Zygnemophyceae, Charophyta).</a> Phycological Research. 59, 74-82 (2011).</li><li>Kanda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR/Cas9-based+knockouts+reveal+that+CpRLP1+is+a+negative+regulator+of+the+sex+pheromone+PR-IP+in+the+Closterium+peracerosum-strigosum-littorale+complex.">CRISPR/Cas9-based knockouts reveal that CpRLP1 is a negative regulator of the sex pheromone PR-IP in the Closterium peracerosum-strigosum-littorale complex.</a> Scientific Reports. 7, 17873 (2017).</li><li>Ichimura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mating+types+and+reproductive+isolation+in+Closterium-ehrenbergii+Meneghini.">Mating types and reproductive isolation in Closterium-ehrenbergii Meneghini.</a> Botanical Magazine-Tokyo. 94, 325-334 (1981).</li><li>Sekimoto, H., Satoh, S., Fujii, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+and+physiological+properties+of+a+protein+inducing+protoplast+release+during+conjugation+in+the+Closterium+peracerosum-strigosum-littorale+complex.">Biochemical and physiological properties of a protein inducing protoplast release during conjugation in the Closterium peracerosum-strigosum-littorale complex.</a> Planta. 182, 348-354 (1990).</li><li>Ichimura, T., Watanabe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Closterium+calosporum+complex+from+the+Ryukyu+Islands-Variation+and+taxonomical+problems.">The Closterium calosporum complex from the Ryukyu Islands-Variation and taxonomical problems.</a> Memoirs of the National Science Museum. 7, (1974).</li><li>Provasoli, L., Pintner, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+media+for+fresh-water+algae:+problems+and+suggestions+.">Artificial media for fresh-water algae: problems and suggestions .</a> The Ecology of Algae, a symposium held at the Pymatuning Laboratory of Field Biology on June 18 and 19, 1959. , 84-96 (1960).</li><li>Provasoli, L., Tryon, C. A., Hartmann, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Media++&amp;+prospects+for+the+cultivation+of+marine+algae.">Media &amp; prospects for the cultivation of marine algae.</a> Proceedings of U. S.-Japan Conference in Hakone, Japan. , 63-75 (1968).</li><li>Guillard, R. R. L., Andersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+methods+for+microalgae.">Purification methods for microalgae.</a> Algal Culturing Techniques: Purification methods for microalgae. , 117-132 (2005).</li></ol>

שימוש בשיטת ההווה, תרבות המשובטים 9 זנים של Closterium sp. הוקמו מתאי 15 מבודד דגימת מים (Inba1), המייצג את שיעור 60% הצלחה. לזן שיבוצע בעתיד על ידי התבוננות מורפולוגי, כמו גם ניתוח הדנ א, כגון ניתוח פילוגנטי מולקולרי8.
בשיטה הנוכחית, הרעננות של דגימת מים חשוב שיעור ההצלחה. עדיף לבודד את התאים מדגימות המים בהקדם האפשרי לאחר האוסף שדה. למרות תאים Closterium המינים (למשל, ehrenbergii ג, ג peracerosum-strigosum-littorale מורכבים) יכול להישמר במדגם מים במשך כ 7 d על-ידי אחסונם ב 4-8 ° C, הבידוד של התאים רצוי ביום של האוסף או למחרת. זה חשוב גם להסיר את כל מזהמים חוץ תאי היעד, אז להגדיל את מספר החזרות כביסה (קרי, > 3 x) עשוי למנוע זיהום של התרבויות על-ידי מיקרואורגניזמים קרקע, תאים.
מגבלה של טכניקה זו היא התקשורת תרבות בשימוש פרוטוקול זה (CA או ממוזגים בינוני CA) אינם תמיד מתאים כל האצות conjugating. במקרים מסוימים, ייתכן צורך לשקול שימוש באמצעי אחר, כמו גם בתנאי טמפרטורה ואור שונה. בנוסף, גם ככה קשה להוכיח אם תרבות גדל מ תא בודד, יש צורך במדויק לאסוף רק 1 התא בעת העברת תאים מבחנה. לכן, העברת צריך להיעשות עם פיפטה נימי זכוכית חדשה בכל פעם.
הקמת תרבות המשובטים עם זה פיפטה שטיפה שיטה היא שיטה קלאסית/תקן והיא השיטה האמינה ביותר לשימוש כדי לבודד את התאים הרצויים עבור מחקר. תרבויות המשובטים conjugating אצות בשימוש הרבה מחקרים8,9,10,11 הוקמו בשיטת ההווה. קשה לנתח conjugating אצות ללא תרבות המשובטים. יתר על כן, בשנים האחרונות, דה נובו רצפי הגנום כולו הפך קל להשיג (למשל, באמצעות הרצפים (sequencer) nanopore מיניון), הקמת המשובטים תרבויות נוספות יקל על רצף דה נובו . במילים אחרות, שיטה זו היא הצעד הראשון ללמוד בעתיד של אצות אלה כדי להבין טוב יותר את המגוון הביולוגי שלהם.
על מנת ליצור זן תרבות יציב, זה צורך לבצע שלבים קריטיים מסוימים במדויק בתוך הפרוטוקול. הצעד החשוב ביותר הוא הכנת פיפטה נימי זכוכית עם צמצם אופטימלי כדי לאפשר המעבר של תא בודד בלבד. הצמצם של פיפטה נימי הזכוכית בטח מעט יותר מאשר אורך ציר מינור של התא עניין. פיפטה נימי האופטימלית זכוכית ניתן תשאף תא בודד על-ידי נימיות. עם זאת, אם הקוטר של הצמצם הוא גדול מדי, נימי ימשוך גם חומרים שאינם חיים מזהם או אפילו (an) אחרים organism(s), בנוסף לתא המטרה.
כדי להשיג על פיפטה נימי זכוכית עם צמצם אופטימלי, הנקודות הבאות הן חשוב לציין. ראשית, התווך של להבה להיות צרים בעת חימום על פיפטה נימי זכוכית. בשלב הבא, בעת משיכת פיפטה של פסטר, יש להסיר הלהבה; אחרת, הצמצם של פיפטה פסטר תתמוטט
הציוד ואת מכולות שמוצג פרוטוקול זה פשוטים, שניתן לשנותם. לדוגמה, באמצעות לוחות רב טוב במקום שעונים משקפיים עם באר אחת, הכביסה תא שניתן יהיה יעיל יותר. בנוסף, המכולות הרבה מכדי האחרים דומים. על ידי העברת תא בודד למדיום תרבות-השלב האחרון, ניתן ליצור תרבות המשובטים.
הכנת במיכל מעוקר ועבודה בשכונה תקים זנים (מזוהמת) axenic. כדי למנוע זיהום, יש צורך חזור על השלב כביסה עם aliquots טריים יותר מ- 3 x. לפעמים, חיידקים גם סטריליים על-ידי הוספת אנטיביוטיקה15.
שיטה זו מתמקדת desmid בידוד (Zygnematales), אבל על ידי שינוי גודל הצמצם פיפטה נימי זכוכית, ניתן להחיל אותה את בידודה של פלנקטון בגודל שונה.

Conjugating אצות (על אף המסדר Zygnematales), הידוע גם בשם conjugatophytes, לכבוש את עמדת פילוגנטי מפתח כמו קרובי משפחה הקרובים ביותר חיים של אבות מיידית של קרקע צמחים1,2. תרביות המשובטים של אצות הובילו על מגוון רחב של מחקרים בטקסונומיה, הפיזיולוגית גנטית במהלך השנים האחרונות. הטכניקות בידוד מיקרואורגניזמים מתוך שדה טבעי יש מסורת ארוכה3,4. בשנים האחרונות, בידוד אוטומטי באמצעות cytometry זרימה טכניקות היו גם הקים5. השיטה הנפוצה ביותר והשיג תא בודד להקמתה של תרבות המשובטים הוא בידוד תא בודד באמצעות פיפטה נימי זכוכית6. שיטה מסורתית זו דורשת מיומנות, פרוטוקול נסיוני מדויק.
במאמר זה נדגים הדוגמאות של אצות מן השדה ודוגמאות הקמתה של תרבויות המשובטים של אצות חד־תאיות שהיו conjugating, כמו מינים Closterium , באמצעות פיפטה נימי של זכוכית. דגימת מים המכיל תאים וגטטיבי נאסף מתוך אתר שדה (למשל, אגם, בריכה או שדה אורז). התאים מבודד דגימת מים באמצעות פיפטה נימי זכוכית, ואז לשטוף. התאים מתורבתים במבחנה המכילה חנקן-בתוספת בינוני (CA בינוני) ב 24 ° C תחת אור: 8 16-ה-h משטר אפל. שיטה זו מתאימה גם בידוד אחרים microalgae ליצור תרבויות המשובטים.

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;Sampling&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plankton net</td><td>RIGO, Japan</td><td>N-NO380T</td><td>Mesh size: 32 &amp;micro;m</td></tr><tr><td>Portable microscope (e.g., Nature Scope FABRE)</td><td>Nikon, Japan</td><td>JAN: 4960759 206725</td><td>Magnification: 20&amp;times;</td></tr><tr><td>Loupe (e.g., Peak 1985 Steinheil System Magnifier)</td><td>Tohkai Sangyo Co. Ltd., Japan</td><td>1985-20</td><td>Magnification: 20&amp;times;</td></tr><tr><td>Spuit</td><td>EIKEN CHEMICAL CO. LTD. Japan</td><td>Sterile spuit No.4</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Tube (50 mL centrifuge tubes with screw caps)</td><td>Labcon, USA</td><td>3181-345-008</td><td></td></tr><tr><td>Bottle (100 mL Polycarbonate bottle)</td><td>AS ONE Corporation, Japan</td><td>1-7403-01</td><td></td></tr><tr><td>60 mm dish</td><td>Asahi glass Co. Ltd., Japan</td><td>1010-060</td><td>&amp;nbsp;For observation of algae.&amp;nbsp; 60 mm/non-treated dish</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Preparation of a micropipette&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pasteur pipettes (cotton plugged 9&amp;rdquo; Pasteur Pipettes)</td><td>Fisher Scientific, USA</td><td>13-678-8B</td><td>7 &amp;times; 225 mm</td></tr><tr><td>Rubber bulb (SPOID SILICONE, 1 cc)</td><td>AS ONE Corporation, Japan</td><td>5-5669-01</td><td>10 &amp;times; 40 mm</td></tr><tr><td>Stainless forceps</td><td>AS ONE Corporation, Japan</td><td>PT-09</td><td>110 mm</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Single-cell isolation&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Watch glass (Blood reaction board)</td><td>Sekiya Rika Co., Ltd, Japan</td><td>F14-155-030</td><td>to rinse cells during isolation. 22 mm diameter and 1 mm depth</td></tr><tr><td>Threaded test tubes&amp;nbsp;</td><td>Fujimotorika, Co., Ltd, Japan</td><td>XX142</td><td>18 &amp;Oslash; &amp;times; 170 mm</td></tr><tr><td>Inverted light microscope</td><td>Olympus, Tokyo, Japan</td><td>CKX41N</td><td>for isolation of algae.</td></tr><tr><td>Plastic dish</td><td>Asahi glass Co. Ltd., Japan</td><td>SH90-15E&amp;nbsp;</td><td>&amp;nbsp;90 &amp;times; 15 mm</td></tr></tbody></table>

establishment of a clonal culture of unicellular conjugating algae

זה חיוני להקים תרבויות המשובטים microalgae לשימוש במחקרים של נושאים שונים, כגון פיזיולוגיה, גנטיקה, טקסונומיה, מיקרוביולוגיה. לכן, חשוב מאוד לפתח טכניקות כדי ליצור תרבויות המשובטים. במאמר זה נדגים הקמת המשובטים התרבויות אצה conjugating. דגימות מים נאספים מן השדה. לאחר מכן, תאים מבודדים באמצעות פיפטה נימי זכוכית, מניחים בכלי התקשורת, גדלו בתנאים מתאימים ליצירת תרבות המשובטים.

דגימת מים (Inba1) של 50 מ ל נאסף מנקודת הדגימה אחד ב אגם ענבה-numa (pH 8.1, 24.7 ° C; 35 ° 44′30. 2″N 140 ° 12′08. 2″E)-סאקורה-שי, צ'יבה, יפן, על יוני 25, 2016. דגימת מים היה מאוחסן ב 4-8 ° c למחרת אחרי האוסף, דוגמא של Closterium sp. הופרדה מרשת דגימת מים המכיל תאים וגטטיבי. חמש עשרה תאים וגטטיבי של מורפולוגיה זהה (Inba1-1,-2-3-4,-5,-6,-7, -8,-9,-10,-11,-12,-13,-14, ו-15) הם בודדו אותנו מהמתרחש המדגם, ואז לשטוף בעזרת פיפטה של שטיפת בשיטה. חמש עשרה תאים בודדים מבודדת היו תרבותי במבחנות עצמאי המכיל 15 מ"ל של מדיום CA ממוזגים. לאחר 2 שבועות של דגירה, התפשטות תאים נצפתה במבחנות 9 [Inba1-1,-3,-4,-5 (איור 2 א),-6,-9,-10,-12 (איור 2b) ו-13; בטבלה 2]. תשע התרבויות המשובטים הוקמו מ מבודד מדגם Inba1 (איור 3).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57761/57761fig1.jpg"> איור 1 : הזרם של תא בודד בידוד. () העברת התא אצה יעד בודד מדגם המים המקורי סטרילי בינוני בכוס השעון הראשון. (b, c) להעביר את התא שוב אל הזכוכית השעון הבא כדי לשטוף. הליך זה יש לחזור עד ישנם אחרים תאים/חומציות מאשר המטרה בטווח הבינוני; שלושה כוסות שעונים מוצגים בתרשים כאן כדוגמה. (ד) בסופו של דבר, להעביר את התא שטף מבחנה של המדיום המתאים לצמיחה. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/57761/57761fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57761/57761fig2v2.jpg"> איור 2 : צילומים של תאים וגטטיבי של Closterium sp. () Inba1-5 ו- (b) Inba1-12 מוצגות כאן. סרגל קנה מידה = 50 מיקרומטר. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/57761/57761fig2v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57761/57761fig3.jpg"> איור 3 : הקמתה של תרבות המשובטים מדגם Inba1. צינורות הבדיקה תרבותי 2 שבועות צולמו מלמטה. כוכבית מציינת התפשטות תאים. סרגל קנה מידה = 2 ס מ. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/57761/57761fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>השם של המדיה</td>
			<td>הפניה</td>
			<td colspan="2">הערות</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="13">CA</td>
			<td rowspan="13">Ichimura ו ואטאנבי12
</td>
			<td>Ca (3)2·4H2O</td>
			<td>2 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>יודע3
</td>
			<td>10 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>מלון NH43
</td>
			<td>5 מ"ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>Β – נה2glycerophosphate·5H2O</td>
			<td>3 מ"ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>MgSO4·7H2O</td>
			<td>2 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>ויטמין B12</td>
			<td>0.01 μg</td>
		</tr>
<tr>
<td>ביוטין</td>
			<td>0.01 μg</td>
		</tr>
<tr>
<td>תיאמין HCl</td>
			<td>1 μg</td>
		</tr>
<tr>
<td>PIV מתכות</td>
			<td>0.1 מ"ל</td>
		</tr>
<tr>
<td>Fe (כמו EDTA; טוחנת 1:1)</td>
			<td>0.1 מ"ל</td>
		</tr>
<tr>
<td>HEPES</td>
			<td>40 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">להוסיף מים כדי ליצור 100 מ</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">pH להסתגל עם NaOH 7.2</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="7">P הרביעי מתכות</td>
			<td rowspan="7">Provasoli ו- Pintner13
</td>
			<td>נה2EDTA·2H2O</td>
			<td>100 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>FeCl3·6H2O</td>
			<td>19.6 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>MnCl2· 4H2O</td>
			<td>3.6 מ"ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>ZnCl2*</td>
			<td>1.04 mg</td>
		</tr>
<tr>
<td>CoCl2·6H2O</td>
			<td>0.4 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>נה2MoO4·2H2O</td>
			<td>0.25 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">להוסיף מים כדי ליצור 100 מ</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Fe (כמו EDTA; טוחנת 1:1)</td>
			<td rowspan="3">Provasoli14
</td>
			<td>Fe (NH4)2(כל4)2·6H2O,</td>
			<td>70.2 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td>Na2EDTA·2H2O,</td>
			<td>66 מ ג</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">להוסיף מים כדי ליצור 100 מ</td>
		</tr>
<tr>
<td>בינוני CA ממוזגים</td>
			<td>אייב et al.7
</td>
			<td colspan="2">דגירה תאים במדיום CA טריים במשך 14 עד 20 ימים. לאסוף את המדיום בתרבית על ידי סינון באמצעות נייר סינון איכותי, לעקר את המדיום מסוננת על-ידי autoclaving (121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות).</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="4">* NIES, 1.04 מ"ג ZnCl2 מוחלף על ידי 2.2 מ ג ZnSO4·7H2O.</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: ניסוחים של המדיה השתמשו במחקר זה.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>דגימת מים</td>
			<td>השם של תא</td>
			<td>סטטוס לאחר תרבות</td>
			<td>שם זן</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="15">Inba1</td>
			<td>-1</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>Inba1-1</td>
		</tr>
<tr>
<td>-2</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>-3</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-3</td>
		</tr>
<tr>
<td>-4</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-4</td>
		</tr>
<tr>
<td>-5</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-5</td>
		</tr>
<tr>
<td>-6</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-6</td>
		</tr>
<tr>
<td>-7</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>-8</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>-9</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-9</td>
		</tr>
<tr>
<td>-10</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-10</td>
		</tr>
<tr>
<td>-11</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>-12</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-12</td>
		</tr>
<tr>
<td>-13</td>
			<td>תאים התרבו</td>
			<td>inba1-13</td>
		</tr>
<tr>
<td>-14</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>-15</td>
			<td>לא השתנו</td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 2: בידוד משפט הסיכום.

Watch this Scientific Journal Video about Establishment of a Clonal Culture of Unicellular Conjugating Algae at JoVE.com

Establishment of a Clonal Culture of Unicellular Conjugating Algae

הקמתה של תרבות המשובטים של אצות חד־תאיות שהיו Conjugating

במאמר זה נדגים הקמתה של תרבויות המשובטים המינים חד־תאיות conjugating אצה שנאספו מתוך אתר שדה טבעי.

It is essential to establish clonal cultures of microalgae for use in studies of various topics, such as physiology, genetics, taxonomy, and microbiology. ...

establishment-of-a-clonal-culture-of-unicellular-conjugating-algae

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Biology

13.1K Views.  Japan Women's University. במאמר זה נדגים הקמתה של תרבויות המשובטים המינים חד־תאיות conjugating אצה שנאספו מתוך אתר שדה טבעי.

Video: Establishment of a Clonal Culture of Unicellular Conjugating Algae

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

Barnacles are marine crustaceans with a sessile adult and free-swimming, planktonic larvae. The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is particularly relevant as a model for the studies of osmoregulatory mechanisms because of its extreme tolerance to low salinity. It is also widely used as a model of settling biology, in particular in relation to antifouling research. However, natural seasonal spawning yields an unpredictable supply of cyprid larvae for studies. A protocol for the all-year-round culturing of B. improvisus has been developed and a detailed description of all steps in the production line is outlined (i.e., the establishment of adult cultures on panels, the collection and rearing of barnacle larvae, and the administration of feed for adults and larvae). The description also provides guidance on troubleshooting and discusses critical parameters (e.g., the removal of contamination, the production of high-quality feed, the manpower needed, and the importance of high-quality seawater). Each batch from the culturing system maximally yields roughly 12,000 nauplii and can deliver four batches in a week, so up to almost 50,000 larvae per week can be produced. The method used to culture B. improvisus is, probably, to a large extent also applicable to other marine invertebrates with free-swimminglarvae. Protocols are presented for the dissection of various tissues from adults as well as the production of high-quality RNA for studies on gene expression. It is also described how cultured adults and reared cyprids can be utilized in a wide array of experimental designs for examining gene expression in relation to external factors. The use of cultured barnacles in gene expression is illustrated with studies of possible osmoregulatory roles of Na+/K+ ATPase and aquaporins.

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is a model for studying osmoregulation and antifouling. However, natural seasonal spawning yields an unpredictable supply of cyprid larvae. Here, a protocol for the all-year-round culturing of B. improvisus is described, including the production of larvae. The use of cultured barnacles in gene expression studies is illustrated.

זיפרגליים Balanus improvisus כמודל ימית - Culturing, ביטוי גנים

Barnacles are marine crustaceans with a sessile adult and free-swimming, planktonic larvae. The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is particularly ...

Environment

Cultivation of Green Microalgae in Bubble Column Photobioreactors and an Assay for Neutral Lipids

There is significant interest in the study of microalgae for engineering applications such as the production of biofuels, high value products, and for the treatment of wastes. As most new research efforts begin at laboratory scale, there is a need for cost-effective methods for culturing microalgae in a reproducible manner. Here, we communicate an effective approach to culture microalgae in laboratory-scale photobioreactors, and to measure the growth and neutral lipid content of that algae. Instructions are also included on how to set up the photobioreactor system. Although the example organisms are species of Chlorella and Auxenochlorella, this system can be adapted to cultivate a wide range of microalgae, including co-cultures of algae with non-algae species. Stock cultures are first grown in bottles to produce inoculum for the photobioreactor system. Algae inoculum is concentrated and transferred to photobioreactors for cultivation in batch mode. Samples are collected daily for the optical density readings. At the end of the batch culture, cells are harvested by centrifuge, washed, and freeze dried to obtain a final dry weight concentration. The final dry weight concentration is used to create a correlation between the optical density and the dry weight concentration. A modified Folch method is subsequently used to extract total lipids from the freeze-dried biomass and the extract is assayed for its neutral lipid content using a microplate assay. This assay has been published previously but protocol steps were included here to highlight critical steps in the procedure where errors frequently occur. The bioreactor system described here fills a niche between simple flask cultivation and fully-controlled commercial bioreactors. Even with only 3-4 biological replicates per treatment, our approach to culturing algae leads to tight standard deviations in the growth and lipid assays.

Here, we present a protocol to construct lab-scale bubble column photobioreactors and use them to culture microalgae. It also provides a method for the determination of the culture growth rate and neutral lipid content.

טיפוח של ירוק Microalgae בועה עמודה Photobioreactors ואת וזמינותו עבור ליפידים נייטרלי

There is significant interest in the study of microalgae for engineering applications such as the production of biofuels, high value products, and for the ...

Cultivation of the Marine Pelagic Tunicate Dolioletta gegenbauri (Uljanin 1884) for Experimental Studies

Gelatinous zooplanktons play a crucial role in ocean ecosystems. However, it is generally difficult to investigate their physiology, growth, fecundity, and trophic interactions primarily due to methodological challenges, including the ability to culture them. This is particularly true for the doliolid, Dolioletta gegenbauri. D. gegenbauri commonly occurs in productive subtropical continental shelf systems worldwide, often at bloom concentrations capable of consuming a large fraction of daily primary production. In this study, we describe cultivation approaches for collecting, rearing, and maintaining D. gegenbauri for the purpose of conducting laboratory-based studies. D. gegenbauri and other doliolid species can be captured live using obliquely towed conical 202 &micro;m mesh plankton nets from a drifting ship. Cultures are most reliably established when water temperatures are below 21 &deg;C and are started from immature gonozooids, maturing phorozooids, and large nurses. Cultures can be maintained in rounded culture vessels on a slowly rotating plankton wheel and sustained on a diet of cultured algae in natural seawater for many generations. In addition to the ability to establish laboratory cultures of D. gegenbauri, we demonstrate that the collection condition, algae concentration, temperature, and exposure to naturally conditioned seawater are all critical to the culture establishment, growth, survival, and reproduction of D. gegenbauri.

Cultivation of the Marine Pelagic Tunicate Dolioletta gegenbauri Uljanin 1884 for Experimental Studies

Doliolids, including the species Dolioletta gegenbauri, are small gelatinous marine zooplankton of ecological significance found on productive subcontinental shelf systems worldwide. The difficulty of culturing these delicate organisms limits their investigation. In this study, we describe cultivation approaches for collecting, rearing, and maintaining the doliolid Dolioletta gegenbauri.

הטיפוח-תרגול של החיל הימי ( uljanin 1884) למחקרים ניסיוניים

Gelatinous zooplanktons play a crucial role in ocean ecosystems. However, it is generally difficult to investigate their physiology, growth, fecundity, ...

Streamlined Sampling and Cultivation of the Pelagic Cosmopolitan Larvacean, Oikopleura dioica

Oikopleura dioica is a planktonic chordate with exceptional filter-feeding ability, rapid generation time, conserved early development, and a compact genome. For these reasons, it is considered a useful model organism for marine ecological studies, evolutionary developmental biology, and genomics. As research often requires a steady supply of animal resources, it is useful to establish a reliable, low-maintenance culture system. Here we describe a step-by-step method for establishing an O. dioica culture. We describe how to select potential sampling sites, collection methods, target animal identification, and the set-up of the culturing system. We provide troubleshooting advice based on our own experiences. We also highlight critical factors that help sustain a robust culture system. Although the culture protocol provided here is optimized for O. dioica, we hope our sampling technique and culture setup will inspire new ideas for maintaining other fragile pelagic invertebrates.

Streamlined Sampling and Cultivation of the Pelagic Cosmopolitan Larvacean, Oikopleura dioica

Oikopleura dioica is a tunicate model organism in various fields of biology. We describe sampling methods, species identification, culturing setup, and culturing protocols for the animals and algal feed. We highlight key factors that helped strengthen the culture system and discuss the possible problems and resolutions.

דיגום וטיפוח בצורה מפושטת של לאראקא הקוסמופוליטן, אויקולאורה דיואיקה

Oikopleura dioica is a planktonic chordate with exceptional filter-feeding ability, rapid generation time, conserved early development, and a compact ...

Coupling Carbon Capture from a Power Plant with Semi-automated Open Raceway Ponds for Microalgae Cultivation

In the United States, 35% of the total carbon dioxide (CO2) emissions come from the electrical power industry, of which 30% represent natural gas electricity generation. Microalgae can biofix CO2 10 to 15 times faster than plants and convert algal biomass to products of interest, such as biofuels. Thus, this study presents a protocol that demonstrates the potential synergies of microalgae cultivation with a natural gas power plant situated in the southwestern United States in a hot semi-arid climate. State-of-the-art technologies are used to enhance carbon capture and utilization via the green algal species Chlorella sorokiniana, which can be further processed into biofuel. We describe a protocol involving a semi-automated open raceway pond and discuss the results of its performance when it was tested at the Tucson Electric Power plant, in Tucson, Arizona. Flue gas was used as the main carbon source to control pH, and Chlorella sorokiniana was cultivated. An optimized medium was used to grow the algae. The amount of CO2 added to the system as a function of time was closely monitored. Additionally, other physicochemical factors affecting algal growth rate, biomass productivity, and carbon fixation were monitored, including optical density, dissolved oxygen (DO), electroconductivity (EC), and air and pond temperatures. The results indicate that a microalgae yield of up to 0.385 g/L ash-free dry weight is attainable, with a lipid content of 24%. Leveraging synergistic opportunities between CO2 emitters and algal farmers can provide the resources required to increase carbon capture while supporting the sustainable production of algal biofuels and bioproducts.

A protocol is described to utilize the carbon dioxide in natural gas power plant flue gas to cultivate microalgae in open raceway ponds. Flue gas injection is controlled with a pH sensor, and microalgae growth is monitored with real time measurements of optical density.

צימוד לכידת פחמן מתחנת כוח עם בריכות מסלול מרוץ פתוחות אוטומטיות למחצה לגידול מיקרו-אצות

In the United States, 35% of the total carbon dioxide (CO2) emissions come from the electrical power industry, of which 30% represent natural gas ...

Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis

The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii (Chlamydomonas) has become a popular organism for research in diverse areas of cell biology and genetics because of its simple life cycle, ease of growth and manipulation for genetic analysis, genomic resources, and transformability of the nucleus and both organelles. Mating strains is a common practice when genetic approaches are used in Chlamydomonass, to create vegetative diploids for analysis of dominance, or following tetrad dissection to ascertain nuclear vs. organellar inheritance, to test allelism, to analyze epistasy, or to generate populations for the purpose of map-based cloning. Additionally, genetic crosses are routinely used to combine organellar genotypes with particular nuclear genotypes. Here we demonstrate standard methods for gametogenesis, mating, zygote germination and tetrad separation. This protocol consists of an easy-to-follow series of steps that will make genetic approaches amenable to scientists who are less familiar with Chlamydomonas. Key parameters and trouble spots are explained. Finally, resources for further information and alternative methods are provided.

Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis

Mating and tetrad separation are required for genetic analysis in Chlamydomonas reinhardtii. Here we demonstrate standard methods for gametogenesis, mating, zygote germination and tetrad dissection. This protocol consists of an easy-to-follow series of steps that will make genetic approaches amenable to scientists who are less familiar with Chlamydomonas.

הזדווגות והפרדה של הטטרדה Chlamydomonas reinhardtii עבור ניתוח גנטי

The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii (Chlamydomonas) has become a popular organism for research in diverse areas of cell biology and ...

A Multi-Omics Extraction Method for the In-Depth Analysis of Synchronized Cultures of the Green Alga Chlamydomonas reinhardtii

Microalgae have been the focus of research for their applications in the production of high value compounds, food and fuel. Moreover, they are valuable photosynthetic models facilitating the understanding of the basic cellular processes. System wide studies enable comprehensive and in-depth understanding of molecular functions of the organisms. However, multiple independent samples and protocols are required for proteomics, lipidomics and metabolomics studies introducing higher error and variability. A robust high throughput extraction method for the simultaneous extraction of chlorophyll, lipids, metabolites, proteins and starch from a single sample of the green alga Chlamydomonas reinhardtii is presented here. The illustrated experimental setup is for Chlamydomonas cultures synchronized using 12 h/12 h light/dark conditions. Samples were collected over a 24 h cell cycle to demonstrate that the metabolites, lipids and starch data obtained using various analytical platforms are well conformed. Furthermore, protein samples collected using the same extraction protocol were used to conduct detailed proteomics analysis to evaluate their quality and reproducibility. Based on the data, it can be inferred that the illustrated method provides a robust and reproducible approach to advance understanding of various biochemical pathways and their functions with greater confidence for both basic and applied research.

A Multi-Omics Extraction Method for the In-Depth Analysis of Synchronized Cultures of the Green Alga Chlamydomonas reinhardtii

System-wide analysis of multiple biomolecules is crucial to gain functional and mechanistic insights into biological processes. Hereby, an extensive protocol is described for high throughput extraction of lipids, metabolites, proteins and starch from a single sample harvested from synchronized Chlamydomonas culture.

שיטת הפקת מולטי-Omics לניתוח מעמיק של תרבויות מסונכרנות של הירוק Alga Chlamydomonas הקשה

Microalgae have been the focus of research for their applications in the production of high value compounds, food and fuel. Moreover, they are valuable ...

Developmental Biology

<meta charset="utf8"></head><body>הגברת ייצור הכלורופיל במיקרו-אצות באמצעות אופטימיזציה של גורמי גדילה

Evaluation of the Effect of Growth Factors on Chlorophylls a and b Production from Microalgae

Microalgae contain two main groups of pigments: chlorophylls and carotenoids. Chlorophyll is a green pigment that absorbs light energy and transforms it into chemical energy to facilitate the synthesis of organic compounds. This pigment serves as a valuable primary source for biotechnological input products in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries due to its high antioxidant properties and coloring capabilities. The objective of this research was to evaluate the effect of growth factors (CO2 concentration, light color, and light intensity) through a Taguchi L4 experimental design on cell growth and the cellular content of chlorophyll a and b in Chlorella sorokiniana, followed by validation of the method using Haematococcus pluvialis microalgae as an additional study model. Cell growth was quantified using the optical density spectrophotometric technique at a wavelength of 550 nm. For the quantification of chlorophylls, a cell extract was obtained using a 90% pure acetone solution, and subsequently, the concentrations of chlorophylls a and b were quantified using spectrophotometric techniques at wavelengths of 647 nm and 664 nm, according to the method described by Jeffrey and Humphrey. The experimental results indicated that controlling conditions of low CO2 addition, purple light, and low light intensity increases both cell growth and the concentration of chlorophylls a and b within the cells. The implementation of this chlorophyll quantification method allows for quick, simple, and precise determination of chlorophyll content, as the wavelengths used are at the absorbance peaks of both types of chlorophylls, making this technique easily reproducible for any microalgae under study.

<meta charset="utf8"></head><body>מחבר זרקור: אופטימיזציה של גורמי גדילה לייצור מטבוליטים משניים רלוונטיים מבחינה ביוטכנולוגית

The present study highlights the advantages of employing the method developed by Jeffrey and Humphrey for extracting and quantifying fat-soluble pigments from microalgae. This method serves as a valuable tool for assessing the influence of growth factors on chlorophyll production and cellular content in these organisms.

הערכת ההשפעה של גורמי גדילה על ייצור כלורופילים A ו-B ממיקרו-אצות

Microalgae contain two main groups of pigments: chlorophylls and carotenoids. Chlorophyll is a green pigment that absorbs light energy and transforms it ...

הקמתה של תרבות המשובטים של אצות חד־תאיות שהיו Conjugating

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

זיפרגליים Balanus improvisus כמודל ימית - Culturing, ביטוי גנים

טיפוח של ירוק Microalgae בועה עמודה Photobioreactors ואת וזמינותו עבור ליפידים נייטרלי

הטיפוח-תרגול של החיל הימי ( uljanin 1884) למחקרים ניסיוניים

דיגום וטיפוח בצורה מפושטת של לאראקא הקוסמופוליטן, אויקולאורה דיואיקה

צימוד לכידת פחמן מתחנת כוח עם בריכות מסלול מרוץ פתוחות אוטומטיות למחצה לגידול מיקרו-אצות

הזדווגות והפרדה של הטטרדה Chlamydomonas reinhardtii עבור ניתוח גנטי

שיטת הפקת מולטי-Omics לניתוח מעמיק של תרבויות מסונכרנות של הירוק Alga Chlamydomonas הקשה

הערכת ההשפעה של גורמי גדילה על ייצור כלורופילים A ו-B ממיקרו-אצות

הערכת ההשפעה של גורמי גדילה על ייצור כלורופילים A ו-B ממיקרו-אצות

הערכת ההשפעה של גורמי גדילה על ייצור כלורופילים A ו-B ממיקרו-אצות