تبحث الدراسة في التأثيرات الوقائية للقلب ل Munziq على إصابة تروية عضلة القلب في الفئران ، وخاصة تلك التي تعاني من سوائل غير طبيعية في الجسم. نهدف إلى تحديد ما إذا كانت المعالجة المسبقة ل Munziq يمكن أن تخفف من إصابة نقص تروية عضلة القلب ، وإحداث تغييرات مرضية ، وحماية وظائف القلب ، واستكشاف آلياتها ، خاصة عبر مسار إشارات NF-kappa B. ركزت مجموعتنا البحثية على دراسة إصابة نقص تروية عضلة القلب وإعادة التروية.
تشير النتائج التي توصلنا إليها إلى أن تثبيط مسار NF-kappa B يمكن أن يخفف من إصابة نقص تروية عضلة القلب وإعادة تروية ، مما قد يخفف من إصابة نقص تروية عضلة القلب عن طريق تثبيط مسار NF-kappa B ، مما يؤثر على وظيفة الميتوكوندريا واستقلاب عضلة القلب. يحدد بحثنا Munziq كعلاج محتمل لإصابات نقص تروية عضلة القلب ، مما يعزز المجال من خلال استكشاف نهج الطب الطبيعي. هذا الاكتشاف مهم لأنه يستهدف مسار NF-kappa B ، وهو آلية جديدة لعلاج إصابات نقص تروية عضلة القلب وإعادة التروية.
تمهد النتائج التي توصلنا إليها الطريق لمزيد من التطبيق السريري للطب التقليدي في إدارة أمراض القلب والأوعية الدموية. للبدء ، قم بإيواء الفئران في سائل الجسم غير الطبيعي ، أو مجموعة ABF ، في بيئة خاضعة للرقابة داخل صناديق المناخ وتوفير الأعلاف العادية. تزويد الفئران بالأعلاف العادية الممزوجة بالطعام الجاف البارد ، وهي بذور الشعير والكزبرة ، لمدة 21 يوما لإنشاء نموذج ABF.
باستخدام تقنية الإعطاء داخل المعدة ، قم بإعطاء خمسة جرامات لكل كيلوغرام من Munziq لفئران مجموعة Munziq لمدة 21 يوما قبل إصابة نقص تروية عضلة القلب ، أو جراحة MIRI. لإنشاء نموذج MIRI ، بعد 21 يوما من المعالجة المسبقة ، ضع الجرذ المخدر على طاولة عمليات معقمة. إجراء فغر القصبة الهوائية لتمكين التنفس بمساعدة جهاز التنفس الصناعي في الفئران.
قبل فتح الصدر ، اغسل موقع الجراحة بالماء والصابون ، واحلق المنطقة ، وقم بتطهيرها بمحلول اليود. بعد ذلك ، باستخدام مقص معقم ، ملقط ، وضاغط ، افتح جدار الصدر لكشف القلب وتحديد الشريان الهابط الأمامي الأيسر ، الذي يقع على سطح القلب. باستخدام خياطة 6-0 ، اربط الشريان للحث على نقص التروية الموضعي لمدة 30 دقيقة.
تأكد من الانسداد الفعال من خلال ملاحظة لون شاحب في عضلة القلب. بعد 30 دقيقة ، حرر الرباط واتركه لإعادة التروية لمدة 120 دقيقة. تأكد من إعادة تروية عضلة القلب عندما تعود إلى اللون الأحمر الفاتح.
بعد إعادة التروية، استخدم أنبوب جمع الدم المفرغ لجمع واحد إلى ملليلترين من الدم من الشريان الأورطي البطني. بعد القتل الرحيم للفأر ، استخدم ملقطا معقما ومقصا لجمع أنسجة عضلة القلب من منطقة الاحتشاء في البطين الأيسر. ضع الأنسجة المجمعة في وعاء معقم لمزيد من التحليل.
بعد جمع القلب المحتضب بعضلة القلب من الفئران التي تم إنشاؤها بواسطة MIRI ، استخدم مقصا وشفرة معقمة لتحويل القلب أفقيا إلى نصفين على طول نقطة منتصف المحور الطويل للبطين الأيسر بشكل عمودي على اتجاه القلب. قسم نصف الجزء القمي إلى جزأين. احتفظ بجزء واحد في 4٪ بارافورمالدهايد في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين إلى 24 ساعة للفحص المورفولوجي.
ضع الجزء الآخر في الجلوتارالديهايد عند أربع درجات مئوية لمدة ساعة إلى أربع ساعات للفحص المجهري الإلكتروني. بعد ذلك ، قسم الجزء الأساسي من القلب ، بما في ذلك المناطق الإقفارية وغير الإقفارية ، إلى جزأين. ضع جزءا واحدا في مبرد وقم بتجميده بسرعة في النيتروجين السائل.
انقل الأنسجة المجمدة إلى فريزر 80 درجة مئوية تحت الصفر لاختبار البيولوجيا الجزيئية. الطرد المركزي للدم الذي تم جمعه من الوريد الأجوف السفلي عند 1 ، 000 جم لمدة 10 دقائق. قم بتخزين المصل المنفصل في فريزر 80 درجة مئوية تحت الصفر.
ضع أقسام الأنسجة الثابتة بالفورمالديهايد في حاضنة 65 درجة مئوية لتخبز لمدة 1.5 إلى ساعتين. اغمر أقسام الأنسجة المخبوزة في الزيلين لمدة 10 دقائق. بعد ذلك ، اغمر أقسام الأنسجة بالتتابع في الكحول اللامائي لمدة واحدة واثنتين لمدة خمس دقائق لكل منهما ، متبوعا ب 95٪ 90٪ 80٪ و 70٪ كحول ، وأخيرا في الماء المقطر لمدة خمس دقائق لكل منهما.
تلطخ أقسام الأنسجة بالهيماتوكسيلين لمدة ثلاث دقائق. قم بإجراء التمايز الحمضي عن طريق غمر أقسام الأنسجة لفترة وجيزة في محلول كحول حمض الهيدروكلوريك لمدة ثانية إلى ثانيتين. قم بإنهاء التمايز عن طريق الشطف بماء الصنبور لمدة خمس دقائق.
بعد ذلك ، اغمر أقسام الأنسجة في الماء المقطر ، ثم في 70٪ 80٪ 90٪ و 95٪ كحول لمدة ثلاث دقائق لكل منهما. بعد غمر القسم في الكحول اللامائي الأول والثاني ، قم بتلطيخ الأقسام بنسبة 0.5٪ من الإيوزين في الإيثانول لمدة دقيقة واحدة. الآن ، اشطف الأقسام بنسبة 95٪ من الإيثانول لإزالة اللون الأحمر الزائد.
بعد ذلك ، اغمر الأقسام في الإيثانول اللامائي لمدة خمس دقائق ، متبوعا بالغمر في الزيلين واحد واثنين لمدة خمس دقائق لكل منهما. قم بتركيب الأقسام الملطخة بالبلسم المحايد. لاحظ التغيرات المرضية في الأنسجة تحت المجهر.
أظهرت أنسجة عضلة القلب في المجموعة الوهمية تنكس حبيبي وفراغي ، ومحدودية في تسلل خلايا الدم الحمراء والخلايا الليمفاوية ، وتمدد الأوعية الدموية واحتقاناها في بعض الأحيان. في مجموعة MIRI ، كان هناك تلف شديد في أنسجة عضلة القلب مع تنكس حبيبي وفراغي واسع النطاق. كان تلف عضلة القلب شديدا بشكل ملحوظ في مجموعة ABF MIRI مقارنة بمجموعة MIRI الضابطة ، حيث أظهر علامات تضخيم لتنكس الأنسجة والتسلل.
أظهرت خلايا عضلة القلب المعالجة ب Munziq في كل من مجموعات التحكم و ABF MIRI انخفاضا في التنكس الحبيبي والفراغي مع عدد أقل من خلايا الدم الحمراء ، وتسلل الخلايا الليمفاوية ، والاحتقان. حافظت خلايا عضلة القلب في المجموعة الوهمية على بنية اللييفات العضلية السليمة ، وطول العضيم العضلي الموحد ، والعديد من الميتوكوندريا. في مجموعة MIRI ، أظهرت خلايا عضلة القلب تورما ، وطول قسط عضلي منوعا ، وتعطلت الخيوط العضلية ، مع تلف واسع النطاق في الميتوكوندريا.
قلل علاج Munziq من تورم خلايا عضلة القلب وحافظ على اللييفات العضلية ، والقشر العضلي ، وبنية الميتوكوندريا ، على غرار الظروف الوهمية. كانت مستويات مصل cTn-T و CK-MB و ICAM-1 أعلى بشكل ملحوظ في مجموعة ABF MIRI مقارنة بمجموعة MIRI الضابطة. أدت المعالجة المسبقة ل Munziq إلى انخفاض مستويات cTn-T و CK-MB و ICAM-1 بشكل ملحوظ في كل من مجموعات ABF و MIRI الضابطة.
أظهرت مجموعة ABF MIRI زيادة في مستويات المالوند ديالديهايد وانخفاض مستويات أكسيد النيتريك في أنسجة عضلة القلب مقارنة بمجموعة MIRI الضابطة. أدت المعالجة المسبقة Munziq إلى خفض محتوى نازعة هيدروجين اللاكتات ومالوند ديالديهايد بشكل كبير مع زيادة مستويات أكسيد النيتريك في عضلة القلب الإقفارية. أظهرت مجموعة ABF MIRI مستويات مرتفعة من الإنترلوكين بيتا واحد ، والإنترلوكين ستة ، ومستويات ألفا TNF ، خاصة عند مستويات البروتين.
خفضت المعالجة المسبقة Munziq مستويات المصل والحمض النووي الريبي المرسال من إنترلوكين واحد بيتا ، وإنترلوكين ستة ، ونخر الورم ألفا ، خاصة عند مستويات البروتين في عضلة القلب. تم تنظيم علامات مسار NF-kappa B في أنسجة MIRI ، مما يشير إلى الالتهاب. قلل علاج Munziq من التعبير عن علامات المسار ، مما يشير إلى انخفاض تنشيط مسار NF-kappa B.
