ونود أن نشكر أليكس هيتشن وميج بوث لمساعدتهم في محاكمات التزاوج. وأيد هذا العمل من قبل NE منحة NERC / H015604 / 1 إلى TP.

1. إعداد يطير الغذاء مع تلوين الطعام <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ ذبابة الفاكهة قارورة القياسية مع ما يقرب من 20 مل من الطعام في القاع (الشكل 1). استخدام الوصفة التالية لمزيج الطعام باستخدام 1 L من الماء المغلي: 10 غرام من أجار، 85 غرام من سكر العنب، و 60 غراما من دقيق الذرة و 40 غرام من الخميرة، ويقلب لمدة 5 دقائق من يجيش. إضافة 25 مل من 10٪ nipagen بمجرد أن يبرد الخليط إلى 75 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الطعام قد بردت وطدت إضافة قطرتين (حوالي 0،5-1 مل) من الأزرق تلوين الطعام إلى الجزء العلوي من المواد الغذائية وتنتشر فوق سطح الأرض كله من القارورة (الشكل 1). استخدام صبغة لون مختلف إذا المفضل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ترك الطعام لمدة يومين في الثلاجة بحيث يتم امتصاص الصبغة من قبل الطبقة العليا من الغذاء؛ هذا يتجنب الرطوبة الزائدة الإضرار الذباب خلال فترة النضج. إضافة قطعة صغيرة من المناديل الورقية إذا الرطوبة الزائدة لا يزال يمثل مشكلة لطخة تصل الرطوبة الزائدة وثم في وقت لاحقأزلها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب على الطعام إما بشكل فردي أو في مجموعات. ملاحظة: سوف الذباب كسب تلطيخ الأمعاء في حدود 1 يوم التي توضع على الطعام. بدلا من ذلك، تنضج تماما الذباب على الطعام مصبوغ قبل التجربة (ارتفاع معدلات الوفيات خلال فترة النضج لم يكن لوحظ من التعرض للصبغة الطعام). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن الذباب مصبوغ يمكن تمييزها بسهولة من الذباب غير مصبوغ. إذا كانوا لا يمكن تمييزها، كرر الخطوات من 1،1-1،4 باستخدام إما على تركيز أعلى من الصبغة، أو صبغة مختلفة. </li></ol> 2. اثنان المحاكمات التزاوج ذكر عن طريق الغذاء تلوين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإنتاج ذرية، وإعداد قارورة تحتوي على عدة أزواج من الذباب الإناث والذكور (مجموعات صغيرة من الذكور والإناث هي أيضا مناسبة، على الرغم من أن تحرص على تجنب الازدحام اليرقات). السماح للإناث لوضع البيض ونقل الذباب إلى قارورة جديدة كل 5-7 أيام. متجر قارورة في درجة حرارة مناسبة لنوع من الفائدة (22 ° C وأو D. pseudoobscura وD. subobscura و 25 درجة مئوية لمدة D. البطن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل جمع الذباب التجريبية إزالة كافة الذباب من قارورة جمع في الوقت المحدد قبل جمع الذكور والإناث لضمان أنها ستكون العذارى (D. البطن - 6 ساعة عند 25 ° C، D. pseudoobscura - 18 ساعة عند 22 ° C، و D. subobscura - 24 ساعة عند 22 ° C). ملاحظة: إذا كان الذباب ليست عذراء هذه الإرادة التحيز سلوكهم في محاكمات التزاوج 15. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخزين والذكور ناضجة بشكل فردي في القياسية 75 × 20 مم قوارير البلاستيك (التي تحتوي على ~ 20 مل من المواد الغذائية). هذا يتجنب الآثار السلبية على سلوك التزاوج من الذكور واللياقة البدنية ينظر في بعض الأنواع عندما يتم الاحتفاظ الذكور في مجموعات 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح نصف الذكور للعلاج المطلوب (CO 2 التخدير في هذه الحالة). استخدام CO 2 حصيرة أو الاستفادة لفضح الذباب للفترة الزمنية المطلوبة. مخزن نصف سوءوفاق في كل معاملة على المواد الغذائية الملونة حتى التزاوج يحدث. وهذا سيجعل لهم تمييزها بصريا خلال المحاكمات التزاوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لنقل الذباب استخدام الشافطة 17. تسمية كل قارورة لتحديد كل من العلاج ووضع اللون من الذكور. هنا، استخدم أربعة معالجات (التخدير، وغير الملونة = G-NC، التخدير، ملونة = GC، لا التخدير، وغير الملونة، NG-NC، وليس التخدير، واللون، NG-C). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الإناث ظهرت حديثا في قوارير المواد الغذائية الطازجة حتى تنضج كمجموعات من 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح الذباب إلى أن تنضج لسن التزاوج (D. البطن - 3 أيام، D. pseudoobscura - 5 أيام، D. subobscura - 7 أيام 18 الذباب يخزن في درجة حرارة مناسبة للأنواع التي تجري دراستها (على سبيل المثال، 22 ° C D ل. . pseudoobscura وD. subobscura و 25 درجة مئوية لمدة D. البطن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الانتقال الإناث إلى قارورة الفردية (تابعaining ~ 20 مل من الطعام) قبل المحاكمة التزاوج للتأقلم على القارورة التزاوج 1 يوم. تسمية هذه قارورة بحيث قارورة يمكن التفريق. كن حذرا للتشويش على التجربة باستخدام وسم محايد (أي 1-150) لذلك ليس من الممكن لتخمين هوية الذباب في أي قنينة. ملاحظة: إن الشخص الذي يضع الذباب في كل قارورة أن تعرف هوية الذباب وضعت في كل قارورة لأنها سوف نلاحظ التي كانت ملطخة العلاج. ومع ذلك، ينبغي المراقب الذي يشاهد التزاوج لا يعرف هويتهم. للقيام سوف تكون هناك حاجة إلى هذا اثنين على الأقل المجربون، واحدة لإنشاء واحد لمراقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء المحاكمات التزاوج بين 10-12 صباحا، أو في الوقت الذي يتزامن مع الضوء القادم على في ضوء دورة / المظلمة يتعرض الذباب إلى (&quot;الفجر&quot; للذباب). إضافة اثنين من الذباب الذكور إلى كل قارورة التزاوج (التي تحتوي على ذبابة أنثى واحدة) باستخدام الشافطة. تأكد من أن الذكور هما من العلاجات المختلفة (التخدير أوالسيطرة) وأن على المرء أن تلطيخ الأمعاء لتجعل من الممكن لتمييزها عن بعضها البعض، والانتباه إلى الذكور اتسخت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا حدث الجماع، تسجيل حالة من الذكور أن الاصحاب (سواء الملونة أو غير - الملونة). إذا التجارب الماضية لمدة 2 ساعة، يفترض أن الأنثى لا تتزاوج. ملاحظة: 2 ساعة مناسبة لهذه الأنواع، ولكن غيرها من ذبابة الفاكهة قد تحتاج أكثر أو أقل وقت. </li></ol> 3. عزباء ذكر المحاكمات التزاوج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للمحاكمات الذكور واحدة، كرر بروتوكول 2 مع اثنين من التغييرات: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.3 لا تبقي الذكور على المواد الغذائية الملونة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.7، فقط إضافة ذكرا واحد لكل قارورة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.8، تسجيل مرة يضاف الطاير إلى القارورة، والوقت يجب أن تسجل يبدأ التزاوج والوقت الانتهاء من التزاوج. من هذه القيم، وحساب التزاوج النجاح، الكمون، ومدتها. </li></ol> 4. تحليل البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام حزمة إحصاءات مناسبة لآناتحلل. إذا كانت البيانات طبيعية وليس لها سوى اثنين من العلاجات، واستخدام تي الاختبارات أو ما يعادلها المعمم النموذج الخطي (GLM). لتجربتين الذكور، استخدام اختبارات ذات الحدين أو GLM ذي الحدين المتوفرة في أي حزمة الإحصاءات الأساسية. ملاحظة: للحصول على البيانات سبيل المثال، تم تنفيذ جميع التحليلات في R نسخة 3.0.3 19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من البيانات الكمون التزاوج ومدة التزاوج لطبيعتها، من خلال التآمر رسوم بيانية تردد من الكمون ومدة كل معاملة 20، وباستخدام اختبار لطبيعتها مثل شابيرو-ويلك. إذا كان غير طبيعي، وتحويلها، أو استخدام إحصاءات يعادل غير المعلمية 20. ملاحظة: لتسجيل بيانات سبيل المثال من خلال تجارب ذكر أعزب التقى التحول متطلبات الحياة الطبيعية والفروق متساوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كانت البيانات يمكن أن يكون طبيعيا، واستخدام تي اختبارات لفحص الفروق بين الكمون التزاوج ومدة واحدة في محاكمات التزاوج الذكور عند استخدام اثنين من العلاجات 21. إذا تم استخدام علاجات متعددة،محاولة لتحليل التباين (ANOVA) 20. إذا لا يمكن تطبيع البيانات، حاول الاختبارات غير المعلمية أي ما يعادل 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام اختبارات ذات الحدين لاختبار تأثير إما تلوين الطعام أو CO 2 التخدير على نجاح التزاوج من الذكور المتنافسة 20. إذا تم استخدام علاجات متعددة، كما هو الحال مع البيانات سبيل المثال، استخدام GLM مع هيكل خطأ ذي الحدين 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لمدة المحاكمات الذكور في البيانات سبيل المثال، استخدم GLMs مع الهياكل الخطأ ذات الحدين. فحص واحد GLM لون متغير استجابة (ملون = 0 وغير الملون = 1) مع الأنواع، والوضع الغاز ومعالجة الغاز كتجهيز توضيحي variables.One GLM فحص CO 2 كمتغير استجابة (بالغاز = 0 وليس بالغاز- = 1) مع الأنواع، ووضع اللون، ومعالجة الغاز تركيبها. في كل حالة، وإنتاج نموذج القصوى، وتنفيذ نموذج التبسيط على أساس AIC 20. </li></ol>

<ol>
	<li>Parker, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+competition+and+its+consequences+in+insects.">Sperm competition and its consequences in insects.</a> Biological Reviews. 45, 525-567 (1970).</li><li>Hosken, D. J., Stockley, P., Tregenza, T., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monogamy+and+the+battle+of+the+sexes.">Monogamy and the battle of the sexes.</a> Annual Review of Entomology. 54, 361-378 (2009).</li><li>Chapman, T., Liddle, L., John, K., Wolfner, M., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+cost+of+mating+caused+by+males+accessory+gland+fluids.">Female cost of mating caused by males accessory gland fluids.</a> Nature. 373, 241-244 (1995).</li><li>Avent, T. D., Price, T. A. R., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-based+female+preference+in+the+fruit+fly+Drosophila+pseudoobscura.">Age-based female preference in the fruit fly Drosophila pseudoobscura.</a> Animal Behaviour. 75, 1413-1421 (2008).</li><li>Barron, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthetising+Drosophila.+for+behavioural+studies.">Anaesthetising Drosophila. for behavioural studies.</a> Journal of Insect Physiology. 46, 439-442 (2000).</li><li>Moeers, A. O., Rundle, H. D., Whitlock, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+selection+and+bottlenecks+on+male+mating+success+in+peripheral+isolates.">The effects of selection and bottlenecks on male mating success in peripheral isolates.</a> The American Naturalist. 153, 437-444 (1999).</li><li>Ashburner, M., Thompson, J. N., Ashburner, M., Wright, T. R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+culture+of+Drosophila.">The laboratory culture of Drosophila.</a> The Genetics and Biology of Drosophila. 2a, 1-109 (1978).</li><li>Powell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Progress and Prospects in Evolutionary Biology: The Drosophila Model. , (1997).</li><li>Moore, A. J., Moore, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balancing+sexual+selection+through+opposing+mate+choice+and+male+competition.">Balancing sexual selection through opposing mate choice and male competition.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 266, 711-716 (1999).</li><li>Hollocher, H., Ting, C., Pollack, F., Wu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incipient+speciation+by+sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster.:+Variation+in+Mating+preference+and+Correlation+between+sexes.">Incipient speciation by sexual isolation in Drosophila melanogaster.: Variation in Mating preference and Correlation between sexes.</a> Evolution. 51, 1175-1181 (1997).</li><li>Perron, J. M., Huot, L., Corrivault, G. W., Chawla, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+carbon+dioxide+anaesthesia+on+Drosophila+melanogaster.">Effects of carbon dioxide anaesthesia on Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 18, 1869-1874 (1972).</li><li>Wu, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster+:+A+possible+case+of+incipient+speciation.">Sexual isolation in Drosophila melanogaster : A possible case of incipient speciation.</a> Proceedings of the National academy of sciences. 92, 2519-2523 (1995).</li><li>Melcher, C., Pankratz, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candidate+gustatory+interneurons+modulating+feeding+behaviour+in+the+Drosophila+brain.">Candidate gustatory interneurons modulating feeding behaviour in the Drosophila brain.</a> PLoS Biology. 3, e305 (2005).</li><li>Kalaw, V., Drapeau, M. D., Long, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+food+coloring+on+longevity+and+viability+of+Drosophila+melanogaster.">Effects of food coloring on longevity and viability of Drosophila melanogaster.</a> Dros. Inf. Serv. 85, 128-129 (2002).</li><li>Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+perception+of+female+mating+status:+its+effect+on+copulation+duration,+sperm+defence+and+female+fitness.">Male perception of female mating status: its effect on copulation duration, sperm defence and female fitness.</a> Animal Behaviour. 72, 1259-1268 (2006).</li><li>Liz&#233;, A., Price, T. A. R., Heys, C., Lewis, Z., Hurst, G. D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extreme+cost+of+rivalry+in+a+monandrous+species+male+&#8722;+male+interactions+result+in+failure+to+acquire+mates+and+reduced+longevity.">Extreme cost of rivalry in a monandrous species male &#8722; male interactions result in failure to acquire mates and reduced longevity.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 281, 20140631 (2014).</li><li>Yeh, S. -. D., Chan, C., Ranz, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+differences+in+sperm+competitive+ability+in+Drosophila.">Assessing differences in sperm competitive ability in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), e50547 (2013).</li><li>Holman, L., Freckleton, R. P., Snook, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+use+is+an+infertile+sperm?+A+comparative+study+of+sperm-heteromorphic+Drosophila.">What use is an infertile sperm? A comparative study of sperm-heteromorphic Drosophila.</a> Evolution. 62, 374-385 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> R: A Language and Environment for Statistical Computing. , (2011).</li><li>Crawley, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Statistics: An introduction using R. , (2005).</li><li>Dytham, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Choosing and Using Statistics: A Biologist's Guide. , (2010).</li><li>Kaiser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+anaesthesia+by+carbon+dioxide+on+hatching+time+and+weight+at+eclosion+in+Drosophila+melanogaster.">Influence of anaesthesia by carbon dioxide on hatching time and weight at eclosion in Drosophila melanogaster.</a> Drosophila Information Service. 76, 92-93 (1995).</li><li>Rera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+longevity+and+tissue+homeostasis+by+the+Drosophila.+PGC-1+homolog.">Modulation of longevity and tissue homeostasis by the Drosophila. PGC-1 homolog.</a> Cell Metabolism. 14, 623-634 (2011).</li><li>Crumpacker, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+micronized+fluorescent+dusts+to+mark+adult+Drosophila+pseudoobscura.">The use of micronized fluorescent dusts to mark adult Drosophila pseudoobscura.</a> American Midland Naturalist. 91, 118-129 (1974).</li><li>Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+few+chemical+words+exchanged+by+Drosophila+during+courtship+and+mating.">A few chemical words exchanged by Drosophila during courtship and mating.</a> Behaviour genetics. 14, 441-478 (1984).</li><li>Liimatainen, J. O., Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+analysis+of+cuticular+hydrocarbons+and+their+effect+on+courtship+in+Drosophila+virilis+and+D.+lummei.">Genetic analysis of cuticular hydrocarbons and their effect on courtship in Drosophila virilis and D. lummei.</a> Behaviour Genetics. 37, 713-725 (2007).</li></ol>

تعلن المؤلفين أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

هذه البيانات تظهر أن تأثير التخدير CO 2 غير متناسقة بين الأنواع، مع اثنين من ثلاثة أنواع تبين تأثير يذكر. وتشير نتائجنا زيارتها وضع العلامات مع صبغة الطعام له تأثير أقل على نجاح التزاوج من الذكور من CO 2 التخدير لD. البطن. وتبين هذه التجارب أن الأصباغ الغذائية يمكن بسهولة وبتكلفة منخفضة استخدامها لالذباب التسمية لفحوصات التزاوج التي تنطوي على الذكور متعددة. من ثلاثة أنواع ذبابة الفاكهة نموذج فحص، إلا D. أظهر البطن تأثير من CO 2 التخدير على أداء التزاوج في وضع تنافسي. في المقابل، فإن أيا من الأنواع أظهر تأثير جمع على الغاز في تجارب التزاوج واحدة من حيث الكمون التزاوج، على عكس النتائج السابقة للD. البطن 5. يمكن بالتالي فإن تأثير المنافسة يتم تسليط الضوء على آثار اللياقة البدنية أكثر دهاء من التخدير CO 2، والتي هي كشف فقطتحت الحالات التي يكون فيها هناك منافسة بين الذكور والذكور. التعرض في جمع المبكر وقبل يوم واحد إلى المحاكمة يكون لها تأثير سلبي على قدرة الذكور من D. البطن للحصول على التزاوج. تعرض قبل يومين من المحاكمة ولكن لم تظهر أي تأثير. كلا D. pseudoobscura وD. لم subobscura لا تظهر أي تأثير التعرض للغاز في أي من التجارب. تفسير واحد هو أن D. كان البطن عرضة للالتعرض المبكر للCO 2 لأنه يجب جمع في الحياة في وقت سابق (0 - 6 ساعة قديمة) من الأنواع الأخرى لضمان الذكور هم البكر. وبالتالي الذكور D. البطن في هذه السن قد تكون أكثر حساسية مثل بشرة من ذبابة لا يزال تصلب، مقارنة مع الأنواع الأخرى التي كان يعد لبشرة لتتصلب. بشكل عام، وهذا يدعم فكرة أن آثار CO 2 التخدير هي أنواع محددة والمحققين يجب اختبار مناسب تأثير في الأنواع المستهدفة. Currentlوقد تم تنفيذ ذ، الجزء الأكبر من عمل على تأثير CO 2 التخدير خارجا على ذبابة الفاكهة البطن 5،11،22، وبالتالي قد لا يكون مناسبا لتطبيقه على الأنواع الأخرى ذات الصلة. طريقة غير الغازية بديل قدمت للتمييز ذباب، هو صبغة الطعام. وتشير النتائج كان هذا العلاج أي تأثير في في جميع الأنواع التي تم فحصها. ومع ذلك، في حين كان الاستخدام الناجح في توفير علامة الرخيصة ومرئية بسهولة للتمييز بين الأفراد تجدر الإشارة إلى أن الصبغة كان أسهل للتمييز في D. pseudoobscura وD. subobscura مما كان عليه في D. وقد استخدمت البطن. السابق مؤلفين عدة ألوان (الأحمر والأخضر والأزرق) 4،6. وجدنا التلوين الأزرق ليكون أسهل للتمييز في جميع الأنواع، وخاصة D. pseudoobscura وD. subobscura. باستخدام عدة ألوان من المحتمل أن تسمح تجارب أكثر تعقيدا مع العديد من flie ملحوظ بشكل فرديالصورة. ومع ذلك، الاختبارات الأولية من الأصباغ المختلفة ضرورية، كما تفشل بعض الأصباغ الغذائية لتلوين الذباب، ربما يتم هضمها عندما تستهلك. يمكن الأصباغ الأخرى لها آثار سامة والحد من البقاء على قيد الحياة من الذباب، وينبغي تجنبها 14). كما تم استخدام طرق تلوين الطعام بديلة باستخدام البقع أكثر تكلفة لفحص سلامة الأمعاء لD. البطن 23. قد توفر هذه كبديل لذلك، على الرغم من أن أكثر تكلفة، وأسلوب الصباغة 23. طريقة صبغ سريع مثل CO 2 الجناح لقطة كما الذباب يمكن تخزينها على الغذاء مصبوغ من المجموعة. كان الإقبال على الطعام السريع (~ 3 ساعة)، لذلك تخزين O / N على المواد الغذائية الملونة أيضا يكون كافيا للاحتفال الذباب، كما تستخدم في دراسات أخرى 6. ومع ذلك، فإن مدة التلوين قصيرة نسبيا (~ 4-5 ساعة) مقارنة لقطة الجناح (دائمة) أو الغبار الفلورسنت بمناسبة (10 - 12 أيام) 24. كما الأنواع ذبابة الفاكهةتختلف في المظهر، والأصباغ المختلفة تكون أكثر أو أقل فعالية بالنسبة للأنواع المختلفة، وحيث أن بعض سلالات (على سبيل المثال، المسوخ خروج المغلوب) يمكن أن يكون عرضة للتغييرات في النظام الغذائي، أي استخدام صبغة يتطلب اختبارا أوليا لفعاليتها لا سيما إذا كانت أطول التعرض الطويل لالأصباغ يمكن أن تكون سامة 14. وعلى النقيض من الدراسة من قبل كالاو وآخرون 14، لم نعثر على أي وفيات كبيرة بعد التخزين لأيام متعددة على الأطعمة الملونة لD. البطن (3 أيام)، D. pseudoobscura (5 أيام)، أو D. subobscura (7 أيام)، وربما يرجع ذلك إلى اختلاف صبغة المستخدمة. في خطوة حاسمة لنجاح استخدام تقنية الصبغة هي خطوة 1.5، وهو ما يؤكد وصبغ المختار يعمل بشكل جيد مع الأنواع والسلالة المستخدمة. وتتضمن تقنية بديلة تطبيق الغبار الملون إلى خارج الطاير قبل استخدامها في التجارب الميدانية 24. وقد استخدمت هذه الطريقة لتتبع الأفراد في ر يرجع الحقلس مدة وضع العلامات وسهولة كتلة بمناسبة الذباب 24. على الرغم من أننا لم تختبر صراحة هذه الطريقة في التجارب التزاوج، سيكون من المهم دراسة أي آثار الغبار التي يمكن أن يكون لها على الحواس الهامة في التزاوج، ولا سيما في ذبابة الفاكهة 25 و 26. وفي الأنواع، ومع ذلك، حيث الصباغة المعوية غير ممكن، هذه الأساليب يمكن أن تكون مناسبة. وفي الختام وجدنا أن في اثنين من الأنواع الثلاثة اختبار (D. pseudoobscura وD. subobscura) لم يكن هناك تأثير وجدت أي من CO 2 التخدير أو تلوين الطعام على قدرة التزاوج من الذكور. لD. البطن تأثير سلبي من CO 2 التخدير تم الكشف، ولكن لم تلوين الطعام لا يؤثر على التزاوج النجاح في هذا النوع. وبشكل عام، يوفر طريقة صبغ طريقة بسيطة ورخيصة غير الغازية لتحديد فردية ذبابة الفاكهة التي تعادل أو أفضل من الأساليب التي تتطلب CO 2 التخدير. هذاومن المرجح أن هذه الطريقة تعمل عبر مجموعة من الأنواع.

على مدى العقود القليلة الماضية كان هناك اهتمام متزايد في كيفية الاختيار والمنافسة الجنسي بين الذكور تأثير على تطور 1،2. وقد لعبت تجارب على سلوك التزاوج دورا هاما في تطوير واختبار نظريات الانتقاء الجنسي 3،4. وبصفة خاصة الأنواع الابحاث التي تستخدم، من جنس ذبابة الفاكهة، ساهمت إلى حد كبير في فهم الانتقاء الجنسي والسلوك. ومع ذلك، فمن المهم للتحقيق في ما إذا كانت التقنيات المستخدمة عادة قد تحيز بشكل مصطنع نتائج التجارب التزاوج القياسية 5،6. وكثيرا ما يستخدم التخدير لمعالجة وتحديد الهوية في تجارب 7. على سبيل المثال، يتم جمع الذباب عادة قبل التزاوج، أو تخزن في المورثات أو علاجات تجريبية باستخدام ثاني أكسيد الكربون (CO 2) مخدر. في التجارب التي يحتاج فيها شخصان أو أكثر لتمييزها، هو ممارسة شائعة لخدر في فلوريداالمنشأ وكليب جزء من الجناح قبالة لتحديد كل مجموعة فردية أو المعاملة 5،8. ومن الأهمية بمكان، ولكن، لفهم كيفية CO 2 العلاج سوف تؤثر على السلوك. وقد تم فحص تأثير CO 2 التخدير في ذبابة الفاكهة السوداء التي تكون فيها الذكور يتعرضون لثاني 2 استغرق فترة أطول كثيرا للتزاوج وعموما كان أقل نجاحا التزاوج من الذكور غير مخدرة أو الذكور مخدرة باستخدام التعرض للبرد 5. وقد لوحظ هذا التأثير على حد سواء عندما تم تطبيق التخدير في يوم التجربة وعندما تم احتساب الذباب يوم واحد لاسترداد. ومع ذلك، كان هذه الدراسة محدودة في دراسة تجارب فقط حيث تم تقديم الذكور واحد إلى كل أنثى 5. سيناريو أكثر واقعية هو لالإناث إلى الذكور تواجه متعددة 9،10، مما يتيح التنافس بين الذكور، والتي قد تسمح للكشف عن المزيد من الخسائر خفية من اللياقة البدنية الذكور بسبب التخدير. استخدام التخدير CO 2 قد يكون أيضاوجدت أون للحد من الخصوبة وطول العمر من البالغين D. البطن عندما يتعرضون بعد وقت قصير من eclosion، كما هو شائع عند جمع عذراء الذباب (11). بديلا لثاني 2 التخدير هو للاحتفال الذباب عن طريق تغذية لهم الطعام الملونة مع صبغ 4،6،10،12،13. هذه الصبغة يدخل أمعاء الطاير ومرئيا من خلال البطن، مما يسمح الذباب الملونة لتمييزها عن الذباب بغير لون، أو من الذباب المسمى مع لون مختلف. طرق تختلف في كيفية هذا يمكن تطبيقها: إضافتها مباشرة إلى الغذاء 12، عن طريق مصبوغ عجينة الخميرة التكميلية 6، أو عن طريق التعرض لرواية مصبوغة الغذاء الركيزة 13. ويبدو أن هذه التقنيات بمناسبة لإظهار أي تأثير على أداء 4،6 التزاوج. ومع ذلك، ورقة فحص مباشرة آثار نفس تلوين الطعام على الكبار D. وجد البطن انخفاض قوي في عمر 14. وقد ركز العمل السابق أيضا ALMمعاهدة الفضاء الخارجي كليا على D. البطن، سواء فيما يتعلق آثار CO 2 التخدير 5،11 وتلوين الطعام 14 الأساليب. حاليا، هناك القليل من المعلومات حول كيفية CO 2 التخدير أو استخدام التلوين الأمعاء يؤثر على سلوك التزاوج من غيرها من ذبابة الفاكهة. الدراسة التالية بتقييم تأثير CO 2 التخدير على سلوك التزاوج من ثلاثة أنواع من ذبابة الفاكهة (D. البطن، D. pseudoobscura، وD. subobscura). تم فحص تأثير جمع الذباب على CO 2 في تجربتين التزاوج الذكور على حد سواء واحد. كما تم العثور على تأثير CO 2 إلى تختلف في D. تم اختبار البطن 5 وفترات كمون مختلفة حتى بين التعرض لثاني 2 والتزاوج. بديل بمناسبة طريقة لقطة التخدير والجناح: يتم تقييم أيضا استخدام الأصباغ الغذائية وصمة عار على الذباب.

<table><tbody><tr><td>Plastic tubing</td><td>Fisher Scientific</td><td>TWT-200-061G</td><td>Other tubing may be suitable however it must fit within a 1ml pipette tip.</td></tr><tr><td>Fine mesh</td><td>Any haberdashery</td><td>-</td><td>Fine curtain mesh is suitable</td></tr><tr><td>1 ml pipette tips</td><td>VWR</td><td>83007-376</td><td>Various brands of pipette tips would be suitable</td></tr><tr><td>Plastic Vials</td><td>Sarstedt</td><td>58.49</td><td>Larger vials or bottles could also be used.</td></tr><tr><td>Cotton Balls</td><td>Lewis Medical Solutions</td><td>28170</td><td>The size of cotton will vary depending on the size of vials used</td></tr><tr><td>Blue Food colouring</td><td>Thesugarcraftcompany</td><td>-</td><td>Other dye colours and brands can have variable results.</td></tr><tr><td>CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; Tank</td><td>BOC</td><td>BOC 40VK</td><td></td></tr><tr><td>Sharpie Markers</td><td>Steadtler</td><td>Lumocolor 313 S</td><td>Various colours can be used, but Lumocolor S give an excellent combination of durability and fineness</td></tr><tr><td>Stopwatch</td><td>Salter</td><td>SL3920</td><td>Any stopwatch with a good digital display would be fine</td></tr></tbody></table>

dyeing insects for behavioral assays: the mating behavior of anesthetized drosophila

وقد ساهمت تجارب التزاوج باستخدام ذبابة الفاكهة إلى حد كبير في فهم الانتقاء الجنسي والسلوك. وغالبا ما تتطلب التجارب أساليب بسيطة وسهلة ورخيصة للتمييز بين الأفراد في المحاكمة. وهناك تقنية القياسية لهذا هي CO 2 التخدير ثم وصفها أو الجناح لقطة كل الطاير. ومع ذلك، وهذا هو الغازية ولقد ثبت أن تؤثر على السلوك. وقد استخدمت تقنيات أخرى تلوين للتعرف على الذباب. تقدم هذه المقالة طريقة بسيطة وغير الغازية لوضع العلامات ذبابة الفاكهة التي تسمح لهم أن تحدد بشكل فردي ضمن التجارب، وذلك باستخدام تلوين الطعام. وتستخدم هذه الطريقة في التجارب حيث تتنافس اثنين من الذكور لتتزاوج مع الإناث. الصباغة سمحت تحديد سريعة وسهلة. كان هناك، ومع ذلك، هناك بعض الاختلاف في قوة تلوين عبر الأنواع الثلاثة التي تم اختبارها. يتم تقديم بيانات تظهر الصبغة لها تأثير أقل على سلوك التزاوج من CO 2 في ذبابة الفاكهة بميلانوجاستر. ويظهر تأثير التخدير CO 2 تعتمد على نوع من ذبابة الفاكهة، مع د. pseudoobscura وD. subobscura يظهر أي أثر، في حين D. وكان الذكور البطن خفضت نجاح التزاوج. طريقة صبغ قدمت ينطبق على مجموعة واسعة من التصاميم التجريبية.

تجربتان التزاوج من الذكور - تأثير CO 2 التخدير على سلوك التزاوج أفضل نموذج جدت لشرح الاختلاف في تأثير CO 2 التخدير يتضمن الأنواع كعامل (مع D. pseudoobscura وD. subobscura تنصهر فيها لأنها أظهرت عدم وجود فروق بين بعضها البعض). في D. pseudoobscura وD. subobscura لم يكن هناك تأثير كبير من CO 2 التخدير على نجاح التزاوج في تجربتين الذكور (Z 1،589 = 0.087، P = 0.931). لD. البطن، كان الذكور يتعرضون لثاني 2 التخدير أقل بكثير نجاح التزاوج (Z1،589 = 2.467، P = 0.014). وكان هناك أيضا تفاعلا كبيرا بين الأنواع والعلاج (χ 2 = 1،589 6.83، P = 0.009) مع وجود تأثير أكبر عندما ينظر D. تعرض البطن إلى الغاز في جمع أو قبل المحاكمات (الجدول 1) 1 يوم. Howevإيه، D. الذكور البطن تتعرض لثاني قبل 2 يومين من المحاكمة التجريبية لم تظهر تأثير CO 2. تجربتان التزاوج من الذكور - تأثير التلوين الأمعاء على سلوك التزاوج أظهر نموذج تبسيط أي تأثير كبير من تلوين الطعام يتم العثور على أي من الأنواع الثلاثة (P&gt; 0.1). عندما أدرجت العلاج أو وضع الغاز في تحليل هذه كانت أيضا ليس كبيرا (P&gt; 0.1). وتظهر نسب التزاوج ناجحة لالذباب الملون عبر العلاجات في الجدول 2. والفرق في تلوين بين الذباب أبقى على الملونة ويمكن رؤية الطعام بغير لون في الشكل 1. وكانت شدة تلوين الطعام في الأمعاء أكبر في D. pseudoobscura وD. subobscura مما كان عليه في D. البطن. تجارب التزاوج واحدة - أثر استخدام CO 2 التخدير على مالسلوك أثناء التشغيل لم يكن هناك فرق في الكمون التزاوج لأي من الأنواع الثلاثة عندما تم استخدام CO 2 التخدير لجمع مؤخرا ظهرت البالغين. تم العثور على أثر لمدة التزاوج في D. subobscura عندما تعرضت لثاني قبل 2 يومين تجارب التزاوج (أرقام 2 و 3؛ الجدول 2). <img alt="الشكل (1)" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig1.jpg" /> الشكل 1. صورة تظهر قوارير من الملونة وغير الملونة تحلق الأغذية (A) وقوة المعوية تلوين في ذكر D. Subobscura (B). <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig2.jpg" /> الشكل 2. متوسط ​​و 95٪ فترات الثقة عن الجماع الكمون لهذه الانواع الثلاثة التحقيق معهم في المحاكمات ذكر أعزب، عندما كان الذكور تخديرد (الحانات ضوء) أو لا مخدرة (القضبان السوداء) عندما يتم جمعها كما العذارى قبل النضج الجنسي. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig3.jpg" /> الشكل 3. متوسط ​​و 95٪ فترات ثقة لمدة الجماع لهذه الانواع الثلاثة التحقيق معهم في المحاكمات ذكر أعزب، عندما كانت مخدرة الذكور (الحانات ضوء) أو لا مخدرة (القضبان السوداء) عندما يتم جمعها كما العذارى قبل النضج الجنسي. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> علاج </td><td> نوع </td><td> رقم محاكمات </td><td> رقم الذباب الملونة التي تزاوج </td><td> ف القيمة </td><td> رقم الذباب بالغاز التي تزاوج </td><td> ف القيمة </td></tr><tr><td rowspan="3"> جمع على CO 2 </td><td> D. ميل </td><td> 73 </td><td> 36 </td><td> 1 </td><td> 27 </td><td> 0.0344 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td>79 </td><td> 41 </td><td> 0.8221 </td><td> 44 </td><td> 0.3682 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 71 </td><td> 40 </td><td> 0.3425 </td><td> 33 </td><td> 0.6353 </td></tr><tr><td rowspan="3"> تتعرض لثاني 2 18 ساعة قبل </td><td> D. ميل </td><td> 57 </td><td> 28 </td><td> 1 </td><td> 19 </td><td> 0.0163 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td> 65 </td><td> 32 </td><td> 1 </td><td> 31 </td><td> 0.8043 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 68 </td><td> 38 </td><td> 0.3961 </td><td> 35 </td><td> 0.9036 </td></tr><tr><td rowspan="3"> تتعرض لثاني 2 2DAYS. </td><td> D. ميل </td><td> 56 </td><td> 19 </td><td> 0.0222 </td><td> 32 </td><td> 0.3497 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td> 70 </td><td> 32 </td><td> 0.5504 </td><td> 33 </td><td> 0.7202 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 56 </td><td> 29 </td><td> 0.8939 </td><td> 26 </td><td> 0.6889 &lt;/ td&gt; </tr></tbody></table> الجدول 1. نتائج تجربتين ذكر الاختيار عبر جميع أنواع العلاجات وفحصها. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> نوع </td><td> سمة </td><td> DF </td><td> تي القيمة </td><td> ف القيمة </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. البطن </td><td> كمون </td><td> 58 </td><td> 1.379 </td><td> 0،174 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 58 </td><td> 1.243 </td><td> 0.221 </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. pseudoobscura </td><td> كمون </td><td> 109 </td><td> 0.419 </td><td> 0،676 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 109 </td><td> 0.436 </td><td> 0.664 </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. subobscura </td><td> كمون </td><td> 83 </td><td> 0.098 </td><td> 0.922 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 83 </td><td> 1،767 </td><td> 0.081 </td></tr></tbody></table> . تم تنفيذ الجدول 2. النتائج من تجارب التزاوج واحدة فحص تأثير تجميع على CO 2 التخدير على التزاوج الكمون ومدة الاختبارات خارجا على ثلاثة أنواع من ذبابة الفاكهة (D. البطن، D. pseudoobscura وD. subobscura).

Watch this Scientific Journal Video about Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila at JoVE.com

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

This protocol describes a simple, cost effective way to individually identify Drosophila or other insects. Demonstration data investigating mating success across three species of Drosophila show that this method is comparable or better than the use of CO2 anaesthesia.

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy ...

dyeing-insects-for-behavioral-assays-mating-behavior-anesthetized

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

9.8K Views.  University of Liverpool. This protocol describes a simple, cost effective way to individually identify Drosophila or other insects. Demonstration data investigating mating success across three species of Drosophila show that this method is comparable or better than the use of CO2 anaesthesia.

Video: Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors remains poorly understood. In Drosophila melanogaster, environmental cues, such as food availability, affect mating activity offering a tractable system to investigate the mechanisms modulating sexual behavior. In D. melanogaster, environmental cues are often sensed via the chemosensory gustatory and olfactory systems. Here, we present a method to test the effect of environmental chemical cues on mating behavior. The assay consists of a small mating arena containing food medium and a mating couple. The mating frequency for each couple is continuously monitored for 24 h. Here we present the applicability of this assay to test environmental compounds from an external source through a pressurized air system as well as manipulation of the environmental components directly in the mating arena. The use of a pressurized air system is especially useful to test the effect of very volatile compounds, while manipulating components directly in the mating arena can be of value to ascertain a compound's presence. This assay can be adapted to answer questions about the influence of genetic and environmental cues on mating behavior and fecundity as well as other male and female reproductive behaviors.

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

We demonstrate an assay to analyze the environmental and genetic cues that influence mating behavior in the fruit fly Drosophila melanogaster.

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في<em&gt; ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Behavior

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular disease and various neurological diseases1. We have optimized simple and robust behavioral assays for determining larval locomotion, adult climbing ability (RING assay), and courtship behaviors of Drosophila. These behavioral assays are widely applicable for studying the role of genetic and environmental factors on fly behavior. Larval crawling ability can be reliably used for determining early stage changes in the crawling abilities of Drosophila larvae and also for examining effect of drugs or human disease genes (in transgenic flies) on their locomotion. The larval crawling assay becomes more applicable if expression or abolition of a gene causes lethality in pupal or adult stages, as these flies do not survive to adulthood where they otherwise could be assessed. This basic assay can also be used in conjunction with bright light or stress to examine additional behavioral responses in Drosophila larvae. Courtship behavior has been widely used to investigate genetic basis of sexual behavior, and can also be used to examine activity and coordination, as well as learning and memory. Drosophila courtship behavior involves the exchange of various sensory stimuli including visual, auditory, and chemosensory signals between males and females that lead to a complex series of well characterized motor behaviors culminating in successful copulation. Traditional adult climbing assays (negative geotaxis) are tedious, labor intensive, and time consuming, with significant variation between different trials2-4. The rapid iterative negative geotaxis (RING) assay5 has many advantages over more widely employed protocols, providing a reproducible, sensitive, and high throughput approach to quantify adult locomotor and negative geotaxis behaviors. In the RING assay, several genotypes or drug treatments can be tested simultaneously using large number of animals, with the high-throughput approach making it more amenable for screening experiments.

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster is a genetically and behaviorally tractable model system that has been used to understand the molecular and cellular basis of many important biological processes for over a century 1. Drosophila has been well exploited to gain insights into the genetic basis of fly behavior.

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults

Drosophila melanogaster is a very powerful model in biological research, but a bad model for photography or videography. This paper describes a simple but effective method to observe and document the behavior or morphology of flies. Flies were placed in a translucent observation chamber c.a. &#216;15 x 5mm (no food inside) or &#216;15 x 12 mm (with an 8 mm-high piece of food inside). After covering with an ultraviolet (UV)/clear filter with high light transmittance, the chamber was placed under a 5-50x zoom stereo microscope, and mini light-emitting diode (LED) video lights were placed on both sides of the microscope to illuminate the chamber to obtain uniform, soft, bright, and nearly shadow-free light. Then, a compact digital camera with 3-5x optical zoom, which can record 1080 P high-definition or higher resolution video (at a frame rate of &#8805;30 fps), was connected to the eyepiece of microscope through a bracket, and photographs or videos were taken through the eyepiece. By adjusting the zoom knob of the zoom stereo microscope, it was very easy to track the flies and take panoramic or detailed close-up images as needed, while the camera recorded everything under the microscope. Because the flies can stay at any position in the chamber, they can be observed and recorded from all directions. The photographs or videos taken are of good image quality. This method can be used both for scientific research and teaching.

An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults

This protocol describes how to make a simple adult Drosophila behavior observation chamber, and how to take high-definition photographs/videos of the morphology or behavior of different types of fruit flies in the observation chamber through relatively simple and affordable methods.

نظام تصوير عالي الوضوح قابل للتعديل للدراسات السلوكية للبالغين Drosophila

Drosophila melanogaster is a very powerful model in biological research, but a bad model for photography or videography. This paper describes a simple but ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

Quantification of Drosophila Grooming Behavior

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a grooming assay protocol and novel chamber design that is cost-efficient and scalable for either small or large-scale studies of Drosophila grooming. Flies are dusted all over their body with Brilliant Yellow dye and given time to remove the dye from their bodies within the chamber. Flies are then deposited in a set volume of ethanol to solubilize the dye. The relative spectral absorbance of dye-ethanol samples for groomed versus ungroomed animals are measured and recorded. The protocol yields quantitative data of dye accumulation for individual flies, which can be easily averaged and compared across samples. This allows experimental designs to easily evaluate grooming ability for mutant animal studies or circuit manipulations. This efficient procedure is both versatile and scalable. We show work-flow of the protocol and comparative data between WT animals and mutant animals for the Drosophila type I Dopamine Receptor (DopR).

This protocol describes a scalable individual grooming assay technique in Drosophila that yields robust, quantitative data to measure grooming behavior. The method is based on comparing the difference in dye accumulation on the bodies of un-groomed versus groomed animals over a set period of time.

الكمي للسلوك الاستمالة ذبابة الفاكهة

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a ...

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

Despite decades of investigation, the neuronal and molecular bases of motivational states remain mysterious. We have recently developed a novel, reductionist, and scalable system for in-depth investigation of motivation using the mating drive of male Drosophila&#160;melanogaster (Drosophila), the methods for which we detail here. The behavioral paradigm centers on the finding that male mating drive decreases alongside fertility over the course of repeated copulations and recovers over ~3 d. In this system, the powerful neurogenetic tools available in the fly converge with the genetic accessibility and putative wiring diagram available for sexual behavior. This convergence allows rapid isolation and interrogation of small neuronal populations with specific motivational functions. Here we detail the design and execution of the satiety assay that is used to measure and alter courtship motivation in the male fly. Using this assay, we also demonstrate that low male mating drive can be overcome by stimulating dopaminergic neurons. The satiety assay is simple, affordable, and robust to influences of genetic background. We expect the satiety assay to generate many new insights into the neurobiology of motivational states.

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

This article describes a behavioral assay that uses male mating drive in Drosophila melanogaster to study motivation. Using this method, researchers can utilize advanced fly neurogenetic techniques to uncover the genetic, molecular, and cellular mechanisms that underlie this motivation.

قياس وتغيير التزاوج محرك في ذكر<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Despite decades of investigation, the neuronal and molecular bases of motivational states remain mysterious. We have recently developed a novel, ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a considerable amount of information has been generated regarding ORN responses to odorants, the role of specific ORNs in driving behavioral responses remains poorly understood. Complications in behavior analyses arise due to different volatilities of odorants that activate individual ORNs, multiple ORNs activated by single odorants, and the difficulty in replicating naturally observed temporal variations in olfactory stimuli using conventional odor-delivery methods in the laboratory. Here, we describe a protocol that analyzes Drosophila larval behavior in response to simultaneous optogenetic stimulation of its ORNs. The optogenetic technology used here allows for specificity of ORN activation and precise control of temporal patterns of ORN activation. Corresponding larval movement is tracked, digitally recorded, and analyzed using custom written software. By replacing odor stimuli with light stimuli, this method allows for a more precise control of individual ORN activation in order to study its impact on larval behavior. Our method could be further extended to study the impact of second-order projection neurons (PNs) as well as local neurons (LNs) on larval behavior. This method will thus enable a comprehensive dissection of olfactory circuit function and complement studies on how olfactory neuron activities translate in to behavior responses.

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

This protocol analyzes navigational behavior of Drosophila larva in response to simultaneous optogenetic stimulation of its olfactory neurons. Light of 630 nm wavelength is used to activate individual olfactory neurons expressing a red-shifted channel rhodopsin. Larval movement is simultaneously tracked, digitally recorded, and analyzed using custom-written software.

تتبع السلوك المورفولوجية اليرقات في الاستجابة للتحفيز أوبتوجينيتيك الخلايا العصبية حاسة الشم

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...

ذبابة الفاكهة نماذج للسمات الوراثية والسلوكية لاضطراب طيف التوحد

Paradigms for Behavioral Assessment in Drosophila Model of Autism Spectrum Disorder

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in social interaction and ability for communication, enhanced restricted or repetitive behaviors, and also, in some cases, learning disability and motor deficit. Drosophila has served as an unparalleled model organism for modeling a great number of human diseases. As many genes have been implicated in ASD, fruit flies have emerged as a powerful and efficient way to test the genes putatively involved with the disorder. As hundreds of genes, with varied functional roles, are implicated in ASD, a single genetic fly model of ASD is unfeasible; instead, individual genetic mutants, gene knockdowns, or overexpression-based studies of the fly homologs of ASD-associated genes are the common means for gaining insight regarding molecular pathways underlying these gene products. A host of behavioral techniques are available in Drosophila which provide easy readout of deficits in specific behavioral components. Social space assay and aggression and courtship assays in flies have been shown to be useful in assessing defects in social interaction or communication. Grooming behavior in flies is an excellent readout of repetitive behavior. Habituation assay is used in flies to estimate the ability for habituation learning, which is found to be affected in some ASD patients. A combination of these behavioral paradigms can be utilized to make a thorough assessment of the human ASD-like disease state in flies. Using Fmr1 mutant flies, recapitulating Fragile-X syndrome in humans, and POGZ-homolog row knockdown in fly neurons, we have shown quantifiable deficits in social spacing, aggression, courtship behavior, grooming behavior, and habituation. These behavioral paradigms are demonstrated here in their simplest and straightforward forms with an assumption that it would facilitate their widespread use for research on ASD and other neurodevelopmental disorders in fly models.

تسليط الضوء على المؤلف: استكشاف أعراض اضطراب طيف التوحد في ذباب الفاكهة - النماذج الجينية والاختبارات السلوكية

Autism Spectrum Disorder (ASD) is associated with impaired social and communicative behavior and the emergence of repetitive behavior. For studying the interrelation between ASD genes and behavioral deficits in the Drosophila model, five behavioral paradigms are described in this paper for assaying social spacing, aggression, courtship, grooming, and habituation behavior.

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in ...

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في

نظام تصوير عالي الوضوح قابل للتعديل للدراسات السلوكية للبالغين Drosophila

الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في

الكمي للسلوك الاستمالة ذبابة الفاكهة

قياس وتغيير التزاوج محرك في ذكر

تتبع السلوك المورفولوجية اليرقات في الاستجابة للتحفيز أوبتوجينيتيك الخلايا العصبية حاسة الشم

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد