نود أن نشكر Astha Maltare لتوليد البيانات الزحف اليرقات. نود أن نشكر الدكتور نيكولاس Lanson الابن لإعطاء تعليقاته على المخطوطة. وأيد هذا العمل من قبل المركز باكارد روبرت لALS في جامعة جونز هوبكنز (لUBP) وتصلب جانبي ضموري جمعية (UBP)، وR01MH083689 من المعاهد الوطنية للصحة العقلية (كندي).

A. الفحص اليرقات الزحف 1. اليرقات مجموعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انشاء زجاجة اوقية (الاونصة) 8 من الذباب (10-15 ذكور + إناث 10-15). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا الذباب تضع بيضها لمدة 24 ساعة، ثم زجاجة واضح من الذباب. (نقل من البالغين في زجاجة جديدة، وكرر حسب الضرورة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان زجاجة لمدة 3-4 أيام، أو حتى 3 يرقات الطور مرئية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 50 - في زجاجة مع يرقات 100 مل من السكروز بنسبة 20٪ والسماح للجلوس لمدة 20 دقيقة. واليرقات تطفو الى الاعلى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع جمع اليرقات باستخدام ماصة 25 مل المصلية مع طرف باتجاه آخر، والمكان الى سلة شبكية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل اليرقات في سلة شبكة مرتين مع منزوع الأيونات O. 2 H اليرقات هي الآن جاهزة للتجارب. </li></ol> 2. لعلاج اليرقات مع المخدرات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام فرشاة لنقل العدد المرغوب فيه من اليرقات إلى دورق 5 مل تحتوي على السكروز حل 5٪ + المخدرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا تتغذى اليرقات على الأقل 15 دقيقة.</li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صب المخدرات بمبيدات اليرقات في سلة شبكة والشطف. وهم الآن على استعداد لاستخدام. </li></ol> 3. (سافر قياس المسافة الإجمالية أو تقلصات جدار الجسم) الفحص الحركي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام فرشاة لنقل يرقة الفردية إلى: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 15 طبق بيتري سم تحتوي على الاغاروز 2٪ (صب سابقا وسمح لتتصلب) على ورقة الرسم البياني مع شبكة 0.2 2 سم. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد عدد من خطوط الشبكة عبرت في 1 دقيقة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كذلك من وعاء زجاجي يحتوي على تشريح عجينة الخميرة تمييع الحل. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد تقلصات التمعج (الأمامي الكامل لحركة الخلفي = 1 تقلص) في دقيقة واحدة مع مراعاة تشريح تحت المجهر. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر حتى يتم احتساب الأرقام المرجوة من اليرقات. </li></ol> باء سريع متكررة انجذاب بالجاذبية السلبية (RING) البروتوكول وكان دي أصلا هذا الاختبارscribed بواسطة جارجانو وآخرون 5. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع ظهرت حديثا الذباب الذكور البالغين تحت تخدير خفيف CO 2 ومكان في المواد الغذائية التي تحتوي على قنينة معيار (أو الغذاء + المخدرات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الذباب في درجة حرارة الغرفة (على رأس مقاعد البدلاء. ~ 22 درجة مئوية) لمدة 2-3 أيام للسماح للانتعاش من CO 2 (وتراكم مستويات الدواء الحالة المستقرة إذا كان ذلك مناسبا). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل حوالي 25 الذباب دون التخدير إلى قارورة البوليسترين المعدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع قارورة مع الذباب في جهاز RING (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للذباب حتى يتأقلم مع البيئة، دون عائق، لمدة 15-20 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلال هذه الكاميرا الرقمية مكان وقت ~ 1 متر أمام جهاز (على منصة وإذا كان ذلك ضروريا لتحقيق المواءمة بين مركز العدسة في منتصف ارتفاع من قوارير)، تركيز وتكبير الكاميرا على الجهاز، وتحديد توقيت ل 3.0 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأخذ بعناية عقد لجهاز خاتم مع يدك اليسرى، حتى لا حيURB الذباب، واجراء موقت مع يدك اليمنى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستفادة بشكل كبير من جهاز إلى أسفل على السطح من على مقاعد البدلاء ثلاث مرات، وضمان أن الحنفية ما يكفي من الصعب أن نهدم جميع الذباب على الجزء السفلي من قنينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بالتزامن مع الانتهاء من الصنبور الثالث، يبدأ العد التنازلي 3 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في ثلاث ثوان التقاط صورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعادة تعيين مؤقت لمدة 1 دقيقة وتبدأ. خلال هذا الوقت إعادة كاميرا، والتركيز على الجهاز، ووضع قناة أخرى من الموقت لمدة ثلاث ثوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 1 دقيقة، كرر الخطوات من 1،7-1،10 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد ما مجموعه 5-6 المحاكمات، وتحميل الصور على جهاز كمبيوتر واستخدام المشاهد المفضلة لديك صورة لفتح، ويسجل ارتفاع متوسط ​​قفز عن كل قارورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحليل احصائى على مجموعات مختلفة الخاص مقارنة ارتفاع متوسط ​​ارتفع. </li></ol> جيم تودد والفحص التزاوج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أول شيء في الصباح، واضح تماما المنتجة للزجاجات FLIلاستخدامها وفاق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على مدار اليوم (كل 3-4 ساعات)، وجمع ظهرت حديثا من الذكور والإناث ساذج عن طريق الاتصال الجنسي: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الذكور على حدة في قوارير أو أنابيب مع المتوسط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 5-6 تضع الإناث معا في قارورة / أنبوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الذباب التي تم جمعها في 25 درجة مئوية تحت ضوء الموارد البشرية 12 / مظلم لمدة 5 أيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل امرأة واحدة في غرفة من عجلة التزاوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل واحد من الذكور في غرفة عجلة التزاوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الزوج تحت المجهر لتشريح المشكلات التالية: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توجه (وبتوجيه من الذكور نحو الإناث) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التنصت (من الذكور والإناث الصنابير) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجناح أغنية (من الذكور ويهتز يمتد جناح واحد) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعق (ويلعق من الذكور والإناث الأعضاء التناسلية) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الشباك (الذكر تجعيد الشعر البطن بموجب نفسه) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> محاولة الجماع (الشباك النشاط أثناء محاولة تحميل والإناث) </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة لمدة 10 دقائق أو حتى الجماع ناجحة، مشيرا الى ان الوقت الذي كل السلوك (كمون)، وإجمالي الوقت تشارك في المغازلة حتى الجماع (لحساب مؤشر المغازلة)، فضلا عن عدد من أزواج التي تؤدي بنجاح سلوك معين ( تردد). وسوف 100٪ من أزواج نوع البرية تتزاوج عادة في غضون 5 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب أمضى مؤشر المغازلة (CI) من خلال تقسيم الوقت في التودد مقسوما على مجموع الوقت حتى الجماع. لأزواج النوع البري هذا يتراوح عادة بين 0،6-0،8. </li></ol> D. الممثل النتائج الزحف مقايسة وطبيعي يرقة نوع البرية يهيمون على وجوههم ~ 3 سم / دقيقة، ومعرض ~ 40-50 تقلصات جدار الجسم في دقيقة واحدة. وقد وضعنا مؤخرا نموذجا ذبابة الفاكهة من التصلب الفتح / TLS ذات الصلة الجانبي الذي يظهر اليرقات عيب الزحف، عمر مخفضة والكبار التسلق ضعف 6. نحن استهدفت التعبير سأداء و نوع البرية وأشكال متحولة من الفتح / TLS إلى الخلايا العصبية الحركية (OK-371-gal4 سائق) وفحص الزحف اليرقات. كما هو مبين أدناه، البرية يرقات نوع الزحف تصل إلى 12 سم، في حين أن التعبير عن الفتح نوع البرية انخفضت قدرة اليرقات الزحف إلى ما يقرب من 6 سم. الحيوانات معربا عن R521C تحور المرض تسبب في الفتح / TLS يبرهن على وجود ضعف شديد جدا في حركة الزحف على (الشكل 1)، والزحف نحو 1 سم فقط / دقيقة. سلبي فحص انجذاب بالجاذبية RING وينبغي أن الذباب الشباب البالغين من النوع البري لديها ارتفاع متوسط ​​التسلق من 4-5 سم ~ في فترة زمنية 3-2 (يمكن تعديلها في وقت من 3 ثوان لاستيعاب سلالات مختلفة أو مستويات النشاط لتحديد ارتفاع متوسط ​​نظرا لمعطى توتر / العلاج). يتم تعيين الذباب التي لا تزال في اسفل قيمة 0. لا ينصح باستخدام أكثر من 25 الذباب في قارورة لأنه عندئذ يصبح من الصعب تحديد موقع كل فرد ذبابة لقياس الارتفاع. N<html> وقد لوحظ س الحساسية في ما يصل الى 6 محاكمات متتالية متباعدة 1 دقيقة باستثناء أننا قد استخدمت. فمن الأهمية بمكان ليس لإعادة استخدام قوارير اختبار البوليسترين في هذا الاختبار بعد غروب الأولي للبيانات يتم جمعها بسبب الذباب الجديدة التي وضعت في قارورة استخدمت لن يصعد الى حد ذاته كما هو الحال في قوارير جديدة. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3795/3795fig1.jpg" /> الشكل 1. الإعداد لفحص RING. يتم وضع كاميرا رقمية ~ 1 متر في الجبهة من الأجهزة التي تحتوي على الذباب في قوارير البولي ستايرين، والتركيز، والتكبير الكاميرا على الجهاز، وتحديد توقيت إلى 3.0 ثانية. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3795/3795fig2.jpg" /> بيانات الممثل الشكل 2. من فحص الزحف يرقات الذباب باستخدام تعبير ectopically UAS-WT الفتح، وUAS-FUS R521C تحت سيطرة سائق الخلايا العصبية الحركية (OK371-gal4). الطبقة = &quot;jove_content&quot;&gt;

<ol>
	<li>Pandey, U. B., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+disease+models+in+Drosophila+melanogaster+and+the+role+of+the+fly+in+therapeutic+drug+discovery.">Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in therapeutic drug discovery.</a> Pharmacol. Rev. 63 (2), 411-436 (2011).</li><li>Feany, M. B., Bender, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila+model+of+Parkinson's+disease.">A Drosophila model of Parkinson's disease.</a> Nature Mar. 23 (6776), 394-398 (2000).</li><li>Auluck, P. K., Bonini, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+prevention+of+Parkinson+disease+in+Drosophila.">Pharmacological prevention of Parkinson disease in Drosophila.</a> Nat. Med. 8 (11), 1185-1186 (2000).</li><li>Whitworth, A. J., Theodore, D. A., Greene, J. C., Benes, H., Wes, P. D., Pallanck, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+glutathione+Stransferase+activity+rescues+dopaminergic+neuron+loss+in+a+Drosophila+model+of+Parkinson's+disease.">Increased glutathione Stransferase activity rescues dopaminergic neuron loss in a Drosophila model of Parkinson's disease.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102 (22), 8024-8029 (2005).</li><li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+iterative+negative+geotaxis+(RING):+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila.">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp. Gerontol. 40 (5), 386-395 (2005).</li><li>Lanson, N. A., Maltare, A., King, H., Smith, R., Kim, J. H., Taylor, J. P., Lloyd, T. E., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila+model+of+FUS-related+neurodegeneration+reveals+genetic+interaction+between+FUS+and+TDP-43.">A Drosophila model of FUS-related neurodegeneration reveals genetic interaction between FUS and TDP-43.</a> Hum. Mol. Genet. 20 (13), 2510-2523 (2011).</li><li>Batlevi, Y., Martin, D. N., Pandey, U. B., Simon, C. R., Powers, C. M., Taylor, J. P., Baehrecke, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynein+light+chain+1+is+required+for+autophagy,+protein+clearance,+and+cell+death+in+Drosophila.">Dynein light chain 1 is required for autophagy, protein clearance, and cell death in Drosophila.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107 (2), 742-747 (2010).</li><li>Sang, T. K., Chang, H. Y., Lawless, G. M., Ratnaparkhi, A., Mee, L., Ackerson, L. C., Maidment, N. T., Krantz, D. E., Jackson, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila+model+of+mutant+human+parkin-induced+toxicity+demonstrates+selective+loss+of+dopaminergic+neurons+and+dependence+on+cellular+dopamine.">A Drosophila model of mutant human parkin-induced toxicity demonstrates selective loss of dopaminergic neurons and dependence on cellular dopamine.</a> J. Neurosci. 27 (5), 981-992 (2007).</li><li>Stacey, S. M., Muraro, N. I., Peco, E., Labb&#233;, A., Thomas, G. B., Baines, R. A., van Meyel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+glial+glutamate+transporter+Eaat1+is+regulated+by+fringe-mediated+notch+signaling+and+is+essential+for+larval+locomotion.">Drosophila glial glutamate transporter Eaat1 is regulated by fringe-mediated notch signaling and is essential for larval locomotion.</a> J. Neurosci. 30 (43), 14446-14457 (2010).</li><li>Repnikova, E., Koles, K., Nakamura, M., Pitts, J., Li, H., Ambavane, A., Zoran, M. J., Panin, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sialyltransferase+regulates+nervous+system+function+in+Drosophila.">Sialyltransferase regulates nervous system function in Drosophila.</a> J. Neurosci. 30 (18), 6466-6476 (2010).</li><li>Repnikova, E., Koles, K., Nakamura, M., Pitts, J., Li, H., Ambavane, A., Zoran, M. J., Panin, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sialyltransferase+regulates+nervous+system+function+in+Drosophila.">Sialyltransferase regulates nervous system function in Drosophila.</a> J. Neurosci. 30 (18), 6466-6476 (2010).</li><li>Nedelsky, N. B., Pennuto, M., Smith, R. B., Palazzolo, I., Moore, J., Nie, Z., Neale, G., Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Native+functions+of+the+androgen+receptor+are+essential+to+pathogenesis+in+a+Drosophila+model+of+spinobulbar+muscular+atrophy.">Native functions of the androgen receptor are essential to pathogenesis in a Drosophila model of spinobulbar muscular atrophy.</a> Neuron. 67 (6), 936-952 (2010).</li><li>Lorenzo, D. N., Li, M. G., Mische, S. E., Armbrust, K. R., Ranum, L. P., Hays, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrin+mutations+that+cause+spinocerebellar+ataxia+type+5+impair+axonal+transport+and+induce+neurodegeneration+in+Drosophila.">Spectrin mutations that cause spinocerebellar ataxia type 5 impair axonal transport and induce neurodegeneration in Drosophila.</a> J. Cell Biol. 189 (1), 143-158 (2010).</li><li>Wang, J. W., Brent, J. R., Tomlinson, A., Shneider, N. A., McCabe, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ALS-associated+proteins+FUS+and+TDP-43+function+together+to+affect+Drosophila+locomotion+and+life+span.">The ALS-associated proteins FUS and TDP-43 function together to affect Drosophila locomotion and life span.</a> J. Clin. Invest. , (2011).</li><li>Choi, J. K., Jeon, Y. C., Lee, D. W., Oh, J. M., Lee, H. P., Jeong, B. H., Carp, R. I., Koh, Y. H., Kim, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila+model+of+GSS+syndrome+suggests+defects+in+active+zones+are+responsible+for+pathogenesis+of+GSS+syndrome.">A Drosophila model of GSS syndrome suggests defects in active zones are responsible for pathogenesis of GSS syndrome.</a> Hum. Mol. Genet. 19 (22), 4474-4489 (2010).</li><li>Ruan, H., Wu, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+interaction-mediated+lifespan+extension+of+Drosophila+Cu/Zn+superoxide+dismutase+mutants.">Social interaction-mediated lifespan extension of Drosophila Cu/Zn superoxide dismutase mutants.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (21), (2008).</li><li>Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+video+tracking+of+locomotion+in+adult+Drosophila+melanogaster.">High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster.</a> J. Vis. Exp. (24), (2009).</li><li>Becnel, J., Johnson, O., Luo, J., N&#228;ssel, D. R., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+serotonin+5-HT7+Dro+receptor+is+expressed+in+the+brain+of+Drosophila,+and+is+essential+for+normal+courtship+and+mating.">The serotonin 5-HT7 Dro receptor is expressed in the brain of Drosophila, and is essential for normal courtship and mating.</a> PLoS One. 6 (6), e20800 (2011).</li><li>Johnson, O., Becnel, J., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serotonin+5-HT(2)+and+5-HT(1A)-like+receptors+differentially+modulate+aggressive+behaviors+in+Drosophila+melanoga-+ster.">Serotonin 5-HT(2) and 5-HT(1A)-like receptors differentially modulate aggressive behaviors in Drosophila melanoga- ster.</a> Neuroscience. 158 (2), 1292-1300 (2009).</li><li>Bastock, M., Manning, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Courtship+of+Drosophila+Melanogaster.">The Courtship of Drosophila Melanogaster.</a> Behaviour. , 85-111 (1955).</li><li>Greenspan, R. J., Ferveur, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Courtship+in+Drosophila.">Courtship in Drosophila.</a> Annu. Rev. Genet. 34, 205-232 (2000).</li><li>Villella, A., Hall, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenetics+of+courtship+and+mating+in+Drosophila.">Neurogenetics of courtship and mating in Drosophila.</a> Adv. Genet. 62, 67-184 (2008).</li></ol>

ليس لدينا ما يكشف.

وينظم بإحكام ذبابة الفاكهة السلوك بعوامل وراثية وبيئية. لقد كنا، وغيرها، وسبق للفحوصات وصفها هنا لجمع البيانات لدراسة الجينات المرتبطة بالطيران السلوكيات وأمراض الاعصاب على غرار الإنسان في ذبابة الفاكهة 5-19. لفحص الزحف، واختيار دقيق من 3 يرقات العمر ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> سكر القصب </td><td> فيشر العلمية </td><td> S5-500 </td></tr><tr><td> الاغاروز </td><td> إينفيتروجن </td><td> 16500-500 </td></tr><tr><td> 6 زجاجة أوقية ذبابة الفاكهة </td><td> جينيسي العلمية </td><td> 32-130 </td></tr><tr><td> فرشاة الدهان (# 1) </td><td> تيد بيلا، شركة </td><td> 11859 </td></tr><tr><td> يطير المكونات الغذائية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> دقيق الذرة </td><td> فيشر العلمية </td><td> NC9109741 </td></tr><tr><td> أجار </td><td> جينيسي العلمية </td><td> 66-104 </td></tr><tr><td> دبس السكر </td><td> فيشر العلمية </td><td> NC9349176 </td></tr><tr><td> حامض البروبيونيك </td><td> Acros </td><td> 14930-0010 </td></tr><tr><td> Tegosept </td><td> قمة </td><td> 20-258 </td></tr><tr><td> الإيثانول </td><td> الصيادعلمي </td><td> BP2818-4 </td></tr><tr><td> خميرة </td><td> جينيسي العلمية </td><td> 62-107 </td></tr></tbody></table>

methods to assay drosophila behavior

وقد استخدمت ذبابة الفاكهة السوداء البطن، ذبابة الفاكهة، لدراسة الآليات الجزيئية لمجموعة واسعة من الأمراض التي تصيب الإنسان مثل السرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض العصبية المختلفة 1. وقد الأمثل نحن المقايسات سلوكية بسيطة وقوية لتحديد تنقل اليرقات، البالغ قدرة تسلق (فحص RING)، والسلوكيات التودد من ذبابة الفاكهة. هذه المقايسات سلوكية قابلة للتطبيق على نطاق واسع لدراسة دور العوامل الوراثية والبيئية على سلوك الذباب. ويمكن استخدام اليرقات القدرة الزحف موثوق بها لتحديد التغيرات في مرحلة مبكرة قدرات الزحف من يرقات ذبابة الفاكهة، وأيضا لدراسة تأثير الأدوية أو الجينات الأمراض التي تصيب البشر (في الذباب المعدلة وراثيا) في تحرك لهم. الفحص الزحف اليرقات ويصبح أكثر قابلية للتطبيق في حالة التعبير أو إلغاء الجين يسبب الفتك في مراحل العذراء أو الكبار، حيث أن هذه الذباب لا البقاء على قيد الحياة إلى سن البلوغ حيث أنها على خلاف ذلك يمكن تقييم. هذا الأساسية 1ويمكن أيضا ssay استخدامها جنبا إلى جنب مع الضوء الساطع أو الضغط لدراسة الاستجابات السلوكية إضافية في يرقات ذبابة الفاكهة. وقد المغازلة على نطاق واسع للتحقيق في الأساس الجيني للسلوك الجنسي، ويمكن أن تستخدم أيضا لدراسة نشاط والتنسيق، فضلا عن التعلم والذاكرة. ذبابة الفاكهة المغازلة ينطوي على تبادل للتنمية مداركه الحسية المختلفة بما في ذلك البصرية والسمعية، وإشارات حسي كيميائي بين الذكور والإناث التي تؤدي إلى سلسلة معقدة من التصرفات الحركية تتميز بشكل جيد وبلغت ذروتها في جماع ناجح. المقايسات الكبار التقليدية التسلق (انجذاب بالجاذبية السلبية) هي شاقة، تتطلب عمالة مكثفة، وتستغرق وقتا طويلا، مع تفاوت كبير بين التجارب المختلفة 2-4. السريع تكرارية انجذاب بالجاذبية السلبية (RING) فحص 5 مزايا كثيرة اكثر من البروتوكولات المستخدمة على نطاق واسع أكثر، وتوفير نهج الإنتاجية استنساخه، الحساسة، وارتفاع لتحديد الحركي الكبار والسلبية ب انجذاب بالجاذبيةehaviors. في مقايسة RING، ويمكن اختبار المورثات أو عدة أدوية في وقت واحد باستخدام عدد كبير من الحيوانات، مع اقتراب عالية الإنتاجية مما يجعلها أكثر قابلية للتجارب الفرز.

Watch this Scientific Journal Video about Methods to Assay Drosophila Behavior at JoVE.com

Methods to Assay Drosophila Behavior

ذبابة الفاكهة السوداء البطن هو وراثيا وسلوكيا نظام نموذج قابل للطرق التي استخدمت لفهم الأساس الجزيئي والخلوي من العديد من العمليات البيولوجية الهامة لأكثر من قرن 1. ذبابة الفاكهة قد تم استغلالها بشكل جيد للحصول على نظرة ثاقبة الأساس الجيني للسلوك الذباب.

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Methods to Assay Drosophila Behavior

42.8K Views.  Louisiana State University Health Sciences Center. ذبابة الفاكهة السوداء البطن هو وراثيا وسلوكيا نظام نموذج قابل للطرق التي استخدمت لفهم الأساس الجزيئي والخلوي من العديد من العمليات البيولوجية الهامة لأكثر من قرن 1. ذبابة الفاكهة قد تم استغلالها بشكل جيد للحصول على نظرة ثاقبة الأساس الجيني للسل?...

Video: Methods to Assay Drosophila Behavior

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults

Drosophila melanogaster is a very powerful model in biological research, but a bad model for photography or videography. This paper describes a simple but effective method to observe and document the behavior or morphology of flies. Flies were placed in a translucent observation chamber c.a. &#216;15 x 5mm (no food inside) or &#216;15 x 12 mm (with an 8 mm-high piece of food inside). After covering with an ultraviolet (UV)/clear filter with high light transmittance, the chamber was placed under a 5-50x zoom stereo microscope, and mini light-emitting diode (LED) video lights were placed on both sides of the microscope to illuminate the chamber to obtain uniform, soft, bright, and nearly shadow-free light. Then, a compact digital camera with 3-5x optical zoom, which can record 1080 P high-definition or higher resolution video (at a frame rate of &#8805;30 fps), was connected to the eyepiece of microscope through a bracket, and photographs or videos were taken through the eyepiece. By adjusting the zoom knob of the zoom stereo microscope, it was very easy to track the flies and take panoramic or detailed close-up images as needed, while the camera recorded everything under the microscope. Because the flies can stay at any position in the chamber, they can be observed and recorded from all directions. The photographs or videos taken are of good image quality. This method can be used both for scientific research and teaching.

An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults

This protocol describes how to make a simple adult Drosophila behavior observation chamber, and how to take high-definition photographs/videos of the morphology or behavior of different types of fruit flies in the observation chamber through relatively simple and affordable methods.

نظام تصوير عالي الوضوح قابل للتعديل للدراسات السلوكية للبالغين Drosophila

Drosophila melanogaster is a very powerful model in biological research, but a bad model for photography or videography. This paper describes a simple but ...

Behavior

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

تحديد العفوي الحركي آخر في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and diverse behavioral features. Identifying behavioral deficiency in animal models is a crucial measure of disease severity, for example, in neurodegenerative diseases where patients often experience impairments in motor function. However, with the availability of various systems to track and assess motor deficits in fly models, such as drug-treated or transgenic individuals, an economical and user-friendly system for precise evaluation from multiple angles is still lacking. A method based on the AnimalTracker application programming interface (API) is developed here, which is compatible with the Fiji image processing program, to systematically evaluate the movement activities of both adult and larval individuals from recorded video, thus allowing for the analysis of their tracking behavior. This method requires only a high-definition camera and a computer peripheral hardware integration to record and analyze behavior, making it an affordable and effective approach for screening fly models with transgenic or environmental behavioral deficiencies. Examples of behavioral tests using pharmacologically treated flies are given to show how the techniques can detect behavioral changes in both adult flies and larvae in a highly repeatable manner.

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

The present protocol assesses the locomotor activity of Drosophila by tracking and analyzing the movement of flies in a hand-made arena using open-source software Fiji, compatible with plugins to segment pixels of each frame based on high-definition video recording to calculate parameters of speed, distance, etc.

تقنية بسيطة لفحص النشاط الحركي في ذبابة الفاكهة

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an excellent model system for such investigations due to its complex behaviors, powerful genetic techniques, and compact nervous system. Laboratory behavioral assays have long been used with Drosophila to simulate properties of the natural environment and study the neural mechanisms underlying the corresponding behaviors (e.g. phototaxis, chemotaxis, sensory learning and memory)1-3. With the recent availability of large collections of transgenic Drosophila lines that label specific neural subsets, behavioral assays have taken on a prominent role to link neurons with behaviors4-11. Versatile and reproducible paradigms, together with the underlying computational routines for data analysis, are indispensable for rapid tests of candidate fly lines with various genotypes. Particularly useful are setups that are flexible in the number of animals tested, duration of experiments and nature of presented stimuli. The assay of choice should also generate reproducible data that is easy to acquire and analyze. Here, we present a detailed description of a system and protocol for assaying behavioral responses of Drosophila flies in a large four-field arena. The setup is used here to assay responses of flies to a single olfactory stimulus; however, the same setup may be modified to test multiple olfactory, visual or optogenetic stimuli, or a combination of these. The olfactometer setup records the activity of fly populations responding to odors, and computational analytical methods are applied to quantify fly behaviors. The collected data are analyzed to get a quick read-out of an experimental run, which is essential for efficient data collection and the optimization of experimental conditions.

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

السلوكيات حاسة الشم يعاير التي تتبع الكمبيوتر<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; في Olfactometer أربعة رباعي

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a considerable amount of information has been generated regarding ORN responses to odorants, the role of specific ORNs in driving behavioral responses remains poorly understood. Complications in behavior analyses arise due to different volatilities of odorants that activate individual ORNs, multiple ORNs activated by single odorants, and the difficulty in replicating naturally observed temporal variations in olfactory stimuli using conventional odor-delivery methods in the laboratory. Here, we describe a protocol that analyzes Drosophila larval behavior in response to simultaneous optogenetic stimulation of its ORNs. The optogenetic technology used here allows for specificity of ORN activation and precise control of temporal patterns of ORN activation. Corresponding larval movement is tracked, digitally recorded, and analyzed using custom written software. By replacing odor stimuli with light stimuli, this method allows for a more precise control of individual ORN activation in order to study its impact on larval behavior. Our method could be further extended to study the impact of second-order projection neurons (PNs) as well as local neurons (LNs) on larval behavior. This method will thus enable a comprehensive dissection of olfactory circuit function and complement studies on how olfactory neuron activities translate in to behavior responses.

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

This protocol analyzes navigational behavior of Drosophila larva in response to simultaneous optogenetic stimulation of its olfactory neurons. Light of 630 nm wavelength is used to activate individual olfactory neurons expressing a red-shifted channel rhodopsin. Larval movement is simultaneously tracked, digitally recorded, and analyzed using custom-written software.

تتبع السلوك المورفولوجية اليرقات في الاستجابة للتحفيز أوبتوجينيتيك الخلايا العصبية حاسة الشم

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an oil-coated graduated cylinder; landing height provided a measure of flight performance by assessing how far flies will fall before producing enough thrust to make contact with the wall of the cylinder. Here we describe an updated version of the flight tester with four major improvements. First, we added a &#34;drop tube&#34; to ensure that all flies enter the flight cylinder at a similar velocity between trials, eliminating variability between users. Second, we replaced the oil coating with removable plastic sheets coated in Tangle-Trap, an adhesive designed to capture live insects. Third, we use a longer cylinder to enable more accurate discrimination of flight ability. Fourth we use a digital camera and imaging software to automate the scoring of flight performance. These improvements allow for the rapid, quantitative assessment of flight behavior, useful for large datasets and large-scale genetic screens.

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Here we describe a method for rapid and accurate measurement of flight performance in Drosophila, enabling high-throughput screening.

لتحسين طريقة لقياس دقة وسرعة الأداء في الطيران<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Biology

ذبابة الفاكهة نماذج للسمات الوراثية والسلوكية لاضطراب طيف التوحد

Paradigms for Behavioral Assessment in Drosophila Model of Autism Spectrum Disorder

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in social interaction and ability for communication, enhanced restricted or repetitive behaviors, and also, in some cases, learning disability and motor deficit. Drosophila has served as an unparalleled model organism for modeling a great number of human diseases. As many genes have been implicated in ASD, fruit flies have emerged as a powerful and efficient way to test the genes putatively involved with the disorder. As hundreds of genes, with varied functional roles, are implicated in ASD, a single genetic fly model of ASD is unfeasible; instead, individual genetic mutants, gene knockdowns, or overexpression-based studies of the fly homologs of ASD-associated genes are the common means for gaining insight regarding molecular pathways underlying these gene products. A host of behavioral techniques are available in Drosophila which provide easy readout of deficits in specific behavioral components. Social space assay and aggression and courtship assays in flies have been shown to be useful in assessing defects in social interaction or communication. Grooming behavior in flies is an excellent readout of repetitive behavior. Habituation assay is used in flies to estimate the ability for habituation learning, which is found to be affected in some ASD patients. A combination of these behavioral paradigms can be utilized to make a thorough assessment of the human ASD-like disease state in flies. Using Fmr1 mutant flies, recapitulating Fragile-X syndrome in humans, and POGZ-homolog row knockdown in fly neurons, we have shown quantifiable deficits in social spacing, aggression, courtship behavior, grooming behavior, and habituation. These behavioral paradigms are demonstrated here in their simplest and straightforward forms with an assumption that it would facilitate their widespread use for research on ASD and other neurodevelopmental disorders in fly models.

تسليط الضوء على المؤلف: استكشاف أعراض اضطراب طيف التوحد في ذباب الفاكهة - النماذج الجينية والاختبارات السلوكية

Autism Spectrum Disorder (ASD) is associated with impaired social and communicative behavior and the emergence of repetitive behavior. For studying the interrelation between ASD genes and behavioral deficits in the Drosophila model, five behavioral paradigms are described in this paper for assaying social spacing, aggression, courtship, grooming, and habituation behavior.

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in ...

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في

نظام تصوير عالي الوضوح قابل للتعديل للدراسات السلوكية للبالغين Drosophila

تحديد العفوي الحركي آخر في

تقنية بسيطة لفحص النشاط الحركي في ذبابة الفاكهة

السلوكيات حاسة الشم يعاير التي تتبع الكمبيوتر

تتبع السلوك المورفولوجية اليرقات في الاستجابة للتحفيز أوبتوجينيتيك الخلايا العصبية حاسة الشم

لتحسين طريقة لقياس دقة وسرعة الأداء في الطيران

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد