Name: intrauterine telemetry to measure mouse contractile pressure in vivo
Uploaded: 2015-04-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo at JoVE.com

This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.

NOT: Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından belirlenen hayvanların bakımı ve kullanımı için kurallar uyulması Tüm hayvan prosedürleri. Tüm protokoller St. Louis Washington Üniversitesi Hayvan Çalışmaları Komitesi tarafından kabul edildi. NOT: Bu protokol için özel malzemeler ve ekipmanlar Malzemeleri ve Ekipmanları tablo listelenir. Kadın Fareler 1. Zamanlı Yetiştiriciliği <ol><li> Erkeklerde 2 saat zaman penceresinde yaş iki ile altı ay arasında yetişkin kadın Breed. Onlar deney bütünlüğü için tutarlı tutulur gibi belirli üreme saat sürece gerekli değildir. </li><li> Bir çiftleşme fiş varlığı ile gebelik onaylayın. Fiş ilk gün sonrası cinsel birleşme 0 (dpc0) olarak görülen hangi gün ve saat belirleyin. Basınç kayıt başlatırken belirli saat unutmayın. </li><li> Dpc8-13 üzerine ameliyatları gerçekleştirmek. Kesin DPC fare suşu bağlıdır. </li><li> Bir fare cerrahisi, pe önce hamile olup olmadığını belirlemek içinanestezi uygulanmadan önce bir görüntüleme sistemine bağlanmış bir 40 MHz lineer dizi probu ile karın rform ultrason görüntüleme. Bu gebelik kesesi görselleştirme sağlayacaktır. Bir ultrason sistemi mevcut değilse, fare ağırlığını kullanın. NOT: dpc0 ve dpc8 ve karın şişkinlik arasında en az 2 g kilo gebelik iyi bir göstergedir. </li></ol> 2. Telemetri Cerrahi Hazırlık <ol><li> Ameliyat öncesi 24 saat içinde aletleri, gazlı bez, pamuk bezlerden, cerrahi örtüler ve pipet uçları sterilize etmek için bir otoklav kullanın. </li><li> % 70 etanol ile temizleyin cerrahi yüzeyi. </li><li> (Kemirgenler için özel) ısıtma yastığı ve boncuk sterilizatör açın. </li></ol> 3. Telemetri Cerrahi <ol><li> Anestezi için 1-2 litre / dakika arasında bir oksijen akış hızı ile% 4-5 izofluran kullanın. </li><li> Fare anesthetization belirtileri gösterir kadar bekleyin ve ardından buprenorfinle subkutan enjekte (analjezik: 20 g başına 0.1 ml). </li><li> Mesane aşağı kaburgaların altından fare karın Tıraş. </li><li> Önceden ısıtılmış ısıtma yastığı ameliyat masasına fareyi getirin ve kurumasını önlemek için oftalmik merhem ile farenin gözleri kapsayacak. </li><li> Steril teknik başlayın. Steril eldiven giyin ve iyot ve etanol scrubs yerleştirmek için hangi steril bir yüzey olarak sarıcı tutun. </li><li> Paket veya tuzlu gelen telemeter çıkarın ve steril gazlı bez üzerine yerleştirmek için steril forseps kullanabilir. <ol><li> Jel ile kateter ucu doldurmak için (telemetre tedarikçi tarafından sağlanan) şırınga kullanın. Yavaşça kateter içine jel çizmek için yeterli negatif basınç yaratarak kateteri sıkmak. </li></ol></li><li> Pipet üzerinde steril bir ucu yerleştirin. Pipet 2 cerrahi tutkal ul ve steril bir yüzey üzerinde pipet ayarlayın. </li><li> Iyot ve daha sonra% 70 etanol ile bölgeyi çubukla, cerrahi siteyi temizlemek için. </li><li> Sadece yeterince büyük cerrahi drape bir delikfare üzerinde kesi ve yer gerekli alan için. </li><li> Fare tamamen bir kesi yapmadan önce anestezi sağlamak için bir ayak tutam (pedal tepkisi) gerçekleştirin. </li><li> Küçük bir dikey orta hat kesi olun. Sonraki, altta yatan vücut duvarı kas yoluyla benzer bir kesi yapmak. </li><li> Yavaşça vücut boşluğuna dışarı rahim çekin ve yaşayabilir En yavrular içeren uterin boynuz bulun. <ol><li> İsteğe bağlı - miRNA ilave edildiğinde, telemeter yerleştirilmesinden önce uterusun kas tabakası viral vektör enjekte edilir. </li></ol></li><li> 3 mm kenar yaylı makas kesim ile uterin boynuz ucunda küçük bir kesi yapmak. </li><li> Rahim duvarı ve fetal keseler arasında, sıkma yapmadan, kateter geçirin. Kazara kaldırılmasını azaltmak için çeşitli keseler geçmiş kateter yerleştirin. Fetal keseler ekleme rahatsız olmadığından emin olun. </li><li> U kateteri uymak için telemetre ekleme sitesine cerrahi tutkal PipetTerine boynuz uterin boynuz dışına kaymasını önlemek ve kateter. Sert olmak tutkal için birkaç saniye bekleyin ve sonra dikkatlice vücut boşluğunun içine rahim geri yerleştirin. </li><li> Kateter giriş yeri karşı tarafındaki vücut boşluğunda telemeter yerleştirin. </li><li> 6.0 emilebilir dikişlerle kapatılır vücut boşluğuna dikin. İlk olarak, bir çanta dikiş ve daha sonra 3-4 ayrı dikiş yapmak. </li><li> Aynı tekniği kullanarak cilt sütür, ancak 6-0 emilmeyen sütür ile. </li><li> Sürüntü dibukain (topikal analjezik) kesi sitesi üzerinden merhem. </li><li> Hayvan rehydrate yardımcı olmak için steril serum fizyolojik subkutan 0.3-0.4 ml enjekte edilir. </li><li> Tamamen uyanık olduğu kadar ameliyat sonrası hayvan izleyin. Serbestçe gibi yatak belirli türleri ağır anestezi fare boğmak olabilir yukarıdaki tabloya başını tutmak mümkün kadar geri kafes içinde fare koymayın. 30-45 dakika süre ile anestezi edilmiş bir fare, bir inci beklemek gerekirE fare 1 saat ve 15 dakika ile tamamen uyanık olmak. </li><li> Ek cerrahisine ise,% 70 etanol ve boncuk tekrar kullanmadan önce sterilize ile aletleri silin. </li></ol> 4. Post-cerrahi Kurtarma <ol><li> Bir günlüğüne günlük cerrahi sonrası ilerlemeyi izleyin. Kilo alımı ve kaybı Katalog ve uyuşukluk, kanama, veya cerrahi kesi eksik kapatılması izlemek. <ol><li> Fare yumuşatılmış fare yemi (~ elma tutarlılığı) veya özel kurtarma diyet gıda besleyin. </li><li> Sütür inceleyin ve onlar çıkardı olmadığından emin olun, ama aşırı fare işlemek için değil deneyin. </li></ol></li></ol> 5. Telemetri Kayıt <ol><li> (Fare cerrahiden iyileşen en az 2-3 gün sonra), ilgi gününde, telemeter açmak için fare yakın bir mıknatıs yerleştirin. Alıcı fare kafesi koyun. telemetre devreye sokulmuş ise alıcı ışık açılmalıdır. </li><li> Yepyeni Teleme kalibre<html> Üretici özel kalibrasyon ile ters sağladı. Yeniden kullanılan telemetre kalibrasyon özellikleri yazılım tutulacaktır. </li><li> Yazılım içinde, &quot;hayvan&quot; üzerine sağ tıklayarak kayıt başlatmak ve &quot;start örnekleme, sürekli,&quot; 500 Hz hızlarında örnekleme sağlar tıklayın. Yazılım kurtarmak VE izlemek için ayarlanmış olduğundan emin olun. NOT: Örnekleme fare simgesi yeşil yandığı zaman, baskılar kayıt altına alınmaktadır. Doğum sırasında fareyi rahatsız kesmek veya emek değiştirmek, böylece dikkatli gözlemleyebilirsiniz. </li><li> Ilgi teslim veya süre sonra, &quot;hayvan&quot; sağ tıklayarak kayıt ve &quot;tüm kayıtları durdurma&quot; seçerek dur. Telemetre pil genellikle sadece sürekli kayıt 1.5 ay sürecek gibi, pil ömründen tasarruf için telemetre kapatmak için bir mıknatıs kullanın. </li><li> CO 2 doz aşımı ile fare Euthanize ve telemetre kurtarmak. Yavrular dekapitasyon tarafından ötenazi. </li></ol>tle &quot;&gt; 6. Telemeter Sterilizasyon <ol><li> Oda sıcaklığında deiyonize su gece boyunca% 1 enzim deterjan çözeltisi içinde uzaktan ölçüm yerleştirin. </li><li> Deiyonize su içinde telemeter durulayın ve kateter sıkmak için dikkatli olmak, tüm doku ve tutkal çıkarın. </li><li> Sterilize etmek için, oda sıcaklığında 24 saat boyunca% 2 glutaraldehid uzaktan ölçüm inkübe edin. </li><li> Steril serum fizyolojik ile uzaktan ölçüm durulayın ve bir sonraki implantasyonu kadar steril serum fizyolojik içinde saklayın veya yenilenmiş geri üreticiye gönderilecek. Doku sterilizasyon sonrası kateter içinde yer alıyorsa telemeters yenilenmiş olmalıdır. Tipik telemeters yenilenmiş gerek önce 4-5 kez kullanılabilir. </li></ol>

<ol>
	<li>Slattery, M. M., Morrison, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preterm+delivery.">Preterm delivery.</a> Lancet. 360, 1489-1497 (2002).</li><li>Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+causes+of+preterm+birth.">Epidemiology and causes of preterm birth.</a> Lancet. 371, 75-84 (2008).</li><li>Keelan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+inhibition+of+inflammatory+pathways+for+the+prevention+of+preterm+birth.">Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth.</a> Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).</li><li>Voltolini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+spontaneous+preterm+birth:+from+underlying+mechanisms+to+predictive+and+preventive+interventions.">Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions.</a> Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).</li><li>Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+parturition+biology+from+genetically+altered+mice.">Insights into parturition biology from genetically altered mice.</a> Pediatric research. 64, 581-589 (2008).</li><li>Rajakumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+HIF-1+alpha,+HIF-2+alpha,+membrane+and+soluble+VEGF+receptor-1+proteins+are+not+increased+in+normotensive+pregnancies+complicated+by+late-onset+intrauterine+growth+restriction.">Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).</li><li>Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+simultaneous+measurement+of+mouse+systolic+arterial+blood+pressure+by+radiotelemetry+and+tail-cuff+methods.+American+journal+of+physiology.">Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology.</a> Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).</li><li>Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+bilateral+pelvic+neurectomy+on+cervical+ripening+in+pregnant+rats.">The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats.</a> Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).</li><li>Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+intrauterine+pressure+by+telemetry:+a+new+approach+for+studying+parturition+in+mouse+models.">In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models.</a> Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).</li><li>Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+modulates+the+onset+of+murine+parturition+by+competing+ovarian+and+uterine+effects.">Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).</li><li>McCloskey, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inwardly+rectifying+K++channel+KIR7.1+controls+uterine+excitability+throughout+pregnancy.">The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy.</a> EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Myometrial kontraktilitenin araştırmaları kas gerginliği ex vivo ölçümleri yararlanmıştır. Bu yöntem, canlı hayvan için uygulanabilir değildir, yeni geliştirilen uterotonik ilaçların erken evre test edilmesi için yararlı olabilir. Uzunlamasına emek ilerlemesini anlamak Bununla birlikte, in vivo yaklaşımlar gereklidir. in vivo ölçümler çeşitli amaçlara hizmet. Birincisi, gebelik süresi boyunca rahimde kasılma desen değişikliklerin tam bir resim yakalama etkinleş...

Erken doğum, perinatal morbidite ve gelişmiş ülkelerde mortalitenin önde gelen nedenidir; perinatal morbidite% 50 ve perinatal mortalite 1,2% 75 sorumludur. Erken doğum yönlü ve idiyopatik olabilir. Çok araştırma kasılma bir bir sakin dokudan myometrium dönüştüren moleküler ve elektrik yollar üzerinde ortaya çıkmıştır rağmen, erken doğum kesin patofizyolojisi zor kalır. Endokrin, inflamatuar ve gen regülasyonu tüm erken doğum 3,4 bağlantılı olmuştur. Ancak, etik kaygılar insanlarda erken doğum mekanizmaları araştırma yeteneğini sınırlayabilir. Bu sınırlamalar göz önüne alındığında, birçok araştırmacı doğum fizyolojisini incelemek için bir model sistem olarak farelere döndü. Fareler kısa gebelikler yaklaşık üç hafta süren ve kolayca genetik manipüle edilebilir var. Ayrıca, çoklu genetik fare modelleri varemek 5 için gerekli olan sinyal yolları belirlemek için geliştirilmiştir. Fare ve insan doğum arasındaki temel farklılıklara rağmen, fareler ve insanlar intrauterin inflamasyon ve enfeksiyon 6 olmak üzere emek için gerekli olan aynı mekanizmaların, birçok paylaşıyoruz. Böylece, fareler rahim aktivitesini incelemek için paha biçilmez bir araç olarak hizmet vermektedir. Bugüne kadar, altın standart farelerde rahim kasılmasını ölçmek için ex vivo izometrik gerilim kayıtları olmuştur; Bununla birlikte, bu deney için bir gebelik zaman noktası ile sınırlıdır ve fizyolojik ortamından rahim çıkarılması gerekir. Bir diğer önemli faktör için bu araştırmalar için gerekli hayvan büyük bir sayıdır. Son olarak, bu yöntem emek ve erken patofizyoloji indüksiyon inceleyen uzunlamasına çalışmalar için izin vermez. Arter basıncı incelemek için kullanılan radyometrik telemetri cihazları yapılan son gelişmeler farelerde ve int 7 değiştirirsıçanlarda 8 rauterine basınç aynı teknoloji gebelik sırasında farelerde intrauterin basınç değişiklikleri incelemek için kullanılan olabilir olup olmadığı sorusunu yalvardı. İlk sorun giderme sonra, bir yöntemi başarıyla fare işgücü uyarma ve ilerlemesini ölçmek için geliştirilmiştir. Bu in vivo yaklaşımı güçlü çalışma kasılmaları gösterge yüksek basınç durumuna hareketsiz rahim düşük basınçlı durumdan geçiş ölçebilir. Bu yöntem aynı zamanda gen ifadesinin 9 fizyolojik etkisini gösteren, tehlikeye doğum ve vahşi tip fareler ile transgenik fareler arasında önemli basınç farkları tespit etmek mümkün olmuştur. Bu protokol, hamilelik sırasında fare uterus basıncı çalışma in vivo metodunda, bir gerçek zaman sağlar.

<table><tbody><tr><td>Surgical Glue</td><td>3M Vetbond</td><td>1469SB</td><td>Tissue Adhesive--stored in Drierite</td></tr><tr><td>Absorbable 6-0 Sutures</td><td>Ethicon</td><td>J212H</td><td>Vicryl</td></tr><tr><td>Non-absorbable 6-0 Sutures</td><td>Ethicon</td><td>8706H</td><td>Prolene</td></tr><tr><td>Water Jacket Blanket + Heating Pad</td><td>Gaymer</td><td>T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC</td><td>Specialized for rodents</td></tr><tr><td>Bead sterilizer</td><td>Keller</td><td>Z378577</td><td>Steri 250 Sterilizer</td></tr><tr><td>Disecting Microscope</td><td>Nikon</td><td>SMZ754</td><td>Fibre optic gooseneck external light source</td></tr><tr><td>Sterile Surgical Gloves--Latex&amp;nbsp;</td><td>Cardinal Health Triflex</td><td>2D7253</td><td></td></tr><tr><td>PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>270-0135-001</td><td>TA11PA-C10</td></tr><tr><td>Telemeter Reciever</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>272-6001-001</td><td>RPC-1</td></tr><tr><td>Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>271-0147-141</td><td>Analysis software</td></tr><tr><td>Diet Recovery Gel</td><td>Clear H2O</td><td>72-01-5022</td><td>Purified Soft Diet for Rodents</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287</td><td>Enzyme detergent</td></tr></tbody></table>

intrauterine telemetry to measure mouse contractile pressure in vivo

Moleküler ve elektrik sinyallerinin karmaşık bir entegrasyon gebeliğin sonunda bir kasılma organı içine sakin rahim dönüştürmek için gereklidir. Uterin kontraktilitenin anahtar regülatörleri bulunmuş olmasına rağmen, bu işlem hala tam olarak anlaşılmamıştır. Transgenik farelerin doğumu incelemek için ideal bir model sunmaktadır. Daha önce, fare uterus kasılmalarını incelemek için tek yöntem çeşitli nedenlerden dolayı optimal ex vivo izometrik gerilim kayıtları, oldu. rahim fizyolojik ortamından çıkarılması gerekir, soruşturmanın sınırlı bir zaman ders mümkündür, ve fareler kurban gerekir. radyometrik telemetri son gelişme farelerde in vivo uterus içi basınç uzunlamasına, gerçek zamanlı ölçümleri için izin vermektedir. Teslimat açıklanan kadar burada, intrauterin telemeter implantasyonu orta gebelik fare rahim basınç değişiklikleri ölçmek için. Basında karşılaştırarak farklılıklar tarafındanyabani tipteki ve transjenik fareleri arasındaki ures, ilgi konusu genin bir fizyolojik etki açıklanacaktır edilebilir. Bu teknik erken doğum gibi hamilelik sırasında miyometrial bozuklukların tedavisinde kullanılan tedavilerin gelişimini hızlandırmak gerekir.

In vivo intrauterin basınçları Gerçek zamanlı bir telemetrik kazanım sistemi kullanılarak kaydedilebilir. Fare eş zamanlı video kaydı ile eşleştirilmiş Basınç örnekleme her yavrunun doğum tam zamanı yakalamak ve annenin rahim içi basıncı teslim süresi ilişkilendirmek için kullanıldı. Tüm veri noktaları daha sonra bir basınç zamana karşı komplo (Şekil 1A) oluşturmak için kayıt boyunca çizilebilir. Bu arsa gebelik sırasında puan gösterdiğinde intr...

Watch this Scientific Journal Video about Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo at JoVE.com

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

Rahim içi Telemetri Fare Kontraktil Basıncını Ölçmek<em&gt; İn Vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

intrauterine-telemetry-to-measure-mouse-contractile-pressure-in-vivo

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

9.6K Görüntüleme.  Washington University in St. Louis. This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy. 

Video: Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable around embryonic day (E) 8.51. Systolic left ventricular (LV) pressure is 2 mmHg at E9.5 and 11 mmHg at E14.52. At these mid-embryonic stages, the LV is clearly visible through the chest wall for invasive pressure measurements because the ribs and skin are not fully developed. Between E14.5 and birth (approximately E21) imaging methods must be used to view the LV. After birth, mean arterial pressure increases from 30 - 70 mmHg from postnatal day (P) 2 - 353. Beyond P20, arterial pressure can be measured with solid-state catheters (i.e. Millar or Scisense). Before P20, these catheters are too big for developing mouse arteries and arterial pressure must be measured with custom pulled plastic catheters attached to fluid-filled pressure transducers3 or glass micropipettes attached to servo null pressure transducers4.
Our recent work has shown that the greatest increase in blood pressure occurs during the late embryonic to early postnatal period in mice5-7. This large increase in blood pressure may influence smooth muscle cell (SMC) phenotype in developing arteries and trigger important mechanotransduction events. In human disease, where the mechanical properties of developing arteries are compromised by defects in extracellular matrix proteins (i.e. Marfan's Syndrome8 and Supravalvular Aortic Stenosis9) the rapid changes in blood pressure during this period may contribute to disease phenotype and severity through alterations in mechanotransduction signals. Therefore, it is important to be able to measure blood pressure changes during late embryonic and neonatal periods in mouse models of human disease.
We describe a method for measuring LV pressure in late embryonic (E18) and early postnatal (P1 - 20) mice. A needle attached to a fluid-filled pressure transducer is inserted into the LV under ultrasound guidance. Care is taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol, especially for the embryonic mice. Representative data are presented and limitations of the protocol are discussed.

Measuring left ventricular pressure (LV) in embryonic and neonatal mice is described. Pressure is measured by inserting a needle connected to a fluid-filled transducer into the LV under ultrasound guidance. Care must be taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol.

Geç Embriyonik ve Yenidoğan Farelerde Ölçüm Sol Ventrikül Basınç

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Biyomühendislik

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a manageable size and relatively easy to house. These factors, together with the availability of a wealth of spontaneous and experimentally induced mutants, make laboratory mice ideally suited to a wide variety of research areas.
In cardiovascular, pharmacological and toxicological research, accurate measurement of parameters relating to the circulatory system of laboratory animals is often required. Determination of heart rate, heart rate variability, and duration of PQ and QT intervals are based on electrocardiogram (ECG) recordings. However, obtaining reliable ECG curves as well as physiological data such as core body temperature in mice can be difficult using conventional measurement techniques, which require connecting sensors and lead wires to a restrained, tethered, or even anaesthetized animal. Data obtained in this fashion must be interpreted with caution, as it is well known that restraining and anesthesia can have a major artifactual influence on physiological parameters1, 2.
Radiotelemetry enables data to be collected from conscious and untethered animals. Measurements can be conducted even in freely moving animals, and without requiring the investigator to be in the proximity of the animal. Thus, known sources of artifacts are avoided, and accurate and reliable measurements are assured. This methodology also reduces interanimal variability, thus reducing the number of animals used, rendering this technology the most humane method of monitoring physiological parameters in laboratory animals3, 4. Constant advancements in data acquisition technology and implant miniaturization mean that it is now possible to record physiological parameters and locomotor activity continuously and in realtime over longer periods such as hours, days or even weeks3, 5.
Here, we describe a surgical technique for implantation of a commercially available telemetry transmitter used for continuous measurements of core body temperature, locomotor activity and biopotential (i.e. onelead ECG), from which heart rate, heart rate variability, and PQ and QT intervals can be established in freeroaming, untethered mice. We also present pre-operative procedures and protocols for post-operative intensive care and pain treatment that improve recovery, well-being and survival rates in implanted mice5, 6.

A surgical technique for implantation of commercially available telemetry transmitters used for continuous measurement of biopotential (one-lead ECG), heart rate, core body temperature and locomotor activity in freely moving mice is shown. Recommendations and protocols for post-operative care and pain relief, improving recovery, well being and survival rate are also presented.

EKG, Nabız, Core Vücut Sıcaklığı ve Serbest hareket eden Laboratuar Fare Etkinlik Veri Verimli Radiotelemetry Vericiler implantasyonu

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

Tıp

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease and injury regional estimates, World Health Organization, 2004). Surgeries that often compromise the quality of life are required to correct heart defects, reminding us of the importance of finding the causes of CHD. Mutant mouse models and live imaging technology have become essential tools to study the etiology of this disease. Although advanced methods allow live imaging of abnormal hearts in embryos, the physiological and hemodynamic states of the latter are often compromised due to surgical and/or lengthy procedures. Noninvasive ultrasound imaging, however, can be used without surgically exposing the embryos, thereby maintaining their physiology. Herein, we use simple M-mode ultrasound to assess heart rates of embryos at E18.5 in utero. The detection of abnormal heart rates is indeed a good indicator of dysfunction of the heart and thus constitutes a first step in the identification of developmental defects that may lead to heart failure.

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Ultra-high frequency ultrasound is a powerful live imaging tool to examine cardiac abnormalities in small animals. Its noninvasiveness allows maintaining the physiologic state of embryos. Herein, we show the use of M-mode ultrasound to measure the heart rates of embryos at E18.5 in utero.

Noninvaziv M-mod ekokardiyografi ile Fare Kalp Puan utero Ölçümünde

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease ...

<meta charset="utf8"></head><body>Hamilelikten Yavru Yetiştirmeye Fare Annenin Otonomik Değişiklikleri

Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements of autonomic activity have been performed in human mothers and infants, the analysis of long-term changes remains unexplored. Mouse mothers can form social bonds with their pups and have a short period of pregnancy and lactation, which makes them useful for the examination of physiological changes from pregnancy to pup-rearing. Therefore, a telemetry system was used for several weeks to measure the changes in the autonomic nervous system and the behavior of mouse mothers. The current results showed that an electrocardiogram (ECG) could be stably recorded regardless of the movements of mothers and parturition. ECG analysis showed that the heart rate gradually decreased from pregnancy to lactation, and sympathetic activity sharply increased as the pups developed. Furthermore, the simultaneous recording of behavior and ECG in the home cage enabled us to understand the behavior-dependent influences on the ECG, thereby revealing the characteristics of autonomic nervous activity during each behavior. Thus, the present experimental method helps to understand how the physiological characteristics of mothers change from pregnancy through pup rearing, supporting the healthy development of pups.

<meta charset="utf8"></head><body>Farelerde Gebelikten Emzirme Dönemine Kadar Elektrokardiyogramların ve Davranışların Analizi

A simultaneous recording of autonomic activity and detailed maternal behavior of mother mice from pregnancy to lactation was achieved using a telemetry system. This method helps to understand the dynamics of the physiological and behavioral characteristics in mothers from pregnancy to weaning.

Farelerde Gebelikten Emzirme Dönemine Kadar Elektrokardiyogramların ve Davranışların Analizi

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements ...

Davranış

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. Indeed, research focusing on the discovery of new potential therapeutic targets using genetically altered mice requires a reliable, long-term assessment of the systemic arterial pressure variation. Currently, the gold standard for obtaining long-term measurements of blood pressure in ambulatory mice uses implantable radio-transmitters, which require&#160;artery cannulation. This technique eliminates the need for tethering, restraining, or anesthetizing the animals which introduce stress and artifacts during data sampling. However, arterial blood pressure monitoring in mice via catheterization can be rather challenging due to the small size of the arteries. Here we present a step-by-step guide to illustrate the crucial key passages for a successful subcutaneous implantation of radio-transmitters and carotid artery cannulation in mice. We also include examples of long-term blood pressure activity taken from freely moving mice after a period of post-surgery recovery. Following this procedure will allow reliable direct blood pressure recordings from multiple animals simultaneously.

The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.

Telemetri kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Uzun süreli Tansiyon Ölçümü

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of massage on skeletal muscles, the molecular mechanisms behind are poorly understood. We have recently developed a simple device to apply local cyclical compression (LCC), which can generate intramuscular pressure waves with varying amplitudes. Using this device, we have demonstrated that LCC modulates inflammatory responses of macrophages in situ and alleviates immobilization-induced muscle atrophy. Here, we describe protocols for the optimization and application of LCC as a massage-like intervention against immobilization-induced inflammation and atrophy of skeletal muscles of mouse hindlimbs. The protocol that we have developed can be useful for investigating the mechanism underlying beneficial effects of physical exercise and massage. Our experimental system provides a prototype of the analytical approach to elucidate the mechanical regulation of muscle homeostasis, although further development needs to be made for more comprehensive studies.

Here we describe the protocols for applying defined mechanical loads to mouse calves and for monitoring the concomitant intramuscular pressure changes. The experimental systems that we have developed can be useful for investigating the mechanism behind the beneficial effects of physical exercise and massage.

Fare Buzağılarına Tutarlı Masaj Benzeri Pertürbasyonların Uygulanması ve Bunun Sonucu Kas içi Basınç Değişikliklerinin İzlenmesi

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. The baroreflex is a key homeostatic mechanism to counteract acute, short-term changes in arterial BP and to maintain BP in a relatively narrow physiological range. BP is sensed by baroreceptors located in the aortic arch and carotid sinus. When BP changes, signals are transmitted to the central nervous system and are then communicated to the parasympathetic and sympathetic branches of the autonomic nervous system to adjust HR. A rise in BP causes a reflex decrease in HR, a drop in BP causes a reflex increase in HR.
Baroreflex sensitivity (BRS) is the quantitative relationship between changes in arterial BP and corresponding changes in HR. Cardiovascular diseases are often associated with impaired baroreflex function. In various studies reduced BRS has been reported in e.g., heart failure, myocardial infarction, or coronary artery disease. 
Determination of BRS requires information from both BP and HR, which can be recorded simultaneously using telemetric devices. The surgical procedure is described beginning with the insertion of the pressure sensor into the left carotid artery and positioning of its tip in the aortic arch to monitor arterial pressure followed by the subcutaneous placement of the transmitter and ECG electrodes. We also describe postoperative intensive care and analgesic management. After a two-week period of post-surgery recovery long-term ECG and BP recordings are performed in conscious and unrestrained mice. Finally, we include examples of high-quality recordings and the analysis of spontaneous baroreceptor sensitivity using the sequence method.

The baroreflex is a heart-rate regulation mechanism by the autonomic nervous system in response to blood-pressure changes. We describe a surgical technique to implant telemetry transmitters for continuous and simultaneous measurement of electrocardiogram and blood pressure in mice. This can determine spontaneous baroreflex sensitivity, an important prognostic marker for cardiovascular disease.

Bilinçli Farelerde Spontan Barorefleks Duyarlılığını Belirlemek için Kombine Telemetrik EKG ve Kan Basıncı Transmitterlerinin İmplantasyonu

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

Real-Time Electrocardiogram Monitoring During Treadmill Training in Mice

Regular physical exercise is a major contributor to cardiovascular health, influencing various metabolic as well as electrophysiological processes. However, in certain cardiac diseases such as inherited arrhythmia syndromes, e.g., arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM) or myocarditis, physical exercise may have negative effects on the heart leading to a proarrhythmogenic substrate production. Currently, the underlying molecular mechanisms of exercise-related proarrhythmogenic remodeling are largely unknown, thus it remains unclear which frequency, duration, and intensity of exercise can be considered safe in the context of disease(s).
The proposed method allows to study proarrhythmic/antiarrhythmic effects of physical exercise by combining treadmill training with real-time monitoring of the ECG. Implantable telemetry devices are used to continuously record the ECG of freely moving mice over a period of up to 3 months both at rest and during treadmill training. Data acquisition software with its analysis modules is used to analyze basic ECG parameters such as heart rate, P wave duration, PR interval, QRS interval, or QT duration at rest, during and after training. Furthermore, heart rate variability (HRV) parameters and occurrence of arrhythmias are evaluated. In brief, this manuscript describes a step-by-step approach to experimentally explore exercise induced effects on cardiac electrophysiology, including potential proarrhythmogenic remodeling in mouse models.

Electrocardiogram (ECG) is the key variable to understanding cardiac electrophysiology. Physical exercise has beneficial effects but may also be harmful in the context of cardiovascular diseases. This manuscript provides a method of recording real-time ECG during exercise, which can serve to investigate its effects on cardiac electrophysiology in mice.

Farelerde koşu bandı eğitimi sırasında gerçek zamanlı elektrokardiyogram izleme

Regular physical exercise is a major contributor to cardiovascular health, influencing various metabolic as well as electrophysiological processes. ...

Rahim içi Telemetri Fare Kontraktil Basıncını Ölçmek

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Geç Embriyonik ve Yenidoğan Farelerde Ölçüm Sol Ventrikül Basınç

EKG, Nabız, Core Vücut Sıcaklığı ve Serbest hareket eden Laboratuar Fare Etkinlik Veri Verimli Radiotelemetry Vericiler implantasyonu

Noninvaziv M-mod ekokardiyografi ile Fare Kalp Puan utero Ölçümünde

Farelerde Gebelikten Emzirme Dönemine Kadar Elektrokardiyogramların ve Davranışların Analizi

Farelerde Gebelikten Emzirme Dönemine Kadar Elektrokardiyogramların ve Davranışların Analizi

Farelerde Gebelikten Emzirme Dönemine Kadar Elektrokardiyogramların ve Davranışların Analizi

Telemetri kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Uzun süreli Tansiyon Ölçümü

Fare Buzağılarına Tutarlı Masaj Benzeri Pertürbasyonların Uygulanması ve Bunun Sonucu Kas içi Basınç Değişikliklerinin İzlenmesi

Bilinçli Farelerde Spontan Barorefleks Duyarlılığını Belirlemek için Kombine Telemetrik EKG ve Kan Basıncı Transmitterlerinin İmplantasyonu

Farelerde koşu bandı eğitimi sırasında gerçek zamanlı elektrokardiyogram izleme