Atrosklerotik Fare Modelinde Aort Ark ve Kök Lezyonlarının İzolasyonu ve Analizi

Bu protokol, aterosklerozun mekanizmaları ve ilerlemesi hakkında daha derinlemesine araştırmaları kolaylaştırmak için aterosklerotik plakların kantitatif analizi için kapsamlı bir metodoloji sağlar.

Kardiyovasküler hastalıkların önde gelen nedenlerinden biri olan ateroskleroz, lezyon gelişiminin ve ilerlemesinin ayrıntılı bir şekilde incelenmesini gerektirir. Bu çalışma, yaygın olarak kullanılan bir aterosklerotik fare modeli, düşük yoğunluklu lipoprotein reseptör nakavt (Ldlr^-/-) farelerde aort arkı ve kök lezyonlarının izolasyonu ve histolojik analizi için kapsamlı bir protokol sunmaktadır. Aort arkı ve kökü, aterosklerotik lezyonlar için anahtar bölgelerdir ve bunların incelenmesi, aterosklerozun başlangıcını, ilerlemesini veya gerilemesini değerlendirmek, kardiyovasküler olay risklerini tahmin etmek ve potansiyel terapötik hedefleri belirlemek için kritik öneme sahiptir. Bu protokol, doku izolasyonu, fiksasyon, Yağ Kırmızısı O boyama, aort kökü kesiti, Hematoksilen ve Eozin (HE) boyama, Verhoeff-Van Gieson (VVG) boyama ve görüntü analizi dahil olmak üzere aort arkı ve kökündeki aterosklerotik yükü ölçmek için yöntemleri ana hatlarıyla belirtir. Yağ Kırmızısı O boyama, aort arkındaki plak alanını ölçerek aterosklerozun şiddetini değerlendirirken, aort kökünün HE boyaması, lipid çekirdeği ve fibröz başlık gibi plak bileşenlerini ortaya çıkararak plak stabilitesinin ve yırtılma riskinin değerlendirilmesini kolaylaştırır. VVG boyama, dokulardaki kollajen liflerini lekeleyebilir ve plak bileşimi ve ilgili bilgiler hakkında daha fazla bilgi sağlar. Bu kapsamlı analiz, lezyon gelişim mekanizmaları hakkında değerli bilgiler sunar ve aterosklerozu önlemek ve tedavi etmek için yeni terapötik stratejilerin oluşturulmasına rehberlik edebilir.

Kardiyovasküler hastalıklar, özellikle ateroskleroz, dünya çapında önemli bir sağlık yükü ve birincil ölüm nedeni olarak ortaya çıkmıştır ^1,2. Ateroskleroz, lipidlerin kademeli olarak birikmesi ve arter duvarında plak oluşumu ile karakterize kronik ilerleyici bir inflamatuar hastalıktır ve sonuçta arteriyel lümenin daralmasına ve potansiyel olarak plakların yırtılmasına yol açar^ve miyokard enfarktüsü ve inme gibi akut kardiyovasküler olayları tetikler ^1,2,3. İnsan sağlığı üzerindeki derin etkisi göz önüne alındığında, aterosklerozun altında yatan mekanizmaları anlamak ve etkili terapötik stratejiler geliştirmek için acil bir ihtiyaç vardır.

Son yıllarda, hayvan modelleri ateroskleroz anlayışımızı ilerletmede çok önemli bir rol oynamıştır. Çeşitli türler arasında fareler, hızlı üremeleri, düşük bakım maliyetleri ve gelişmiş genetik manipülasyon tekniklerinin mevcudiyeti nedeniyle tercih edilen bir model olarak ortaya çıkmıştır ^4,5. Özellikle, LDL reseptör nakavt (Ldlr^-/-) fareler ve ApoE^-/- fareler, benzer patofizyolojik özellikler sergiledikleri için insan aterosklerozunu taklit etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır ^4,5,6,7,8,9.

Farelerde aterosklerotik lezyonlar aortun çeşitli yerlerinde ortaya çıkabilir, ancak özellikle aort kökü, aort arkı ve brakiyosefalik gövde gibi hemodinamik ile yakından ilişkili alanlarda gelişmeye eğilimlidirler, inen aort ise nispeten daha az etkilenir¹⁰. Fare modellerinde aterosklerotik lezyon yükünü doğru bir şekilde değerlendirmek, plakların varlığını, boyutunu ve evresini değerlendirmek ve böylece farklı ilaçların veya faktörlerin aterosklerozun başlangıcı, ilerlemesi ve gerilemesi üzerindeki etkisini araştırmak için histolojik boyama tekniklerinin ve görüntüleme analizinin bir kombinasyonu gereklidir¹¹. İyi bilinen bir yöntem olan Yağ Kırmızısı O boyama, özellikle nötr lipitleri ve lipoproteinleri¹² boyayarak aort arkında¹³ plak oluşumunun doğrudan görselleştirilmesini sağlar. Bu arada, aort kökünün Hematoksilen-Eozin (HE) boyaması sadece plak alanını tanımlamakla kalmaz, aynı zamanda fibröz başlık ve lipid nekrotik çekirdek gibi ayrıntılı yapısal özellikler de sağlar. Bu ayrıntılar, plak stabilitesini değerlendirmek ve plak rüptürü riskini tahmin etmek için çok önemlidir¹¹. Birlikte, bu teknikler aterosklerotik lezyon şiddeti ve ilerlemesinin kapsamlı bir değerlendirmesini kolaylaştırır.

Bu protokol, Chow diyeti ve Western diyeti ile beslenen ^{fareleri örnek} olarak aldı ve aort arkının Yağ Kırmızısı O boyaması ve parafine gömülü aort kökü bölümlerinin HE boyaması kullanılarak farelerde aterosklerotik lezyon yükünü değerlendirmek için ayrıntılı bir adım adım kılavuz sağlamayı amaçladı. Protokol, aort izolasyonu ve fiksasyonu, parafin gömme ve kesit alma, boyama prosedürleri ve görüntü analizinin tüm yönlerini kapsarken, sonuçların tekrarlanabilirliğini ve güvenilirliğini sağlamak için operasyonel ayrıntıları ve temel adımlar için hususları içerir. Araştırmacılar bu protokolü izleyerek, terapötik müdahalelerin etkinliğini doğru ve verimli bir şekilde değerlendirebilir ve aterosklerozun altında yatan mekanizmalar hakkında bilgi edinebilirler.

Bu çalışmada kullanılan tüm hayvan protokolleri, Şanghay Spor Üniversitesi Hayvan Deneyleri Etik İnceleme Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. Reaktiflerin ve diseksiyon araçlarının hazırlanması

1. İnce makaslar, düz forsepsler, kavisli forsepsler, yaylı makaslar ve pimler dahil olmak üzere diseksiyon aletlerini önceden otoklav ile sterilize edin.
2. % 75 etanol: 75 mL Susuz etanolü 25 mL ddH₂O ile karıştırın.
3. 1x Fosfat tamponlu salin (PBS): 0.01 M PBS tozunu 2 L ddH₂O içinde çözün.
4. %4 paraformaldehit (PFA) çözeltisi: Çeker ocaktaki manyetik bir karıştırıcıda 800 mL 1x PBS'yi yaklaşık 60 °C'ye ısıtın. Sürekli karıştırarak yavaşça 40 g paraformaldehit tozu ekleyin. Tamamen eriyene kadar 1N NaOH ile titre edin. Oda sıcaklığına soğutun, 1x PBS ile hacmi 1 L'ye ayarlayın, süzün ve pH'ı 7.2-7.4'e ayarlayın.
   DİKKAT: PFA, dikkatli kullanım ve güvenlik protokollerine sıkı sıkıya bağlı kalmayı gerektiren tehlikeli bir kimyasaldır.
5. Oil Red O stoklama çözeltisi: 2,5 g Oil Red O tozunu 500 mL %100 izopropanol içinde çözün, kahverengi bir şişede kapatın ve uzun süreli saklama için buzdolabında 4 °C'de saklayın.
   DİKKAT: İzopropanol toksik ve zararlı bir kimyasaldır; bu nedenle, sağlık ve güvenliği sağlamak için eldivenler de dahil olmak üzere gerekli kişisel koruyucu ekipmanların (KKD) giyilmesi esastır.
6. Oil Red O'nun çalışma solüsyonu: Stoklama solüsyonu ile steril ddH₂O'yu 3:2 oranında karıştırın. Her kullanım için taze hazırlayın ve çözeltiyi 0,22 μm steril şırınga filtresi veya büyük filtre kağıdı ile filtreleyin.
7. Victoria Blue'B boyama çözeltisi: 0,5 g Victoria Blue'B'yi 100 mL %70 etanol içinde çözün.

2. Aort ve kalbin izolasyonu

1. Tüm fareleri kafes başına 3-5 hayvanda, 12 saatlik aydınlık / karanlık döngüsüyle, sıcaklık kontrollü bir ortamda barındırın ve standart bir chow diyeti (chow) veya %0.2 kolesterol ve %21.2 yağ içeren batı tipi bir diyet (WTD) ile besleyin. 12 haftalık ve ağırlığı 25 ila 30 g arasında olan C57BL6/J LDLr-/- erkek fareleri seçin. Fareleri bir CO₂ odasında kurban edin.
2. Diseksiyondan önce, fareleri sırtüstü pozisyonda (ventral tarafı yukarı) 1-2 kat emici kağıtla kaplı bir köpük levha üzerine yerleştirin ve uzuvları pimlerle sabitleyin.
3. Kürkü temizlemek ve nemlendirmek için farelerin karnına %75 etanol püskürtün.
4. Farelerin ventral derisini kavramak için forseps kullanın ve cildi karın tabanından boynun üstüne kadar kesmek için ince makas kullanın.
5. Karın duvarını açın, ardından sternumu kaldırmak için forseps kullanın ve göğüs boşluğunu ortaya çıkarmak için hem diyaframı hem de kaburgaları kesin.
6. Karotis arterlerin daha kolay temizlenmesini sağlayacak yemek borusu ve soluk borusunu çıkarın. Karaciğer, akciğer, dalak, gastrointestinal sistem ve pankreas dahil olmak üzere organları çıkarın, aynı zamanda peritonun arkasında bulunan böbrekleri ve omurganın yanındaki abdominal aortu koruyun. Mezenterik arterleri diseksiyon yaparken, abdominal aorta zarar vermemek için bağırsakları kaldırdığınızdan ve aorttan kesi yaptığınızdan emin olun.
7. Net bir gözlem alanı sağlamak için fareleri bir stereomikroskop altına yerleştirin ve soğuk ışık kaynağını diseksiyon alanıyla hizalayın.
8. 0.45 x 15 (II) RWLB iğnesi ile PBS ile doldurulmuş 10 mL'lik bir şırıngayı sol ventrikül apeksine yavaşça enjekte edin ve aortun genişlemesini gözlemleyin.
9. Görüş alanını tam olarak ortaya çıkarmak için diseksiyon alanındaki kanı ve sıvıyı kağıt mendille nazikçe silin.
10. Torasik aortun açığa çıkarılması kolaydır. Torasik aortun ucuna bağlı diyafram segmentini kavramak için forseps ve aort ile göğüs kas duvarı arasındaki bağ dokusunu kesmek için yaylı makas kullanarak bir atılım olarak kullanın.
11. Kalbi forseps ile nazikçe çekin ve aort arkının dallarını gözlemleyerek torasik aortu kaldırın ve aort kemerinin etrafındaki adventif yağ ve bağ dokusunu ve dallarını torasik aort boyunca yukarı doğru inceleyin.
    NOT: Dikkatli olun, aortu sağlam tutun, yırtmaktan veya yaralamaktan kaçının ve çevredeki yağ ve bağ dokusunu tamamen çıkarın. Bu adım, yetkin manipülasyon elde etmek için tekrarlanan uygulama gerektirir.
12. Abdominal aortu ve ortak iliak arterleri torasik aort boyunca aşağı doğru diseke edin.
13. Ana iliak arterleri çatallanmalarının 1-2 mm altından kesin, aortun küçük dallarını omurga boyunca kesin ve serbest bırakın, böbreklerin yakınındaki renal arterleri ayırın, boyundaki üç dal damarını distal uçlarından kesin ve son olarak kalbin yakınındaki yükselen aortu kesin.
14. Aort arkını incelemeden önce, altındaki kan damarlarına yüksek kontrastlı küçük, koyu renkli bir conta yerleştirin ve aort arkı bölgesini fotoğraflayın.
15. Kalp dokusunu kesin ve kalbin alt yarısını kulakçıklara paralel bir düzlem boyunca kesin. Kesilen kalbi düzeltin (Şekil 1A).

3. Aort arkının fiksasyonu ve ön tedavisi

1. Önceden 1.5 mL'lik bir santrifüj tüpünde 1 mL %4 PFA çözeltisi hazırlayın.
2. Aortu tüpe yerleştirin ve oda sıcaklığında en az 24 saat sabitleyin.
   NOT: Aort, Yağ Kırmızısı O boyamasının kalitesini etkilemeden 1 aya kadar %4 PFA'da korunabilir. Normal konfigürasyonunu korumak için, dokuyu fiksasyondan önce bir kauçuğa yerleştirmek uygun bir seçenek olabilir.
3. Kurumasını önlemek için aortu PBS içeren bir Petri kabına aktarın. Stereomikroskop altında, aort içindeki plakların kantitizasyonuna müdahaleyi azaltmak için diseksiyon sırasında tamamen sıyrılmamış kalan adventisyel yağları dikkatlice çıkarmak için forseps ve yaylı makas kullanın.
4. Aortu iç uzunlamasına ekseni boyunca dikkatlice kesmek için yaylı makas kullanın ve ardından aort arkının üç dalını lateral taraf boyunca aort arkının eğrilik seviyesine kadar sırayla kesin ve tamamen yayılmasına izin verin (Şekil 1C).
5. Bu aşamada ya yağ kırmızısı O boyaması için kullanın ya da %4 PFA'da saklayın.

4. Aort arkının yağ kırmızısı O boyaması

1. Kesilmiş aortu 12 oyuklu bir plakaya yerleştirin. Her kuyucuğa 1 mL steril ddH₂O ekleyin ve bir çalkalayıcı üzerinde 5 dakika yıkayın, 2x tekrarlayın.
2. Çıkarılan çözelti ile 12 oyuklu plakayı bir çeker ocak içine yerleştirin ve görünür filigran kalmayana kadar 20 dakika havayla kurutun.
3. Her kuyucuğa 1 mL taze hazırlanmış Oil Red O çalışma solüsyonu ekleyin ve çalkalayıcı üzerinde 20 dakika çalkalayın, ardından Oil Red O çalışma solüsyonunu çıkarın.
4. Her kuyucuğa 2 mL steril ddH₂O ekleyin ve 5 dakika yıkayın, bu adımı 3 kez tekrarlayın. Bundan sonra, aortu ddH₂O'da tutun.
5. Aortu bir lam üzerine yerleştirin ve stereomikroskop altında yayın. Kontrastı artırmak için sürgünün altına siyah bir lastik ped yerleştirin.
6. Kontrastı daha da artırmak için slaytı, yanına bir cetvel yerleştirilmiş olarak beyaz bir kağıda yerleştirin ve bir kamera kullanarak fotoğraf çekin. Aortu nemli tutmak için, tedavi edilen aortu 1 mL PBS içeren 1.5 mL'lik bir santrifüj tüpünde saklayın.

5. Aort arkının görüntü analizi

1. Yakalanan aort görüntüsünü Image J yazılımı ile donatılmış bir bilgisayarda açın.
2. 450 piksel x 900 piksel gibi dikdörtgen bir kutu içeren, tüm aortu içeren alanı seçin ve yeni bir .tiff resmi olarak kaydedin.
3. Yeni kaydedilen .tiff resmi Görüntü J'de açın. Düzenle > Ters Çevir'e tıklayın, ardından Görüntü'yü seçin ve RGB Yığını Yaz'> tıklayın.
4. Görüntü'ye gidin, Yığınlar'ı tıklatın > Görüntülere Yığınla'yı tıklatın ve ardından en iyi kontrasta sahip Yeşil olanı seçin.
5. Görüntü'ye gidin, Parlaklık / Kontrast > Ayarla'ya tıklayın. Minimum değeri yaklaşık 200 olarak değiştirin, her görüntü için benzer arka planları korurken arka planı simge durumuna küçültün ve ardından Uygula'yı tıklatın.
6. Analiz Et'e gidin ve Ölçümü Ayarla'yı seçin. Alan, Alan Kesri, Eşikle Sınırla ve Etiketi Görüntüle'yi seçin, ardından Tamam'ı tıklayın.
7. Analiz Et'e gidin, Ölçüm'ü seçin ve sonucu bir elektronik tabloya kopyalayın.
8. Analiz Et'e gidin, Araç > ROI Yöneticisi'ni tıklayın, ardından aortun dikdörtgen kutulu Kemer kısmını seçin. ROI Yöneticisi'ne gidin ve [t] Ekle'yi ve ardından Ölç'ü seçin. Ölçülen sonuçları bir elektronik tabloya kopyalayın.
9. Normallik testine dayalı olarak fare gruplarında ölçülen alanı analiz edin. 0.05 < p farkın istatistiksel olarak anlamlı olduğunu gösterir.
   NOT: Deneyin tasarımına göre uygun istatistiksel yöntemi seçin.

6. Kalbin parafin gömülmesi

1. Kalbin tepesini çıkarın ve insizyonun düz ve kapak kökünün yönü ile aynı hizada olduğundan emin olun (Şekil 1B).
2. Her kalp örneğini ayrı ayrı bir parafin gömme kutusuna yerleştirin ve kutuyu bir kalemle işaretleyin.
3. Çeker ocakta, parafine gömülü mendille birlikte kaseti boş bir kaba koyun ve gömme kutusunu akan su ile 3 dakika durulayın.
4. Aşağıdaki gibi artan konsantrasyon gradyanlarına sahip etanol kullanarak doku dehidrasyonunu gerçekleştirin: 2 saat boyunca% 50 etanol, 30 dakika boyunca% 75 etanol, 30 dakika% 85 etanol, 30 dakika% 95 etanol ve 10 dakika% 100 etanol. Her adımda etanolü değiştirerek adımları tekrarlayın.
5. Ksilen ile doku şeffaflığını şu şekilde gerçekleştirin: 1: 1 ksilen ve etanol karışımı 20 dakika, ksilen 15 dakika, ksileni değiştirerek bu 1x'i tekrarlayın.
6. Parafin mumunu önceden 60 °C'de fırında eritin. Numunelere 30 dakika boyunca ksilen ve parafin karışımı, ardından 2 saat parafin yumuşak balmumu ve ardından 1 saat boyunca parafin sert balmumu uygulayın.
   DİKKAT: Etanol yanıcı ve uçucu bir organik çözücüdür. Ksilen orta derecede toksiktir ve kullanıldığında koruma gerektirir.
7. Parafin gömme
   1. Uygun boyuttaki kalıbı seçin, açın ve gömme makinesini önceden ısıtın.
   2. Kalıba erimiş parafin mumu ekledikten sonra, dokuyu gömme kasetinden çıkarın ve önceden ısıtılmış forseps kullanarak kesilmiş yüzeyi aşağı bakacak şekilde kalıbın orta tabanına yerleştirin.
   3. Kalıp bir dondurucu masasında soğuduktan ve içindeki parafin katılaştıktan sonra, belirtilen gömme kaset kapağını kalıbın üzerine yerleştirin ve gerekli miktarda parafin ile doldurun.
   4. Parafin mumu soğuduktan ve sertleştikten sonra, bloğu kalıptan çıkarın ve 4 °C'de buzdolabında saklayın (Şekil 1D).

7. Aort kökünün parafin bölümleri

1. Gömme kaset kapağını çevreleyen fazla parafini temizleyin ve ardından parafin bloğunu parafin dilimleyicinin başında bulunan kelepçe yuvasına güvenli bir şekilde yapıştırın. Bloğu, dilimin kesileceği yerden biraz kaydırılmış bir konuma ayarlayın ve parafin bloğu içindeki doku bölümünün bıçağın kesici kenarına paralel olduğundan emin olun. İlk kesit alma için, doku konumunu ortaya çıkarmak için dilim kalınlığını 10 μm'ye ayarlayın.
2. Mikroskop altında ilk kesi bulunduğunda, dilim kalınlığını 6 μm'ye ayarlayın ve seri kesit alma yapın. Mikroskop altında üç sağlam aort kapağı görünene kadar dilimleyicide bölümleri kesin, dilimleyin ve toplayın, bu noktada kesit alma hazırlığı başlar. Her fare için 6 μm aralıklarla bir dilim bırakın ve uygun bir genel bakış elde etmek için farklı cam taşıyıcılara, örneğin bölüm 1-11-21-31'e farklı dilim konumları yerleştirin.
3. Dokuyu düz bir şekilde yaymak için bölümleri 37 °C ılık su içeren bir yayıcı üzerinde yüzdürün ve ardından dokuyu bir slaytla alın. Suyun kurumasını bekledikten sonra dilimleri gece boyunca 42 °C'ye ayarlanmış bir ekmek kızartma makinesine koyun.
4. Bu 8 bölümün ortalama plak alanı, her faredeki aort kök plak alanının değerini temsil eder. Bu bölümleri boyadıktan sonra, ortalama plak alanını ve plak alanını ölçün.

8. Hematoksilen Eozin boyama

1. Dilimleri 60 °C'de 30 dakika kurutucuya koyun. Bir çeker ocakta, bir boyama rafı kullanarak, bölümleri sırayla 10 dakika ksilen içine yerleştirin (bu adımı bir kez tekrarlayın, ksileni değiştirin), 5 dakika boyunca %100 etanol (bu adımı tekrarlayın, etanolü değiştirin), 5 dakika boyunca% 95 etanol, 5 dakika boyunca% 85 etanol ve 5 dakika boyunca% 75 etanol.
2. Akan su ile 5 dakika durulayın. Bölümleri 8 dakika boyunca hematoksilen lekesine batırın ve akan su altında durulayın.
3. Bölümleri %1 hidroklorik asit alkol ile birkaç saniye ayırt edin ve akan su ile durulayın ve mikroskop altında bölümlerin mavi, mora döndüğünü gözlemleyin.
4. Bölümleri 5 dakika boyunca bir eozin boyama solüsyonuna daldırın. Bölümleri 7 daldırma için %95 etanole ve ardından 30 saniye boyunca %100 etanole yerleştirin.
5. En az 30 saniye boyunca ksilen içinde berraklaştırın. Slaytları nötr sakız kullanarak kapatın, mikroskop altında fotoğraf çekin ve yüksek çözünürlüklü görüntüleri, tercihen .tiff formatında kaydedin.

9. Verhoeff-Van Gieson (VVG) boyama

1. Bölüm 8.1 ve 8.2'de belirtilen adımların aynısını izleyerek parafin bölümleri üzerinde rutin mum alma ve rehidrasyon gerçekleştirin.
2. %70 etanolde kısa bir süre duruladıktan sonra, bölümleri 15 dakika boyunca Victoria Blue'B boyama solüsyonuna batırın.
3. Bölümleri %95 etanolde birkaç saniye ayırt edin. Bölümleri 2x damıtılmış suyla yıkayın.
4. Damlacık uygulaması ile bölümleri 5 dakika boyunca Ponceau boyama solüsyonu ile boyayın. % 100 etanol kullanarak bölümleri ayırt edin ve kurutun.
   NOT: Ponceau boyama işleminden sonra su ile herhangi bir temastan kaçınınız.
5. En az 30 saniye boyunca ksilen içinde berraklaştırın. Slaytları nötr sakızla monte edin ve mikroskop altında fotoğraflayın.

10. Aort kök plağının görüntü analizi

1. Görüntüyü, Image J yazılımıyla donatılmış bir bilgisayarda açın. Plakayı kutulamak için herhangi bir kutu aracını seçin.
2. Görüntü'ye gidin, Kaplama > Seçim Ekle'yi tıklayın, ardından plakanın alanını ölçmek için Ölç'ü tıklayın. Ölçülen sonuçları bir elektronik tabloya kopyalayın.
3. Normallik testine dayalı olarak fare gruplarında ölçülen Alanı analiz edin. 0.05 < p farkın istatistiksel olarak anlamlı olduğunu gösterir.

Temsili sonuçlar, aterosklerotik bir fare modelinde aort arkı ve kök lezyonları için izolasyon ve analiz tekniğinin uygulanmasını göstermektedir. Bu sonuçlar, tekniğin aterosklerotik lezyonları tanımlama ve karakterize etme yeteneğinin açık kanıtıdır. Örneğin, spesifik lekelere sahip histolojik görüntüler (ör., Yağ Kırmızısı O) lipid birikimini vurgularken, hematoksilen ve eozin (H&E) boyama, arter duvarının yapısı, lipid çekirdeklerinin varlığı ve n...

Burada, Ldlr nakavt farelerde aort örneklemesi yöntemleri ve plakların kantitatif analizi hakkında ayrıntılı bilgi veriyoruz.

Diseksiyon prosedürünün hassasiyeti, aterosklerozun fare modelinde in vivo aort sıyırmasının en büyük teknik zorluğudur. Deneyimlerimize dayanarak, kilit noktalar aşağıdaki gibidir: (1) aort ark dalları ile perivasküler yağ arasındaki karşılaştırmayı artırmak için arterdeki tüm kanı yıkamak iç...

Beyan edilecek bir şey yok.

Bu çalışma, Şanghay Spor Üniversitesi'nde egzersiz ve halk sağlığı araştırma programı (0831), Şanghay yüksek öğrenim genç öğretmenleri eğitim finansman programı (A2-0213-22-0058-5) ve Şanghay Belediye Bilim ve Teknoloji Komitesi tarafından desteklenmiştir.