Тонкослойная хроматография (ТСХ) — это метод хроматографии, который разделяет соединения на основе их полярности. В ТСХ в качестве неподвижной фазы обычно используется полярный силикагель, форма диоксида кремния. Силикагель содержит гидроксильные (ОН) группы на своей поверхности, которые образуют водородные связи с полярными соединениями, влияя на их адгезию к неподвижной фазе.

Для начала анализа смесь соединений наносится на стартовую линию на пластине ТСХ с помощью тонкого капилляра. Дно пластины погружается в подвижную фазу, которая обычно представляет собой органический растворитель, менее полярный, чем неподвижная фаза. Растворитель перемещается вверх по пластине за счет капиллярного действия, перенося пятно растворенного вещества. По мере перемещения растворителя вверх по пластине компоненты смеси распределяются между подвижной фазой или неподвижной фазой. Полярные компоненты сильнее взаимодействуют с полярной неподвижной фазой, в результате чего они перемещаются медленно и проходят лишь небольшое расстояние на пластине ТСХ. Менее полярные компоненты образца более растворимы в подвижной фазе и, как правило, больше взаимодействуют с подвижной фазой, что позволяет им перемещаться дальше по пластине ТСХ.

Понимание полярности компонентов и подвижной фазы имеет важное значение для прогнозирования результатов разделения. Подвижная фаза (растворитель) должна быть достаточно полярной, чтобы эффективно перемещать наиболее полярное растворенное вещество, обеспечивая при этом хорошее разделение соединений. Фактор замедления R_f определяется как отношение расстояния, пройденного компонентом, к расстоянию, пройденному подвижной фазой. Понимание этой концепции имеет решающее значение в анализе ТСХ. Параметр R_f соединения зависит от используемой подвижной фазы. R_f имеет высокие значения для неполярных соединений с неполярной подвижной фазой. Низкие значения R_f наблюдаются для полярных компонентов с неполярной подвижной фазой.