예쁜꼬마선충을 배양 플레이트에 고정시키기 위한 냉각 단계의 조립 및 작동

우리는 전체 Caenorhabditis elegans 개체군을 재배 접시에 직접 고정시킬 수 있는 간단한 접근 방식을 개발하고 있습니다. 이 전략은 이미징 관련 실험을 크게 가속화합니다. 예쁜꼬마선충 개체군의 고해상도 이미징에 일반적으로 사용되는 아지드화나트륨 고정화는 매우 노동 집약적이어서 개별 동물 장착 및 취급이 필요합니다.

이 방법은 또한 동물의 수명과 생존력을 감소시켜 데이터를 혼란스럽게 할 수 있습니다. 전통적인 냉각 방법은 섭씨 2도에서 4도의 비교적 낮은 온도를 사용하는 미세 유체를 사용했기 때문에 광범위한 사용자 교육이 필요합니다. 우리는 냉각 단계에서 섭씨 6도와 같은 따뜻한 온도가 높은 회전 이미징을 위해 동물을 더 강하게 고정시킨다는 것을 발견했습니다.

예쁜꼬마선충의 냉각 고정화는 널리 사용되지는 않지만 일반적으로 상당한 사용자 교육이 필요한 복잡한 미세 유체와 결합됩니다. 일반적인 고정화 방법론의 단점으로 인해 냉각 동원 및 접근성이 개선되어 연구자에게 높은 처리량과 고해상도 이미징이 가능합니다. 개별 동물의 노동 집약적인 장착 및 마취와 비교할 때, 당사의 냉각 접근 방식은 많은 예쁜꼬마선충 개체군을 가역적으로 고정시켜 처리 시간의 98%를 제거할 수 있습니다.

화학 마취제가 없기 때문에 동물과 연구원에 대한 유해한 노출도 최소화됩니다. 냉각 단계는 배양 플레이트에서 직접 높은 처리량과 고해상도 이미징을 허용합니다. 이 설계의 단순성으로 인해 다른 연구자들은 자신의 장치를 쉽게 구축하고 기존 설정에 통합하여 생물학적 연구의 범위와 속도를 혁신 할 수 있습니다.

우리 실험실은 다양한 현미경 구성에 맞게 냉각 단계를 조정할 것입니다. 다양한 디자인은 도립 현미경, 복합 정립 현미경 및 다양한 이미징 플랫폼과 함께 작동합니다.