Living Caenorhabditis elegansにおける蛍光顕微鏡による内因性貨物の軸索輸送の可視化の最適化

クラシカルスタートは、軸索輸送の可視化のための軸索輸送タンパク質に一般的に使用されますが、内因性の貨物の挙動は異なります。内因性タンパク質レベルは低く、視覚化が困難です。シナプス血管前駆体を標識する内因性GPR3の可視化を改善するために、取得条件を最適化するためのアイデアを提供します。

軸索輸送場には細胞質タンパク質が豊富に存在するため、従来の蛍光顕微鏡を使用してそのダイナミクスを視覚化することは困難です。このプロトコルは、これらの課題を克服するために、時間的に制御されたラベリングアプローチとともにアブレーションステップを使用することを提案しています。私たちは最近、内在性分光の軸索輸送を可視化することができました。

このプロトコルに記載されている取得パラメータを最適化することにより、時間的制御ラベリングアプローチを組み合わせました。これにより、輸送を仲介する機械の最初のコンポーネントを特定することができました。