痛みとかゆみに関連する行動の同時測定のための頬注射モデル

我々のデータは、アルゴゲンがスクラッチ行動を減らすことを示しているが、カプサイシンがスクラッチ行動に及ぼす影響は不明のままである。したがって、各量の痛みの同時測定が重要である。従来の方法では、かゆみや痛みの感覚についてのみ情報を提供しますが、頬の注入モデルは、かゆみや痛みに関する情報を個別に同時に提供します。

頬の注射は、スクラッチ、拭き取り、グルーミングの行動を差別する練習を行うため、最初は難しい場合があります。射出と行動解析のビデオ デモは、この手法を習得する際に役立ちます。頬の注入実験では、評価の前日に、各マウスの頬のファーを毛髪のバリカンで剃り、30〜60フレーム/秒のフレームレートのビデオカメラを三脚に、温度、湿度、および音制御された環境に取り付けます。

指示された向きでカメラの下にケージを4つ置き、各ケージの間にスクリーンを置いて、マウスが互いに見えないようにします。シェービングの1日後、各記録ケージに1匹のマウスを1時間置き、動物を記録条件に順応させます。局所治療を使用する場合は、この時点でそれを適用します。

動物が順応している間、マウスあたり29または30ゲージの針を装備した1つの0.5ミリリットルの注射器に関心のある試験物質をロードする。順応期間の終わりに、注射の前にビデオ録画を開始します。その後、目を覚ます動物の剃った頬に皮をむいて試験物質の10マイクロリットル溶液を注入する。

次に、注射したマウスをそれぞれのケージに戻し、30分間ビデオ録画を続けます。実験の最後に、ビデオを適切なビデオ編集ソフトウェアプログラムにロードします。マウスが頬に向かって後ろ足を上げ、1秒または数秒にわたって数回傷を負ってから、1つのスクラッチバウトとして足を下ろすたびにカウントします。

マウスは単一の前脚を使用して、両方の前脚を手入れに使用しますが、スワイプ動作のみが痛みに関連する動作としてカウントされます。首の注射実験では、実験の前日に、各マウスの首のうなじに毛の毛を毛のバリカンで剃ります。シェービングの1日後、マウスを記録ケージに1時間順応させると、目覚めの状態で皮を剃った首に皮をむく状態で目的の被験物質10マイクロリットルを注入する。

注射した動物を記録ケージに戻し、マウスの挙動を30分間記録します。その後、ちょうど実証したように、首の引っ掻く吹き出物と顔の拭き取りの動作を数えます。首の注入モデルでは、ヒスタミンは強い引っ掻き行動を誘発し、車両は軽度の引っ掻き傷を誘発する。

頬注射モデルでは、カプサイシンは引っ掻き行動を誘発せず、痛みに関連すると考えられる拭き取り行動を誘発する。頬への注入後, ヒスタミンは、主に弱い拭き行動とスクラッチ行動を誘発します。.抗ヒスタミン試薬の適用は、ヒスタミン誘発性掻引行動がヒスタミン受容体にヒスタミンの反応によって引き起こされることを示唆する傷を阻害する。

この実験では、かゆみメディケーターの適用は、掻き傷を誘発したが、拭き取り行動ではなく、試験されたメディケータがマウスのプルトゲンとして作用するが、ヒトにおけるその効果と同様に、マウスのアルゴゲンとして作用しないことを示す。この方法は、かゆみと痛みの感覚を簡単かつ明確に1つの手順で区別することができます。詳細な行動分析は、かゆみまたは痛みの感覚のいずれかに焦点を当てることによって行うことができます。

かゆみと痛みの行動は異なる応答を一致します。また、これらの技術は難しくない。頬の注射と観察手順は、私たちのトレーニング仲間の様々なマスターを可能にするかもしれません。

イェール大学のラモット教授による頬注射モデルの導入に感謝します。