המחקר שלנו מתמקד בהבנת האופן שבו העין מונעת דלקת באופן טבעי. המחקר שלנו הראה כי מסלול המיקורן חיוני לדיכוי דלקת בעין ולקידום הישרדות התאים ברשתית הלחוצה. זה מצביע על כך שהשבתת מסלול המיקורן יכולה להועיל לטיפול במחלות גנרטיביות ברשתית.
פרוטוקול זה מנרמל את הלחץ התוך עיני לפני נסיגת המחט, מפחית את הטראומה למבני העין ומגביל את הפגיעה במרכיב האיסכמיה-רפרפוזיה. חידוד זה ממזער את השונות הניסיונית הנגרמת על ידי מניפולציה פיזית, ומשפר את הדיוק של מודל זה. המחקר שלנו מקדם את הרעיון הייחודי של טיפול במקום נטרול מולקולות כדי להפחית את התסמינים בתקווה שהתאים יוכלו לשרוד ולחזור לשגרה.
התמקדנו בשינוי התנהגות התאים המעורבים במחלה. לגישה זו יש פוטנציאל חזק לספק יתרונות ארוכי טווח ועמידות להישנות של מחלות כרוניות, מכיוון שפעילות תאית תקינה מושרת. המודל שלנו הציע טכניקה מעודנת לחקר פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה בעין העכבר.
וזה עשוי להציע ייצוג מדויק יותר של האופן שבו מבנים תוך עיניים יגיבו לפציעה מלחץ תוך עיני ממושך או מפגיעת רפרפוזיה. כדי להתחיל, הכינו מזרקים של תמיסת מלח סטרילית 0.9% נתרן כלורי המחוברת לקו עירוי ותא עצירה עם מחט בגודל 30 המחוברת לקצה הקו, אחת לכל עכבר, והניחו אותם 120 סנטימטרים מעל פני הספסל. לאחר מכן, שטפו את כל בועות האוויר מהקו.
לאחר מכן, צור מיטה לייצוב העכבר על ידי חיתוך שקע של כשישה על שלושה סנטימטרים בספוג והנחתו היטב בבאר קלקר או במיכל שטוח אחר. לאחר הרדמת העכבר, הרחיבו את הקשתית עם טיפה אחת של 1% טרופיקמיד והמתינו חמש דקות להרחבה. לאחר מכן, הניחו היטב את העכבר במיטת הספוג מתחת למיקרוסקופ.
יש למרוח תמיסת מלח על העיניים כדי לשטוף כל פסולת או פרווה מפני השטח של העיניים. בעזרת מלקחיים ללא שיניים, יש להחזיק בעדינות את אחת העיניים. לאחר מכן, כשקו העירוי סגור, קנול את החדר הקדמי עם המחט כשני מילימטרים מהלימבוס.
ודא שהמחט חודרת את הקרנית בניצב למשטח הקרנית המעוקל ההיקפי, ואז שטוחה מעט במקביל למישור הקשתית. סובב את תא העצירה כדי להפעיל את קו העירוי וודא שאין דליפה דרך פצע הקרנית. הקפידו על התנפחות הדרגתית של הקרנית ככל שהלחץ התוך עיני עולה.
בעזרת טונומטר, בדוק שהלחץ התוך עיני עלה ל-90 עד 100 מילימטרים של כספית. אבטח את קו העירוי עם סרט, וודא שהמחט לא תשנה את מיקומה ותתחיל לדלוף. כעת, מרחו משחה עיניים כמו בציטראצין על העין כדי למנוע יובש.
הנח את העכבר הרחק מהמיקרוסקופ מתחת לחימום lamp כדי לשמור על טמפרטורת גוף תקינה למשך 60 דקות. לאחר 60 דקות, החזר את העכבר למיקרוסקופ. הורד את מזרק תמיסת המלח לגובה העכבר כדי לנרמל את הלחץ התוך עיני.
מדוד את הלחץ התוך עיני בעזרת הטונומטר כדי לבדוק שהוא קרוב לנורמה, בסביבות 20 מילימטרים כספית. לאחר הנורמליזציה, הסר בזהירות את המחט, הימנע מנזק לעדשה או לקשתית. מצפים את עיני העכבר במשחה אנטיבקטריאלית עיניים, כגון משחת עיניים וטרינרית בציטרצין.
עקוב אחר העכבר על משטח מחומם למשך שעה עד שעתיים עד שהוא מתאושש לחלוטין מההרדמה. לאחר התאוששות מלאה, החזר את העכבר לכלוב שלו. הרשתית ביום השביעי הראתה נזק ואובדן תאים גדולים יותר בהשוואה ליום השני, מה שמצביע על ניוון רשתית חמור יותר לאורך זמן לאחר איסכמיה ורפרפוזיה.
הציונים ההיסטופתולוגיים האישיים היו גבוהים יותר ברוב שכבות הרשתית ביום השביעי בהשוואה ליום השני, והראו שינויים פתולוגיים מוגברים לאורך זמן. הציונים ההיסטולוגיים הכוללים היו גבוהים משמעותית ביום השביעי מאשר ביום השני, מה שמצביע על התקדמות ניכרת בנזק לרשתית.