This research was financially supported by the SIAM Gravitation Grant 024.002.002, the Netherlands Organization for Scientific Research and by the Dutch Technology Foundation (STW - Simon Stevin Meester 2013). The authors want to thank Mario Pronk for providing the granular sludge samples.

הערה: AGS נאסף מכור טייס Nereda במפעל הטיפול בשפכים אוטרכט, הולנד. הכור הוזן עם ביוב עירוני. הבוצה גרגירי היה מדד נפח הבוצה (5min SVI) של 59.5 מ&quot;ל / g VSS. בוצת נדגמה באפריל בסוף המחזור אירובי. לאחר הדגימה, הבוצה הועברה מיד למעבדה, הסתנן ומאוחסנים ב -20 ° C עד השימוש. 1. הפקת EPS הערה: בוצה פרטנית צנטריפוגה ב 4000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות, למזוג supernatant. אסוף גרגירים הגלול עבור העקירות. המוצקים הכולל (TS) ו המוצקים נדיפים (VS) של הגרגרים נקבעו על ידי השיטות הסטנדרטיות 23. גורם ההמרה בין משקל רטוב גרגיר - המשקל של הגרגרים נלקחים ישירות הגלול - ואת TS נקבע לפני החילוץ. כל העקירות נעשו triplicates. הערה: 3 g g הרטובranules שמש עבור כל שיטת חילוץ. TS וערכיהם VS (TS 0.39 גרם ו 0.34 גרם VS), נמדד triplicates, שימשו על מנת לחשב את התשואה החילוץ. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיצוי צנטריפוגה 11 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרגירים לתוך צינור צנטריפוגה ולמלא את הצינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל עם מים demineralized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הצינור צנטריפוגה ביד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צינור צנטריפוגה המכיל את התערובת על 4,000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant בכוס זכוכית, וזורקים את הכדור ולהמשיך עם supernatant כמפורט בסעיף 1.7. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיצוי Sonication 10 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרגירים לתוך צינור צנטריפוגה ולמלא את הצינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל עם מים demineralized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל sonication פעם על קרח למשך 2.5 דק &#39;ב 40 W לתערובת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צנטריפוגהשפופרת המכילה את התערובת על g 4,000 × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant בכוס זכוכית, וזורקים את הכדור ולהמשיך עם supernatant כמפורט בסעיף 1.7. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חומצת Ethylenediaminetetraacetic (EDTA) מיצוי 11 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרגירים לתוך בקבוק זכוכית 100 מ&quot;ל ולמלא את הבקבוק עד 50 מ&quot;ל עם 2% (w / v) פתרון EDTA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הבקבוק ביד ולאחסן אותו במקרר ב 4 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את התערובת לתוך צינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צינור צנטריפוגה המכיל את התערובת על 4,000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant בכוס זכוכית, וזורקים את הכדור ולהמשיך עם supernatant כמפורט בסעיף 1.7. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Formamide - מיצוי נתרן הידרוקסידי (NaOH) 13 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרגירים לתוך 100בקבוק זכוכית מ&quot;ל ולמלא את הבקבוק עד 50 מ&quot;ל עם מים demineralized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף 0.3 מ&quot;ל 99% לפוראמיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הבקבוק ביד ולאחסן אותו במקרר ב 4 מעלות צלזיוס במשך שעה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 20 מ&quot;ל 1 M NaOH להשהייה גרגיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הבקבוק ביד ולאחסן אותו במקרר ב 4 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את התערובת באופן שווה לשתי צינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צינורות צנטריפוגה המכילים את התערובת על 4,000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant בכוס זכוכית, וזורקים את הכדור ולהמשיך עם supernatant כמפורט בסעיף 1.7. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פורמלדהיד - NaOH חילוץ 11 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרגירים לתוך בקבוק זכוכית 100 מ&quot;ל ולמלא את הבקבוק עד 50 מ&quot;ל עם מים demineralized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף 0.3 מ&quot;ל 37% פורמלדהיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הבקבוק ביד וחנותאותו במקרר ב 4 מעלות צלזיוס במשך שעה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 20 מ&quot;ל 1 M NaOH להשהייה גרגיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט לנער את הבקבוק ביד ולאחסן אותו במקרר ב 4 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את התערובת באופן שווה לשתי צינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צינורות צנטריפוגה המכילים את התערובת על 4,000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant בכוס זכוכית, וזורקים את הכדור ולהמשיך עם supernatant כמפורט בסעיף 1.7. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טמפרטורה גבוהה - מיצוי סודיום קרבונט (Na 2 CO 3) 9,22,24 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרום חום 150 מ&quot;ל מי ברז בכוס זכוכית 1,000 מ&quot;ל על בוחש מגנטי עד 80 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 גרם (משקל רטוב) גרנולות בתוך 250 מ&quot;ל מבולבל הבקבוק למלא את הבקבוק עד 50 מ&quot;ל עם מים demineralized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף 0.25 g Na 2 CO 3 נטול מים או 0.67 גרם Na 2 CO 3 • 10H <sUB&gt; 2 O לתוך הבקבוק כדי להשיג 0.5% (w / v) Na 2 CO ריכוז 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את הבקבוק המכיל את התערובת לתוך אמבט מים. מכסה את הבקבוק ואת כוס הכוס בנפרד בנייר אלומיניום כדי למנוע אידוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים את התערובת במשך 35 דקות ב 400 סל&quot;ד ו -80 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את התערובת לתוך צינור צנטריפוגה 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה צינור צנטריפוגה המכיל את התערובת על 4,000 גרם × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף supernatant וזורקים את הכדור. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> TS ו VS מדידה כל התמציות פי השיטות הסטנדרטיות 23. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את supernatant dialyze זה למשך 24 שעות נגד 1,000 מ&quot;ל מים ultrapure (שקית דיאליזה עם 3,500 משקל מולקולרי Da מנותקים (MWCO)) 11,12. להחליף את מי דיאליזה לאחר 12 שעות כדי להגביר את האפקט של הדיאליזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבר חלק סביר (סביב 1/3) של supernatant dialyzed כדיצלחת אלומיניום עבור TS ו VS המדידה 23. הערה: יבש המדגם לילה ב 105 מעלות צלזיוס. ההבדל במשקל של מנת האלומיניום הריקה ואת מנת האלומיניום המכיל המדגם המיובש הוא תוכן TS. ואז לשרוף את אותה מנת אלומיניום המכיל המדגם ב 550 מעלות צלזיוס למשך 2 שעות. ההבדל במשקל בין צלחת האלומיניום הריקה ואת מנת האלומיניום המכיל המדגם הנשרף הוא תכול האפר. ההבדל בין תוכן TS ואפר הוא התוכן VS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור כל קטע, להעביר את החלק היחסי שיורית של supernatant dialyzed עד 10 כוסות זכוכית מ&quot;ל. לעבות את supernatant עבור 2 ימים ב 60 ° C עד נפח סופי של 1-2 מ&quot;ל כדי להגדיל את הריכוז פולימר ב supernatant. </li></ol></li></ol> הפקת 2. אלגינט דמוי פולימר תאי (ALE) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dialyze התמצית שהושגה בשלב 1.6.8 על פי צעד 1.7.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את תמצית dialyzed לתוך כוס זכוכית 250 מ&quot;ל. לְהַאֵטly ומערבבים החילוץ ב 100 סל&quot;ד ו בטמפרטורת החדר. כל הזמן לעקוב אחר שינויים pH עם אלקטרודה pH, תוך הוספת 1 חומצה הידרוכלורית M (HCl) על pH הסופי של 2.2 ± 0.05 להשיג ALE בצורת חומצי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר התאמת ה- pH 2.2, להעביר את תמצית לתוך צינור צנטריפוגות צנטריפוגה 50 מ&quot;ל ב 4000 g × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בטל supernatant ולאסוף גלולה דמוי ג&#39;ל. הגלולה דמוית ג&#39;ל היא ALE בצורת חומצי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להשיג את נתרן (או אשלגן) בצורת ALE, לאט להוסיף 0.5 M NaOH (או 0.5 M אשלגן הידרוקסידי) הג&#39;ל שהושגו בשלב 2.4, תוך ערבוב את הג&#39;ל לאט עם מקל זכוכית ביד עד pH 8.5 הוא הגיע. </li></ol> 3. מבחן גיבוש יונית הידרוג&#39;ל הערה: כדי לבדוק אם EPS שחולץ היה נכסי היווצרות הידרוג&#39;ל יוניים, מבחן היווצרות חרוז עם יוני Ca 2+ שמש 25. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר העיבוי של התמצית בשלב 1.7.3 כדיבהיקף של 1-2 מ&quot;ל, מערבבים את התערובת לאט עם מקל זכוכית ולהתאים pH שלו 8.5 עם 0.5 M NaOH. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את התמצית של שלב 3.1 או ALE נתרן של שלב 2.5 ולאט לאט לטפטף את התמצית עם פיפטה פסטר לתוך 2.5% (w / v) כלוריד סידן (2 CaCl) פתרון. הערה: אם EPS החילוץ יש ג&#39;ל הידרוג&#39;ל היוני להרכיב נכסים, טיפה בצורת (כדוריים) חרוזים יוקמו. אם EPS החילוץ אין ג&#39;ל הידרוג&#39;ל יוני להרכיב נכסים, התמצית תתפזר בפתרון 2 CaCl. </li></ol> 4. מבחן היציבות של הידרוג&#39;ל יונית הערה: כדי להמשיך להבין את התפקיד של הידרוג&#39;ל EPS היוני במבנה מבנה AGS, בדיקות יציבות בוצעו על חרוזי הידרוג&#39;ל היוניים של מיצוי Na 2 CO 3, שנאספו בשלב 3.2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את החרוזים הידרוג&#39;ל למשך 30 דקות בתמיסה 2 CaCl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת כף כדי להוציא את החרוזים הידרוג&#39;ל מן CaCl 2 </sub&gt; פתרון ולפצל את החרוזים ארבעה חלקים שווים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חנות חלק 1 ב 10 מ&quot;ל Demineralized מים במשך 4 שעות ב 4 ° C. הבדיקות היציבות הבאות בוצעו באותו אופן כפי שמתוארות שיטות חילוץ 1.3 - 1.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלק 2 חנות ב 10 מ&quot;ל 2% (w / v) פתרון EDTA במשך 3 שעות ב 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חנות חלק 3 ב 7.15 מ&quot;ל Demineralized מים עם 60 μl 99% לפוראמיד עבור שעה 1 ב 4 ° C. לאחר מכן מוסיפים 2.85 מ&quot;ל 1 M NaOH ולאחסן חלק 3 עבור 3 שעות ב 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חנות חלק 4 ב 7.15 מ&quot;ל Demineralized מים עם 60 μl 37% פורמלדהיד עבור שעה 1 ב 4 ° C. לאחר מכן מוסיפים 2.85 מ&quot;ל 1 M NaOH ולאחסן חלק 4 עבור 3 שעות ב 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג אם יש התפוררות גלויה של החרוזים במהלך האחסון בתנאים שתוארו ב 4.3 - 4.6 ל- להעריך אם החרוזים לעמוד בתנאי חילוץ. </li></ol>

<ol>
	<li>Pronk, M., de Kreuk, M. K., de Bruin, B., Kamminga, P., Kleerebezem, R., van Loosdrecht, M. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Full+scale+performance+of+the+aerobic+granular+sludge+process+for+sewage+treatment.">Full scale performance of the aerobic granular sludge process for sewage treatment.</a> Water Res. 84, 207-217 (2015).</li><li>Kreuk, M. K., Kishida, N., van Loosdrecht, M. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerobic+granular+sludge+-+state+of+the+art.">Aerobic granular sludge - state of the art.</a> Water Sci. Technol. 55 (8-9), 75 (2007).</li><li>Adav, S. S., Lee, D. J., Show, K. Y., Tay, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerobic+granular+sludge:+Recent+advances.">Aerobic granular sludge: Recent advances.</a> Biotechnol. Adv. 26, 411-423 (2008).</li><li>Seviour, T., Pijuan, M., Nicholson, T., Keller, J., Yuan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+properties+of+aerobic+sludge+granules+as+hydrogels.">Understanding the properties of aerobic sludge granules as hydrogels.</a> Biotechnol. Bioeng. 102 (5), 1483-1493 (2009).</li><li>Flemming, H. -. C., Wingender, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biofilm+matrix.">The biofilm matrix.</a> Nat. Rev. Microbiol. 8 (9), 623-633 (2010).</li><li>Seviour, T., Yuan, Z., van Loosdrecht, M. C. M., Lin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerobic+sludge+granulation:+A+tale+of+two+polysaccharides?.">Aerobic sludge granulation: A tale of two polysaccharides?.</a> Water Res. 46 (15), 4803-4813 (2012).</li><li>Wingender, J., Neu, T. R., Flemming, H. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+are+Bacterial+Extracellular+Polymeric+Substances.">What are Bacterial Extracellular Polymeric Substances.</a> Microb. Extracell. Polym. Subst. Charact. Struct. Funct. , 27-53 (1999).</li><li>Flemming, H. -. C., Neu, T. R., Wozniak, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EPS+Matrix:+The+&#34;House+of+Biofilm+Cells.&#34;.">The EPS Matrix: The &#34;House of Biofilm Cells.&#34;.</a> J. Bacteriol. 189 (22), 7945-7947 (2007).</li><li>Lin, Y. M., Sharma, P. K., van Loosdrecht, M. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemical+and+mechanical+differences+between+alginate-like+exopolysaccharides+isolated+from+aerobic+flocculent+sludge+and+aerobic+granular+sludge.">The chemical and mechanical differences between alginate-like exopolysaccharides isolated from aerobic flocculent sludge and aerobic granular sludge.</a> Water Res. 47 (1), 57-65 (2013).</li><li>Fang, H. H. P., Jia, X. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+extracellular+polymer+from+anaerobic+sludges.">Extraction of extracellular polymer from anaerobic sludges.</a> Biotechnol. Tech. 10 (11), 803-808 (1996).</li><li>Liu, H., Fang, H. H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+extracellular+polymeric+substances+(EPS)+of+sludges.">Extraction of extracellular polymeric substances (EPS) of sludges.</a> J. Biotechnol. 95, 249-256 (2002).</li><li>Comte, S., Guibaud, G., Baudu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+extraction+method+on+EPS+from+activated+sludge:+An+HPSEC+investigation.">Effect of extraction method on EPS from activated sludge: An HPSEC investigation.</a> J. Hazard. Mater. 140 (1-2), 129-137 (2007).</li><li>Adav, S. S., Lee, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+extracellular+polymeric+substances+from+aerobic+granule+with+compact+interior+structure.">Extraction of extracellular polymeric substances from aerobic granule with compact interior structure.</a> J. Hazard. Mater. 154, 1120-1126 (2008).</li><li>Pan, X., Liu, J., Zhang, D., Chen, X. I., Li, L., Song, W., Yang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+five+extraction+methods+for+extracellular+polymeric+substances+(EPS)+from+biofilm+by+using+three-dimensional+excitation-emission+matrix+(3DEEM)+fluorescence+spectroscopy.">A comparison of five extraction methods for extracellular polymeric substances (EPS) from biofilm by using three-dimensional excitation-emission matrix (3DEEM) fluorescence spectroscopy.</a> Water SA. 36 (1), 111-116 (2010).</li><li>D'Abzac, P., Bordas, F., Van Hullebusch, E., Lens, P. N. L., Guibaud, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+extracellular+polymeric+substances+(EPS)+from+anaerobic+granular+sludges:+Comparison+of+chemical+and+physical+extraction+protocols.">Extraction of extracellular polymeric substances (EPS) from anaerobic granular sludges: Comparison of chemical and physical extraction protocols.</a> Appl. Microbiol. Biotechnol. 85 (5), 1589-1599 (2010).</li><li>Comte, S., Guibaud, G., Baudu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relations+between+extraction+protocols+for+activated+sludge+extracellular+polymeric+substances+(EPS)+and+EPS+complexation+properties:+Part+I.+Comparison+of+the+efficiency+of+eight+EPS+extraction+methods.">Relations between extraction protocols for activated sludge extracellular polymeric substances (EPS) and EPS complexation properties: Part I. Comparison of the efficiency of eight EPS extraction methods.</a> Enzyme Microb. Technol. 38 (1-2), 237-245 (2006).</li><li>Adav, S. S., Lee, D. J., Tay, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+polymeric+substances+and+structural+stability+of+aerobic+granule.">Extracellular polymeric substances and structural stability of aerobic granule.</a> Water Res. 42, 1644-1650 (2008).</li><li>Caudan, C., Filali, A., Lefebvre, D., Sp&#233;randio, M., Girbal-Neuhauser, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+polymeric+substances+(EPS)+from+aerobic+granular+sludges:+Extraction,+fractionation,+and+anionic+properties.">Extracellular polymeric substances (EPS) from aerobic granular sludges: Extraction, fractionation, and anionic properties.</a> Appl. Biochem. Biotechnol. 166 (7), 1685-1702 (2012).</li><li>Fr&#248;lund, B., Palmgren, R., Keiding, K., Nielsen, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+extracellular+polymers+from+activated+sludge+using+a+cation+exchange+resin.">Extraction of extracellular polymers from activated sludge using a cation exchange resin.</a> Water Res. 30 (8), 1749-1758 (1996).</li><li>Nielsen, P. H., Jahn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+EPS.">Extraction of EPS.</a> Microb. Extracell. Polym. Subst. Charact. Struct. Funct. , 49-72 (1999).</li><li>Lin, Y. M., Nierop, K. G. J., Girbal-Neuhauser, E., Adriaanse, M., van Loosdrecht, M. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustainable+polysaccharide-based+biomaterial+recovered+from+waste+aerobic+granular+sludge+as+a+surface+coating+material.">Sustainable polysaccharide-based biomaterial recovered from waste aerobic granular sludge as a surface coating material.</a> Sustain. Mater. Technol. 4, 24-29 (2015).</li><li>Lin, Y. M., Wang, L., Chi, Z. M., Liu, X. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+Alginate+Role+in+Aerobic+Granular+Bio-particles+Formation+and+Settleability+Improvement.">Bacterial Alginate Role in Aerobic Granular Bio-particles Formation and Settleability Improvement.</a> Sep. Sci. Technol. 43 (7), 1642-1652 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. , (1998).</li><li>Mchugh, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A guide to the seaweed industry. , (2003).</li><li>Lin, Y., de Kreuk, M., van Loosdrecht, M. C. M., Adin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+alginate-like+exopolysaccharides+isolated+from+aerobic+granular+sludge+in+pilot-plant.">Characterization of alginate-like exopolysaccharides isolated from aerobic granular sludge in pilot-plant.</a> Water Res. 44 (11), 3355-3364 (2010).</li><li>Zorel, J. A., Aquino, S. F., Sanson, a. L., Castro-Borges, W., Silva, S. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+EPS+extraction+protocols+from+anaerobic+sludge+for+gel-based+proteomic+studies.">Evaluation of EPS extraction protocols from anaerobic sludge for gel-based proteomic studies.</a> Water Sci. Technol. 72 (4), 535 (2015).</li><li>Ruiz-Hernando, M., Cabanillas, E., Labanda, J., Llorens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound,+thermal+and+alkali+treatments+affect+extracellular+polymeric+substances+(EPSs)+and+improve+waste+activated+sludge+dewatering.">Ultrasound, thermal and alkali treatments affect extracellular polymeric substances (EPSs) and improve waste activated sludge dewatering.</a> Process Biochem. 50 (3), 438-446 (2015).</li><li>Seviour, T., Pijuan, M., Nicholson, T., Keller, J., Yuan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gel-forming+exopolysaccharides+explain+basic+differences+between+structures+of+aerobic+sludge+granules+and+floccular+sludges.">Gel-forming exopolysaccharides explain basic differences between structures of aerobic sludge granules and floccular sludges.</a> Water Res. 43, 4469-4478 (2009).</li><li>de Kerchove, A. J., Elimelech, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+polysaccharide+gel+layers+in+the+presenceof+Ca2++and+K++ions:+Measurements+and+mechanisms.">Formation of polysaccharide gel layers in the presenceof Ca2+ and K+ ions: Measurements and mechanisms.</a> Biomacromolecules. 8 (1), 113-121 (2007).</li><li>Jiang, H. L., Tay, J. H., Liu, Y., Tay, S. T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2++augmentation+for+enhancement+of+aerobically+grown+microbial+granules+in+sludge+blanket+reactors.">Ca2+ augmentation for enhancement of aerobically grown microbial granules in sludge blanket reactors.</a> Biotechnol. Lett. 25 (2), 95-99 (2003).</li><li>Liang, Z., Li, W., Yang, S., Du, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+and+structural+characteristics+of+extracellular+polymeric+substances+(EPS),+pellets+in+autotrophic+nitrifying+biofilm+and+activated+sludge.">Extraction and structural characteristics of extracellular polymeric substances (EPS), pellets in autotrophic nitrifying biofilm and activated sludge.</a> Chemosphere. 81 (5), 626-632 (2010).</li><li>Guo, X., Liu, J., Xiao, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+damage+of+cell+wall+and+cell+membrane+for+various+extracellular+polymeric+substance+extractions+of+activated+sludge.">Evaluation of the damage of cell wall and cell membrane for various extracellular polymeric substance extractions of activated sludge.</a> J. Biotechnol. 188, 130-135 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

הערות על סעיף הפרוטוקול הפקת EPS / ALE מתואר עבור נפח של 50 מ&quot;ל ו -3 גרם של גרגרי. ערכים אלו אמורים כקווים מנחים. עקירות עם ריכוזי גרגיר גבוהים יכולות להפחית את התשואה של EPS החילוץ. במהלך החילוץ של ALE הטמפרטורה חייבת להישמר קבועה על 80 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות. כמה זמן נדרש עבור תערובת לחמם (כ -5 דקות) נכלל בפרוטוקול. יתר על כן, את יעילות החילוץ לשפר באמצעות בר ומערבבים מגנטי באותו הגודל כמו בקוטר של תחתית הבקבוק. זה יגרום נכסי ערבוב טובים ואפקטי טחינה, קידום החילוץ של EPS. בהמשך סעיף הפרוטוקול, TS ו VS תשואות של כל העקירות (supernatant שנאספו צעדים 1.1-1.6) נחושות. דיאליזה צריכה להתבצע לפני TS ו VS מדידה כדי להקטין שגיאות אפשריות בשל הנוכחות של כימיקלים המשמשים עקירות. אMWCO של 3,500 Da מומלץ להסיר כימיקלים אלה תוך שמירה על מקרומולקולות EPS בתוך שקית דיאליזה. תיק הדיאליזה צריך נפח גדול יותר מאשר הנפח של התמצית. זה הכרחי, כי עוצמת השמע של תמצית יגדל במהלך דיאליזה (למשל, להפקת EDTA עד 40% מהגידול הכמותי). מידת ההסרה כימית על ידי דיאליזה יכולה להיקבע על ידי מדידת pH במדגם לפני ואחרי הדיאליזה. לחלופין, מדידות מוליכות של מי הדיאליזה להראות את מידת הסרת יון. כדי להשיג ALE מן EPS חילוץ הכולל (שלבי 1.6 ו -2) צעד הדיאליזה הוא אופציונאלי. אף על פי כן, יש דיאליזה שלושה יתרונות: היא מפחיתה את כמות HCl דרושים הממטרים, זה משפרת את ההעברה המוני חומצה בקטע ומפחיתה את תכולת האפר של ALE שהושג. משקעים של ALE מומלץ להשתמש בכוס זכוכית עם נפח גדול בהרבה מאשר extract. Na 2 CO 3 הוא מת ממנת יתר בדרך כלל ב החילוץ. המוסף HCl הראשון יגיב עם CO Na 2 3 עזב בתמצית, וכתוצאה מכך היווצרות פחמן דו חמצני, אם המדגם לא היה dialyzed לפני, ב הקצפה. במהלך התוספת של HCl, התמצית צריכה להתרגש לאט עם בר ומערבבים מגנטי באותו הגודל כמו חלק התחתון של הכוס. בר ומערבבים בסדר גודל כזה ואת ערבוב איטי תגרום אפילו ערבוב בלי לשבור את המבנה של המשקע. אם גושי ג&#39;ל חומצי נוצרים בקטע, הכוס יש הסתחררה מעט ביד. כמות המשקעים היא מתקיימת תוך שימת ריכוז החומצה של 1 M להימנע עלייה בנפח גדול של תמצית ועדיין קבלת חלוקה הומוגנית של חומצה במדגם. ריכוזי חומצה גבוהים יכולים לגרום במערך ירידת pH אזורי גושי ג&#39;ל חומצי. ה- pH נמוך מ 2.0 מצמצם את כמות ALE כי ניתן לשחזר, ככל הנראה בשל שינויים מבנייםשל פולימרים ב- pH נמוך. לכן חשוב לשמור על pH הסופי 2.20 ± 0.05. מגבלות שיטת חילוץ ALE שואפת לחלץ פולימרים תאיים מבניים של EPS מ AGS או biofilms בכלל לא נועדה לחלץ את כל EPS הנוכחי. כדי לחלץ את כל EPS, שילוב של יותר מ שיטת חילוץ אחד הוא הכרחי. יתר על כן, כפי שמוצג עם העלייה של תשואת VS EPS ידי החלת חילוץ כפול מרובע, מיצוי אחד לא לחלץ את כל EPS המבני. מיצוי ALE הוא שיטת חילוץ EPS קשה, שילוב ערבוב מתמיד עם תנאי חום אלקליין. מסיבה זו ייתכן כי חומר תאי כמה מופק יחד עם EPS. למרות תמוגה תא יכול להיגרם על ידי שיטות מיצוי פיסיקלי וכימי (sonication 31,32, NaOH 31,32, EDTA 11,32, 32 CER, חום 32 ו שיעורי גזירה גבוהה על ידי מ &#39;ixing 19), בנוכחות חומר תאי EPS התאושש עדיין צריכה להיות מאומתת. הנכס היוני יוצרי ג&#39;ל של EPS החילוץ הוא המוקד העיקרי של מחקר זה, אם EPS התאושש מכיל חומר תאי לא נותח. מחקר עתידי יתמקד בזיהוי חומר תאי בתוך EPS החילוץ. Solubilizing המטריצה הידרוג&#39;ל של AGS חיונית כדי לחלץ EPS המבני צורות EPS מטריצת הידרוג&#39;ל צפופה וקומפקטית ב AGS. למרות EPS מכיל שיעורים שונים של מקרומולקולות אורגניות כגון סוכרים, חלבונים, חומצות גרעין, (phospho) שומנים, חומרים humic וכמה פולימרי אינטר 7,5,8, לא כולם יוצרים ג&#39;ל. רק אלו פולימרים יוצרי ג&#39;ל נחשבים כאן כמו פולימרים מבניים EPS. מטרת עקירות EPS היא solubilize EPS הראשון ולאחר מכן לאסוף את EPS solubilized. אם EPS המבני (כלומר, tהוא EPS ויצרו הידרוג&#39;ל) היא היעד של מיצוי, מטריקס ג&#39;ל של AGS יש solubilized הראשון. שיטות יחידות שיכול solubilize מטריקס ג&#39;ל מסוגלות לחילוץ EPS המבני. במחקר זה, כמה קרובות השתמשו בשיטות מיצוי EPS כגון צנטריפוגה 10 - 15, sonication 10,14,15, EDTA 10 - 12,14,15, פורמלדהיד + NaOH 10 - 15 לפוראמיד + NaOH 13 לא יכול ביעילות לבודד את מבניים EPS. זאת בשל העובדה כי מטריקס הידרוג&#39;ל של הגרגר האירובי לא היה solubilized בשיטות אלה. מסיבה זו, בדיקות יציבות בסעיף 4 בוצעו רק עם התנאים הנוכחיים EDTA, לפוראמיד + NaOH ו פורמלדהיד + מיצוי NaOH. עקירות שלוש אלה לא היו מסוגלים לבודד EPS המבני, אך עדיין השיגו את התשואה הגבוהה ביותר VS EPS מלבד חילוץ 3 Na 2 CO. תנאי of החילוץ 3 Na 2 CO לא יושמו כפי שיטת החילוץ זה בבירור solubilized המטריצה AGS. לפיכך התנאים שיושמו בעת בדיקת יציבות נחשבו נציג. הפקה עם שרף קטיוני (CER), אחר שיטת חילוץ EPS בשימוש התכוף, לא נחשבה לצורך השוואה זו, כמו במחקרים קודמים על מיצוי EPS עם CER לא הניבו תוצאות טובות יותר מאשר העקירות הכימיות המשמשות כאן. ג&#39;ל יוצרי EPS ב AGS ג&#39;ל יוצרי EPS נחשב EPS המבני במטריצה ​​הידרוג&#39;ל של AGS. ראוי לציין כי ישנם סוגים שונים של הידרוג כגון ג&#39;לי יוניים, ג&#39;לים מושרה טמפרטורה וג&#39;ל מושרה pH. מחקר זה מתמקד רק EPS יוצרות ג&#39;לי יוניים. לגבי החלק הגדול של חומר ג&#39;ל מבני חילוץ, זה עשוי להיות EPS מבני הדומיננטי. יש בהחלט אפשרויות שסוגים אחרים של EPSהטופס כי סוגים שונים של הידרוג&#39;ל (למשל, ג&#39;ל מושרה pH 28) קיים מהסוג הזהה או אחר של גרגר אירובי. אף על פי כן, לא משנה איזה סוג של הידרוג&#39;ל הוא ממוקד, solubilizing מטריקס ג&#39;ל EPS היא הצעד החשוב ביותר כדי לחלץ EPS יוצרי ג&#39;ל. נכון לעכשיו, מחקר קטן שנעשה על EPS המבני של בוצה פרטנית. מיצוי ALE המתואר בפרוטוקול זה הוא מסוגל להוציא EPS יוצרי הג&#39;ל AGS וישמש במחקרים עתידיים לאפיין EPS המבני. מחקר נוסף צריך להיעשות על AGS, EPS המבני EPS הלא מבני כדי להבין טוב יותר את התהליך ותפקוד של פרור ו EPS. במיוחד בשלוש הנקודות הבאות צריכות להיחקר: למה מיקרואורגניזמים לייצר כמות כה גדולה של EPS, מהו ההרכב המדויק של EPS וכיצד הוא בהרכב EPS שהשתנה בהתאם לשינויים סביבתיים. זיהוי וניתוח כל התרכובות המעורבות interacti שלהםons יעזור להבין biofilms ואיך להשתמש בהם לטובתנו.

בשנים האחרונות הבוצה פרטנית האירובי (AGS) התהליך הפך תהליך טיפול ביולוגי בשפכים פופולרי, מיושם בהצלחה במפעלי טיהור שפכים כמה בקנה מידה מלאה 1. בניגוד לתהליך הבוצה הקונבנציונלי הופעל, ב AGS לעבד את מיקרואורגניזמים יוצרים גרגירים במקום flocs 2. יש גרגירים אלה settleability טוב יותר, מסוגלים לעמוד שיעורים ועומס אורגניים גבוהים, ויש להם סובלנות גבוהה יותר כדי רעיל מ flocs בוצה משופעלת 3. בניגוד biofilms, AGS נוצר באופן ספונטני ללא מעורבות של כל חומר הספק 4. ב AGS, כמו biofilms, מיקרואורגניזמים לייצר כמות משמעותית של חומרים פולימריים תאיים hydrated ביותר (EPS) 5 לטופס מטריקס הידרוג&#39;ל שבו הם-משותקת עצמית 4 - 6. EPS הוא תערובת מורכבת, מורכבת סוכרים, חלבונים, חומצות גרעין, (phospשומנים הו), חומרים humic וכמה פולימרים אינטר 5,7,8. חומרים פולימריים אלה לתקשר אחד עם השני באמצעות כוחות אלקטרוסטטיים, קשרי מימן, כוחות יוניים אטרקטיביים ו / או תגובות ביוכימיות, וכו &#39;5, היוצרים מבנה רשת שליישונים צפוף וקומפקטי. הפולימרים ב EPS אשר מסוגלים ליצור הידרוג 4,9 ו לתרום להיווצרות של מבנה רשת שליישונים הם מבחינה זו נחשבת EPS מבני, קבוצת משנה של EPS הכולל. EPS אחראי המבנה הכימי ותכונות פיזיקליות של גרגרים 5. לכן חיוני כדי להבין את תפקידו של כל מתחם EPS. גישות שונות משמשות כדי לחלץ EPS 10 - 15. עם זאת, בשל המורכבות הקיצונית שלהם, זה כמעט בלתי אפשרי לחלץ את כל רכיבי EPS בשיטה אחת. נכון להיום, אין &quot;מידה אחת מתאימה לכולם&quot; שיטה להפקת EPS. הבחירה של שיטת החילוץ משפיעה לא רק את הסכום הכולל, אלא גם את רכב הפולימרים התאוששו 13,16 - 20. בהתאם לסוג של בוצה ואת EPS של שיטות שונות ריבית נדרשת. חילוץ פולימרים יוצרי ג&#39;ל, אפיון תכונותיהם חוקרת הגומלין שלהם אחד עם השני ועם EPS שאינם יוצרי ג&#39;ל יעזור לחשוף את התפקיד של EPS במבנה בוצה פרטנית אירובית. יתר על כן, פולימרי יוצרי ג&#39;ל גם biopolymers השימושי ביישומים תעשייתיים. אחד יישומים אפשריים כבר הוצגו באמצעות פולימרי יוצרי הג&#39;ל AGS כחומר ציפוי כדי להגדיל את התנגדות המים של נייר 21. לכן, שיטות חילוץ, ספציפית עבור EPS יוצרי ג&#39;ל נדרשות. מטרת מחקר זה היא לפתח מתודולוגיה כדי לחלץ EPS יוצרי הג&#39;ל AGS. שש שיטות חילוץ 10 - 15,22, אשר משמשים לעתים קרובות בספרות, נבחרו כדי לחלץ EPS מ AGS. הסכום הכולל ואת רכוש יוצרי ג&#39;ל של EPS חילוץ הושוו עבור כל מתודולוגיה.

<table><tbody><tr><td>250 ml baffled flask</td><td>Kimble</td><td>25630-250</td><td></td></tr><tr><td>1,000 ml glass beaker</td><td>VWR</td><td>213-1128</td><td></td></tr><tr><td>RCT basic, magnetic stirrer with thermometer</td><td>IKA</td><td>3810000</td><td></td></tr><tr><td>sodium carbonate decahydrate</td><td>Merck KGaA</td><td>1063911000</td><td></td></tr><tr><td>50 ml centrifugation tubes</td><td>greiner bio-one</td><td>227261</td><td></td></tr><tr><td>Multifuge 1 S-R, centrifuge</td><td>Heraeus/Thermo Scientific</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>hydrochloric acid, 37%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>30721-1L-GL-D</td><td></td></tr><tr><td>250 ml glass beaker</td><td>VWR</td><td>213-1124</td><td></td></tr><tr><td>calcium chloride dihydrate</td><td>Merck KGaA</td><td>1023821000</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Pasteur Pipette</td><td>Copan</td><td>201C</td><td></td></tr></tbody></table>

extraction of structural extracellular polymeric substances from aerobic granular sludge

To evaluate and develop methodologies for the extraction of gel-forming extracellular polymeric substances (EPS), EPS from aerobic granular sludge (AGS) was extracted using six different methods (centrifugation, sonication, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), formamide with sodium hydroxide (NaOH), formaldehyde with NaOH and sodium carbonate (Na2CO3) with heat and constant mixing). AGS was collected from a pilot wastewater treatment reactor. The ionic gel-forming property of the extracted EPS of the six different extraction methods was tested with calcium ions (Ca2+). From the six extraction methods used, only the Na2CO3 extraction could solubilize the hydrogel matrix of AGS. The alginate-like extracellular polymers (ALE) recovered with this method formed ionic gel beads with Ca2+. The Ca2+-ALE beads were stable in EDTA, formamide with NaOH and formaldehyde with NaOH, indicating that ALE are one part of the structural polymers in EPS. It is recommended to use an extraction method that combines physical and chemical treatment to solubilize AGS and extract structural EPS.

מיצוי EPS הופעתו של גרגרים לאחר ומיישום נהלי חילוץ EPS השונה מוצגת באיור 1. המבנה בצורת ג&#39;ל גרגירים היו שלם לאחר צנטריפוגה (איור 1 א) והפקת EDTA (איור 1 ג &#39;). גרגרים נשברו לרסיסים בגדלים שונים על ידי sonication. העכירות בשלב הנוזלי יכולות להיות בגלל השעיה של שברים קטנים (איור 1b) כמו עכירות ירד מאוד לאחר צנטריפוגה. Formamide פורמלדהיד לבד לא תהיה כל השפעה על שינוי הצורה של גרגר ומבנה ג&#39;ל שלה (מידע לא מוצג). לאחר תוספת של NaOH, בשלב נוזל הפך צהבהב. כמה חומר מוכה היה מנותק מן השטח של הגרגירים יצר שכבה על גבי הגרגרים התיישבו (איור 1D ו 1E). ובכל זאת, את הצורה שלגרגירים לא שונו. תוספת של NaOH כנראה השתפר solubilization EPS, אבל לא יכול לפגוע במבנה מטריקס ג&#39;ל. לשם השוואה, גרגירים נעלמו לחלוטין לאחר חילוץ 3 Na 2 CO (1F איור). במקום תערובת של חלקיקים דמויי ג&#39;לי נוזליים זעירים סול כמו נוצרה, מראה את מטריקס ג&#39;ל גרגירים היה solubilized אכן. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54534/54534fig1.jpg" /> איור 1. בוצת EPS הפרטנית אירובי עקירות. במשך ויזואליזציה טובה יותר של ההשפעה של כל שיטת חילוץ על הגרגירים, ניסויים נערכו 25 מיליליטר בקבוקי זכוכית. לאחר שהסתיים הליך החילוץ, התמציות הוחזקו במשך שעה 1 בטמפרטורת חדר כדי לאפשר משנה המושעית להתיישב. (א) החילוץ צנטריפוגה, (ב) מיצוי Sonication, (ג) מיצוי EDTA, (ד) Formamide - NaOH נוסףction, (ה) פורמלדהיד - מיצוי NaOH, (ו) טמפרטורה גבוהה -. Na 2 CO 3 החילוץ <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/54534/54534fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> EPS תשואה ביחס שבר VS לכל שיטה מתוארת באיור 2. התשואה מוצגת מ&quot;ג VS EPS לכל הראשונית גרם VS גרגיר. כמות EPS מתקבל על ידי פורמלדהיד + NaOH, לפוראמיד + NaOH ו Na 2 CO 3 + חום + ערבוב היה גבוה יותר מזה של צנטריפוגה, sonication והפקת EDTA. תוצאות דומות עבור שיטות מיצוי אלה הוצגו גם על ידי מחקרים קודמים 11 - 13,15 המציין כי תנאי בסיסי לשפר EPS מסיס 26,27. כמות EPS התאוששה על ידי Na 2 CO 3<html> היה הגבוהה ביותר, יותר מ -20 פעמים זה מושג רק על ידי צנטריפוגה. בנוסף, תשואת EPS הכוללת של מיצוי Na 2 CO 3 יכולה להיות עוד יותר משופרת על ידי עקירות מרובות. חילוץ שני באמצעות הגלולה מושלכת בשלב 1.6.8 (סעיף פרוטוקול) של החילוץ הראשון הגדיל את התשואה הכוללת על ידי 28%, מיצוי מרובע אפילו הגדיל את התשואה הכוללת על ידי 46%. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54534/54534fig2.jpg" /> איור 2. תוצאות של כל שיטות החילוץ ביחס VS תשואה ותוכן אפר. עבור כל מיצוי הבר הראשון מייצג את התשואה VS במ&quot;ג VS EPS לכל הראשונית גרם VS גרגיר. הבר השני מייצג את אחוז המשקל של אפר TS החילוץ. הברים שגיאה להמחיש את סטיית התקן של שלוש עקירות ביצע עבור כל טכניקה החילוץ.&quot;_blank&quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. אלגינט דמוי פולימר תאי (ALE) מיצוי אחרי ה- pH של EPS שחולץ על ידי מיצוי Na 2 CO 3 הותאם 2.2, 63% מכלל תושבי העיר VS היה זרז. המשקע הוא חומצי ALE 25. השבר שיורי היה EPS סביר אשר ניתן solubilized בתנאי החילוץ, אך לא יכול להיוצר משקע ב- pH 2.2. מבחן היווצרות הידרוג&#39;ל יונית גרגרים אירוביים תוארו כדומה לזו של הידרוג. תהליך הפרור נחשב כתופעת יוצרי ג&#39;ל עם גליקוזידים כסוכן gelling 4,9,25,28. בדרך כלל, Ca 2 + הוא אחד קטיונים הנפוצים ביותר בשפכים. בנוסף, הוא נקשר בקלות עם סוכרים חומצי (למשל,alginates וחומצה פולי-galacturonic), מן הסתם גם יון לדלפק לתווך gelation 29. כך וכתוצאה מכך ionically הידרוג&#39;ל צולב. היה נראה כי התוספת של יוני 2+ Ca יכולה להאיץ פרור בוצה אירובית 30. לכן, Ca 2 + -EPS (הידרוג&#39;ל יוני) יכול לשחק תפקיד חשוב בבניית המבנה מטריקס ג&#39;ל בבוצה פרטנית אירובית. מבחינה זו, אם EPS החילוץ מהווה הידרוג&#39;ל יוני עם יוני Ca 2 + יכול לשמש כבדיקה על מנת לבדוק אם EPS החילוץ הוא פולימר מבני תורם להיווצרות של מטריקס ג&#39;ל בבוצה פרטנית אירובי 9. במחקר זה, עבור EPS מופק AGS (איור 3 א) על ידי שיטות שונות, רק EPS שחולץ על ידי Na 2 CO 3 שנערך בצורת טיפה 2.5% (w / v) פתרון CaCl 2 ויצר חרוזי הידרוג&#39;ל יוניים יציבים .יתר על כן, ALE נתרן המתקבל זו EPS ידי צעדים נוספים (מיצוי פולימר ALE, איור 3B) מוצג באותו הנכס וכן. הצבע והמורפולוגיה של חרוזי ג&#39;ל -ALE Ca 2 + (איור 3c) דומה בוצה הפרטנית אירובית (איור 3 א). ככל הנראה, EPS חילוץ בשיטת Na 2 CO 3 תורם להיווצרות של מטריקס ג&#39;ל בבוצה פרטנית אירובית. ALE, שהנו מרכיב עיקרי של EPS זה הוא פולימרים מבניים, מסוגל ליצור הידרוג&#39;ל יוני. בדיקת יציבות של הידרוג&#39;ל היוני היה נראה כי במהלך חילוץ EPS, גרגירים אירוביים שמרה צורה הכדורית שלהם EDTA, פורמלדהיד + NaOH ו לפוראמיד + NaOH (איור 1). על מנת להבין אם פולימרים מבניים חילוץ לשחק תפקיד היציבות של גרגירים, Ca 2 + -ALE חרוזים היולהתייחס אל דברים בדיוק באותו אופן כמו גרגר אירובי במהלך החילוץ. מעניין, Ca 2 + חרוזים -ALE הציגו את היציבות דומה לזה של AGS (3D איור - 3F), כלומר, Ca 2 + -ALE חרוזים היו יציבים מאוד EDTA. וקשה היה למצוא כמות ALE מנותק מפני השטח של Ca 2 + חרוזים -ALE (floc חום זעיר 3E איור ו 3F), כאשר חרוזים Ca 2+ -ALE היה טבול פורמלדהיד + NaOH ו לפוראמיד + NaOH במשך שלוש שעות , בהתאמה. דמיון זה במונחים של יציבות בין Ca 2 + חרוזי -ALE וגרגרים אירוביים עולה כי ALE הוא חלק אחד הפולימרים המבניים החשובים להרכיב את מטריקס ג&#39;ל AGS. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54534/54534fig3.jpg" /> איור 3. גרגרים אירוביים חילוץ ALE. (א) גרגירי pr מי demineralizedמיצוי IOR. (ב) ALE חומציים (חילוץ על פי הסעיפים 1.6 ו -2) לאחר צנטריפוגה ב g 4,000 × ו -4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. תוצאות של בדיקת היציבות של הידרוג&#39;ל היוני. (ג) Ca 2 + -ALE-חרוזים מאוחסנים מים demineralized עבור 4 שעות ב 4 ° C.. (ד) Ca 2 + -ALE-חרוזים מאוחסנים EDTA 2%, עבור 3 שעות ב 4 ° C.. (ה) Ca 2 + -ALE-חרוזים מאוחסנים לפוראמיד + NaOH עבור 4 שעות ב 4 ° C.. (ו) Ca 2 +-חרוזים -ALE מאוחסן בפורמלין + NaOH עבור 4 שעות ב 4 ° C. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/54534/54534fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Extraction of Structural Extracellular Polymeric Substances from Aerobic Granular Sludge at JoVE.com

Extraction of Structural Extracellular Polymeric Substances from Aerobic Granular Sludge

הפרוטוקול מספק מתודולוגיה solubilize בוצה פרטנית אירובית כדי לחלץ פולימרים תאיים דמוי אלגינט (ALE).

הפקת חומרים פולימריים המבני התאי מ אירובי גרגירי בוצה

To evaluate and develop methodologies for the extraction of gel-forming extracellular polymeric substances (EPS), EPS from aerobic granular sludge (AGS) ...

extraction-structural-extracellular-polymeric-substances-from-aerobic

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Environment

22.5K Views.  Delft University of Technology.  הפרוטוקול מספק מתודולוגיה solubilize בוצה פרטנית אירובית כדי לחלץ פולימרים תאיים דמוי אלגינט (ALE). 

Video: Extraction of Structural Extracellular Polymeric Substances from Aerobic Granular Sludge

Methods for Facilitating Microbial Growth on Pulp Mill Waste Streams and Characterization of the Biodegradation Potential of Cultured Microbes

The kraft process is applied to wood chips for separation of lignin from the polysaccharides within lignocellulose for pulp that will produce a high quality paper. Black liquor is a pulping waste generated by the kraft process that has potential for downstream bioconversion. However, the recalcitrant nature of the lignocellulose resources, its chemical derivatives that constitute the majority of available organic carbon within black liquor, and its basic pH present challenges to microbial biodegradation of this waste material. Methods for the collection and modification of black liquor for microbial growth are aimed at utilization of this pulp waste to convert the lignin, organic acids, and polysaccharide degradation byproducts into valuable chemicals. The lignocellulose extraction techniques presented provide a reproducible method for preparation of lignocellulose growth substrates for understanding metabolic capacities of cultured microorganisms. Use of gas chromatography-mass spectrometry enables the identification and quantification of the fermentation products resulting from the growth of microorganisms on pulping waste. These methods when used together can facilitate the determination of the metabolic activity of microorganisms with potential to produce fermentation products that would provide greater value to the pulping system and reduce effluent waste, thereby increasing potential paper milling profits and offering additional uses for black liquor.

Industrial wastes can be collected and modified to analyze microbial growth. Lignocellulose extraction techniques provide components to analyze specific biodegradation ability. Gas chromatography-mass spectrometry identifies fermentation products of microorganisms grown on pulping waste. These methods determine the metabolic capacity of microorganisms to degrade pulping waste.

The kraft process is applied to wood chips for separation of lignin from the polysaccharides within lignocellulose for pulp that will produce a high ...

Development of Sulfidogenic Sludge from Marine Sediments and Trichloroethylene Reduction in an Upflow Anaerobic Sludge Blanket Reactor

The importance of microbial sulfate reduction relies on the various applications that it offers in environmental biotechnology. Engineered sulfate reduction is used in industrial wastewater treatment to remove large concentrations of sulfate along with the chemical oxygen demand (COD) and heavy metals. The most common approach to the process is with anaerobic bioreactors in which sulfidogenic sludge is obtained through adaptation of predominantly methanogenic granular sludge to sulfidogenesis. This process may take a long time and does not always eliminate the competition for substrate due to the presence of methanogens in the sludge. In this work, we propose a novel approach to obtain sulfidogenic sludge in which hydrothermal vents sediments are the original source of microorganisms. The microbial community developed in the presence of sulfate and volatile fatty acids is wide enough to sustain sulfate reduction over a long period of time without exhibiting inhibition due to sulfide. 
This protocol describes the procedure to generate the sludge from the sediments in an upflow anaerobic sludge blanket (UASB) type of reactor. Furthermore, the protocol presents the procedure to demonstrate the capability of the sludge to remove by reductive dechlorination a model of a highly toxic organic pollutant such as trichloroethylene (TCE). The protocol is divided in three stages: (1) the formation of the sludge and the determination of its sulfate reducing activity in the UASB, (2) the experiment to remove the TCE by the sludge, and (3) the identification of microorganisms in the sludge after the TCE reduction. Although in this case the sediments were taken from a site located in Mexico, the generation of a sulfidogenic sludge by using this procedure may work if a different source of sediments is taken since marine sediments are a natural pool of microorganisms that may be enriched in sulfate reducing bacteria.

Microbial sulfate reduction is a process of great importance in environmental biotechnology. The success of the sulfidogenic reactors depends among other factors on the microbial composition of the sludge. Here, we present a protocol to develop sulfidogenic sludge from hydrothermal vents sediments in a UASB reactor for reductive dechlorination purposes.

פיתוח של Sulfidogenic בוצה מים משקעים וטריכלוריטן הפחתה בכור שמיכת Upflow אנאירובית בוצה

The importance of microbial sulfate reduction relies on the various applications that it offers in environmental biotechnology. Engineered sulfate ...

Au-Interaction of Slp1 Polymers and Monolayer from Lysinibacillus sphaericus JG-B53 - QCM-D, ICP-MS and AFM as Tools for Biomolecule-metal Studies

In this publication the gold sorption behavior of surface layer (S-layer) proteins (Slp1) of Lysinibacillus sphaericus JG-B53 is described. These biomolecules arrange in paracrystalline two-dimensional arrays on surfaces, bind metals, and are thus interesting for several biotechnical applications, such as biosorptive materials for the removal or recovery of different elements from the environment and industrial processes. The deposition of Au(0) nanoparticles on S-layers, either by S-layer directed synthesis 1 or adsorption of nanoparticles, opens new possibilities for diverse sensory applications. Although numerous studies have described the biosorptive properties of S-layers 2-5, a deeper understanding of protein-protein and protein-metal interaction still remains challenging. In the following study, inductively coupled mass spectrometry (ICP-MS) was used for the detection of metal sorption by suspended S-layers. This was correlated to measurements of quartz crystal microbalance with dissipation monitoring (QCM-D), which allows the online detection of proteinaceous monolayer formation and metal deposition, and thus, a more detailed understanding on metal binding.
The ICP-MS results indicated that the binding of Au(III) to the suspended S-layer polymers is pH dependent. The maximum binding of Au(III) was obtained at pH 4.0. The QCM-D investigations enabled the detection of Au(III) sorption as well as the deposition of Au(0)-NPs in real-time during the in situ experiments. Further, this method allowed studying the influence of metal binding on the protein lattice stability of Slp1. Structural properties and protein layer stability could be visualized directly after QCM-D experiment using atomic force microscopy (AFM). In conclusion, the combination of these different methods provides a deeper understanding of metal binding by bacterial S-layer proteins in suspension or as monolayers on either bacterial cells or recrystallized surfaces.

Au-Interaction of Slp1 Polymers and Monolayer from Lysinibacillus sphaericus JG-B53 - QCM-D, ICP-MS and AFM as Tools for Biomolecule-metal Studies

To obtain basic information on the sorption and recycling of gold from aqueous systems the interaction of Au(III) and Au(0) nanoparticles on S-layer proteins were investigated. The sorption of protein polymers was investigated by ICP-MS and that of proteinaceous monolayers by QCM-D. Subsequent AFM enables the imaging of the nanostructures.

Au-אינטראקציה של הפולימרים Slp1 וחד שכבתי מ<em&gt; Lysinibacillus sphaericus</em&gt; JG-B53 - QCM-D, ICP-MS וAFM ככלים לbiomolecule-מתכת לימודים

In this publication the gold sorption behavior of surface layer (S-layer) proteins (Slp1) of Lysinibacillus sphaericus JG-B53 is described. These ...

Chemistry

Looking Outwards: Isolation of Cyanobacterial Released Carbohydrate Polymers and Proteins

Cyanobacteria can actively secrete a wide range of biomolecules into the extracellular environment, such as heteropolysaccharides and proteins. The identification and characterization of these biomolecules can improve knowledge about their secretion pathways and help to manipulate them. Furthermore, some of these biomolecules are also interesting in terms of biotechnological applications. Described here are two protocols for easy and rapid isolation of cyanobacterial released carbohydrate polymers and proteins. The method for isolation of released carbohydrate polymers is based on conventional precipitation techniques of polysaccharides in aqueous solutions using organic solvents. This method preserves the characteristics of the polymer and simultaneously avoids the presence of contaminants from cell debris and culture medium. At the end of the process, the lyophilized polymer is ready to be used or characterized or can be subjected to further rounds of purification, depending on the final intended use. Regarding the isolation of the cyanobacterial exoproteome, the technique is based on the concentration of the cell-free medium after removal of the major contaminants by centrifugation and filtration. This strategy allows for reliable isolation of proteins that reach the extracellular milieu via membrane transporters or outer membrane vesicles. These proteins can be subsequently identified using standard mass spectrometry techniques. The protocols presented here can be applied not only to a wide range of cyanobacteria, but also to other bacterial strains. Furthermore, these procedures can be easily tailored according to the final use of the products, purity degree required, and bacterial strain.

Here, protocols for the isolation of cyanobacterial released carbohydrate polymers and isolation of their exoproteomes are described. Both procedures embody key steps to obtain polymers or proteins with high purity degrees that can be used for further analysis or applications. They can also be easily adapted according to specific user needs.

מבט כלפי חוץ: בידוד של Cyanobacterial שוחרר פולימרים פחמימות וחלבונים

Cyanobacteria can actively secrete a wide range of biomolecules into the extracellular environment, such as heteropolysaccharides and proteins. The ...

Biochemistry

Optimizing Attachment of Human Mesenchymal Stem Cells on Poly(&#949;-caprolactone) Electrospun Yarns

Research into biomaterials and tissue engineering often includes cell-based in vitro investigations, which require initial knowledge of the starting cell number. While researchers commonly reference their seeding density this does not necessarily indicate the actual number of cells that have adhered to the material in question. This is particularly the case for materials, or scaffolds, that do not cover the base of standard cell culture well plates. This study investigates the initial attachment of human mesenchymal stem cells seeded at a known number onto electrospun poly(&#949;-caprolactone) yarn after 4 hr in culture. Electrospun yarns were held within several different set-ups, including bioreactor vessels rotating at 9 rpm, cell culture inserts positioned in low binding well plates and polytetrafluoroethylene (PTFE) troughs placed within petri dishes. The latter two were subjected to either static conditions or positioned on a shaker plate (30 rpm). After 4 hr incubation at 37&#160;oC, 5% CO2, the location of seeded cells was determined by cell DNA assay. Scaffolds were removed from their containers and placed in lysis buffer. The media fraction was similarly removed and centrifuged &#8211; the supernatant discarded and pellet broken up with lysis buffer. Lysis buffer was added to each receptacle, or well, and scraped to free any cells that may be present. The cell DNA assay determined the percentage of cells present within the scaffold, media and well fractions. Cell attachment was low for all experimental set-ups, with greatest attachment (30%) for yarns held within cell culture inserts and subjected to shaking motion. This study raises awareness to the actual number of cells attaching to scaffolds irrespective of the stated cell seeding density.

This article describes a range of set-ups for seeding human mesenchymal stem cells onto materials, in this case electrospun yarns, that do not cover the base of standard culture well plates in order to maximize and quantify the number of cells that initially attach compared to the known seeding density.

אופטימיזציה של קובץ מצורף של תאי גזע mesenchymal האדם על פולי (ε-caprolactone) חוטים electrospun

Research into biomaterials and tissue engineering often includes cell-based in vitro investigations, which require initial knowledge of the starting cell ...

Bioengineering

A Novel Bioreactor for High Density Cultivation of Diverse Microbial Communities

A novel reactor design, coined a high density bioreactor (HDBR), is presented for the cultivation and study of high density microbial communities. Past studies have evaluated the performance of the reactor for the removal of COD1 and nitrogen species2-4 by heterotrophic and chemoautotrophic bacteria, respectively. The HDBR design eliminates the requirement for external flocculation/sedimentation processes while still yielding effluent containing low suspended solids. In this study, the HDBR is applied as a photobioreactor (PBR) in order to characterize the nitrogen removal characteristics of an algae-based photosynthetic microbial community. As previously reported for this HDBR design, a stable biomass zone was established with a clear delineation between the biologically active portion of the reactor and the recycling reactor fluid, which resulted in a low suspended solid effluent. The algal community in the HDBR was observed to remove 18.4% of total nitrogen species in the influent. Varying NH4+ and NO3- concentrations in the feed did not have an effect on NH4+ removal (n=44, p=0.993 and n=44, p=0.610 respectively) while NH4+ feed concentration was found to be negatively related with NO3- removal (n=44, p=0.000) and NO3- feed concentration was found to be positively correlated with NO3- removal (n=44, p=0.000). Consistent removal of NH4+, combined with the accumulation of oxidized nitrogen species at high NH4+ fluxes indicates the presence of ammonia- and nitrite-oxidizing bacteria within the microbial community.

A novel reactor design, coined a high density bioreactor (HDBR), is presented for the cultivation and study of high density microbial communities. Here, the HDBR is successfully applied in a photobioreactor (PBR) configuration for the study of nitrogen metabolism by a mixed high density algal community.

Bioreactor רומן לטיפוח צפיפות גבוה של קהילות חיידקים מגוונות

A novel reactor design, coined a high density bioreactor (HDBR), is presented for the cultivation and study of high density microbial communities. Past ...

<meta charset="utf8"></head><body>מידול נישות מתאנוטרופ – המערכת האקולוגית של מודל מזרקי השיפוע

Agarose-Based Model Ecosystem for Cultivating Methanotrophs in a Methane-Oxygen Counter Gradient

Aerobic methane-oxidizing bacteria, known as methanotrophs, serve important roles in biogeochemical cycling. Methanotrophs occupy a specific environmental niche within methane-oxygen counter gradients found in soils and sediments, which influences their behavior on an individual and community level. However, conventional methods to study the physiology of these greenhouse gas-mitigating microorganisms often use homogeneous planktonic cultures, which do not accurately represent the spatial and chemical gradients found in the environment. This hinders scientists' understanding of how these bacteria behave in situ. Here, a simple, inexpensive model ecosystem called the gradient syringe is described, which uses semi-solid agarose to recreate the steep methane-oxygen counter gradients characteristic of methanotrophs' natural habitats. The gradient syringe allows for the cultivation of methanotrophic strains and the enrichment of mixed methane-oxidizing consortia from environmental samples, revealing phenotypes only visible in this spatially resolved context. This protocol also reports various biochemical assays that have been modified to be compatible with the semi-solid agarose matrix, which may be valuable to researchers culturing microorganisms within other agarose-based systems.

<meta charset="utf8"></head><body>מחבר זרקור: תכנון טכניקות פשוטות וזולות לגידול חיידקים מחמצני מתאן במעבדה

A protocol is described for preparing a simple model ecosystem that recreates the methane-oxygen counter gradient found in the natural habitat of aerobic methane-oxidizing bacteria, enabling the study of their physiology in a spatially resolved context. Modifications to common biochemical assays for use with the agarose-based model ecosystem are also described.

מודל אקולוגי מבוסס אגרוז לטיפוח מתאנוטרופים בשיפוע מונה מתאן-חמצן

Aerobic methane-oxidizing bacteria, known as methanotrophs, serve important roles in biogeochemical cycling. Methanotrophs occupy a specific environmental ...

A Facile and Eco-friendly Route to Fabricate Poly(Lactic Acid) Scaffolds with Graded Pore Size

Over the recent years, functionally graded scaffolds (FGS) gaineda crucial role for manufacturing of devices for tissue engineering. The importance of this new field of biomaterials research is due to the necessity to develop implants capable of mimicking the complex functionality of the various tissues, including a continuous change from one structure or composition to another. In this latter context, one topic of main interest concerns the design of appropriate scaffolds for bone-cartilage interface tissue. In this study, three-layered scaffolds with graded pore size were achieved by melt mixing poly(lactic acid) (PLA), sodium chloride (NaCl) and polyethylene glycol (PEG). Pore size distributions were controlled by NaCl granulometry and PEG solvation. Scaffolds were characterized from a morphological and mechanical point of view. A correlation between the preparation method, the pore architecture and compressive mechanical behavior was found. The interface adhesion strength was quantitatively evaluated by using a custom-designed interfacial strength test. Furthermore, in order to imitate the human physiology, mechanical tests were also performed in phosphate buffered saline (PBS) solution at 37 &#176;C. The method herein presented provides a high control of porosity, pore size distribution and mechanical performance, thus offering the possibility to fabricate three-layered scaffolds with tailored properties by following a simple and eco-friendly route.

A Facile and Eco-friendly Route to Fabricate PolyLactic Acid Scaffolds with Graded Pore Size

In this work, poly(lactic acid)/polyethylene glycol (PLA/PEG) scaffolds were prepared by using a combination of melt mixing and selective leaching. The method herein discussed permitted to develop three-layer scaffolds by highly controlling both porosity and pore size. The mechanical properties were also evaluated in a physiological environment.

קליל ידידותי לסביבת כביש לפברק פולי (החומצה לקטית) פיגומים עם גודל מדורג נקבובי

Over the recent years, functionally graded scaffolds (FGS) gaineda crucial role for manufacturing of devices for tissue engineering. The importance of ...

הפקת חומרים פולימריים המבני התאי מ אירובי גרגירי בוצה

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

Methods for Facilitating Microbial Growth on Pulp Mill Waste Streams and Characterization of the Biodegradation Potential of Cultured Microbes

פיתוח של Sulfidogenic בוצה מים משקעים וטריכלוריטן הפחתה בכור שמיכת Upflow אנאירובית בוצה

Au-אינטראקציה של הפולימרים Slp1 וחד שכבתי מ

מבט כלפי חוץ: בידוד של Cyanobacterial שוחרר פולימרים פחמימות וחלבונים

אופטימיזציה של קובץ מצורף של תאי גזע mesenchymal האדם על פולי (ε-caprolactone) חוטים electrospun

Bioreactor רומן לטיפוח צפיפות גבוה של קהילות חיידקים מגוונות

מודל אקולוגי מבוסס אגרוז לטיפוח מתאנוטרופים בשיפוע מונה מתאן-חמצן

מודל אקולוגי מבוסס אגרוז לטיפוח מתאנוטרופים בשיפוע מונה מתאן-חמצן

מודל אקולוגי מבוסס אגרוז לטיפוח מתאנוטרופים בשיפוע מונה מתאן-חמצן

קליל ידידותי לסביבת כביש לפברק פולי (החומצה לקטית) פיגומים עם גודל מדורג נקבובי