لذلك، هذا هو فريدة من نوعها القياس الطيفي الكتلة المحيطة، ومناسبة بشكل خاص لتحليل العينات البيولوجية، سواء في المختبر وفي الجسم الحي. وبما أن هذا لا يتطلب بشكل منتظم معالجة مسبقة خاصة للعينات، مثل فرز الخلايا، والتجزئة، والتركيز، فإنه يمكن تحليل عينة مع الحد الأدنى من فقدان المكونات البيولوجية، وخاصة تلك الموجودة كميّة صغيرة جداً. هذه التقنية تسمح لك بتحليل مواد الأنسجة الخام مباشرة في دقيقة واحدة بواسطة قياس الطيف الشامل.
سرعة هو دون عوائق في متانة النظام، والمزايا الرئيسية الكامنة في هذه التقنية. كل ما عليك القيام به هو فقط لإعداد السيليكا، 10 ملليغرام من عينة الأنسجة، و 10 ميكرولترات من الانتشار. ووضعها في خرطوشة يمكن التخلص منها.
يتم تعيينها إلى الجهاز PESI-MS، وسوف تحصل على النتيجة في بضع دقائق. عن طريق اختيار الطيف الشامل المناسب، يمكنك التعليق على الهوية الجزيئية. للبدء، استرداد أنسجة الكبد أو الكلى من الفريزر.
على لوحة الفلين، وقطع عينة الأنسجة إلى ما يقرب من اثنين من اثنين في اثنين من ملليمترين باستخدام مشرط أو سكين. بدلا من ذلك، لكمة خارج العينة مع تريبان وتقليم طول العمود إلى مليمترين. إذا كانت الأنسجة ملوثة بالدم، اغسل لفترة وجيزة مع محلول ملحي بارد الفوسفات.
مكان ما يقرب من 10 ملليغرام من قطع أو لكمات خارج عينة في microtube البلاستيك وإضافة 100 ميكرولترات من 50٪ الإيثانول. استخدام ميكروبستل لتجانس العينة. ثم مع pipetman، مكان 10 ميكرولترات من التجانس في بئر خرطوشة مطياف الكتلة.
ضع الخراطيش في غرفة التأين في مطياف كتلة التأين المجس المباشر المسبار وتثبيت مسبار إبرة سرقة غير القابل للصدأ التي سيتم استخدامها لعينة التأين. أغلق غطاء الغرفة بإحكام لتنشيط جهاز الأمان تلقائيًا. بدء تشغيل الكمبيوتر على متن عن طريق النقر على أيقونة بدء لتحليل، وذلك باستخدام لوحات على الشاشة، وتطبيق الجهد من 2.3 كيلوفولت إلى الإبرة لتوليد أقطاب كهربائية وضمان أن تردد الإبرة هو ثلاثة هيرتز.
انتظر 30 ثانية حتى يكتمل القياس. بعد قياس كل عينة، تخلص من الخراطيش والإبرة في متخلصات متخلصات مُهترَبٍ حيوي. لتحليل أطياف الكتلة، افتح البرنامج المرتبط بمطياف الكتلة.
انقر على ملف L-C-D في إطار متصفح ملف البيانات للبرنامج. اختيار انقر فوق على ذروة واحدة من نافذة الطيف الشامل، وتصوير تلقائيا E-I-C. تحقق من T-I-C و E-I-C، وانقر على رمز متوسط الطيف لتحديد نطاق الإطار الزمني لتوليد الطيف الشامل.
تصدير بيانات النص الطيفي الشامل. لتحليل سوائل الجسم، قم برسم ما يصل إلى 10 ميكرولترات من عينة المصل، وصرفها في أنبوب صغير 1.5 ملليلتر. إضافة 190 ميكرولترات من 50٪ الإيثانول إلى الأنبوب، ثم دوامة لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة.
للقضاء على جميع خلايا الدم الحمراء، الطرد المركزي السائل في 15،000 مرات G لمدة دقيقة واحدة إلى خمس دقائق في أربع درجات مئوية. نقل 10 ميكرولترات من عظمى في بئر خرطوشة والمضي قدما لقياس على مطياف الكتلة كما كان سابقا. يُظهر هذا البروتوكول إعداد العينة لـ PESI-MS على عينة صلبة وعينة سائلة وحية.
سرطان الخلايا الكلوية البشرية يظهر قمم مميزة من الدهون محايدة. كانت هناك قمم قوية نسبيا في الأطياف بنسبة الشامل إلى تهمة من 900 من أنسجة سرطان الخلايا الكلوية البشرية التي لم يتم تحديدها في الأنسجة غير السرطانية المحيطة بها. هذه القمم تمثل أساسا ترياكيل الجلسرين.
مثال على البيانات المكتسبة في أنسجة الكبد العادية، يصور آفة الورم النية من مريض مصاب بالتهاب الكبد المزمن وتليف الكبد. تم تحليل مصل الإنسان من ثلاثة أفراد باستخدام PESI-MS ، كانت هناك اختلافات واضحة في الأنماط الطيفية بين الأفراد. للتغيرات الأيضية في 5-FdU حقن intraveneously في ذيل السفينة من الماوس، تم تحقيق الكشف السريع جدا وحساسة من 5-FdU مع أدوكت الصوديوم في الكبد في الموقع.
كما عمق طرف إبرة من موقع الأنسجة، يلعب أهم دور في التأين الذي يقرأ الحصول على البيانات الناجحة، تأكد من اتباع التعليمات. يمكنك تحديد الأنواع الجزيئية من خلال النظر في قاعدة البيانات التجارية. هذه هي وسيلة لتأهيل الآلية الجزيئية للمرض.
وقد أصبح العديد من الباحثين المهتمين في تطبيق هذه التقنية للتنبؤ بازدهار المرض والتكهن. خصوصاً باستخدام خزعة ريكت فقط تأكد من عدم وخز من قبل إبرة التحقيق.
ويمكن تجنب ذلك ببساطة مع أداة محددة لإزالة إبرة من الجهاز.
