يمكن استخدام هذه الطريقة للإجابة على الأسئلة الرئيسية حول دور البيئة الدقيقة للنخاع العظمي وبقاء أورام المايلوما النقية. والميزة الرئيسية لهذا الإجراء هو أنه يمكن تطبيقه على الدراسات الطولية لمكافحة المخدرات واستخدامها في فحص مسارات كيميائية حيوية متعددة بطريقة غير الغازية. في يوم التجربة لأول مرة غسل الخلايا 8226 Luciferase عبر الواقع ثلاث مرات في الجليد البارد PBS في 200 RCF لمدة خمس دقائق في الطرد المركزي وإعادة تثبيت بيليه في الجليد الطازج برنامج تلفزيوني الباردة في خمس مرات عشر إلى الخلايا السادسة لكل 200 ميكرولترات من الجليد البارد PBS لكل فأر.
المقبل تأكيد عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم في تخدير أربعة إلى ستة أسابيع من العمر NOG الماوس وتطبيق مرهم العيون على عيون الحيوان. قم بتحميل الخلايا في حقنة إنسولين مليلتر واحدة مجهزة بإبرة قياس 26. حقن كامل حجم الخلايا في الوريد الذيل للحيوان، قبل إعادة الماوس إلى قفص انها، والرصد حتى الشفاء الكامل.
عشرة إلى عشرين يوما بعد التحدي، وحقن كل engrafted مع 200 microliters في vivo الصف د-لوسيفيرين الركيزة في المالحة العقيمة داخل نيبيريتانيا. ضع الحيوانات المُجَنَّعة في موضع الـ supine في نظام تصوير حيواني صغير في غضون 5 إلى 10 دقائق من الحقن. قياس متوسط التألق في مناطق مختارة من الاهتمام ضمن برامج التصوير المقابلة.
للعلاج المستهدف من 8226 لوسيفراز الأورام، بعد قياس الإضاءة الحيوية الأساسية في كل كما هو موضح للتو، عشوائية الحيوانات في مجموعات العلاج وعلاج كل فأرة مع سلسلة من 200 حقن IP ميكرولتر من Temsirolimus أو التحكم في المالحة. قياس نشاط لوسيفراز مرتين في الأسبوع ومؤامرة التغييرات في الإضاءة الحيوية مع مرور الوقت. لقياس التغيرات في عملية التمثيل الغذائي للورم، قم أولاً بإزالة الطعام من القفص المنزلي للفئران لمدة 24 ساعة لتجنب امتصاص Fludeoxyglucose غير محدد.
في اليوم التالي تمييع 500 إلى 100 microcuries من 18 الفلور المشع Fludeoxyglucose التحقيق في المالحة المعقمة إلى حجم النهائي من 100 ميكرولترات لكل فأر وتسجيل الوقت والنشاط من تحقيقات مع معايرة جرعة. عندما تكون المسابير جاهزة، فإن أول مُعَد على وسادة تدفئة مع الرأس مواجهًا واستخدام حقنة أنسولين ذات ميليلتر محمية ومجهزة بإبرة قياس 26 لحقن 100 ميكرولترات من المسبار في الوريد الذيل. قياس النشاط الإشعاعي المتبقي في الإبرة والمحاقن مع معايرة الجرعة وملاحظة النشاط والوقت.
ثم قياس النشاط Fludeoxyglucose radiolabeled في مناطق مختارة من الفائدة التي تتوافق مع الأورام engrafted في حيواني صغير PET CT التصوير النظام. ويمكن تأكيد نجاح نخاع العظام engraftment الورم من خلال التصوير bioluminescence كما هو موضح. يمكن استخدام التصوير التسلسلي لحيوانات متعددة لتصور توزيع أورام النخاع العظمي المتعددة.
بالإضافة إلى ذلك ، يظهر تحليل الأشعة السينية للتصوير البصري تحديدًا سريعًا وغير جراحي للموقع الدقيق وتوزيع أورام المايلوما المتعددة داخل الهيكل العظمي للماوس. يمكن قياس الإضاءة الحيوية التي تنتجها هذه الخلايا السرطانية المُنقَضة بشكل متسلسل وغير تلقائي لتقييم التغيرات في نمو الورم. وعلاوة على ذلك، يمكن رصد بقاء الفئران المعالجة بمثبط mTOR Temsirolimus ويمكن استخدام الانبعاثات البوزيترون وتحليل التصوير المقطعي المحسوب للتصوير الإشعاعي الورمي Fludeoxyglucose للبرهنة على التغيرات التي توسطت في تينسيرولليموس في استقلاب الجلوكوز.
أثناء تنفيذ هذا الإجراء من المهم حقن الخلايا IEV. لقد وجدنا أن الفشل في حقن الخلايا في الوريد يؤدي إلى تشكيل خلايا ورم غير نقية بالقرب من موقع الحقن. بعد هذا الإجراء، يمكن استخدام طرق أخرى مثل الكيمياء المناعية والأشعة الدقيقة المعالجة المقطعية لمعالجة الأسئلة حول تأثير الأورام على بنية العظام والمكونات الخلوية والجزيئية غير الورمية في بيئة النخاع.