Trakeostomi Ile İntra-Arteriyel Kan Basıncı İzleme ve Ventilasyon Kullanan Farelerde Beyin Ölümü İndüksiyonu

Donör beyin ölümünden sonra bağış katı organ nakli için ana kaynak olmasına rağmen, beyin fonksiyonunun geri dönüşü olmayan kaybı sistemik inflamatuar yanıta yol açan patofizyolojik değişikliklere neden olur. Beyin-ölüm indüksiyon Bu murine modeli analitik araçlar ve nakavt modelleri beyin-ölüm düzenleme yollarını incelemek için büyük bir çeşitlilik kullanımına olanak sağlar. Pedal refleksine yanıt eksikliğini doğruladıktan ve üst karın kıllarını çıkardıktan sonra arteriyel kateterizasyon için, maruz kalan cildi %70 etanol ile dezenfekte edin ve deride orta hat kesisi yapmak için diseksiyon makas kullanın.

Forceps kullanarak, künt submandibular bezleri ve boyun kas dokusu incelemek ve ortak karotis arter ortaya çıkarmak için dokuları ayırmak. Üç yer le 8-0 sağ ortak karotis arter altında ipek ligatürler ve proksimal ligature bir kıskaç yerleştirin. Akış askıya alınır ve en distal ligature kapatın böylece arter gerginlik getirin.

Kesinin kranial yönü üzerinde küçük bir önceden biçimlendirilmiş deri deliği ile 26-gauge arteriyel kateter yerleştirin. Lümen geri akışı azaltmak ve her üç dikiş ile kateteri güvenli çok büyük ise forseps ile kateteri sıkmak, sonra önceden oluşmuş cilt deliğine yakın cilde kateteri düzeltmek için tek bir 5-0 monofilament olmayan emilebilir kullanın. Trakeostomi yapmak için pretrakeal kasları köreltmek için forceps kullanın ve iki 8-0 yerleştirin trakeanın altındaki ipek bağlar.

Tek taraflı havalandırmayı önlemek için iki trakeal kıkırdak arasına havalandırma tüpünü yerleştirin ve tüpü her iki ligatürle sabitleştirin, ardından cildi 6-0 monofilament emilemez bir dikişle kapatın ve fareyi dakikada 150 frekans ve 200 mikrolitrelik bir gelgit hacmiyle havalandırın. Deneysel hayvan beyin ölümü neden olmak için, eğilimli pozisyona fare düzenlemek ve, forceps ile cilt tutarak, kafatası deri kaldırmak için cerrahi makas kullanın. Sol parietal korteksin üzerinde bir milimetrelik kaliper sondaj deliği delin ve kafatasının son doku köprüsüne nüfuz etmek için künt forceps kullanın.

Keskin kenarları çıkardıktan sonra, havanın tamamı boşaltılmış olarak önceden tuzlu suyla doldurulmuş bir balon kateteri yerleştirin. Kateter tamamen kranial kavite içinde olduğunda, 10 ila 15 dakikalık bir süre içinde dakikada yaklaşık 0,1 milimetre kateter şişirmeye başlamak için bir şırınga pompası kullanın. Beyin ölümü meydana geldiğinde, balon kateter in şişirme durdurmak ve hipotermi önlemek için fare üzerinde bir ısıtma battaniye yerleştirin.

Beyin ölümü onaylandıktan sonra, izlemek ve düzenli olarak kan basıncı belge, her 30 dakikada bir salin 100 mikrolitre infüzyon hayvanın kan basıncını stabilize etmek için. Beyin ölümü dört saat sonra, kalpler atan olmadan herhangi bir hayvan hariç ve standart protokollere göre ilgi fare organları ve dokuları hasat. Beyin-ölüm indüksiyonsonra, kan basıncı uzun bir hipotansif faz takip bir ilk hipertansif zirve sergiler.

Başka bir köklü gözlem beyin ölümü indüksiyon bağışıklık sisteminin aktivasyonuyol açar. Gerçekten de, bu modelde beyin ölümü dört saat sonra, bağışıklık belirteçleri bir organa özgü upregulation mRNA düzeyinde gözlenmektedir. Beyin ölümü önceden tanımlanmış bir dönemden sonra, organlar doğrudan analiz veya sonraki organ nakli için hasat edilebilir.

Bu model beyin-ölüme bağlı yaralanma etkisi içine derinlemesine çalışmalar sağlayacak ve zaten kompleman aktivasyonu ve lökosit göç içine yeni anlayışlar ortaya koymuştur.