Biz onun açıklayıcı çalışmaları için Dennis Mathias kabul etmek istiyorum. Bu çalışma NIH T32AI 106704-01A1 ve Ohio State Üniversitesi Organ Nakli, Perfüzyonunun, Mühendislik ve Yenilenme T. Flesch Fonu tarafından desteklenmiştir.

Tüm prosedürler Kurumsal Hayvan Bakım ve İnsani Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanımı (IACUC) için Ulusal Araştırma Konseyi&#39;nin Kılavuz kurallarına göre yapılmıştır ve Ohio State Üniversitesi IACUC komitesi tarafından onaylanması uğramıştır. 1. İlk Kurulum <ol><li> Ayar cerrahi mikroskop ve ameliyat odasına (Şekil 3, Şekil 4). anestezi bakımı ve yaşamsal sinyalleri izlemek için de dahil tüm ekipman açın. elektro ünitesi ve elektrikli battaniyeden açın. ameliyat masasına yakın infüzyon pompası yerleştirin. <ol><li> Anestezi şırınga inhalasyon (molekül ağırlığı 184.5) için, sıvı izofluran 10 mL hazırlayın ve anestezi birimi içine yerleştirin. </li><li> Ayar kan örnekleri işlenecek santrifüj yakın bir 200 mL çalışma masasının yakınında sıvı azot kabı ve bir. </li><li> Sıracerrahi aletler, 4-0 ve 7-0 örgülü ipek dikiş steril pamuklu çubuk, 4x4 dokunmamış süngerler, 5 ml şırıngalar ve ameliyat masasına yakınındaki 27 gauge insülin şırıngası yerleştirme. </li></ol></li><li> izofluran odası hazırlamak ve yeterli izofluran anestezi indüksiyon iletim sisteminde damlatılır emin olun. </li></ol> Anestezinin 2. İndüksiyon <ol><li> Aşağıdaki kişisel koruyucu donanımlar (PPE) koymak sıçan sevkinden önce: Cerrahi maske, cerrahi eldiven ve tek kullanımlık önlük. </li><li> sıçan tartılır ve ağırlığı kaydedilir. NOT: Sprague Dawley sıçan kullanılmalıdır. </li><li> anestezi bölmesi sıçan yerleştirin ve izofluran ve oksijen açın. izofluran odacığı kullanılarak anestezi neden. </li><li> Temizleyici karşılaşması (Şekil 5) sağlamak için elektrikli saç tokası kullanılarak hayvanın karın saçlarını Klip. </li><li> Bir additio için izofluran odasında hayvan geri koyunnal bir dakika. Anestezi derinliğini kontrol etmek için bir ayak parmağı tutam gerçekleştirin. </li></ol> 3. Prosedür <ol><li> hayvanın burun konisi burun ve ısınma pad üzerinde kısıtlamalar veya bantla hareketsiz dört ekstremite ile sıçan yerleştirin. </li><li> den daha büyük 250 g ağırlığındaki hayvanlar için% 200 ve 250 g ve 4 ağırlığındaki hayvanlar için% 3,6 anestezi ile anestezi dağıtım sistemi, burun konisine ve izofluran ile anestezi devam edin. Bir ayak tutam ve cilt tutam yaparak anestezi derinliğini kontrol edin. </li><li> Keskin bir makas (Şekil 6) kullanılarak deriden xiphoid pubis bir orta hat abdominal yarma olun. </li><li> xiphoid ve mesane veya bağırsak zarar vermemeye karın özen göstererek girmek pubis linea alba boyunca karın zarı bir kesi olun. Karaciğer öne kılıç şeklinde bir süreç yakın periton sopa gibi, önce bu ar karın duvarı insizyonu için serbest bırakıldıktan sağlamakad. </li><li> deri yoluyla enine kesi ve karaciğerin sağ lobunun alt sınırının düzeyinde periton olun. </li><li> den daha büyük 250 g ağırlığındaki hayvanlar için% 200 ve 250 g ve 2 ağırlığındaki hayvanlar için% 1.6 anestezi aşağı doğru çevirin. </li><li> eğimli bir sivrisinek kelepçe kullanılarak kılıç şeklinde işlemi geri çekin. </li><li> Orta hat olarak birbirlerinden mümkün olduğunca uzak kaburga çekme yer yiv retraktör (Şekil 7). frenik falsiform ve mide bağlar kesin. nemlendirilmiş steril pamuk ile karaciğer yukarı kaldırın. </li><li> porta erişmek için ek bağlar gerektiği kesin. Tuzlu çözelti ile nemlendirilmiş gazlı bez (Şekil 7) ile iç organ dönme gerçekleştirir. </li><li> Keskin veya künt diseksiyon kullanılarak portalı hilusu örten gevşek bağ dokusu çıkarın. Portal ven uzunluğunu örten gevşek bağ dokusu çıkarın. </li><li> gevşek bağ t ile itmek için forseps kullanınBir pencereyi yapma sol portal ven, arter ve safra kanalına konu posterior ve 4-0 Potts dikiş yerleştirmek ancak (Şekil 8) aşağı cinch yoktur. </li><li> Sağ böbreğin yaklaşık düzeyinde gelir portal ven posterior dalı örten gevşek bağ dokusu kapalı temizleyin. Bu damar kanülasyon için kullanılacaktır. </li><li> Bir insülin şırıngasına (Şekil 9) ile inferior vena cava (IVC) üzerinden kan 0.5 mL çizin. 12 dakika süre ile 135 x g&#39;de, küçük bir şişe içinde santrifüj kan 0.5 mL yerleştirin. serum kendine çekmek için deneyin. <ol><li> 135 x g&#39;de 3 dakika - bir tat çizgi kırmızı kan hücreleri ve serum arasında takdir edilemezse, fazladan bir 2 süreyle santrifüj deneyin. alanin-amınotransferaz (ALT) bir şişe içinde serum ve yerde kapalı çizin. Ek bileşen doğrudan sıvı azot içine yerleştirerek bu örnek dondurma. </li></ol></li><li> kanül için kullanılacak 7-0 dikiş ve ven yakın yerin iki parça kesinsiyon. bildiğim kadarıyla medial mümkün olduğunca bu damarın çevresinde ilk 7-0 döngü yerleştirin. Bu döngü bağla ve kavisli bir sivrisinek kelepçe (Şekil 10) kullanılarak geri çekmek için kullanabilir. Portal ven ile kesiştiği yakın kanülasyon için kullanılan ve bir kravat yerleştirin olacak ven üzerinde ikinci 7-0 döngü yerleştirin ancak aşağıya cinch yoktur. </li><li> reaktif 3 mL olan 5 mL&#39;lik bir şırınga ile infüzyon pompası hazırlayın. Başbakan boru. </li><li> Bir mikrocerrahi kelepçe kullanarak uzak portal ven Kelepçe. NOT: ven kanülasyon için çizi olduğunda bu kanamayı azaltacaktır. </li><li> 7-0 kalmak dikiş ve küçük mikro makas kullanılarak portal ven ile kesiştiği arasında ven 0.5 mm&#39;lik bir delik açın. Sol portal ven sistemi (Şekil 11, Şekil 12) kanüle 27-0 kateter kullanın. Sol ve sağ portal damarların bifurkasyonu geçmiş kateter yerleştirin. </li><li> Infus tarafından kanül yerleştirilmesini kontrolnormal tuzlu su içinde 1 mL ing ve ağartma, karaciğerin sol yanal ve orta loblar için dikkat edin. El ile bu kateter sağ portal ven Kalkış geçmiş, ancak medyan lobu besleyen portal ven kalkış ötesine onaylayın. </li><li> Potts dikiş aşağı Cinch ve iskemi başlangıç ​​zamanı. ven etrafında 7-0 dikiş ve onu yerinde tutacak ve distal portal venden kelepçenin çıkartılması 27-0 kateteri sıkın. </li><li> infüzyon pompası kullanılarak polietilen glikol-süperoksit dismutaz (PEG-SOD, 0.00067 gr / ml) infüzyonu başlatın. iskemik zamanın başlangıcına mümkün olduğunca yakın infüzyon başlatın. </li></ol> 4. İzleme <ol><li> infüzyon boyunca hayvanın yaşam belirtilerini izlemeye devam edin. % 0.9 normal serum fizyolojik 2 ml veya 15 dakikalık bir süre boyunca% 0.9 normal serum fizyolojik içinde eritilmiş, PEG-SOD 2 mL (0.00067 gr / ml) iletmek. </li></ol> 5. reperfüzyon <ol><li> bir saat i başlangıcından itibaren geçmesine izin verschemic saati. Bu sıcak iskemi zaman 1-h. </li><li> Potts dikiş çıkarın. 27-0 kateteri çıkarın. ven etrafında 7-0 dikiş aşağı Cinch. zaman unutmayın. Bu reperfüzyon zamanını işaretler. </li></ol> 6. Devam Örnekleme <ol><li> 120 dakika sonra Reperfüzyonda IVC üzerinden kan 0.5 mL çizin. kırmızı kan hücrelerini parçalayan önlemek için yavaş yavaş kan çizin. Yavaş yavaş bir şişe içine kan damla. IVC kanama her kan alımından sonra kontrol emin olun. <ol><li> kanamayla devam edilirse, steril bir pamuk bez ya da gazlı bez 1 cm kesit kesik ile küçük bir 1 cm hafif bir basınç uygulanır. </li></ol></li><li> 12 dakika boyunca 135 x g&#39;de santrifüjleyin. 135 x g 3 dakika - yeterli ayırma elde değilse, ek bir 2 deneyin. </li><li> ALT sonraki işlemler için, bir şişe içinde, serum yarı yerleştirin. Çekin bu örnekleri dondurun. </li></ol> 7. Ötenazi <ol><li> Sıçan anestezi altında iken IVC ve s kesilmişUperior vena cava (SVC) ve kan akışı, solunum ve kalp atışları sona erene dek, monitör. </li><li> diyafram insizyon ve bir daire şeklinde diyaframı insizyonu ve periton boşluğuna karaciğer bağlantı kalır ilave bağ dokusu incising kısa bir hepatektominin gerçekleştirin. periton boşluğundan karaciğeri çıkarın. </li><li> Karaciğerin sağ lobunun gelen karaciğerin sol ve medyan lobu dört örnekleri ve dört örnekleri alın. Numuneler mümkün olduğu kadar büyük olması gerekmesine ve boyutları sadece karaciğer dokusunun miktarı ile sınırlı olacaktır. Küçük, etiketlenmiş şişelerde bu yerleştirin ve sıvı azot içinde dondurularak ek. Doku adenozin trifosfat (ADP), malondialdehit (MDA) ve glutation (GSH) için daha sonra işlenmek için bu kullanım. </li></ol> 8. Sonrası deney Analizi <ol><li> kullanılan diyagnostik kitler kullanan glutatyon (GSH), malondialdehit (MDA) ve alanin aminotransferaz (ALT) karaciğer dokusunda aktivitelerini ve serum örnekleri belirlemeküreticinin talimatlarına göre. </li><li> liziz tamponu ile karaciğer dokusu homojenize ve Bradford tahlili kullanılarak miktarı belirlenir. bölünmüş Capase-3 ve aktine karşı antikorlar kullanılarak, sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezi ve immunoblotting doku lizat analiz edin. kamuya açık yazılım ile gerçekleştirilen batı lekelerinden niceliğini. </li></ol>

<ol>
	<li>Serracino-Inglott, F., Habib, N. A., Mathie, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+ischemia-reperfusion+injury.">Hepatic ischemia-reperfusion injury.</a> Am J Surg. 181, 160-166 (2001).</li><li>Fondevila, C., Busuttil, R. W., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+ischemia/reperfusion+injury--a+fresh+look.">Hepatic ischemia/reperfusion injury--a fresh look.</a> Exp Mol Pathol. 74, 86-93 (2003).</li><li>Kupiec-Weglinski, J. W., Busuttil, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia+and+reperfusion+injury+in+liver+transplantation.">Ischemia and reperfusion injury in liver transplantation.</a> Transplant Proc. 37, 1653-1656 (2005).</li><li>OPTN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Overall by Organ. Current US Waiting List. , (2016).</li><li>OPTN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Transplants in the US by Recipient ABO. , (2016).</li><li>Tacchini, L., Radice, L., Pogliaghi, G., Bernelli-Zazzera, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+activation+of+heat+shock+and+nuclear+factor+kappaB+transcription+factors+in+postischemic+reperfused+rat+liver.">Differential activation of heat shock and nuclear factor kappaB transcription factors in postischemic reperfused rat liver.</a> Hepatology. 26, 186-191 (1997).</li><li>Palladini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lobe-specific+heterogeneity+and+matrix+metalloproteinase+activation+after+ischemia/reperfusion+injury+in+rat+livers.">Lobe-specific heterogeneity and matrix metalloproteinase activation after ischemia/reperfusion injury in rat livers.</a> Toxicol Pathol. 40, 722-730 (2012).</li><li>Nakano, H., Kuzume, M., Namatame, K., Yamaguchi, M., Kumada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+intraportal+injection+of+anti-ICAM-1+monoclonal+antibody+against+liver+cell+injury+following+warm+ischemia+in+the+rat.">Efficacy of intraportal injection of anti-ICAM-1 monoclonal antibody against liver cell injury following warm ischemia in the rat.</a> Am J Surg. 170, 64-66 (1995).</li><li>Centurion, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ischemic+liver+preconditioning+on+hepatic+ischemia/reperfusion+injury+in+the+rat.">Effects of ischemic liver preconditioning on hepatic ischemia/reperfusion injury in the rat.</a> Transplant Proc. 39, 361-364 (2007).</li><li>Kobayashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+endogenous+nitric+oxide+in+ischemia-reperfusion+injury+in+rat+liver.">Role of endogenous nitric oxide in ischemia-reperfusion injury in rat liver.</a> J Surg Res. 59, 772-779 (1995).</li><li>Strifler, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+Methane+Limits+the+Mitochondrial+Electron+Transport+Chain+Dysfunction+during+Experimental+Liver+Ischemia-Reperfusion+Injury.">Inhaled Methane Limits the Mitochondrial Electron Transport Chain Dysfunction during Experimental Liver Ischemia-Reperfusion Injury.</a> PLoS One. 11, e0146363 (2016).</li><li>Sarikus, Z., Bedirli, N., Yilmaz, G., Bagriacik, U., Bozkirli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+epidural+bupivacaine+on+ischemia/reperfusion-induced+liver+injury.">The effects of epidural bupivacaine on ischemia/reperfusion-induced liver injury.</a> Bratisl Lek Listy. 117, 41-46 (2016).</li><li>Guimar&#227;es Filho, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+remote+ischemic+preconditioning+in+the+expression+of+IL-6+and+IL-10+in+a+rat+model+of+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of remote ischemic preconditioning in the expression of IL-6 and IL-10 in a rat model of liver ischemia-reperfusion injury.</a> Acta Cir Bras. 30, 452-460 (2015).</li><li>Liu, Q. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythropoietin+pretreatment+exerts+anti-inflammatory+effects+in+hepatic+ischemia/reperfusion-injured+rats+via+suppression+of+the+TLR2/NF-&#954;B+pathway.">Erythropoietin pretreatment exerts anti-inflammatory effects in hepatic ischemia/reperfusion-injured rats via suppression of the TLR2/NF-&#954;B pathway.</a> Transplant Proc. 47, 283-289 (2015).</li><li>Montero, E. F., Quireze, C., d'Oliveira, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+duct+exclusion+from+selective+vascular+inflow+occlusion+in+rat+liver:+role+of+ischemic+preconditioning+and+N-acetylcysteine+on+hepatic+reperfusion+injury.">Bile duct exclusion from selective vascular inflow occlusion in rat liver: role of ischemic preconditioning and N-acetylcysteine on hepatic reperfusion injury.</a> Transplant Proc. 37, 425-427 (2005).</li><li>T&#225;rtaro, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=No+protective+function+found+in+Wistar+rats+submitted+to+long+ischemia+time+and+reperfusion+after+intermittent+clamping+of+the+total+hepatic+pedicle.">No protective function found in Wistar rats submitted to long ischemia time and reperfusion after intermittent clamping of the total hepatic pedicle.</a> Transplant Proc. 47, 1038-1041 (2015).</li><li>Yeh, D. Y., Yang, Y. C., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Warm+Ischemia-Reperfusion-Induced+Increase+in+Pulmonary+Capillary+Filtration+Is+Ameliorated+by+Administration+of+a+Multidrug+Resistance-Associated+Protein+1+Inhibitor+and+Leukotriene+D4+Antagonist+(MK-571)+Through+Reducing+Neutrophil+Infiltration+and+Pulmonary+Inflammation+and+Oxidative+Stress+in+Rats.">Hepatic Warm Ischemia-Reperfusion-Induced Increase in Pulmonary Capillary Filtration Is Ameliorated by Administration of a Multidrug Resistance-Associated Protein 1 Inhibitor and Leukotriene D4 Antagonist (MK-571) Through Reducing Neutrophil Infiltration and Pulmonary Inflammation and Oxidative Stress in Rats.</a> Transplant Proc. 47, 1087-1091 (2015).</li><li>Kilicoglu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+view+of+a+promising+anti+TNF-&#945;+agent+on+hepatic+ischaemia+reperfusion+injury.">Ultrastructural view of a promising anti TNF-&#945; agent on hepatic ischaemia reperfusion injury.</a> Bratisl Lek Listy. , 601-607 (2015).</li><li>Jim&#233;nez P&#233;rez, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spironolactone+Effect+in+Hepatic+Ischemia/Reperfusion+Injury+in+Wistar+Rats.">Spironolactone Effect in Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury in Wistar Rats.</a> Oxid Med Cell Longev. , 3196431 (2016).</li><li>Sano, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+drug+delivery+system+for+liver+sinusoidal+endothelial+cells+for+ischemia-reperfusion+injury.">New drug delivery system for liver sinusoidal endothelial cells for ischemia-reperfusion injury.</a> World J Gastroenterol. 21, 12778-12786 (2015).</li><li>Chang, Y. K., Huang, S. C., Kao, M. C., Huang, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cepharanthine+alleviates+liver+injury+in+a+rodent+model+of+limb+ischemia-reperfusion.">Cepharanthine alleviates liver injury in a rodent model of limb ischemia-reperfusion.</a> Acta Anaesthesiol Taiwan. , (2015).</li><li>Lucas, M. L., Rhoden, C. R., Rhoden, E. L., Zettler, C. G., Mattos, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+L-arginine+and+L-NAME+on+ischemia-reperfusion+in+rat+liver.">Effects of L-arginine and L-NAME on ischemia-reperfusion in rat liver.</a> Acta Cir Bras. 30, 345-352 (2015).</li><li>Yeh, D. Y., Tung, S. P., Fu, Y. H., Yang, Y. C., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+superoxide+dismutase+administration+reduces+contralateral+lung+injury+induced+by+unilateral+lung+ischemia+and+reperfusion+in+rats+through+suppression+of+activity+and+protein+expression+of+matrix+metalloproteases.">Intravenous superoxide dismutase administration reduces contralateral lung injury induced by unilateral lung ischemia and reperfusion in rats through suppression of activity and protein expression of matrix metalloproteases.</a> Transplant Proc. 47, 1083-1086 (2015).</li><li>Yusen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation:+Thirty-second+Official+Adult+Lung+and+Heart-Lung+Transplantation+Report-2015;+Focus+Theme:+Early+Graft+Failure.">The Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-second Official Adult Lung and Heart-Lung Transplantation Report-2015; Focus Theme: Early Graft Failure.</a> J Heart Lung Transplant. 34, 1264-1277 (2015).</li><li>Held, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> An Introduction to Reactive Oxygen Species: Measurement of ROS in Cells. , 1-14 (2012).</li><li>Gawe&#322;, S., Wardas, M., Niedworok, E., Wardas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malondialdehyde+(MDA)+as+a+lipid+peroxidation+marker.">Malondialdehyde (MDA) as a lipid peroxidation marker.</a> Wiad Lek. 57, 453-455 (2004).</li><li>Beckman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superoxide+dismutase+and+catalase+conjugated+to+polyethylene+glycol+increases+endothelial+enzyme+activity+and+oxidant+resistance.">Superoxide dismutase and catalase conjugated to polyethylene glycol increases endothelial enzyme activity and oxidant resistance.</a> J Biol Chem. 263, 6884-6892 (1988).</li><li>Carlberg, I., Mannervik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutathione+reductase.">Glutathione reductase.</a> Methods Enzymol. 113, 484-490 (1985).</li><li>Nguyen, W. D., Kim, D. H., Alam, H. B., Provido, H. S., Kirkpatrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylene+glycol-superoxide+dismutase+inhibits+lipid+peroxidation+in+hepatic+ischemia/reperfusion+injury.">Polyethylene glycol-superoxide dismutase inhibits lipid peroxidation in hepatic ischemia/reperfusion injury.</a> Crit Care. 3, 127-130 (1999).</li></ol>

Tüm yazarlar hiçbir açıklama var bildirmektedir.

Bu deney serisi göstermiştir ki, kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, sol içine PEG-SOD ve ALT salınımında önemli düşüşlere yol açmıştır ortalama lob, hücre zarlarının lipid peroksidasyonu (MDA) ve glutatyon bakım (GSH) enjeksiyonu (normal tuz ). Alanin amino transferaz (ALT) de dahil olmak üzere karaciğer doku transaminaz hepatoselüler hasar belirteçlerini kurulmuştur. sol lob PEG-SOD ile enjekte edilir ALT azalma, PEG-SOD koruyucu bir etki gösterir. Artan MDA artmış lipid peroksidasyonu gösterir ve oksidatif stres ve doku hasarının bir işaretleyici olarak kabul edilir. Reaktif oksijen türlerinin aşırı üretimi MDA 26 üretiminde bir artışa neden olur. PEG-SOD enjekte hayvanın sol ve medyan loblarda doku MDA önemli azalma PEG-SOD koruyucu bir etki gösterir. Bu PEG-SOD zarar hücreleri koruduğunu akım anlayışı ile tutarlıdırKısmen düşük reaktif oksijen türlerinin 27 kaynaklanır. Buna ek olarak, reaktif oksijen türlerinin varlığında, glutatyon disülfid glutatiyon (GSH), 28 düşürülür. ayrıca, PEG-SOD enjekte karaciğer sol ve orta loblarda GSH bakım PEG-SOD koruyucu etkisini güçlendirir. Ek olarak, iskemi-reperfüzyon hasarı maruz dokuda, yarılmış kaspaz-3, apoptoz bir ürün artmış olduğu kanıtlanmıştır. PEG-SOD ile muamele sol lob bölünmüş kaspaz-3 azalma PEG-SOD apoptozda bir azalmaya neden olduğunu göstermektedir. Süperoksit dismutaz (SOD), reaktif oksijen türlerinin detoksikasyonuna kritik bir enzimdir. enzim bir hidrojen peroksit ve su içinde iki süperoksit anyonlar dönüşümünü katalize eder. Enzim katalazın sonra işlemi 25 tamamlayan, su ve oksijene hidrojen peroksit dönüştürür. yarı ömrüdoğal SOD konjüge polietilen glikol-süperoksit dismutaz (PEG-SOD) gelişimine kadar, deneysel modellerde kullanımı sınırlıdır. polietilen glikole SOD Konjugasyon 14 saat 6 dakika ila yarılanma ömrünü uzatır. Nguyen ve diğ. sistemik olarak verilmesini 29 kullanarak, bir fare modelinde, hepatik iskemi lipid peroksidasyonu azaltmak için yeteneğini göstermiştir. tekniğinin burada ayrıntılı ve bazı daha önce literatürde tarif edilmiştir potansiyel değişikliklerin bir çeşitlilik vardır. Modeli kullanılmıştır moleküller bağlı olarak inhalasyon 11 epidural infüzyon 12, intraperitoneal enjeksiyon 17, 18, 21, 22, intravenöz uygulama 10, 14, 15 kullanılarak serbest bırakılabilir <superiferik üst mezenterik ven 8 içine&gt; s, 19, 23, 24 ya da enjeksiyon. Bu protokolde pek çok kritik adımlar vardır. En önemli portal vende kanülasyon olduğunu. Bakım damarda kesilmiş delik çok büyük olmadığı alınmalıdır. Doku çok elastik olan ve delik kendi başına büyütmek olacaktır. Biz mikrocerrahi makas ile 0.5 mm bir delik keserek başlamanızı öneririz. Kanül elle prosedürün bu kısmını gerçekleştirmek için çalışırken, eğer daha büyük çeviklik sağlayan bir cihaz kullanılarak delikten beslenebilir. Başlangıçta kanül beslerken Ayrıca, damarın arka duvarda bir delik alay önlemek için sol ve sağ portal damarların bifurkasyonu doğru doğrudan hedeflenmelidir. Kanülün ucu çatallanma ulaştığında, daha sonra özel sol damar içine beslenebilirmüttefik. kanül sol ve medyan lobu hem besleyen sol portal ven içine beslenir sonra, konumu ven içine hissederek el teyit edilebilir. Onun konumu da karaciğerin verilen segmentlerde ağarması etkisi soğuk tuz az miktarda enjekte ve görerek teyit edilebilir. Sıçan karaciğer hilar kelepçe modeli karaciğer iskemik-reperfüzyon hasarı gösteren bir tekrar üretilebilir ve kararlı bir platform sağlar. Değişken hilar kelepçe modelleri, anti-oksidanlar ve diğer küçük moleküller 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, koruyucu etkilerini incelemek için araştırmacılar tarafından kullanılmıştır. varyasyon Nokta olan kaplar kelepçe aşağıdakiler bulunmaktadır<html> safra kanalı dahil olup olmadığı iskemik yapılır kademeli baskı, ve reperfüzyon 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 süresinin uzunluğu, 19, 20, 21. Bu model, bir molekülün uygulama yolu ve uygulama etkilerini incelemek için kullanılır Ayrıca, heterojen olan 8, 10, 11,&quot;&gt; 12, 14, 15, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 24. Açıklanan yaklaşım çeşitli avantajları vardır. Önce, iskemik segmente portal kaynağının doğrudan kanülasyon doğrudan segmental hepatik uygulama sağlar çalışılan farmakolojik madde içerir. Bu, bir iç kontrol olarak karaciğerinin diğer lobların kullanımını sağlar. İkincisi, segmental karaciğer kanülasyon çalışılan molekülü için bir dağıtım düşük hacmi mümkün kılar. Bu yaklaşım, böylece sistemik yan etkilerin riskini azaltır madde. ilgi karaciğer segment doğrudan enjekte hepatik segmentin doğrudan kanülasyon ön-iskemi teslim edilecek madde için izin verirIçi iskemi ya da post-iskemi. Bu iskemi-reperfüzyon hasarı döngüsünün herhangi bir noktada molekülün etkisi üzerindeki çalışma için izin verir. iskemik zamanın giderek uzunluğu ve mevcut olacağını karaciğer rejenerasyon çalışması için yaralanma ek fırsat artan düzeyde. Bu yaklaşımın bazı sınırlamalar da vardır. İlk başlangıç ​​maliyetidir. Cerrahi mikroskop satın zaten bir tane sahip olmayan bir laboratuar için önemli bir başlangıç ​​maliyeti olabilir. Bu teknik, bir mikroskop olmadan zor ya da imkansız olabilir. İkinci eğri öğrenme süresi edilir. Bu prosedür oldukça basit olmasına rağmen bazı pratik gerektirir ve bir acemi bir uzman olmak için prosedürlerin önemli sayıda gerektirecektir olasıdır. Özetle, bu model hepatik iskemi reperfüzyon hasarını incelemek için, tekrarlanabilir, basit ve uygun maliyetli bir platform sağlar. protokolde polietilen gl burada tarif edilmiş olmasına rağmenycol-süperoksit dismutaz, bir serbest radikal toplayıcı 25, infüze edildi, bu model karaciğerde I / R hasarı üzerindeki etkisini değerlendirmek amacıyla, farklı farmakolojik maddelerin çeşitli aşılamak için kullanılabilir.

Akış oklüzyonu ve karaciğer transplantasyonu ile başlıca karaciğer cerrahi, sıcak bir iskemi sürecini ve iskemi / reperfüzyon (I / R) yaralanmasında 1 giden bir reperfüzyon dönemi gerektirmektedir. Karaciğerde I / R yaralanma sonuçları yoğun 1, 2, 3 detaylandırılmıştır. I sonuçları / literatürde ayrıntılı R zedelenmesi, reaktif oksijen türlerinin üretimi, nötrofil aktivasyonu, Kupffer hücrelerinde ve endotelial hücreler, Toll benzeri reseptör heme oksijenaz sisteminin aktivasyonu ve aktivasyonu, bir de dahil olmak üzere enflamatuar kaskadın başlatma endotelin ve nitrik oksit, nükleer faktör-KB&#39;nin aktivasyonu ve proenflamatuar sitokin ve adezyon molekülü sentezi 1, 2, 3 iyileştirilmesi arasındaki dengesizlik. Bunlar proinflamatuar olaylar l mayapoptoz, nekroz, organ yetmezliği ve nihai organ yetmezliği 3 EAD. I / karaciğer transplantasyonu için tahsis organlarda R hasarına erken greft kaybına yol ve marjinal organları yaralanma 3 daha duyarlı olarak mevcut donor açığı katkıda olabilir. 2015 5&#39;de yapıldı ABD&#39;de 4 karaciğer nakli bekleyen listesindeki 15.226 potansiyel alıcılar ve sadece 5950 karaciğer nakli şu anda vardır. Nedeniyle verici organ bu uç sınırlama, araştırma hepatik I / R hasarına aşı fonksiyonu ve organ kullanımını optimize etmek için gerekli olan keşfetmek. hepatik I / R hasarı çalışma için kullanılan hayvan modelleri sıçan hilar kelepçe modelleri ve fare karaciğer nakli modellerini içerir. Şu anda kullanımda olan sıçan hilar kelepçe modelleri çeşitli vardır. En yaygın birdir portal ven, hepatik arter ve safra duct sol yanal ve orta loblar mikro klipleri 6, 7, 8, 9, 10, 11, 60 min reperfüzyon sonra 30 dakika ila 6, 7, 10, 13, 14 ve 60 bir süre için 12 ile kenetlenir tedarik h 7, 9, 10, 13 ila 24, 14 sağlanır. Sıçan karaciğerin sol yanal ve orta loblar karaciğer parankimi 9 yaklaşık% 70 içermektedir. iskemik ön şartlandırma incelemek için dizayn Bazı protokoller, hilar damarlarının aralıklı sıkıştırma içerirveya hilar damarları 9, 13 kıstırma neden olduğu iskemi daha uzun bir süre için, arka bacak önce. literatürde tarif edilen çeşitli modifikasyonlar da vardır. İlk sol yanal ve medyan lobu besleyen portal ven ve hepatik arter kelepçe, ancak safra kanalı 15 hariç tutmaktır. İkinci bir modifikasyon öncesinde bölme 16, 17, 18, 19, 20 portal ven, hepatik arter ve safra kanalı sıkma toplam hepatik iskemi indüklenmesidir. Üçüncü bir modifikasyon 30-60 dakika 8 doğru loba hilar damarların sıkıştırma içerir. Ek bir modifikasyon, 21 karaciğer 13&#39;te hasara yol için bir arka bacak vasküler demeti sıkıştırma kapsar </sup&gt;. Hilar kelepçe prosedüre çeşitli yaklaşımlar Şekil 1A-D &#39;de gösterilmiştir. Fare karaciğer hilar kelepçe modelleri hepatik I / R farklı moleküller ve bileşiklerin etkilerini incelemek için kullanılmıştır. Periferik üst mezenterik ven 8 içine inhalasyon 11 epidural infüzyon 12, intraperitoneal enjeksiyon 17, 18, 21, 22, intravenöz uygulama, 10, 14, 15, 19, 23, 24 ya da enjeksiyon ile teslim edilmiştir, bu moleküllerin modeline kullanılan olarak . Bu rapor includ ayrıntılı fare karaciğeri hilar kelepçe modeliçalışılan farmakolojik maddenin direk segmental hepatik uygulama sağlar portal ven yan dal ile iskemik segmenti portal kaynağı (Şekil 2), doğrudan kanül es. Yaklaşımımız Bu durumda incelenen maddenin bir enfüzyonu pegile-süperoksit dismutaz, bir serbest radikal toplayıcı 25, iskemik kesimi doğrudan infüze edilir ve bu süre içinde, 60 dakika boyunca, sol yanal ve orta loblarda iskemi indükleme olan . Kan numuneleri, iskemiden önce indüklenmesine ve 120 dakika sonrası reperfüzyon alınır. Bu noktada, sıçan öldürülür ve numuneler, sol ve orta lobundan alınır. Ayrıca, numuneler bir iç kontrol olarak hizmet etmek sağ lob alınır. Bu yaklaşıma sayısız avantajı vardır. İlk ve en önemlisi, incelenen farmakolojik madde ile doğrudan iskemik kesimi içine enjekte edilebilir hacmaf dağılımı sistemik dolaşım içine enjeksiyon hacim dağılımı ya da periton boşluğuna karşılaştırıldığında oldukça düşüktür. Buna ek olarak, bu yaklaşım azaltır, sistemik yan etkiler olasılığını ortadan kaldırmak olmasa da.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="674">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:288px;">Sprague-Dawley Rat&#160;</td>
			<td style="width:196px;">Harlan Sprague Dawley Inc.&#160;</td>
			<td style="width:128px;">200- 250 grams&#160;</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Microscope&#160;</td>
			<td>Leica&#160;</td>
			<td>M500-N w/ OHS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Charcoal Canisters</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SOMNO-2001-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane Molecular Weight 184.5&#160;</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure-Lok Precision Analytical Syringe&#160;&#160;</td>
			<td>Valco Instruments Co, Inc.&#160;</td>
			<td>SOMNO-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electrosurgical Unit</td>
			<td>Macan&#160;</td>
			<td>MV-7A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Warming Pad</td>
			<td>Braintree Scientific&#160;</td>
			<td>HHP2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SomnoSuite Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>SS-MVG-Module</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PhysioSuite</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>PS-MSTAT-RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane chamber&#160;</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SOMNO-0530LG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SurgiVet</td>
			<td>Isotec</td>
			<td>CDS 9000 Tabletop</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen&#160;</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>98015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27-0 Micro-Cannula</td>
			<td>Braintree Scientific&#160;</td>
			<td>MC-28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rib retractors&#160;</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>INS600240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Glycol - Superoxide Dismutase (PEG-SOD)</td>
			<td>Sigma Aldrich&#160;</td>
			<td>S9549 SIGMA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GenieTouch</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal Saline</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>NDC 0338-0048-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4x4 Non-Woven Sponges&#160;</td>
			<td>Criterion</td>
			<td>104-2411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Q-Tips</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>1009175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">U-100 27 Gauge Insulin Syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>22-272328</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5mL Syringe</td>
			<td>BD&#160;</td>
			<td>REF 309603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Braided Silk Suture</td>
			<td>Deknatel, Inc.</td>
			<td>198737LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7-0 Braided Silk Suture</td>
			<td>Teleflex Medical&#160;</td>
			<td>REF 103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.8 mL Arcticle Cryogenic Tube</td>
			<td>USA Scientific&#160;</td>
			<td>1418-7410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microsurgical Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Scissors&#160;</td>
			<td>Roboz&#160;</td>
			<td>RS-5610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Large Scissors</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>SAA-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Large Angled</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>JFCL-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Small Angled&#160;</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>FRAS-15 RM-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clip Applier</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scissors - non micro</td>
			<td>FST 14958-11</td>
			<td>14958-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps - Straight Tip&#160;</td>
			<td>S&#38;T&#160;</td>
			<td>FRS-15 RM8TC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Large Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Microsurgical Clip</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>18055-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Other Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Mosquito Clamps</td>
			<td>Generic&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analysis&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name</td>
			<td>Company&#160;</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alannine aminotransferase (ALT) assay&#160;</td>
			<td>Biovision</td>
			<td>K752-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Malondialdehye (MDA) assay&#160;</td>
			<td>Abcam&#160;</td>
			<td>ab118970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glutathione (GSH) assay</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>7030002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibodies - Cleaved Caspase-3 and Actin&#160;</td>
			<td>Cell Signaling Tecnology</td>
			<td>Antibody 9661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ImageJ Software&#160;</td>
			<td>National Institutes of Health&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RIPA Lysis and Extraction Buffer&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>10-188</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

method of direct segmental intra-hepatic delivery using a rat liver hilar clamp model

akış oklüzyonu ve karaciğer transplantasyonu ile başlıca karaciğer cerrahi, sıcak bir iskemi sürecini ve iskemi / reperfüzyon (I / R) sayısız olumsuz sonuçlarla birlikte yaralanmaya yol açan bir reperfüzyon dönemi gerektirmektedir. karaciğer transplantasyonu için tahsis marjinal organların potansiyel I / R hasarına azalma organı kullanım oranı ikincil akım donor açığı katkıda bulunur. Önemli bir ihtiyaç transplantasyon greft fonksiyonu üzerindeki etkisini aracılık etmek üzere hepatik I / R yaralanması keşfetmek için mevcuttur. Fare karaciğer hilar kelepçe modelleri hepatik I / R hasarına olan farklı moleküllerin etkisini araştırmak için kullanılır. modeline bağlı olarak, bu moleküller periferal üst mezenterik damar içine inhalasyon, epidural yoldan, intraperitoneal enjeksiyon, damar içi uygulama ya da enjeksiyon ile teslim edilmiştir. Bir fare karaciğeri hilar kelepçe modeli, I / R zedelenmesinin iyileşmesi farmakolojik moleküllerin etkilerini inceleyen kullanım için geliştirilmiştir. describSıçan karaciğeri hilar kelepçesi için ed modeli, doğrudan segmental karaciğer taşınmasına izin veren, portal damar yan dal ile iskemik karaciğer segmente portal kaynağının doğrudan kanül içerir. Yaklaşımımız çalışmanın altında madde infüze edilir ve bu süre içinde 60 dakika, sol yanal ve medyan loblarda iskemi başlatmaktır. Bu durumda, pegile-süperoksit dismutaz (PEG-SOD), bir serbest radikal toplayıcısı, iskemik kesimi doğrudan infüze edilir. Bu deney serisi, PEG-SOD infüzyonu hepatik I / R hasarına karşı koruyucu olduğunu göstermektedir. Bu yaklaşımın avantajı, sistemik yan etkiler dağıtım ve redüksiyon hacmi azalmayla birlikte iskemik segmentine molekülün doğrudan enjeksiyonu bulunmaktadır.

Bu deney, n 2 grup = 3 sıçan her biri ile gerçekleştirildi. Üç fare karaciğerleri, 15 dakikalık bir süre boyunca infüzyon pompası ile normal salin 2 mL (NS) enjekte edilmiştir. Üç fare karaciğerleri, 15 dakikalık bir süre boyunca infüzyon pompası ile pegile-süperoksit dismutaz (PEG-SOD, 0.00067 gr / ml) ile karıştırılmış, normal tuzlu su, 2 mL (NS) enjekte edilmiştir. Yukarıdaki protokol tarif edildiği gibi, kan örnekleri önceden hilar kelepçe ve 120 dakika sonra reperfüzyon alınmıştır. reperfüzyon dört karaciğer doku örneklerinde, 120 dakika tamamlanması sol ve orta bölge ve dört karaciğer örnekleri alınmıştır sonra ek olarak, sıçan karaciğer sağ lob alınmıştır. Serum Alanin amino transferaz (ALT), önceden hilar kıskacı ve kontrol 120 dakika sonra reperfüzyon (NS) ve deneysel (PEG-SOD) hayvanlarda ölçülmüştür. kontrolün ALT düzeyleri arasında anlamlı bir fark yoktu (NS)Hayvanlar ön hilar kelepçe ve 120 dakika sonra Reperfüzyonda. ALT kontrol düzeyi (NS) ve deney hayvanları (PEG-SOD) 120 dakika boyunca (Şekil 13A) ile arasında anlamlı bir fark yoktu. Doku Malondialdehit (MDA) kontrol (NS) ve deneysel (PEG-SOD), karaciğerin sağ ve sol lob hem de hayvanlar için ölçüldü. kontrol enjeksiyonu (NS) ve deneysel enjeksiyon (PEG-SOD) ile sağ lob (non-hilar kelepçe) Doku MDA anlamlı bir fark göstermektedir. kontrol enjeksiyonu ile sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) doku MDA (NS) sağ lob (non-hilar kelepçe) p &lt;0.001 önemli ölçüde farklıdır. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) deney enjeksiyonu (PEG-SOD) p &lt;0.005 (Şekil 13B) karşı kontrol enjeksiyonu (NS) doku MDA açısından ciddi farklılıklar vardır. Doku glutatyon (GSH) ölçülür ve kontrol enjeksiyonu (NS) a sahip doku glutatyon sağ lob (non-hilar kelepçe) içerisinde yapıldınd deneysel enjeksiyonu (PEG-SOD) anlamlı bir fark göstermektedir. kontrol enjeksiyonu ile sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) GSH (NS) kontrol enjeksiyonu (NS) p &lt;0.05 ile sağ lob (non-hilar kelepçe) önemli ölçüde farklıdır. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) deney enjeksiyon (PEG-SOD) p &lt;0.005 (Şekil 13C) karşı kontrol enjeksiyonu (NS) doku glutatyon açısından ciddi farklılıklar vardır. Batı benek kontrol hayvanların sağ ve sol lob karşılaştırılması yapılmış ve gösterir artan kaspaz-3, hilar kıskaç ve reperfüzyon (Şekil 13D) sonra sol lob yarılır. İkinci bir western blot kontrolü ile ve PEG-SOD (Şekil 13E) ile tedavi edilmiş hayvanların sol lobları karşılaştırılarak yapıldı. Bu, PEG-SOD ile tedavi edilmiş hayvanların karaciğer dokusunda bölünmüş kaspaz-3 azalma gösterir. Dansitometrisi da demonstra yapıldıklivaj kaspaz-3 karaciğer dokusunda seviyesi önemli ölçüde kontrol hayvanları (Şekil 13F) sağ lob karşı sol arttığını mmm. Normal Tuzlu su infüzyonu, PEG-SOD ile aşılanmış deney hayvanlarında sol lob karaciğer dokusu, ve kontrol hayvanlarına sol lob karaciğer dokusu, karşılaştırıldığında, dansitometre hayvanlara kıyasla, PEG-SOD ile tedavi edilen hayvanlarda bölünmüş kaspaz-3 azalma önemli ölçüde ortaya koyduğunu kontrol (Şekil 13G) ile muamele edilmiştir. <img alt="Şekil 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig1.jpg" /> Şekil 1: Anatomik Çizimler. Sıçan karaciğer A. anatomik gösterimidir. Sıçan karaciğer B. anatomik gösterimidir. Karaciğerin sol ve medyan lobu portal pedikül kenetlenir. sol ve medyan lob iskemik bulunmaktadır. C anatomikSıçan karaciğer gösterimidir. Sol lob portal pedikül kenetlenir. sol lob iskemik. Sıçan karaciğer D. anatomik gösterimidir. Sağ lobun portal pedikül sıkıştırıldığı ve sağ lob iskemik olduğunu. <img alt="şekil 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig2.jpg" /> Şekil 2: anatomik Çizimler. portal sıçan karaciğer anatomik örnekleme damar yan dal ile kanüle edildi. Karaciğerin sol ve medyan lobu portal pedikül bir dikiş ile çevrilidir ve bir mikrodamar kelepçe damar demeti çevresinde sıkılaştırmak için kullanılmıştır. sol ve medyan lob iskemik bulunmaktadır. <img alt="Şekil 3," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig3.jpg" /> Şekil 3: Enstrüman Kurulum. Bu rakam th gösteriyor<html> E enstrüman set-up. <img alt="Şekil 4," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig4.jpg" /> Şekil 4: Ameliyathane Kurulumu. Bu rakam ameliyathane kurulumu gösterir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 5," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig5.jpg" /> Şekil 5: Karın Saç kırpılması. Bu rakam karın saç kırpma göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> yük / 54729 / 54729fig6.jpg&quot;/&gt; Şekil 6: immobilizasyon ve Cilt İnsizyonunun. Bu rakam sıçan ve cilt kesisi immobilizasyon göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 7," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig7.jpg" /> Şekil 7: Kaburga Retraktör Yerleştirme ve Eviserasyon. Bu rakam kaburga retraktörü yerleştirme ve eviserasyon göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 8," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig8.jpg" /> Şekil 8: bir yer<html> Sütür olumlu yönde etkilemiştir. Bu rakam dikiş yerleşimini göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig8large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 9," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig9.jpg" /> Şekil 9: İnferior Vena Cava dan Kan Kurası. Bu rakam vena kava kan beraberlik göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig9large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 10," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig10.jpg" /> Şekil 10: Ven Şubesi Kapalı bağladı ve geri çekildi. şube bağladı ve geri çekilmiş ven Bu rakam gösteriyor.<html> ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig10large.jpg&quot; target = &#39;_ blank&#39;&gt; bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayın. <img alt="Şekil 11," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig11.jpg" /> Şekil 11: kanülasyon yöntem. Bu rakam Kanülasyonu sürecini göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig11large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> <img alt="Şekil 12," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig12.jpg" /> Şekil 12: kanülasyonu. Bu rakam kanülasyonunu göstermektedir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54729/54729fig12large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> içerik&quot; fo: keep-together.within sayfalık = &quot;1&quot;&gt; <img alt="Şekil 13," class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/54729/54729fig13.jpg" /> Şekil 13: Temsilcisi Sonuçlar: Rat Hilar Kelepçe Modeli Kullanarak Pegileinterferon-Süperoksit Dismutaz Doğrudan Segmental İntrahepatik Teslim. NS normal tuzlu =. PEG-SOD = pegile-süperoksit dismutaz, ALT = alanin aminotransferaz, MDA = malondialdehit. C. Serum Alanin amino transferaz (ALT, mU / ml), önceden hilar kelepçe ve 120 dakika sonra reperfüzyon arasında karşılaştırıldı. kontrol (NS) ön hilar kelepçe ve kontrol 120 dakika sonra Reperfüzyonda (NS) (p &lt;0.001) arasında önemli bir fark vardır. 120 dakika sonra reperfüzyon (p &lt;0.05) kontrol (NS) ve deney grupları (PEG-SOD) arasında önemli bir fark vardır. Bir öğrencinin T-testi kullanıldı. Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir. Kontrol enjeksiyonu (NS) Bir sağ lob (non-hilar kelepçe) B. Doku malondialdehitd deney enjeksiyonu (PEG-SOD) anlamlı bir fark göstermektedir. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) kontrol enjeksiyonu (NS) ile doku malondialdehid sağ lob (non-hilar kelepçe) p &lt;0.001 önemli ölçüde farklıdır. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) deney enjeksiyonu (PEG-SOD) p &lt;0.005 versus kontrol enjeksiyonu (NS) doku Malondialdehit önemli ölçüde farklı seviyelerde yer alır. Bir öğrencinin T-testi kullanıldı. Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir. Kontrol enjeksiyonu (NS) ve deneysel enjeksiyon (PEG-SOD) C. sağ lob (non-hilar kelepçe) doku glutatyon anlamlı bir fark göstermektedir. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) kontrol enjeksiyonu (NS) ile doku glutatyon kontrol enjeksiyonu (NS) p &lt;0.05 ile sağ lob (non-hilar kelepçe) önemli ölçüde farklıdır. Sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) kontrol injectio doku glutatyon açısından ciddi farklılıklar vardırDeneysel enjeksiyon karşı N (NS) (PEG-SOD) p &lt;0.005. Bir öğrencinin T-testi kullanıldı. Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir. D. Batı benek kontrol hayvanların sağ lob (non-hilar kelepçe) karşı, sol lob (sonrası hilar reperfüzyon) (normal tuz) karaciğer dokusunda bölünmüş kaspaz-3 artış ortaya konuldu. E. Batı benek gösteren kontrol (normal tuz) ile tedavi edilen hayvanlara kıyasla, PEG-SOD ile tedavi edilmiş hayvanların karaciğer dokusunda bölünmüş kaspaz-3 azalmıştır. Bölünmüş kaspaz-3 karaciğer dokusunda F. seviyesi önemli ölçüde sonrası hilar reperfüzyon hayvanlar (p &lt;0.05) &#39;de artar. Bir öğrencinin T-testi kullanıldı. Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir. G. (PEG-SOD ile aşılanmış), deney hayvanları sol lob karaciğer doku ve (Normal Tuzlu su infüzyonu) kontrol hayvanlarının sol lob karaciğer dokusu karşılaştırıldığında, bir in bölünmüş kaspaz-3 orada azalma önemli olduğukontrol (normal tuz) ile tedavi edilen hayvanlara kıyasla, PEG-SOD ile muamele imals. Bir öğrencinin T-testi kullanıldı. Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir.

Watch this Scientific Journal Video about Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model at JoVE.com

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Benzersiz bir sıçan karaciğer hilar kelepçe modeli iskemi-reperfüzyon zedelenmesinin iyileşmesi farmakolojik moleküllerin etkisini incelemek için geliştirilmiştir. Bu model, doğrudan karaciğer taşınmasına izin veren, portal damar dalı ile iskemik karaciğer segment portal kaynağının doğrudan kanül içerir.

Bir Sıçan Karaciğer Hilar Kelepçe Modeli Kullanılarak Doğrudan Segmental İçi hepatik Dağıtım Yöntemi

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

method-direct-segmental-intra-hepatic-delivery-using-rat-liver-hilar

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

14.0K Görüntüleme.  The Ohio State University Wexner Medical Center.  Benzersiz bir sıçan karaciğer hilar kelepçe modeli iskemi-reperfüzyon zedelenmesinin iyileşmesi farmakolojik moleküllerin etkisini incelemek için geliştirilmiştir. Bu model, doğrudan karaciğer taşınmasına izin veren, portal damar dalı ile iskemik karaciğer segment portal kaynağının doğrudan kanül içerir. 

Video: Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, T2D results in elevated blood glucose levels. The "gold-standard" in assessing insulin sensitivity is a hyperinsulinemic-euglycemic clamp or insulin clamp. In this procedure, insulin is infused at a constant rate resulting in a drop in blood glucose. To maintain blood glucose at a constant level, exogenous glucose (D50) is infused into the venous circulation. The amount of glucose infused to maintain homeostasis is indicative of insulin sensitivity. Here, we show the basic clamp procedure in the chronically catheterized, unrestrained, conscious rat. This model allows blood to be collected with minimal stress to the animal. Following the induction of anesthesia, a midline incision is made and the left common carotid artery and right jugular vein are catheterized. Inserted catheters are flushed with heparinized saline, then exteriorized and secured. Animals are allowed to recover for 4-5 days prior to experiments, with weight gain monitored daily. Only those animals who regain weight to pre-surgery levels are used for experiments. On the day of the experiment, rats are fasted and connected to pumps containing insulin and D50. Baseline glucose is assessed from the arterial line and used a benchmark throughout the experiment (euglycemia). Following this, insulin is infused at a constant rate into the venous circulation. To match the drop in blood glucose, D50 is infused. If the rate of D50 infusion is greater than the rate of uptake, a rise in glucose will occur. Similarly, if the rate is insufficient to match whole body glucose uptake, a drop will occur. Titration of glucose continues until stable glucose readings are achieved. Glucose levels and glucose infusion rates during this stable period are recorded and reported. Results provide an index of whole body insulin sensitivity. The technique can be refined to meet specific experimental requirements. It is further enhanced by the use of radioactive tracers that can determine tissue specific insulin-stimulated glucose uptake as well as whole body glucose turnover.

The hyperinsulinemic-euglycemic clamp is the "gold standard" for the assessment of insulin action. Insulin is infused at a constant rate stimulating glucose uptake. The amount of exogenous glucose infused to counter this drop is indicative of insulin sensitivity. Here the procedure is performed on a conscious, unrestrained rat.

Bilinçli Rat hiperinsülinemik öglisemik Kelepçe

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

Tıp

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

Hepatik Arter İmar Kısmi Ortotopik Karaciğer Nakli Bir Rat Modeli Cerrahi İşlemleri

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

İzole Yöntemi<em&gt; Ex vivo</emBir Rat Modelinde&gt; Akciğer Perfüzyon: Sıçan EVLP Programı Geliştirme Öğrenilmiş Dersler

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg dimethylnitrosamine (DMN), given intraperitoneally for three consecutive days per week. Intraperitoneal injections were performed in the fume hood as DMN is a known hepatoxin and carcinogen. The model has several advantages. Firstly, liver changes can be studied sequentially or at particular stages of interest. Secondly, the stage of liver disease can be monitored by measurement of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes. Thirdly, the severity of liver damage at different stages can be confirmed by sacrifice of animals at designated time points, followed by histological examination of Masson&#39;s Trichome stained liver tissues. After four weeks of DMN dosing, the typical fibrosis score is 5 to 6 on the Ishak scale. The model can be reproduced consistently and has been widely used to assess the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

Rat Dimethylnitrosamine Başlatılan Karaciğer Fibrozis Modeli

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Intravascular Delivery of Biologics to the Rat Kidney

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage Renal Disease with high risk of death for cardiovascular events. Moreover, recent clinical studies have shown that renovascular structure and function may have a great impact on functional renal recovery after surgery. Here, we describe a protocol for the delivery of drugs into the renal artery of rats. This procedure offers significant advantages over the frequently used systemic administration as it may allow a more localized therapeutic effect. In addition, the use of rodents in pharmacodynamic analysis of preclinical studies may be cost effective, paving the way for the design of translational experiments in larger animal models. Using this technique, infusion of rat recombinant Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) protein in rats has induced activation of VEGF signaling as shown by increased expression of FLK1, pAKT/AKT, pERK/ERK. In summary, we established a protocol for the intrarenal delivery of drugs in rats, which is simple and highly reproducible.

The administration of drugs for recovery of kidney function requires control of the localization and distribution of the therapeutic compound. Here, we describe in detail a simple technique for intrarenal delivery of drugs in rats. This procedure may be easily performed with no mortality and high reproducibility.

Sıçan Böbrek için Biologies intravasküler teslim

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

Orthotopic fare modeli bir roman manyetik anastomoz teknik Suprahepatic Vena kava imar için kullanılarak karaciğer nakli

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and detoxifying functions of the liver. In most irreversible liver damage cases, orthotropic liver transplant (OLT) remains the only available treatment. To study the therapeutic potential of a treatment for ALF, its prior testing in an animal model of ALF is essential. In the current study, an ALF model in rats was developed by combining 70% partial hepatectomy (PHx) and injections of acetaminophen (APAP) that provides a therapeutic window of 48 h. The median and left lateral lobes of the liver were removed to excise 70% of the liver mass and APAP was given 24 h postsurgically for 2 days. Survival in ALF-induced animals was found to be severely decreased. The development of ALF was confirmed by altered serum levels of the enzymes alanine amino transferase (ALT), aspartate amino transferase (AST), alkaline phosphatase (ALP); changes in prothrombin time (PT); and assessment of the international normalized ratio (INR). Study of the gene expression profile by qPCR revealed an increase in expression levels of genes involved in apoptosis, inflammation, and in the progression of liver injury. Diffused degeneration of hepatocytes and infiltration of immune cells was observed by histological evaluation. The reversibility of ALF was confirmed by the restoration of survival and serum levels of ALT, AST, and ALP after intrasplenic transplantation of syngeneic healthy rat hepatocytes. This model presents a reliable alternative to the available ALF animal models to study the pathophysiology of ALF as well as to evaluate the potential of a novel therapy for ALF. The use of two different approaches also makes it possible to study the combined effect of physical and drug-induced liver injury. The reproducibility and feasibility of current procedure is an added benefit of the model.

The acute liver failure animal model developed in the current study presents a feasible alternative for the study of potential therapies. The current model employs the combined effect of physical and drug-induced hepatic injury and provides a suitable time window to study the potential of novel therapies.

%70 Parsiyel Hepatektomi ve Asetaminofen birleştirerek Akut Karaciğer Yetmezliği Bir Sıçan Modeli Nin Üretimi

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunun Sıçan Modelinde Arteriyel Reconnection Sonrası Azaltılmış Komplikasyonlar

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...