(; EJD EY022383 ve EY022683) ve Core hibe (P30EY001765), Görüntüleme ve Mikroskopi Çekirdek Modülü Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri araştırma hibeleri tarafından desteklenmiştir.

Etik Beyanı: Tüm işlemler Johns Hopkins Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından belirlenen kurallara uygun olarak yapıldı. Not: Diğer kemirgen suşları veya türleri de kullanılabilir, ancak çekim sırasında kullanılan fareler Jackson, C57BL / 6 fareleri. diğer suşları veya türler kullanırken, anestezi dozları ve yaralanma zaman çizelgesi değişebilir unutmayın. Soy, tür, ve deneysel farklılaşmalarına uydurmak için I / R koşullara uyum önemlidir. 1. Anestezi Kokteyl hazırlayın <ol><li> 50 ml&#39;lik bir santrifüj tüpü içinde 1.25 mi Ketamine, 0.625 mi iksilazin, 0.375 mi asepromazin ve 22.75 ml fosfat tamponlu tuzlu su birleştirin. NOT: Yazının geri kalanı için, bu çözüm kokteyl olarak anılacaktır. </li><li> 60 ml&#39;lik bir şırınga ve bir 0.20 um filtre kullanılarak yeni bir steril 50 ml santrifüj tüpüne kokteyl filtre. Etiket ve tarih bu yeni tuolacak. </li><li> Tamamen anestezik ışık kaynaklı bozulmasını önlemek için alüminyum folyo ile kokteyl tüp sarın. NOT: kokteyl oda sıcaklığında saklanabilen ve en erken-dolan madde son kullanma tarihine kadar tekrar kullanılabilir. </li></ol> 2. Anestezi Booster hazırlayın <ol><li> 50 ml&#39;lik bir santrifüj tüpü içinde, 4 mL Ketamin ve 16 ml fosfat tamponlu tuzlu su birleştirir. NOT: Bu çözüm bundan sonra güçlendirici olarak anılacaktır. </li><li> 60 ml&#39;lik bir şırınga ve bir 0.20 um filtre kullanılarak yeni bir steril 50 ml santrifüj borusu ile yükseltici filtre. Etiket ve tarih bu yeni tüp. NOT: güçlendirici oda sıcaklığında saklanabilen ve en erken-dolan madde son kullanma tarihine kadar tekrar kullanılabilir. </li></ol> 3. Cerrahi Suite hazırlayın <ol><li> 18 ° C ile 21 ° C arasındaki oda sıcaklığına ayarlayın. </li><li> Ameliyat masasında açın ve highe için yüzey ısısını ayarlamakSt sıcaklığı. </li><li> Cerrahi underpads ile tüm çalışma yüzeyleri örtün. </li><li> sıcak cerrahi masaya boş bir kafes ya da başka bir kap düzenleyin. </li><li> Bir ölçek ve tezgâh üzerinde bir kulak tagger düzenleyin. </li></ol> 4. Heparin Sodyum Dengeli Tuz Çözüm hazırlayın <ol><li> dengelenmiş tuz çözeltisi (HBSS) içindeki bir 500 mi IV şişeye heparin sodyum, 0.5 ml ilave edilir. </li><li> % 0.1 heparin sodyum şişeye Y-site boru prepierced birincil setinin keskin ucunu sokun. </li></ol> 5. IV Kutup kurma <ol><li> IV kutup uzantısından% 0.1 heparin sodyum şişe asın, ve Y-site boru prepierced birincil sette hava filtresi kapağını açın oturtun. </li><li> 163 cm (120 mm Hg)% 0.1 heparin sodyum şişe yükseltin. sodyum heparin damla zirvesine masa gelen yüksekliğini ölçün. </li><li> El Y-site boru prepierced birincil seti hafifçe vurarak IV tüp herhangi bir hava kabarcıklarını çıkarın. </li&gt; </ol> 6. Sodyum Heparin Damla kurma <ol><li> Beş valf manifolduna Y-site boru prepierced birincil seti bağlayın. </li><li> 30-ölçer bağlayın ½ erkek rakorlar luer için Luer erkek kullanarak beş kapılı manifolduna inç iğneler. </li><li> 30-gauge, borunun kendi 10 inç segmentine 30-gauge ½ inç iğne her sokun. </li><li> hemostat kullanarak, yeni 30-gauge ½ inç iğne iğne ipuçlarını kırmak ve 30-gauge tüp içine onların kör uçlar yerleştirin. İğne ipuçları sterilite veya dezenfeksiyon Adım 8.3 için gerekli olacaktır. </li><li> bant kullanarak, iç bağlantı noktalarına bağlı borular dış bağlantı noktalarına bağlı tüpler üzerine konumlandırılır, öyle ki iğne ile 30 gauge tüpleri sağlayabilir. Bu düzenleme ön kamara kanülasyon sırasında boru karışıklığı önleyecektir. </li><li> Beş valf manifolduna% 0.1 heparin sodyum akışı ve her bir port için çevirin. <ol><li> Emin olun% 0,1heparin sodyum her bir port için güçlü akıyor. bir liman zayıf akan ise, bağlantı noktasını değiştirmek ya da steril bir şırınga hava ile temizleyin. </li><li> 30-gauge tüpleri ve 5-valf manifoldundan hava kabarcıklarını çıkarmak için 3 dakika -% 0.1 heparin sodyum 2 akmasına izin verin. </li></ol></li><li> 5-valf manifoldu üzerindeki tüm portları kapatın. </li></ol> 7. Cerrahi Fare hazırlayın <ol><li> Cerrahi paketine fareler getirin. Ameliyat sırasında, hayvan kaybını önlemek için, her bir kafes için su şişeleri sağlayın. </li><li> Her bir farenin ağırlığı kaydedin. </li><li> intraperitoneal gram vücut ağırlığı başına 0.02 ml kokteyl ile her fare enjekte edilir. </li><li> Etiketi ve her bir fare sayısını kaydeder. </li><li> Ameliyat masasında boş kap içine tüm fareler yerleştirin. ayak tutam pedal çekilme yanıtı yokluğunda tarafından onaylandıktan derin anesthetization ulaşmak için tüm fareler için 5-10 dakika bekleyin. </li><li> Her bir fare için, bir damla uygulanmasıöğrenci dilatasyon ve kısa vadeli yağlanması için her gözün içine Tropicamide. </li><li> Her fare için, lokal anestezi ve kısa vadeli yağlanması için her gözün içine proparakain bir damla yönetmek. </li><li> İlk fare olacak anestezi ilk fare kanüle edilmesi ve böylece anesthetization sırasına fareler düzenleyin. </li><li> İzin yaklaşık göz için 2 dakika yürürlüğe girmesi düşer. </li><li> Kasette sıkıca çekerek bant düz 4-inç parçalarını hazırlayın. bir kenara, her fare için bant tek parça ayarlayın. NOT: Kasette sıkıca çekin yerine getirmemek bant kıvrılmasını neden olacaktır. </li></ol> 8. cannulate Ön Kamara <ol><li> Cerrahi mikroskop altında ilk fare düzenleyin ve tercih edilen kornea üzerinde mikroskop odaklanın. NOT: Her iki kanülasyonu göz gerçekleştirilebilir. Sağ hakim cerrahlar i bulabilirsinizSol dominant cerrahlar hakkını tercih edebilirsiniz süre t kolay, sol gözü cannulate. </li><li> Beş valf manifoldu ilk% 0.1 heparin sodyum port açın. </li><li> Cerrahi mikroskop altında, hafifçe göz proptose için forseps bir çift kullanın. zonule lifleri ve kornea apeks arasında yaklaşık yarım ön kamaraya 30-gauge kanül iğne takın. <ol><li> çizilmemesi veya iris, lens ya da iç kornea yüzeyinin delinmesiyle önlemek için özen gösterin. </li><li> korneaya ikinci kez nüfuz kaçının. </li><li> kanül ve kornea arasındaki sürtünmeyi aşmak için nazik bir kıvırma hareketi ile, ön kamarada derinden kanül yerleştirin. </li></ol></li><li> tablo 30-gauge boru sağlamak için bant şeridi kullanın. bant ulaşırken eklenen kanül hareketini en aza indirmek için, masa karşı 30-gauge boru basın. </li><li> cerrahi başlama süresi olarak kaydedilir. </li><li> verif, mikroskop kullanılarakkaçak ortaya y. Sızıntı varsa, sıvının hareketi göz yakınında görünür olacaktır. </li><li> Görme I / R göz kontralateral gözün daha büyük olduğunu gözlemleyerek göz distansiyon onaylayın. Birlikte, sızıntı olmaması ve oküler distansiyon varlığı göz içi basıncı başarılı bir yükselme göstermektedir. </li><li> her iki göze hipromelloz uygulayın. Hipromelloz kornea ve mühür microleaks yağlamak için hizmet vermektedir. sürekli yağlama için (yaklaşık olarak her 30 dakika) gerektiği gibi hipromelloz yeniden uygulayın. </li><li> tüm hayvanlar kanüle edilene kadar tekrarlayın Adım 8. </li></ol> 9. Monitör Anestezi <ol><li> ayak tutam kullanın, bıyıkları veya kuyruk görsel gözlem görsel gözlem her bir fare anestezi kalmasını doğrulamak için. Bir fare bir pedal geri çekme yanıtı, bıyık seğirmesi veya kuyruk hareketi göstermesi gerekmektedir, 9.2 Adım hemen geçin. </li><li> Bir fare cerrahi, kaldırma sırasında uyandırmak başlarsakuyruk fare arkasından alt karın içine intraperitoneal 0.05 ml güçlendirici enjekte etmek. yükseltici etkili olması için 2 dk - 1 izin verin. </li><li> Bir fare, ek sedasyon, gerektiğinde tekrar Adım 9 gerektirir. </li></ol> 10. Anterior Odası&#39;ndan Kanül kaldır <ol><li> Her bir hayvan için, 90 dakika geçtikten sonra, yavaşça antoryor odacıktan kanül çekin. </li><li> Bitişik hayvanların kanül tüp rahatsız etmemek için özen, cerrahi tablodan fareyi Untape. </li><li> jöle yağlama ile her iki gözü yağlayın. </li><li> sonraki kanüller kaldırılır gibi, ameliyatın cerrahi masada boş bir kap içinde fareler düzenlemek. Cerrahi tablonun ısı kapatmayın. </li><li> Isıtmalı cerrahi masaya kurtarma için 3 saat - 2, en azından, izin verin. tam anestezi kurtarıldı sık kadar fareler gözlemleyin. </li></ol> 11. Temiz Equipment <ol><li> alkol mendil kullanarak kanüller dezenfekte edin. NOT: otoklavlama olarak dezenfeksiyon veya sterilizasyon için kullanılan diğer yöntemler, sübstitüe edilmiş olabilir. </li><li> hava ile dolu bir 60 ml&#39;lik bir şırınga kullanılarak 5-valf manifoldunun% 0.1 heparin sodyum, 30-geyç &#39;lik iğneler, 30-gauge boru ve kanül boşaltınız. </li><li> damıtılmış su ile dolu bir 60 ml&#39;lik bir şırınga kullanılarak 5-valf manifoldu, 30-geyç &#39;lik iğneler, 30-gauge boru ve kanül yıkayın. </li><li> hava ile dolu bir 60 ml&#39;lik bir şırınga kullanılarak 5-bağlantı manifoldu, 30-gauge iğne, 30-gauge boru ve kanüller damıtılmıştır suyu atmak. </li><li> kanül dezenfeksiyon ve boru aparatı yıkandıktan sonra, yeniden kullanım için bu cihazı saklayın. </li><li> Mağaza, atmak, ya da tüm diğer donanımları kapatın. cerrahi tablonun ısı bırakın. </li></ol> 12. Dönüş Onların Ev Kafes tüm Fareler <ol><li> Fareler (2 sonra - 3 saat) cerrahi uyandırmak sonra evde kafes her hayvan dönmek. Her kafes için jel yiyecek sağlamak. kendi tayin odalarına tüm kafesleri dönün. </li><li> Cerrahi tablonun ısı kapatın. Tüm atık atmak ve cerrahi paketi silin. </li></ol> 13. Retina Değerlendirmesi gerçekleştirin <ol><li> Uygun olarak, Elektroretinogram kayıt için histolojik analiz ya da koyu adapte fareler için retina toplamak. </li></ol>

<ol>
	<li>Osborne, N. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+ischemia:+mechanisms+of+damage+and+potential+therapeutic+strategies.">Retinal ischemia: mechanisms of damage and potential therapeutic strategies.</a> Prog Retin Eye Res. 23 (1), 91-147 (2004).</li><li>Bonne, C., Muller, A., Villain, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radicals+in+retinal+ischemia.">Free radicals in retinal ischemia.</a> Gen Pharmacol. 30 (3), 275-280 (1998).</li><li>Smith, G. G., Baird, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+time+of+retinal+cells+when+deprived+of+their+blood+supply+by+increased+intraocular+pressure.">Survival time of retinal cells when deprived of their blood supply by increased intraocular pressure.</a> Am J Ophthalmol. 35 (5:2), 133-136 (1952).</li><li>Buchi, E. R., Suivaizdis, I., Fu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+retinal+ischemia+in+rats:+an+experimental+model+for+quantitative+study.">Pressure-induced retinal ischemia in rats: an experimental model for quantitative study.</a> Ophthalmologica. 203 (3), 138-147 (1991).</li><li>Block, F., Schwarz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+b-wave+of+the+electroretinogram+as+an+index+of+retinal+ischemia.">The b-wave of the electroretinogram as an index of retinal ischemia.</a> Gen Pharmacol. 30 (3), 281-287 (1998).</li><li>Katai, N., Yoshimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptotic+retinal+neuronal+death+by+ischemia-reperfusion+is+executed+by+two+distinct+caspase+family+proteases.">Apoptotic retinal neuronal death by ischemia-reperfusion is executed by two distinct caspase family proteases.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 40 (11), 2697-2705 (1999).</li><li>Toriu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lomerizine,+a+Ca2++channel+blocker,+reduces+glutamate-induced+neurotoxicity+and+ischemia/reperfusion+damage+in+rat+retina.">Lomerizine, a Ca2+ channel blocker, reduces glutamate-induced neurotoxicity and ischemia/reperfusion damage in rat retina.</a> Exp Eye Res. 70 (4), 475-484 (2000).</li><li>Kawai, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+of+risk+factors+for+the+degeneration+of+retinal+ganglion+cells+after+ischemia/reperfusion+in+rats:+effects+of+age,+caloric+restriction,+diabetes,+pigmentation,+and+glaucoma.">Modeling of risk factors for the degeneration of retinal ganglion cells after ischemia/reperfusion in rats: effects of age, caloric restriction, diabetes, pigmentation, and glaucoma.</a> FASEB J. 15 (7), 1285-1287 (2001).</li><li>Chidlow, G., Schmidt, K. G., Wood, J. P., Melena, J., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-lipoic+acid+protects+the+retina+against+ischemia-reperfusion.">Alpha-lipoic acid protects the retina against ischemia-reperfusion.</a> Neuropharmacology. 43 (6), 1015-1025 (2002).</li><li>Fei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Upregulation+of+Homer1a+Promoted+Retinal+Ganglion+Cell+Survival+After+Retinal+Ischemia+and+Reperfusion+via+Interacting+with+Erk+Pathway.">Upregulation of Homer1a Promoted Retinal Ganglion Cell Survival After Retinal Ischemia and Reperfusion via Interacting with Erk Pathway.</a> Cell Mol Neurobiol. , (2015).</li><li>Xu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+role+of+Nrf2+for+retinal+ganglion+cells+in+ischemia-reperfusion.">Neuroprotective role of Nrf2 for retinal ganglion cells in ischemia-reperfusion.</a> J Neurochem. 133 (2), 233-241 (2015).</li><li>Kim, B. J., Braun, T. A., Wordinger, R. J., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+morphological+changes+and+impaired+retinal+function+associated+with+temporal+regulation+of+gene+expression+after+retinal+ischemia/reperfusion+injury+in+mice.">Progressive morphological changes and impaired retinal function associated with temporal regulation of gene expression after retinal ischemia/reperfusion injury in mice.</a> Mol Neurodegener. 8 (21), (2013).</li><li>Portillo, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD40+mediates+retinal+inflammation+and+neurovascular+degeneration.">CD40 mediates retinal inflammation and neurovascular degeneration.</a> J Immunol. 181 (12), 8719-8726 (2008).</li><li>Wei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nrf2+has+a+protective+role+against+neuronal+and+capillary+degeneration+in+retinal+ischemia-reperfusion+injury.">Nrf2 has a protective role against neuronal and capillary degeneration in retinal ischemia-reperfusion injury.</a> Free Radic Biol Med. 51 (1), 216-224 (2011).</li><li>Abcouwer, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ischemic+preconditioning+and+bevacizumab+on+apoptosis+and+vascular+permeability+following+retinal+ischemia-reperfusion+injury.">Effects of ischemic preconditioning and bevacizumab on apoptosis and vascular permeability following retinal ischemia-reperfusion injury.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 51 (11), 5920-5933 (2010).</li><li>Abcouwer, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minocycline+prevents+retinal+inflammation+and+vascular+permeability+following+ischemia-reperfusion+injury.">Minocycline prevents retinal inflammation and vascular permeability following ischemia-reperfusion injury.</a> J Neuroinflammation. 10 (149), (2013).</li><li>Zheng, L., Gong, B., Hatala, D. A., Kern, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+ischemia+and+reperfusion+causes+capillary+degeneration:+similarities+to+diabetes.">Retinal ischemia and reperfusion causes capillary degeneration: similarities to diabetes.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 48 (1), 361-367 (2007).</li><li>Weyker, P. D., Webb, C. A., Kiamanesh, D., Flynn, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+ischemia+reperfusion+injury:+a+bench-to-bedside+review.">Lung ischemia reperfusion injury: a bench-to-bedside review.</a> Semin Cardiothorac Vasc Anesth. 17 (1), 28-43 (2013).</li><li>Raedschelders, K., Ansley, D. M., Chen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+and+molecular+origin+of+reactive+oxygen+species+generation+during+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">The cellular and molecular origin of reactive oxygen species generation during myocardial ischemia and reperfusion.</a> Pharmacol Ther. 133 (2), 230-255 (2012).</li><li>Di, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs+expression+and+function+in+cerebral+ischemia+reperfusion+injury.">MicroRNAs expression and function in cerebral ischemia reperfusion injury.</a> J Mol Neurosci. 53 (2), 242-250 (2014).</li><li>Saidi, R. F., Kenari, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+ischemia/reperfusion+injury:+an+overview.">Liver ischemia/reperfusion injury: an overview.</a> J Invest Surg. 27 (6), 366-379 (2014).</li><li>Malek, M., Nematbakhsh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+ischemia/reperfusion+injury;+from+pathophysiology+to+treatment.">Renal ischemia/reperfusion injury; from pathophysiology to treatment.</a> J Renal Inj Prev. 4 (2), 20-27 (2015).</li><li>Mallick, I. H., Yang, W., Winslet, M. C., Seifalian, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia-reperfusion+injury+of+the+intestine+and+protective+strategies+against+injury.">Ischemia-reperfusion injury of the intestine and protective strategies against injury.</a> Dig Dis Sci. 49 (9), 1359-1377 (2004).</li><li>Hesketh, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+ischaemia+reperfusion+injury:+a+mouse+model+of+injury+and+regeneration.">Renal ischaemia reperfusion injury: a mouse model of injury and regeneration.</a> J Vis Exp. (88), (2014).</li><li>Stefansson, E., Wilson, C. A., Schoen, T., Kuwabara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+ischemia+induces+cell+mitosis+in+the+adult+rat+retina.">Experimental ischemia induces cell mitosis in the adult rat retina.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 29 (7), 1050-1055 (1988).</li><li>Honjo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statin+inhibits+leukocyte-endothelial+interaction+and+prevents+neuronal+death+induced+by+ischemia-reperfusion+injury+in+the+rat+retina.">Statin inhibits leukocyte-endothelial interaction and prevents neuronal death induced by ischemia-reperfusion injury in the rat retina.</a> Arch Ophthalmol. 120 (12), 1707-1713 (2002).</li><li>Otori, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+c-fos+and+c-jun+mRNA+following+transient+retinal+ischemia:+an+approach+using+ligation+of+the+retinal+central+artery+in+the+rat.">Expression of c-fos and c-jun mRNA following transient retinal ischemia: an approach using ligation of the retinal central artery in the rat.</a> Surv Ophthalmol. 42, 96-104 (1997).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epac2-deficiency+leads+to+more+severe+retinal+swelling,+glial+reactivity+and+oxidative+stress+in+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+induced+ischemic+retinopathy.">Epac2-deficiency leads to more severe retinal swelling, glial reactivity and oxidative stress in transient middle cerebral artery occlusion induced ischemic retinopathy.</a> Sci China Life Sci. 58 (6), 521-530 (2015).</li><li>Zhang, Y., Zhang, Z., Yan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simvastatin+inhibits+ischemia/reperfusion+injury-induced+apoptosis+of+retinal+cells+via+downregulation+of+the+tumor+necrosis+factor-alpha/nuclear+factor-kappaB+pathway.">Simvastatin inhibits ischemia/reperfusion injury-induced apoptosis of retinal cells via downregulation of the tumor necrosis factor-alpha/nuclear factor-kappaB pathway.</a> Int J Mol Med. , (2015).</li><li>Li, B., Pang, I. H., Barnes, G., McLaughlin, M., Holt, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+and+device+to+induce+transient+retinal+ischemia+in+the+rat.">A new method and device to induce transient retinal ischemia in the rat.</a> Curr Eye Res. 24 (6), 458-464 (2002).</li></ol>

The authors have no disclosures.

Retina I / GİB yükselmesi ile R yaralanması kemirgen retina nörovasküler ünitesinde hücresel hasarı ve disfonksiyonu, özellikle nörodejenerasyonu, modelleme kendi programını kanıtlamıştır. Bu prosedür sağlam bir kontrol doku sağlar ve teknik gelişmişliği açısından kolayca erişilebilir. Bu ve basınç ve iskemi süresini artırarak yaralanma şiddetini 24 artırabilir diğer I / R yaralanmasına modellerinde görülmüştür. Bu nedenle, bazı uygulayıcılar burada 4,6-10,12</su...

Retina İskemi-reperfüzyon (I / R), glokom, diyabetik retinopati ve retinal vasküler oklüzyonlar 1 de dahil olmak üzere pek çok insan retinal hastalıkları, karakterize etmektedir. Dolaşım sonradan iade edildiğinde retina I / R, retina damar sisteminde azalmış kan akımı (iskemi) retina oksijen ve diğer besin karşı aşırı duyarlılığı, şiddetli oksidatif tetikleyici ve inflamatuar hasar durumunu oluşturur (reperfüzyon) 2. nöral retina retina nörodejenerasyon belki / R&#39;a bağlı hasarın en belirgin özelliği olmak üzere, bu değişikliklere karşı özellikle savunmasız görünüyor. Fare retina İ / R hasarını modelleme için bir protokol burada sunulmuştur. Bu teknik retina nörovasküler birimin insan hastalıkları için potansiyel mekanizmaları ve tedavi stratejilerinin incelemek için araştırmacılar sağlar. Cerrahi anemi 3 nörodejeneratif sonuçlarını anlamak isteyen cerrahlar tarafından 1952 yılında öncülük rodent Retina I / yüksek göz içi basıncının (GİB) tarafından R iskemik hakaret 4 sonra nörodejeneratif uç noktaları standartlaştırılması amacıyla 1991 yılında yeniden kuruldu. sistolik kan basıncının üstünde göz içi basıncını yükseltmek için tuzlu rezervuar damla kullanarak, bu çalışmalar basınçlı göz kanülasyon retina dolaşımını durdurma ve böylece nöronal dejenerasyona başlatmak için yeterli olduğunu göstermiştir. GİB yükselmesi retina I / R kullanarak Daha yeni çalışmalar I / R-kaynaklı retina nörodejenerasyon 5-12 yatan mekanizmaları ayrıntılı başladı. Çoklu gruplar inflamasyon 13,14, damar geçirgenliği 15,16 ve kılcal dejenerasyonu 14,17 dahil olmak üzere ek patolojik değişiklikler bildirilmiştir. Birlikte ele alındığında, bu çalışmalar daha genel olarak retina nörovasküler hastalığı için bir model olarak, yüksek IOP retinal I / R hasarına kurduk. I / R yaralanma mekanizmasını karakterize va çalışma için gerekli olanscular hastalığı. Yükseltilmiş GİB&#39;ndan Retina I / R hasarına, I / R akciğer 18 yaralanma, kalp 19, beyin 20, karaciğer 21, böbrek 22 ve bağırsakta 23 de dahil olmak üzere pek çok hipoksi kaynaklı yaralanma modellerinde, biridir. Bu modeller vasküler hastalık anlayışımızı ve klinik çareler geliştirilmesinde olağanüstü olmuştur. oküler dokularda, retina I / GİB yükselmesi ile R sakatlığı I / R süreçlerinin soruşturma uzatarak bu ilgili koşulların daha kapsamlı bir resmini yardımcı olur. retinada klinik nörodejeneratif koşullar, retina I / GİB yükselmesi ile R yaralanması ile yakından gelen iskemik patogenezi keşfetmek ilgilenen araştırmacılar için değerli bir araç sunuyor. Burada tarif edilen protokol, uysal, ve erişilebilir hedeflenmektedir. Böyle retina nöronlarının ölçümü, retina kalınlığı ölçümü ve elektrofizyolojik r olarak nöronal dejenerasyonu uç noktalar ile de tamamlanmaktadırretinal sinir işlevinin ayıt. Bu model nörovasküler soruşturma ilerleyen yararını kanıtlamış ve görsel tıp araştırmalarında temel bir kuralı olarak statüsünü kazanma olacağını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Heparin Sodium Injection, USP</td><td>Abraxis Pharmaceutical Products</td><td></td><td>1,000 USP/ml</td></tr><tr><td>BSS Sterile Irrigating Solution</td><td>Alcon Laboratories, Inc.</td><td>9007754-0212</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>SC-2 kg Digital Pocket Scale</td><td>American Weigh Scales, Inc.</td><td>SC-2 kg</td><td></td></tr><tr><td>Tropicamide Ophthalmic Solution USP 1%</td><td>Bausch + Lomb</td><td></td><td>1% (10 mg/ml)</td></tr><tr><td>Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution USP, 0.5%</td><td>Bausch + Lomb</td><td></td><td>0.5% (5 mg/ml)</td></tr><tr><td>INTRAMEDIC Polyethylene Tubing</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>427400</td><td>Inner diameter: 427400</td></tr><tr><td>30 G 1/2 PrecisionGlide Needles</td><td>Benton Dickinson and Company</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>BC 1 ml TB Syringe, Slim Tip with Intradermal Bevel Needle, 26 G x 3/8</td><td>Benton Dickinson and Company</td><td>309625</td><td></td></tr><tr><td>BD 60 ml Syringe Luer-Lok Tip</td><td>Benton Dickinson and Company</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss OPMI Visu 200/S8 Microscope</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>000000-1179-101</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Syringe Filter</td><td>Corning Inc.</td><td>CLS431224</td><td>0.20 &amp;micro;m</td></tr><tr><td>Durasorb Underpads</td><td>Covidien</td><td>1038</td><td>23 x 24 inches</td></tr><tr><td>Alcohol Prep</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td>2 Ply, Medium</td></tr><tr><td>Student Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>91150-20</td><td></td></tr><tr><td>Hartman Hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Primary Set, Macrobore, Prepierced Y-Site, 80 Inch</td><td>Hospira</td><td>12672-28</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline pH 7.4 (1x)</td><td>Invitrogen</td><td>10010-049</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Distilled water</td><td>Invitrogen</td><td>15230-204</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>C57BL/6J Mice</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>664</td><td></td></tr><tr><td>AnaSed Injection: Xylazine Sterile Solution</td><td>LLOYD, Inc.</td><td></td><td>20 mg/ml</td></tr><tr><td>Lubricating Jelly, Water Soluble Bacteriostatic</td><td>MediChoice</td><td></td><td>3-Gram Packet</td></tr><tr><td>NAMIC Angiographic Pressure Monitoring Manifold</td><td>Navilyst Medical, Inc.</td><td>70039355</td><td>5-Valve Manifold with Seven Female Ports</td></tr><tr><td>Goniosoft, Hypromellose 2.5% Ophthalmic Demulcent Solution: Hydroxypropyl Methylcellulose</td><td>OCuSOFT, Inc.</td><td></td><td>2.5% (25 mg/ml)</td></tr><tr><td>Ketaset CIII: Ketamine Hydrochloride</td><td>Pfizer, Inc.</td><td></td><td>100 mg/ml</td></tr><tr><td>Trans-Pal I.V. Stand&amp;nbsp;</td><td>Pryor Products</td><td>372</td><td>Furnished with a home-constructed 60-cm stainless steel extension</td></tr><tr><td>Acepromazine: Acepromazine Maleate Injection, USP</td><td>Vet One</td><td></td><td>10 mg/ml</td></tr><tr><td>V-Top Surgery Table/Adjustable Hydraulic</td><td>VSSI</td><td>100-4041-21</td><td></td></tr><tr><td>Tube Fitting Luer Male to Luer Male</td><td>Warner Instruments</td><td>64-1579</td><td></td></tr></tbody></table>

a mouse model of retinal ischemia-reperfusion injury through elevation of intraocular pressure

Retina İskemi-reperfüzyon (I / R), glokom, diyabetik retinopati ve retinal vasküler oklüzyon da dahil olmak üzere çok sayıda oküler hastalık, hücre hasarına katkıda bulunan patofizyolojik süreç. I / R hasarının kemirgen modelleri, özellikle retina nörovasküler ünitesinde nörodejeneratif hasar bakımından, insan İ / R hasarı için mekanizmalar ve tedavi stratejileri hakkında önemli bilgiler sağlıyor. göz içi basıncı (GİB) yüksekliği ile farelerde retina İ / R hasarını uyarılması için bir protokol burada sunulmuştur. Bu protokolde, oküler ön kamara yükseltilmiş bir tuzlu rezervuar damla aktığı bir iğne ile kanüle edilir. sistolik kan basıncının üzerinde GİB&#39;in yükseltmek için bu damla kullanarak, bir uygulayıcı geçici iç retina kan akımını (iskemi) durur. dolaşım kanül uzaklaştırılmasıyla (reperfüzyon) eski haline getirildiğinde, ağır hücresel hasar retina nörodejenerasyonunda sonuçta ortaya çıkan, ortaya çıkar. Son damızlıkler, bu modelin daha fazla unsurları olarak enflamasyon, vasküler geçirgenlik ve kapiler dejenerasyon göstermektedir. Böyle retinal arter ligasyonu, retina I / tarafından R yaralanması gibi alternatif retina İ / R metodolojileri ile karşılaştırıldığında GİB&#39;in nöronal patogenezi ve tedavisi incelemek için değerli bir araç olarak kendini sunan, anatomik özgüllük, deneysel tractability ve teknik erişilebilirlik avantajlar sunmaktadır yükselmiş retina nörovasküler birimi.

GİB yükselmesi retina I / R nörodejeneratif etkileri genellikle iki standart yaklaşımlar kullanılarak değerlendirilir. Nöronal çekirdeğin Neun immün I / R hakaret (Şekil 1) Aşağıdaki önemli nöronal hücre kaybı ortaya koymuştur. I / R, paraformaldehid sabit nöronal hücre işaretleyici Neun ile etiketlenmiş ve tüm monte edildikten sonra Kısaca, gözler 7 gün enükleasyon. Görüntüler konfokal mikroskopi kullanılarak çekilen ve neun ile etiketl...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure at JoVE.com

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Bu makalede, farelerde yüksek göz tansiyonu retinal iskemi-reperfüzyon hasarı uyarılması için bir yöntem tarif eder. yüksek göz içi basıncı ile retinal iskemi-reperfüzyon hasarı, retina nörovasküler biriminin, insan hastalıkları için, potansiyel hücresel mekanizmaları ve tedavi incelemelerine sağlayan retinada tehlikeye oksijen ve besin teslimat karakterize olan insan patolojilerinin model vermektedir.

Göz İçi Basıncı Yükselmesi ile Retina İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

a-mouse-model-retinal-ischemia-reperfusion-injury-through-elevation

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

14.8K Görüntüleme.  Johns Hopkins University.  Bu makalede, farelerde yüksek göz tansiyonu retinal iskemi-reperfüzyon hasarı uyarılması için bir yöntem tarif eder. yüksek göz içi basıncı ile retinal iskemi-reperfüzyon hasarı, retina nörovasküler biriminin, insan hastalıkları için, potansiyel hücresel mekanizmaları ve tedavi incelemelerine sağlayan retinada tehlikeye oksijen ve besin teslimat karakterize olan insan patolojilerinin model vermektedir. 

Video: A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Laser-Induced Chronic Ocular Hypertension Model on SD Rats

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular hypertension is one of the well established animal models. This video demonstrates how to induce ocular hypertension by Argon laser photocoagulation in rat.

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular hypertension is one of the well established animal models. This video demonstrates how to induce ocular hypertension by Argon laser photocoagulation in rat.

Lazer Kaynaklı SD Sıçanlarda Kronik Oküler Hipertansiyon Modeli

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular ...

Biyoloji

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model of ocular hypertension to mimic human high-tension glaucoma. Here laser illumination is applied to the corneal limbus to photocoagulate the aqueous outflow, inducing angle closure. The changes of IOP are monitored using a rebound tonometer before and after the laser treatment. An optomotor behavioral test is used to measure corresponding changes in visual capacity. The representative result from one mouse which developed sustained IOP elevation after laser illumination is shown. A decreased visual acuity and contrast sensitivity is observed in this ocular hypertensive mouse. Together, our study introduces a valuable model system to investigate neuronal degeneration and the underlying molecular mechanisms in glaucomatous mice.

Chronic ocular hypertension is induced using laser photocoagulation of the trabecular meshwork in mouse eyes. The intraocular pressure (IOP) is elevated for several months after laser treatment. The decrease of visual acuity and contrast sensitivity of experimental animals are monitored using the optomotor test.

Görme Kusurları karakterize Kronik Oküler Hipertansiyon bir Lazer-kaynaklı Fare Modeli

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Tıp

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the brain for visual perception. Damage to RGCs and their axons leads to vision loss and/or blindness. Although the specific cause of glaucoma is unknown, the primary risk factor for the disease is an elevated intraocular pressure. Glaucoma-inducing procedures in animal models are a valuable tool to researchers studying the mechanism of RGC death. Such information can lead to the development of effective neuroprotective treatments that could aid in the prevention of vision loss. The protocol in this paper describes a method of inducing glaucoma - like conditions in an in vivo rat model where 50 &#181;l of 2 M hypertonic saline is injected into the episcleral venous plexus. Blanching of the vessels indicates successful injection. This procedure causes loss of RGCs to simulate glaucoma. One month following injection, animals are sacrificed and eyes are removed. Next, the cornea, lens, and vitreous are removed to make an eyecup. The retina is then peeled from the back of the eye and pinned onto sylgard dishes using cactus needles. At this point, neurons in the retina can be stained for analysis. Results from this lab show that approximately 25% of RGCs are lost within one month of the procedure when compared to internal controls. This procedure allows for quantitative analysis of retinal ganglion cell death in an in vivo rat glaucoma model.

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma is characterized by damage to retinal ganglion cells. Inducing glaucoma in animal models can provide insight into the study of this disease. Here, we outline a procedure that induces loss of RGCs in an in vivo rat model and demonstrates the preparation of whole-mount retinas for analysis.

Glokom uyaran bir de Prosedürü<em&gt; İn Vivo</em&gt; Rat Modeli ve Tüm montaj Retina Hazırlık

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known risk factor for glaucoma. This protocol demonstrates a step-by-step guide on this technique in Long Evans rats and C57BL/6 mice. Under general anesthesia, a "purse-string" suture is applied on the conjunctiva, around the equator and behind the limbus of the eye. The fellow eye serves as an untreated control. Over the duration of our study, which was a period of 8 weeks for rats and 12 weeks for mice, IOP remained elevated, as measured regularly by rebound tonometry in conscious animals without topical anesthesia. In both species, the sutured eyes showed electroretinogram features consistent with preferential inner retinal dysfunction. Optical coherence tomography showed selective thinning of the retinal nerve fiber layer. Histology of the rat retina in cross-section found reduced cell density in the ganglion cell layer, but no change in other cellular layers. Staining of flat-mounted mouse retinae with a ganglion cell specific marker (RBPMS) confirmed ganglion cell loss. The circumlimbal suture is a simple, minimally invasive and cost-effective way to induce ocular hypertension that leads to ganglion cell injury in both rats and mice.

Chronic ocular hypertension is induced by applying a circumlimbal suture in rats and mice, leading to functional and structural deterioration of the retinal ganglion cells consistent with glaucoma.

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

A Reversible Silicon Oil-Induced Ocular Hypertension Model in Mice

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing stable IOP elevation in mice that mimics the post-operative complication of using silicone oil (SO) as a tamponade agent in human vitreoretinal surgery. In this protocol, SO is injected into the anterior chamber of the mouse eye to block the pupil and prevent inflow of aqueous humor. The posterior chamber accumulates aqueous humor and this in turn increases the IOP of the posterior segment. A single SO injection produces reliable, sufficient, and stable IOP elevation, which induces significant glaucomatous neurodegeneration. This model is a true replicate of secondary glaucoma in the eye clinic. To further mimic the clinical setting, SO can be removed from the anterior chamber to reopen the drainage pathway and allow inflow of aqueous humor, which is drained through the trabecular meshwork (TM) at the angle of the anterior chamber. Because IOP quickly returns to normal, the model can be used to test the effect of lowering IOP on glaucomatous retinal ganglion cells. This method is straightforward, does not require special equipment or repeat procedures, closely simulates clinical situations, and may be applicable to diverse animal species. However, minor modifications may be required.

Here, we present a protocol to induce ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse eyes by intracameral injection of silicone oil and the procedure for silicone oil removal from the anterior chamber to return elevated intraocular pressure to normal.

Farelerde Geri Dönüşümlü Silikon YağA Bağlı Oküler Hipertansiyon Modeli

Elevated intraocular pressure (IOP) is a well-documented risk factor for glaucoma. Here we describe a novel, effective method for consistently inducing ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR model induction and its readouts in both mice and rats. Retinal neovascularization is induced in OIR by exposing rodent pups either to hyperoxia (mice) or alternating levels of hyperoxia and hypoxia (rats). The primary readouts of these models are the size of neovascular (NV) and avascular (AVA) areas in the retina. This preclinical in vivo model can be used to evaluate the efficacy of potential anti-angiogenic drugs or to address the role of specific genes in the retinal angiogenesis by using genetically manipulated animals. The model has some strain and vendor specific variation in the OIR induction which should be taken into consideration when designing the experiments.

Oxygen-induced retinopathy (OIR) can be used to model ischemic retinal diseases such as retinopathy of prematurity and proliferative diabetic retinopathy and to serve as a model for proof-of-concept studies in evaluating antiangiogenic drugs for neovascular diseases. OIR induces robust and reproducible neovascularization in the retina that can be quantified.

Kemirgenlerde İskemik Retina Hastalıkları için Oksijen Kaynaklı Retinopati Modeli

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...

Full-Circle Cauterization of Limbal Vascular Plexus for Surgically Induced Glaucoma in Rodents

Glaucoma, the second leading cause of blindness worldwide, is a heterogeneous group of ocular disorders characterized by structural damage to the optic nerve and retinal ganglion cell (RGC) degeneration, resulting in visual dysfunction by interrupting the transmission of visual information from the eye to the brain. Elevated intraocular pressure is the most important risk factor; thus, several models of ocular hypertension have been developed in rodents by either genetic or experimental approaches to investigate the causes and effects of the disease. Among those, some limitations have been reported such as surgical invasiveness, inadequate functional assessment, requirement of extensive training, and highly variable extension of retinal damage. The present work characterizes a simple, low-cost, and efficient method to induce ocular hypertension in rodents, based on low-temperature, full-circle cauterization of the limbal vascular plexus, a major component of aqueous humor drainage. The new model provides a technically easy, noninvasive, and reproducible subacute ocular hypertension, associated with progressive RGC and optic nerve degeneration, and a unique post-operative clinical recovery rate that allows in vivo functional studies by both electrophysiological and behavioral methods.

The goal of this protocol is to characterize a novel model of glaucomatous neurodegeneration based on 360&#176; thermic cauterization of limbal vascular plexus, inducing subacute ocular hypertension.

Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu

Glaucoma, the second leading cause of blindness worldwide, is a heterogeneous group of ocular disorders characterized by structural damage to the optic ...

Nörobilim

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. To investigate pathological mechanisms of retinal ischemia, relevant experimental models need to be developed. Anatomically, a main retinal blood supplying vessel is the ophthalmic artery (OpA) and OpA originates from the internal carotid artery of the common carotid artery (CCA). Thus, disruption of CCA could effectively cause retinal ischemia. Here, we established a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion (tBCCAO) to tie the right CCA with 6-0 silk sutures and to occlude the left CCA transiently for 2 seconds via a clamp, and showed that tBCCAO could induce acute retinal ischemia leading to retinal dysfunction. The current method reduces reliance on surgical instruments by only using surgical needles and a clamp, shortens occlusion time to minimize unexpected animal death, which is often seen in mouse models of middle cerebral artery occlusion, and maintains reproducibility of common retinal ischemic findings. The model can be utilized to investigate the pathophysiology of ischemic retinopathies in mice and further can be used for in vivo drug screening.

Here, we describe a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion using simple sutures and a clamp. This model can be useful for understanding the pathological mechanisms of retinal ischemia caused by cardiovascular abnormalities.

Geçici Bilateral Ortak Karotid Arter Tıkanması sonucu İndüklenen İskemik Retina Yaralanmasının Murine Modeli

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Monitoring Dynamic Growth of Retinal Vessels in Oxygen-Induced Retinopathy Mouse Model

Oxygen-induced retinopathy (OIR) is widely used to study abnormal vessel growth in ischemic retinal diseases, including retinopathy of prematurity (ROP), proliferative diabetic retinopathy (PDR), and retinal vein occlusion (RVO). Most OIR studies observe retinal neovascularization at specific time points; however, the dynamic vessel growth in live mice along a time course, which is essential for understanding the OIR-related vessel diseases, has been understudied. Here, we describe a step-by-step protocol for the induction of the OIR mouse model, highlighting the potential pitfalls, and providing an improved method to quickly quantify areas of vaso-obliteration (VO) and neovascularization (NV) using immunofluorescence staining. More importantly, we monitored vessel regrowth in live mice from P15 to P25 by performing fluorescein fundus angiography (FFA) in the OIR mouse model. The application of FFA to the OIR mouse model allows us to observe the remodeling process during vessel regrowth.

This protocol describes a detailed method for the preparation and immunofluorescence staining of mice retinal flat mounts and analysis. The use of fluorescein fundus angiography (FFA) for mice pups and image processing are described in detail as well.

Oksijene Bağlı Retinopati Fare Modelinde Retina Damarlarının Dinamik Büyümesinin İzlenmesi

Oxygen-induced retinopathy (OIR) is widely used to study abnormal vessel growth in ischemic retinal diseases, including retinopathy of prematurity (ROP), ...

<meta charset="utf8"></head><body>Retina Patolojilerini İncelemek için Retinal İskemi-Reperfüzyon Hasarı için Fare Modeli

Induction of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury in a Mouse Eye Model

Ischemia-reperfusion injuries are known to cause a range of retinal pathologies, including diabetic retinopathy, glaucoma, retinal vascular occlusions, and other vaso-occlusive conditions. This manuscript presents a method for inducing ischemia-reperfusion injury in a mouse model. The method utilized anterior chamber cannulation attached to a saline reservoir, generating hydrostatic pressure to raise the intraocular pressure to 90-100 mmHg. This method effectively caused constriction of retinal capillaries to induce retinal ischemia. At the end of the ischemic period (60 min), the intraocular pressure was normalized (&#8804;20 mmHg) before removing the cannula from the anterior chamber to initiate reperfusion. Days after the ischemia/reperfusion procedure, the eyes were collected and sectioned for histological staining. The histopathology of the retinal sections was scored by evaluating eight parameters of retinal injury: folds, hemorrhage, deformation, cell loss in the ganglion cell, inner nuclear, outer nuclear, and photoreceptor layers, and damage to retinal pigment epithelial cells. This method provided a reproducible model to study the mechanisms and pathology of retinal ischemia/reperfusion injury. In addition, this model can facilitate the discovery of potential therapeutic targets to treat retinal ischemia/reperfusion injury, advancing the study of retinal pathologies and improving patient outcomes.

<meta charset="utf8"></head><body>Bir Fare Gözü Modelinde Retinal İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

This protocol models retinal ischemia-reperfusion injury in a mouse eye by inducing retinal ischemia via anterior chamber cannulation and intraocular pressure elevation, followed by intraocular pressure normalization to initiate the reperfusion.

Bir Fare Gözü Modelinde Retinal İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Ischemia-reperfusion injuries are known to cause a range of retinal pathologies, including diabetic retinopathy, glaucoma, retinal vascular occlusions, ...