Biz talepleri için izleme yazılımı özelleştirmek için Electricidade Em po (electricidadeempo.net) teknik yardım için Daniel Veit ve Pedro Gouveia teşekkür ederiz. Biz de filme sürecinde destek için Tom Retzke teşekkür ederiz. Bu çalışma Max Planck Kurumu tarafından desteklenmiştir.

Flywalk inşaat ve teknik detaylar yerde 26 (MK elde edilebilir, bu kurmak daha fazla bilgi kurulması herhangi bir sorun durumunda) tarif edilmiştir. Burada güvenilir sonuçlar elde etmek için yardımcı olacak paradigmanın işleme hakkında ayrıntılı talimatlar odaklanmak. 1. Fly Taşıma <ol><li> 12 saat ışık: 23-25 ​​° C ve% 70 bağıl nemde karanlık rejim Arka 12 saat altında gıda ortamı 27 orta yoğunluklu kültürlerde düşük uçar. Bu amaçla, 20-30 yeni ortaya çıkan yetişkin, daha sonra 1 hafta boyunca büyük bir gıda flakon yeniden yetişkin sinekler atmak ve ortaya yavrular için beklemek uçar izin verir. </li><li> 30-40 yeni ortaya çıkan (yaş &lt;24 saat), yetişkin sinekler toplayın ve 3-5 gün yemek ortamı 27 içeren yeni bir şişede onları yaş. </li><li> Yirmi dört saat davranışsal deney başlamadan önce: Transferi Tüm 30-40 önceden toplanmış 3-5 d eski (2.2 bakınız) yeni bir vi uçarEl nemli kauçuk köpüğü fişi veya bir aspiratör kullanılarak nemli doku kağıt içeren. Not: CO 2 kullanarak sinek uyuşturan etmeyin. </li></ol> Flywalk Kur&#39;un 2. Hazırlık <ol><li> Nemlendiriciler olarak 250 ml&#39;lik şişe kullanın. Damıtılmış su 100 ml nemlendiriciler doldurun. </li><li> Koku şişeleri hazırlayın. <ol><li> Saf kokular, etil asetat, etil bütirat, izopentil asetat ve çözücü, madeni yağ içinde 2,3-bütandion 500 ul 10 -3 dilüsyonları hazırlayın. </li><li> Koku şişe başına iki toplu çek valfleri takın. Vanalar tek yönlü hava akımı sadece izin verdiği çek unutmayın. Bu nedenle, hava, bir tarafta şişeye girmesini ve diğer tarafta bırakın şekilde çek valfleri bağlayın. </li><li> 200 ul PCR reaksiyonu, tüpün kapağını çıkarın. Ayrı bir reaksiyon tüpüne, her koku seyreltme 100 ul pipet ve ayrı bir koku viyaller içinde tüpleri. Ayrıca sadece çözücü mineral OI içeren tek koku şişe hazırlamakl. </li><li> Sıkıca paslanmaz çelik fişleri ve lastik contalar kullanarak onları kapatarak koku şişeleri mühür. </li><li> Koku verme sistemi (madeni yağ ihtiva eden 4 ihtiva eden kokular ve 1) 5 koku şişeleri bağlayın. Doğru akım yönünde onları bağlamak için emin olun. Yanlış bağlantı sadece planlanmış deney taviz vermeyecek, aynı zamanda dağıtım sistemi kirletebilir. </li></ol></li><li> Uyarıcı cihazın karıştırma odasının çıkışını mühürleme suretiyle sızıntı olup olmadığını kontrol edin. Uyarıcı cihazına önce tüm hava akımları artık giderek sıfıra düşmesi ki emin olun. Değilse, şimdi sistemin çıkan havanın tıslama sesi ile tespit edilebilir sızıntı olup olmadığını kontrol edin. </li><li> Dikkatle gelen adaptörleri kullanarak her iki taraftan bir aspiratör ve yakın cam tüpler kullanılarak 15 ayrı cam tüpler 15 ayrı sinekler aktarın. Not: Sistem hermetik başarılı deneyler için mühürlü gerektiğinden, adaptörler sıkıca cam tüpler uygun olmasını sağlamakve cam tüpler bu adımı sırasında kırılabilir unutmayın. Koruyucu eldiven ve gözlük takarak yaralanmaları önlemek için dikkat edin. </li><li> Flywalk kurulum cam tüpler bağlayın ve burada andan itibaren, sinekler yeni ortama alışmakta izin deney başlamadan önce en az 15 dakika bekleyin. </li><li> Cam tüpler taktıktan sonra: cam tüpler sonra 16 hava akımları sistemine girmeden hava akımı kadar eklerseniz bilgisayarda 1 aşağı dijital akış metre okuma kontrol edin. Nem% 60 ile% 80 arasında ise Ayrıca, bilgisayarda 1 kontrol edin. </li><li> Sinekler sunulan koku uyaranlara sırasını ve zamanlamasını kontrol Tasarım uyaran protokolü. 40 kez her anda açıklanan veriler, mevcut 4 koku ve tek başına kontrol (madeni yağ) ve tüm olası üçlü ve dörtlü kokular karışımları gibi edinin. 90 saniyelik bir interstimulus aralıklarla 500 msn darbe süresi ayarlayın ve uyarıcı dizisi rastgele. </li><li> Li açınght kaynağı (LED-küme, λ = 630). Cam tüpler içindeki sıcaklığı artırmadan verimli izleme için yeterli ışık sağlamak için emin olun. </li><li> 15 cam tüpler dahil bir şekilde izlenecek ve tüplerin kenarlarından yaklaşık 5 mm dışlanan alan boyunca bir çerçeve sürükleyerek izleme sisteminin ilgi bir bölge ayarlayın. </li><li> Bireyi korumak için gelen komut kendi Y-pozisyonlarını değiştirerek izleme sistemi bireysel tüpler arasındaki 14 paralel ayırma çizgileri kurmak deney boyunca tanımlanabilir uçar. Sadece bir sinek iki satır herhangi bir set arasında takip edilecektir, çünkü böyle iki ayırıcı hatları arasında tek cam tüp orada her zaman böyle bir şekilde onları konumlandırmak için emin olun. </li><li> Güvenilir cam tüpler boyunca izlenir sinekler şekilde kamera parametrelerini ayarlamak için emin olun. Sinekler ilgi bölgenin kenarlarında kayıp ise, izleme s parlaklığını veya kazancı artırmakoftware. Takip sistemi mekanik titreşimleri kaçının. Üreticinin protokolüne göre, ticari bir yazılım kullanılarak takip edin. </li><li> Uyarıcı protokolü başlayarak deney başlayın. Tutanak 20 fps (saniyede kare) de XY koordinatları flies&#39; ve metin dosyaları koku valf durumu ile birlikte oturum açın. </li></ol> 3. Veri Analizi NOT: Bu adımlar analizi yine de bir adım-adım bir şekilde sunulacaktır anlamlı sonuçlar elde etmek için çok önemli olduğu için veri analizi aşağıdaki adımlar R. programlanmış özel olarak yazılmış rutinleri kullanılarak otomatize edilir. Analiz için ham veriler, bir koku stimülasyon döngüsü için ortak bir zaman ekseni üzerinde cm koku vana durumu, nabız sayısında deneyde 15 sinek x pozisyonları senkronize bilgileri içeren .csv-dosyalarıdır. Veri analizi için özel kod istek üzerine temin edilebilir. <ol><li> Açık .csv dosyası, bir cha tarafından anlamına valf açılma zamanı noktasını bulmakValf durumunu temsil eden sütun nge. </li><li> Formun koku pozisyonunun doğrusal fonksiyonunu hesaplayın f (t) s * t = i + t stimülasyon döngüsü zaman olduğu, s rüzgar hızı (burada 20 cm / sn) ve ben koku pozisyonu 0 (vana açma artı gecikme) tüpler girdiği zaman noktası kullanılarak hesaplanabilir kesmek olduğunu. </li><li> Bu koku da zaman noktasını bulun ve her sinek ve 0 Not bu zaman noktası ayarlayın x-pozisyon kesiştiği noktaları: sinek pozisyonları her individual&#39;s hizalanmış Bu şekilde koku ile karşılaşıyoruz. </li><li> Ilgi bölgenin çok kenarlarında oturan sinekler hariç. </li><li> Her stimülasyon çevrimi için bir zaman aralığı (100 milisaniye) ve yineleme prosedürü ile X ekseni boyunca yer değiştirme bölünmesiyle X-pozisyonlarından hız hesaplayın. </li><li> Şekil 2E&#39;de gösterildiği gibi her sinek ve koku için ve belirli bir koku için bu süre ortalama ders itibaren ortalama hızı zaman kurs hesaplamak hız zaman kurslar elde etmek. </li><li> Şekil 3C gösterildiği gibi net deplasman elde etmek için her izleme olay için koku darbe ve sonrasında sinek ve koku başına ortalama net deplasman sonra 4 saniye içinde net deplasman hesaplamak. </li></ol> 4. Temizleme Prosedürü <ol><li> Temiz Cam Tüpler <ol><li> Cam tüpler gelen sinek ve adaptörleri çıkarın ve deterjan, cam tüpler ıslatın. </li><li> Çalışan damıtılmış su altında cam tüpler durulayın ve basınçlı hava ile kurutun. </li><li> 8 saat boyunca 200 ° C&#39;de ısı cam borular. </li></ol></li><li> Temiz Koku Dağıtım Sistemi <ol><li> Merkezi karıştırma odasından tüm koku şişeleri ve tüpünü çıkarın. </li><li> Karıştırma odasından boru bağdaştırıcıları çıkarın. </li><li> Laboratuar temizleme solüsyonu ve çözücüler (örneğin, etanol, aseton) ile durulayarak temizleyin karıştırma odası. Laboratuar kaputun altında bu adımları uygulayın. </li><li> Kuru karıştırma odası 8 saat 200 ° C &#39;de bu basınçlı hava ile ve ısıtın. </li></ol></li><li> Temiz Koku Şişeler ve Çek Vanalar <ol><li> Çelik fişini (ıskarta kauçuk conta) çıkartın ve koku şişeleri gelen çek valfler ve laboratuvar temizleme solüsyonu tüm bileşenleri ıslatın. </li><li> Bir ultrason banyosunda sonikasyon bileşenler ve damıtılmış su ile yıkayın. </li><li> Etanol ve aseton ile kontrol valfleri dışındaki tüm bileşenleri temizleyin. Laboratuar kaputun altında bu adımları uygulayın. </li><li> Ve basınçlı hava ile kuru bileşenler 8 saat süreyle 200 ° C sıcaklıkta tekrar ısıtın. </li><li> Etanol ve bir şırınga kullanarak aseton ile yıkanarak iç temizliğini valfler (akış yönünü düşünün). Laboratuvar gözlüğü takan laboratuar başlık altında şu adımları uygulayın. Aseton basınçlı hava ile yıkama hemen lastik parçaları, kuru çek valfleri saldırır çünkü. </li><li> Birkaç gün onay valfler havayı darbe ile kalıntı kokuları çıkarın. Bu temizleme adım için rejim kapalı / 1 sn hava 60 ° C&#39;de bir inkübatör ve 1 sn hava kullanın. </li></ol&gt; </li></ol>

<ol>
	<li>Murlis, J., Elkinton, J. S., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+plumes+and+how+insects+use+them.">Odor plumes and how insects use them.</a> Annu. Rev. Entomol. 37, 505-532 (1992).</li><li>Kennedy, J. S., Marsh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pheromone-regulated+anemotaxis+in+flying+moths.">Pheromone-regulated anemotaxis in flying moths.</a> Science. 184 (4140), 999-1001 (1974).</li><li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors.">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Exp. Biol. 209 (15), 3001-3017 (2006).</li><li>Buehlmann, C., Graham, P., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desert+ants+locate+food+by+combining+high+sensitivity+to+food+odors+with+extensive+crosswind+runs.">Desert ants locate food by combining high sensitivity to food odors with extensive crosswind runs.</a> Curr. Biol. 24 (9), 960-964 (2014).</li><li>Van Breugel, F., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plume-tracking+behavior+of+flying+Drosophila+emerges+from+a+set+of+distinct+sensory-motor+reflexes.">Plume-tracking behavior of flying Drosophila emerges from a set of distinct sensory-motor reflexes.</a> Curr. Biol. 24 (3), 274-286 (2014).</li><li>Schuckel, J., Meisner, S., Torkkeli, P. H., French, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+properties+of+Drosophila+olfactory+electroantennograms.">Dynamic properties of Drosophila olfactory electroantennograms.</a> J. Comp. Physiol. A. 194 (5), 483-489 (2008).</li><li>Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+encoding+of+rapidly+fluctuating+odors.">Neural encoding of rapidly fluctuating odors.</a> Neuron. 61 (4), 570-586 (2009).</li><li>Nagel, K. I., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+mechanisms+underlying+olfactory+receptor+neuron+dynamics.">Biophysical mechanisms underlying olfactory receptor neuron dynamics.</a> Nat. Neurosci. 14 (2), 208-216 (2011).</li><li>Martelli, C., Carlson, J. R., Emonet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensity+invariant+dynamics+and+odor-specific+latencies+in+olfactory+receptor+neuron+response.">Intensity invariant dynamics and odor-specific latencies in olfactory receptor neuron response.</a> J. Neurosci. 33 (15), 6285-6297 (2013).</li><li>Szyszka, P., Gerkin, R. C., Galizia, C. G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+odor+transduction+and+pulse+tracking+by+insect+olfactory+receptor+neurons.">High-speed odor transduction and pulse tracking by insect olfactory receptor neurons.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 111 (47), 16925-16930 (2014).</li><li>Nagel, K. I., Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+and+circuit+mechanisms+promoting+broadband+transmission+of+olfactory+stimulus+dynamics.">Synaptic and circuit mechanisms promoting broadband transmission of olfactory stimulus dynamics.</a> Nat. Neurosci. 18 (1), 56-65 (2014).</li><li>Larsson, M. C., Domingos, A. I., Jones, W. D., Chiappe, M. E., Amrein, H., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Or83b+encodes+a+broadly+expressed+odorant+receptor+essential+for+Drosophila+olfaction.">Or83b encodes a broadly expressed odorant receptor essential for Drosophila olfaction.</a> Neuron. 43 (5), 703-714 (2004).</li><li>Knaden, M., Strutz, A., Ahsan, J., Sachse, S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+representation+of+odorant+valence+in+an+insect+brain.">Spatial representation of odorant valence in an insect brain.</a> Cell Rep. 1 (4), 392-399 (2012).</li><li>Zaninovich, O. A., Kim, S. M., Root, C. R., Green, D. S., Ko, K. I., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single-fly+assay+for+foraging+behavior+in+Drosophila.">A single-fly assay for foraging behavior in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (81), e50801 (2013).</li><li>Farhan, A., Gulati, J., Gro&#946;e-Wilde, E., Vogel, H., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CCHamide+1+receptor+modulates+sensory+perception+and+olfactory+behavior+in+starved+Drosophila.">The CCHamide 1 receptor modulates sensory perception and olfactory behavior in starved Drosophila.</a> Sci. Rep. 3 (2765), 1-6 (2013).</li><li>Fl&#252;gge, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geruchliche+Raumorientierung+von+Drosophila+melanogaster.">Geruchliche Raumorientierung von Drosophila melanogaster.</a> Z. Vgl. Physiol. 20 (4), 462-500 (1934).</li><li>Borst, A., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotropotaxis+in+Drosophila+melanogaster.">Osmotropotaxis in Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Physiol. A. 147 (4), 479-484 (1982).</li><li>Louis, M., Huber, T., Benton, R., Sakmar, T. P., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+olfactory+sensory+input+enhances+chemotaxis+behavior.">Bilateral olfactory sensory input enhances chemotaxis behavior.</a> Nat. Neurosci. 11 (2), 187-199 (2008).</li><li>Gomez-Marin, A., Stephens, G. J., Louis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+sampling+and+decision+making+in+Drosophila+chemotaxis.">Active sampling and decision making in Drosophila chemotaxis.</a> Nat. Commun. 2 (441), 1-10 (2011).</li><li>Gaudry, Q., Hong, E. J., Kain, J., de Bivort, B. L., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+neurotransmitter+release+enables+rapid+odour+lateralization+in+Drosophila.">Asymmetric neurotransmitter release enables rapid odour lateralization in Drosophila.</a> Nature. 493 (7432), 42442-42448 (2013).</li><li>Quinn, W. G., Harris, W. A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Conditioned behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 71 (3), 708-712 (1974).</li><li>Ramdya, P., Lichocki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensory+interactions+drive+collective+behaviour+in+Drosophila.">Mechanosensory interactions drive collective behaviour in Drosophila.</a> Nature. 519 (7542), 233-236 (2014).</li><li>Bhandawat, V., Maimon, G., Dickinson, M. H., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+modulation+of+flight+in+Drosophila+is+sensitive,+selective+and+rapid.">Olfactory modulation of flight in Drosophila is sensitive, selective and rapid.</a> J. Exp. Biol. 213 (21), 3625-3635 (2010).</li><li>Duistermars, B. J., Chow, D. M., Frye, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flies+require+bilateral+sensory+input+to+track+odor+gradients+in+flight.">Flies require bilateral sensory input to track odor gradients in flight.</a> Curr. Biol. 19 (15), 1301-1307 (2009).</li><li>Claridge-Chang, A., Roorda, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry.">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139 (2), 405-415 (2009).</li><li>Steck, K., Veit, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+behavioral+paradigm+for+Drosophila+olfaction+-+The+Flywalk.">A high-throughput behavioral paradigm for Drosophila olfaction - The Flywalk.</a> Sci. Rep. 2 (361), 1-9 (2012).</li><li>Lewis, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Drosoph. Inf. Serv. 34, 117-118 (1960).</li><li>Lebestky, T., Chang, J. S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+different+forms+of+arousal+in+Drosophila+are+oppositely+regulated+by+the+dopamine+D1+receptor+ortholog+DopR+via+distinct+neural+circuits.">Two different forms of arousal in Drosophila are oppositely regulated by the dopamine D1 receptor ortholog DopR via distinct neural circuits.</a> Neuron. 64, 522-536 (2009).</li><li>Thoma, M., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compound+valence+is+conserved+in+binary+odor+mixtures+in+Drosophila+melanogaster.">Compound valence is conserved in binary odor mixtures in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 217 (20), 3645-3655 (2014).</li><li>Olsson, S. B., Kuebler, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+multicomponent+stimulus+device+for+use+in+olfactory+experiments.">A novel multicomponent stimulus device for use in olfactory experiments.</a> J. Neurosci. Meth. 195 (1), 1-9 (2011).</li></ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını var olduğunu beyan ederiz.

Flywalk sistemi ilk bakışta oldukça sofistike görünse de, bir kez kurmak ve onu çalıştıran kullanımı kolay ve çok sağlam sonuçlar üretir. Biyo-deney ile üretilen sonuçların tutarlılığını stres için burada gösterilen temsili sonuçlar neredeyse 2 yıl, yeni bir takip yazılımı ve ışık kaynağı kullanılarak modifiye kurulum ile bir önceki çalışmada 29 de gösterilen bazı sonuçları sonra elde edildi söylenebilir. Bununla birlikte, çekici cevaplardır - Daha önce kendi di...

Herhangi neuroethological araştırmanın herkesin ortak hedefi tek nöronlar veya nöronal devrelerin faaliyet devletler ve bir organizmanın davranışı arasında nedensel bir ilişki kurmaktır. Bu amaç nöronal aktivitenin elde etmek ve davranışları aynı uyarıcı koşullarında izlenmeli ve bu uyarıcı koşulları ideal olanların mantıklı gelişti inceleme altına sinir sistemi benzer olmalıdır. Davranışsal biyoanalizlere gelince, özellikle bu gereklilikler tarihsel Drosophila oldukça zorlu kanıtlanmıştır koku neuroethology melanogaster. Kaynağından çıkan kez koku tüyleri hızla hava hareketi koku dağılımı 1 temel belirleyicisi olmaktan kaynaklanan çalkantılı difüzyon ince filamentler içine break up. Bunun bir sonucu olarak, bir koku kaynağına doğru seyreden bir böcek temiz hava değişken aralıklarla serpiştirilmiş koku paketleri ile kesikli uyarımı karşılaşır. Her ikisiyürüyüş ve böcekler uçan - Drosophila dahil - 5 - kokuların 2 yokluğunda çapraz rüzgar hareketli ağırlıklı tüy karşılaşma üzerine rüzgâra karşı kabaran tarafından navigasyon için bu aralıklı stimülasyon rejimi yararlanmaya gösterilmiştir. Bu tuzak analizi olarak Drosophila neuroethology kullanılan 11, birçok davranış biyoanalizlerin - ve fizyolojik deneyler için stimülasyon prosedürleri ise, büyük ölçüde, bir böcek, temiz hava veya dinamik stimülasyon dizilerinin 6 uzun süre serpiştirilmiş kokuların da sağlayarak, tek nefes çekme tarafından doğal ortamda yaşayabilir taklit 15 - açık alan arenalar veya T-labirent koku geçişlerini 12 güveniyor. Tanımı gereği koku geçişlerini koku kaynağından mesafeye bağlı konsantrasyonda değişken olduğundan, ancak belli bir davranış, bu paradigmalar kullanarak kesin bir koku konsantrasyonu isnat edilemez. Buna ek olarak, eğimiBir koku degrade eleştirel odorant fizikokimyasal özelliklerine bağlıdır. Bir zorluğa yol açabilir 20 - Bir çok uçucu bileşiğin bir degrade daha az uçucu bileşiğin tarafından oluşturulan ve bu nedenle de zor navigasyon 16 tek yolu olarak uzayda konsantrasyon farklılıkları ölçmek güvenerek bir organizma için izlemek için daha sığ olacaktır Özellikle seçim analizlerde koku tercihler. Uzayda her noktada farklı karışım bileşeni oranlarına yol açar ve bu nedenle tekrar fizyoloji ve davranış arasında açık bir ilişki engellemektedir, çünkü koku karışımları yönelik davranışlarını araştıran Bu etki aynı zamanda son derece zararlıdır. Sirke sinekleri meyve fermente üzerine agrega eğiliminde olsa da, gıda kaynakları ve ovipozisyon siteleri karşı navigasyon yalnız vardır. Bununla birlikte, bireysel hayvanları test ziyade birçok davranışsal paradigmalar Drosophila neuroetholo kullanılangy sineklerin kohortlarda kokusu eşliğinde davranışları incelemek ve cazibe bir kontrol uyaran üzerinde koku seçiminde sinekler kesir olarak puanlanır. Bu kohort deneyleri sinek neuroethology anlaşılmasına büyük katkıları olmuştur ve bunları kullanarak yapılan gözlemlerin birçoğu tek sinek deneylerinde teyit edilebilir. Ancak, her other&#39;s kararını 21 etkileyebilir ve aşırı durumlarda bir koku değerlendirilmesi nüfus yoğunluğuna bağlı olarak 22 kaçınmaya ilgisizlik geçebilirsiniz uçar olduğu gözlenmiştir. Ayrıca, deney bu türlü sonuçlar genellikle nöronal aktivite ile davranış arasında ilişki çalışırken arzu olurdu doğrusu bunu yapıyor iken sinek ne yaptığını gözlemleyerek daha davranışsal kararlar, bir dizinin sadece son nokta sağlamaktadır. Bunlar oldukça düşük çözünürlüklü kohort deneyleri gibi izin gergin uçuş arenalar ve koşu bandı gibi yüksek çözünürlüklü tek sinek yöntemleri ile tezatzaman davranışsal tepkilerin doğrudan gözlem için uyaran 20,23,24 sunulmuştur. Onlar çok verimli ve-arası bireysel ve inter-deneme değişkenlik kısmen uzun süre boyunca nüfusun gözlem ortalaması alınır çünkü sağlam hatta nispeten sonuçları düşük örnek boyutları sağlar, çünkü Ancak, kohort deneyleri, hala popüler. Gergin uçuş ve koşu bandı muhtemelen uyaran sunum ve temporal çözünürlük konusunda altın standart sağlarken, kullanılan arenalar tek hayvanlar için tasarlanmış ve bu nedenle zaman alıcı örnek bir istatistiksel analiz için gerekli boyutları elde etmektir edilir. Çeşitli diğer yaklaşımlar son iyi tanımlanmış bir teşvik rejimi ile kombinasyon halinde, yüksek çözünürlüklü davranış verilerinin etkin bir şekilde alınmasını sağlayacak geliştirilmiştir. Bu koku tüy 5 doğru bir 3D-model ile kombinasyon halinde bir Projede, rüzgar tünelinde birden sirke sineklerinin denetimsiz 3D-izleme dahil </sup&gt;, her iki tarafta 25 ve Flywalk paradigma 26&#39;dan airstreams ile birlikte seçim odalarında çoklu bireysel sineklerin izleme. Flywalk olarak, 15 ayrı sinekler, küçük cam tüplerde bulunmaktadır ve sürekli kırmızı ışık koşulları altında bir havai kamera tarafından izlenen. Kokular 20 cm / sn arasında sürekli bir hava akımı, bir ilave edildi ve sabit bir hızda cam tüpler boyunca yol. Hava akımı koku teslim sistemine girmeden önce distile su (nemlendiriciler) ihtiva eden 250 ml&#39;lik şişeler içinden geçirilerek nemlendirilir. Flies&#39; pozisyonları sinekler daha yukarı taşımak veya edemez ilgi (ROI) bir kare bölge koku tüplerin uzunluğu en kapsayan (ancak tüpleri (her tarafı yaklaşık 5 mm dış kenarlarını hariç) içinde kaydedilir downwind) koku sunumu (Şekil 1A, B) sefer. Fly kimlikleri izleme sistemi t sabit tutulmasıonların Y-pozisyonlarına (yani kendi cam tüp limitleri) bazında deney hroughout. Koku uyarılması kadar 8 tek koku ve 26,29 (Şekil 1B), bunun bütün olası karışımları sunum sağlar çok bileşenli bir uyarıcı cihaz kullanılarak elde edilir. Bir deney ders bilgisayar koku verme sistemini düzenleyen ve sıcaklık ve nem bilgi toplama (bilgisayar 1, Şekil 1C) tarafından kontrol edilir. Bu bilgisayar, aynı zamanda sürekli olarak saniyede 20 kare (bilgisayar 2) sinek pozisyonlarını izler ikinci bir bilgisayara bir datalogger (kayıt başlat / durdur) kontrol eder. Koku stimülasyon döngüleri etrafında, koku vana durumunu (vana açıklığının yani zaman-noktası), koku kimliğini, sıcaklık ve nem pozisyonları Fly koku bilgisayara 2. Bu şekilde bilgileri kaydedilir ve pozisyonları .csv dosyaları olarak eşitlenir ve ihraç uçmak hangi daha da işlenir ve özel olarak yazılmış analiz rutinleri kullanarak analiz edilebilir. ÇünküTüm sistem bilgisayar kontrollü, hiçbir insan müdahalesi deneysel oturumu sırasında gereklidir.

<table><tbody><tr><td>Flywalk setup</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>stimulus device</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>LED cluster</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>HD Pro Webcam C920</td><td>Logitech, Lausanne, Switzerland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 Computers</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flywalk Reloaded v1.0 software</td><td>Electricidade Em P&amp;oacute; (electricidadeempo.net)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Labview 11.0 software</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly food</td><td>Custom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly vials</td><td>Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly vials</td><td>Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>aspirator</td><td>Custom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>mineral oil</td><td>Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>odors</td><td>Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>200 &amp;micro;l PCR reaction tubes</td><td>Biozym Scientific GmbH, Oldendorf, Germany</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

high-resolution quantification of odor-guided behavior in drosophila melanogaster using the flywalk paradigm

Kendi doğal ortamında, sirke gibi böcekler kimyasal olarak farklı koku büyük miktarda ile bombardıman edilir Drosophila melanogaster uçmak. Hatta daha da karmaşıklaştıran, böcek sinir sistemi tarafından tespit edilen kokular genellikle kimin kompozisyon ve konsantrasyon oranları değişebilir tek bileşikler ancak bunların karışımları değildir. Bu sinir sistemi tarafından değerlendirilmesi gerekir farklı koku uyaranlara neredeyse sonsuz miktarda yol açar. Bir koku uyarıcı yönleri sinek tarafından değerlendirmesini belirleyen anlamak için, verimli birçok koku ve koku karışımları doğru koku güdümlü davranışlarını incelemek için arzu edilen bir durumdur. Doğrudan nöronal aktivitenin davranışı ilişkilendirmek için, davranış karşılaştırılabilir bir zaman dilimi içinde ve nörofizyolojik deneylerde olduğu gibi aynı uyarıcı koşullarında sayısal olmalıdır. Bununla birlikte, Drosophila neuroethology çok anda kullanılan koku biyo-specia yerine vardırverimlilik doğru veya çözünürlük doğru ya lized. Flywalk, otomatik koku teslimat ve izleme sistemi, verimlilik ve çözünürlük arasında köprüdür. Bu koku, paket serbest yürüme sinek uyarılmış ve Hayvanların dinamik davranış etkilerini belirlemek için tam olarak ne zaman belirlenmesini sağlar.

Sinekler sabit bir hızda cam tüpler yoluyla koku bakliyat ve koku darbe seyahatleri arasında kendi cam tüpler içinde serbestçe dağıtmak için izin Çünkü sinekler stimülasyon sırasında x-pozisyonuna bağlı farklı zamanlarda koku karşılaşıyoruz. Bunun bir sonucu olarak, etil asetat çekici 10 -3 seyreltme 500 milisaniye darbe uyandırdığı rüzgara karşı yörüngelerin başlangıç ​​ve bitiş noktalarının yakın oturmuş sinekler kişilerce kıyasla cam tüpler rüzgaraltı ucunda...

Watch this Scientific Journal Video about High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm at JoVE.com

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Otomatik izleme sistemi Flywalk Drosophila melanogaster koku güdümlü davranış yüksek çözünürlüklü ölçümü için kullanılır.

Koku kılavuzluğunda Davranış Yüksek çözünürlüklü Niceleme<em&gt; Drosophila melanogaster</emKullanma&gt;<em&gt; Flywalk</em&gt; Paradigma

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

high-resolution-quantification-odor-guided-behavior-drosophila

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

9.2K Görüntüleme.  Max Planck Institute for Chemical Ecology.  Otomatik izleme sistemi Flywalk Drosophila melanogaster koku güdümlü davranış yüksek çözünürlüklü ölçümü için kullanılır. 

Video: High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

High-resolution Measurement of Odor-Driven Behavior in Drosophila Larvae

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral paradigm, the experimenter usually assumes that the rapid diffusion of odorant molecules from the source leads to the creation of a stable gradient in the dish. To establish a quantitative correlation between sensory inputs and behavioral responses, it is necessary to achieve a more thorough characterization of the odorant stimulus conditions. In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

Yüksek çözünürlüklü Ölçüm Drosophila Larva Koku-Driven Davranış

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral ...

Biyoloji

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory bulb1-5. Olfactory information in the external world is transmitted to the antennal lobe by olfactory sensory neurons (OSNs), which segregate to distinct regions of neuropil called glomeruli according to the specific olfactory receptor they express. Here, OSN axons synapse with both local interneurons (LNs), whose processes can innervate many different glomeruli, and projection neurons (PNs), which convey olfactory information to higher olfactory brain regions.
Optical imaging of the activity of OSNs, LNs and PNs in the antennal lobe - traditionally using synthetic calcium indicators (e.g. calcium green, FURA-2) or voltage-sensitive dyes (e.g. RH414) - has long been an important technique to understand how olfactory stimuli are represented as spatial and temporal patterns of glomerular activity in many species of insects6-10. Development of genetically-encoded neural activity reporters, such as the fluorescent calcium indicators G-CaMP11,12 and Cameleon13, the bioluminescent calcium indicator GFP-aequorin14,15, or a reporter of synaptic transmission, synapto-pHluorin16 has made the olfactory system of the fruitfly, Drosophila melanogaster, particularly accessible to neurophysiological imaging, complementing its comprehensively-described molecular, electrophysiological and neuroanatomical properties2,4,17. These reporters can be selectively expressed via binary transcriptional control systems (e.g. GAL4/UAS18, LexA/LexAop19,20, Q system21) in defined populations of neurons within the olfactory circuitry to dissect with high spatial and temporal resolution how odor-evoked neural activity is represented, modulated and transformed22-24.
Here we describe the preparation and analysis methods to measure odor-evoked responses in the Drosophila antennal lobe using G-CaMP25-27. The animal preparation is minimally invasive and can be adapted to imaging using wide-field fluorescence, confocal and two-photon microscopes.

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

We describe an established technique to measure and analyze odor-evoked calcium responses in the antennal lobe of living Drosophila melanogaster.

Koku-uyarılmış Cevaplarının Kalsiyum Görüntüleme Drosophila Antennal Lob

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory ...

Nörobilim

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field. Studying locomotor behavior in Drosophila melanogaster relies on the ability to be able to quantify changes in motion during or in response to a given task. For this reason, a high-resolution video tracking system, such as the one we describe in this paper, is a valuable tool for measuring locomotion in real-time. Our protocol involves the use of an initial air pulse to break the flies momentum, followed by a thirty second filming period in a square chamber. A tracking program is then used to calculate the instantaneous speed of each fly within the chamber in 10 msec increments. Analysis software then compiles this data, and outputs a variety of parameters such as average speed, max speed, time spent in motion, acceleration, etc. This protocol will discuss proper feeding and management of flies for behavioral tasks, handling flies without anesthetization or immobilization, setting up a controlled environment, and running the assay from start to finish.

The study of complex locomotor behavior in Drosophila melanogaster is dependent upon the ability to quantify changes in a given fly's movement. This article demonstrates how to do this using a high-resolution tracking system.

Yetişkin Drosophila melanogaster Locomotion Yüksek Çözünürlüklü Video Takip

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual stabilization of upwind tracking directly aids in odor tracking. But do olfactory signals directly influence visual tracking behavior independently from wind cues? Additionally, recent advances in olfactory molecular genetics and neurophysiology have motivated novel quantitative behavioral analyses to assess the behavioral influence of (e.g.) genetically inactivating specific olfactory activation circuits. We modified a magnetic tether system originally devised for vision experiments by equipping the arena with narrow laminar flow odor plumes. Here we focus on experiments that can be performed after a fly is tethered and is able to navigate in the magnetic arena. We show how to acquire video images optimized for measuring body angle, how to judge stable odor tracking, and we illustrate two experiments to examine the influence of visual cues on odor tracking.

Here we describe how to optimize the acquired video image for an olfactory magnetic-tether (OMT) apparatus. We also describe two sample experimental protocols for studying visuo-olfactory fusion.

Drosophila Uçuş sırasında Görme aracılığı Koku Takibi

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

Toplayıcılık Davranış için Tek-sinek Deneyi<em&gt; Drosophila</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

Test<em&gt; Drosophila</emBir Y-labirenti testi ile&gt; koku alma

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an excellent model system for such investigations due to its complex behaviors, powerful genetic techniques, and compact nervous system. Laboratory behavioral assays have long been used with Drosophila to simulate properties of the natural environment and study the neural mechanisms underlying the corresponding behaviors (e.g. phototaxis, chemotaxis, sensory learning and memory)1-3. With the recent availability of large collections of transgenic Drosophila lines that label specific neural subsets, behavioral assays have taken on a prominent role to link neurons with behaviors4-11. Versatile and reproducible paradigms, together with the underlying computational routines for data analysis, are indispensable for rapid tests of candidate fly lines with various genotypes. Particularly useful are setups that are flexible in the number of animals tested, duration of experiments and nature of presented stimuli. The assay of choice should also generate reproducible data that is easy to acquire and analyze. Here, we present a detailed description of a system and protocol for assaying behavioral responses of Drosophila flies in a large four-field arena. The setup is used here to assay responses of flies to a single olfactory stimulus; however, the same setup may be modified to test multiple olfactory, visual or optogenetic stimuli, or a combination of these. The olfactometer setup records the activity of fly populations responding to odors, and computational analytical methods are applied to quantify fly behaviors. The collected data are analyzed to get a quick read-out of an experimental run, which is essential for efficient data collection and the optimization of experimental conditions.

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

Of Bilgisayar İzleme tarafından Analiz Edilmiş Olfaktor Davranışlar<em&gt; Drosophila</em&gt; Dört kadranda olfactometer içinde

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a considerable amount of information has been generated regarding ORN responses to odorants, the role of specific ORNs in driving behavioral responses remains poorly understood. Complications in behavior analyses arise due to different volatilities of odorants that activate individual ORNs, multiple ORNs activated by single odorants, and the difficulty in replicating naturally observed temporal variations in olfactory stimuli using conventional odor-delivery methods in the laboratory. Here, we describe a protocol that analyzes Drosophila larval behavior in response to simultaneous optogenetic stimulation of its ORNs. The optogenetic technology used here allows for specificity of ORN activation and precise control of temporal patterns of ORN activation. Corresponding larval movement is tracked, digitally recorded, and analyzed using custom written software. By replacing odor stimuli with light stimuli, this method allows for a more precise control of individual ORN activation in order to study its impact on larval behavior. Our method could be further extended to study the impact of second-order projection neurons (PNs) as well as local neurons (LNs) on larval behavior. This method will thus enable a comprehensive dissection of olfactory circuit function and complement studies on how olfactory neuron activities translate in to behavior responses.

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

This protocol analyzes navigational behavior of Drosophila larva in response to simultaneous optogenetic stimulation of its olfactory neurons. Light of 630 nm wavelength is used to activate individual olfactory neurons expressing a red-shifted channel rhodopsin. Larval movement is simultaneously tracked, digitally recorded, and analyzed using custom-written software.

Yanıt koku nöronlar Optogenetic uyarılması olarak Drosophila larva davranışını izlemek

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...

Tracking Freely Walking Flies: A Method to Assess Locomotion in Drosophila

Source: Sun, M. and Chen, L. L. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/video/55602/" target="_blank">A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2017).
This video describes how to track freely walking flies to assess their general locomotion ability. The featured protocol demonstrates the assay&#39;s setup and data analysis using video tracking software.

Serbestçe Yürüyen Sineklerin İzini Sürmek: Drosophila'da Hareketi Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Source: Sun, M. and Chen, L. L. A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).
This video describes how to ...

Koku kılavuzluğunda Davranış Yüksek çözünürlüklü Niceleme

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Yüksek çözünürlüklü Ölçüm Drosophila Larva Koku-Driven Davranış

Koku-uyarılmış Cevaplarının Kalsiyum Görüntüleme Drosophila Antennal Lob

Yetişkin Drosophila melanogaster Locomotion Yüksek Çözünürlüklü Video Takip

Drosophila Uçuş sırasında Görme aracılığı Koku Takibi

Toplayıcılık Davranış için Tek-sinek Deneyi

Test

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi

Of Bilgisayar İzleme tarafından Analiz Edilmiş Olfaktor Davranışlar

Yanıt koku nöronlar Optogenetic uyarılması olarak Drosophila larva davranışını izlemek

Serbestçe Yürüyen Sineklerin İzini Sürmek: Drosophila'da Hareketi Değerlendirmek İçin Bir Yöntem