Refinamento Técnico de um Modelo Bilateral de Isquemia-Reperfusão Renal em Camundongos para Pesquisa de Lesão Renal Aguda

A lesão renal aguda é um importante fator de risco associado à alta mortalidade em pacientes com parada cardíaca após retorno da circulação. Esse procedimento pode ser realizado para induzir lesão renal aguda. Esse protocolo consiste em induzir a reperfusão da isquemia renal de forma precisa, segura e consistente.

Quem demonstrará o procedimento será Huang Cheng-Wei, um assistente do meu laboratório. Para começar, coloque um camundongo macho C57BL/6 anestesiado de oito semanas de idade na posição prona em uma plataforma de cirurgia com uma manta elétrica para manter a temperatura corporal. Em seguida, toque as costas, encontre a coluna lombar e procure ângulos costovertebrais abaixo de ambos os lados da última costela.

Aplique loção depilatória para raspar e esfregar os pelos perto de ambos os lados da região do ângulo costovertebral. Desinfetar a área cirúrgica com solução de Betadine e álcool a 75% com algodão. Use pinças de ponta fina para levantar suavemente a pele abaixo do ângulo costovertebral esquerdo.

Em seguida, com tesoura, criar uma incisão dorsolateral oblíqua de um centímetro ao longo das linhas de tensão da pele a partir da linha média lombar no flanco esquerdo. Em seguida, transeccionar a parede muscular do flanco esquerdo para visualizar o rim esquerdo. Empurre e separe o rim esquerdo cuidadosamente do tecido circundante com pinças.

Em seguida, identifique o pedículo renal. Apertar o pedículo renal esquerdo com um clipe microvascular. Confirme a isquemia por uma mudança visível na cor do rim de rosa para vermelho escuro.

Para evitar a dessecação durante o clampeamento, cubra o rim com bolas de algodão estéreis e úmidas com soro fisiológico. Após 25 minutos, abrir o clipe microvascular esquerdo para iniciar a reperfusão do rim esquerdo. Retorne o rim para a cavidade abdominal.

Fechar a cavidade abdominal com sutura absorvível 6/0. Observe o mouse até que ele comece a se mover livremente e se alimentar. A isquemia renal após o clampeamento do pedículo renal é mostrada aqui.

Uma mudança de cor do rim de rosa para vermelho escuro revela que a perfusão renal tornou-se inadequada. Em comparação com os controles, os níveis séricos de nitrogênio ureico e creatinina no sangue aumentaram dois dias após a reperfusão renal. Essa técnica abre caminho para que os pesquisadores explorem novas abordagens terapêuticas contra a lesão renal aguda.