형광 이미징을 사용한 Jurkat 발현 키메라 항원 수용체의 신속한 체외 세포 독성 평가

CAR T세포는 인체 임상시험에서 더 나은 반응을 얻기 위해 지속적으로 개선되고 있습니다. 우리는 형광 이미징을 사용하여 가장 잘 작동하는 조합을 스크리닝하는 것과 같은 편향되지 않은 고처리량 방법을 사용하여 실험실에서 이를 평가하는 방법을 찾고 있습니다. 세포외 및 힌지 도메인의 기하학적 구조를 수정하여 임의의 단일 사슬 가변 단편에 대해 설계할 수 있는 구성물의 여러 조합이 있습니다.

이 프로토콜은 Jurkat 세포를 사용하여 표적 세포를 제거하는 데 가장 효과적인 조합을 식별하기 위해 설계되었습니다. 이는 Jurkat 세포를 사용하여 표적 세포 독성을 기반으로 CAR 구조를 스크리닝하기 위한 빠르고 처리량이 높은 프로토콜로, 기존 T 세포로 검증됩니다. 이 기술을 사용하여 12개의 서로 다른 CAR 구조를 96웰 플레이트에서 동시에 테스트할 수 있습니다.

Akhavan Lab에서는 여러 CAR 구조를 스크리닝하기 위해 높은 처리량 방식으로 Jurkat 세포를 발현하는 CAR에 의한 표적 세포의 직접 순환을 절대적인 수로 정량화합니다. 우리 실험실의 주요 목표는 고급 뇌종양에 대한 CAR T 세포 요법의 임상 번역을 개선하는 것입니다. 당사는 CAR T 세포 세포 독성을 개선하고 종양 미세환경을 표적으로 삼기 위한 하나의 양식으로 고처리량 약물 스크리닝을 활용합니다.