蛍光イメージングを用いたキメラ抗原受容体を発現するJurkatの迅速 in vitro 細胞毒性評価

CAR-T細胞は、ヒト臨床試験でより良い反応を達成するために絶えず改良されています。私たちの研究室では、蛍光イメージングを使用して最適な組み合わせをスクリーニングするなど、偏りのないハイスループット法を使用してこれを評価する方法を特定しています。細胞外ドメインとヒンジドメインの形状を変更することにより、単一の鎖可変フラグメントに対して設計できるコンストラクトの組み合わせはいくつかあります。

このプロトコルは、Jurkat細胞を使用して標的細胞を排除する上で最も効果的な組み合わせを特定するために設計されました。これは、Jurkat細胞を用いて標的細胞の細胞毒性に基づいてCARコンストラクトをスクリーニングし、従来のT細胞で検証するための迅速でハイスループットなプロトコルです。この手法を使用して、12種類のCARコンストラクトを96ウェルプレートで同時に試験することができます。

ここAkhavan Labでは、複数のCARコンストラクトをスクリーニングするために、Jurkat細胞をハイスループットで発現するCARによる標的細胞の直接シクロシスを絶対数で定量化しています。私たちの研究室の主な目的は、高悪性度脳腫瘍に対するCAR-T細胞療法の臨床的翻訳を改善することです。私たちは、CAR-T細胞の細胞毒性を改善し、腫瘍微小環境を標的とするための1つのモダリティとして、ハイスループット薬物スクリーニングを活用しています。