이 방법은 콜로 식민지 해부학의 치유 메커니즘에 대한 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있으며, 아나스토모릭 누출 속도와 잠재적으로 파괴적인 결과를 줄이는 모델을 제공 할 수 있습니다. 우리의 기술은 인간 환자에게 유사한 임상 누설 비율을 가진 동물 모형에 있는 colo-colonic 또는 colo-rectal 해부학을 능력을 발휘하기 위한 상대적으로 간단하고 재현가능한 방법을 제공합니다. 먼저 마취된 마우스의 사지를 수술 표면에 고정하고 노출된 복부를 클로르헨시딘으로 소독하는 것으로 시작합니다.
다음으로 동물 위에 멸균 드레이프를 배치하고, xiphoid에 하복부의 중간선을 따라 피부 절개를합니다. 복벽의 중간선을 들어 올리기 위해 집게를 사용하고, 복부 내 구조물을 손상시키지 않도록 주의하여 중위 복근증의 길이를 절개합니다. 내장이 노출되면, cecum과 작은 창자를 찾아 내고, 내림차순및 시그모이드 결장노출을 위해 좌측 내장을 내측으로 회전합니다.
그런 다음 축축한 멸균 거즈로 내장을 덮습니다. 무딘 프로브 팁을 윤활 젤리로 코팅하고 프로브를 직장으로 조심스럽게 진출하여 내림차순 시그모이드 결장의 식별을 돕습니다. 결장이 확인되면, 부분적으로 프로브를 철회하고, 골반 입구보다 우수한 시그로이드 결장들을 부드럽게 잡기 위해 외상성 집게를 사용합니다.
날카로운 마이크로 가위를 사용하여, 시그모이드 결장, 창자 조직에 수직, 그리고 결장의 폭에 걸쳐 80 ~90 %를 확장, 시그모이드 결장 따라 절단을합니다. 내장 회전 또는 colotomy 과정에서 막새 혈관이 부상을 입은 경우 최대 2 분 동안 부상을 부위에 부드럽게 압력을 가하십시오. 시그모이드 colotomy를 복구하려면, 카스트로비에호 바늘 드라이버와 5 ~ 6 개의 간단한 중단 8 O 비 흡수 성 폴리 프로필렌 스티치를 사용하여 colostomy를 복구하십시오.
간질 국경에서 해부학을 수행하고 항 간질 국경에 양자간 작업을 수행하면 특허 및 비 협착성 해부학을 보장하는 데 도움이됩니다. 수리가 진행됨에 따라, 초기 봉합사가 배치되기 전에 수리를 가로 지르기 위해 트랜스 항문, 무딘 팁 해부 프로브를 진행하여 수리를 너무 좁히는 것을 방지하고, 해부학 적 협착의 속도를 감소시다. 모든 봉합사가 배치되면, 복부를 여러 번 관개하기 위해 따뜻하게 멸균 식염수로 채워진 10 밀리리터 주사기를 사용합니다.
최종 관개 시 복부를 멸균 식염수로 채우고, 해부학 내에서 누출을 식별하기 위해 18 개의 게이지 앙미오카테터를 직장으로 조심스럽게 진출하여 5 ~ 1 입방 센티미터의 공기로 결장부풀을 부풀리도록 합니다. 그런 다음 수리를 위해 추가 봉합사를 배치하고 콜론을 다시 팽창하여 누출이 없는지 확인합니다. 제거하기 전에 협심증으로 결장부를 수축시키고, 중재된 내장을 정상 해부학 적 위치로 부드럽게 되돌려 놓습니다.
4개의 O 흡수성 편조 봉합사를 사용하여 복부 절개를 닫고, 복벽의 근육층을 따라 달리는 봉합사가 절개 꼭대기에서 시작하여 절개의 열등한 양상에서 마무리합니다. 그런 다음 4개의 O monofilament 봉합사를 사용하여 피부를 닫고 마취에서 완전히 회복 될 때까지 마우스를 모니터링하십시오. 적절한 실험 종점에서, 클로르헨시딘과 70%에탄올로 복부를 살균하고, 날카로운 가위를 사용하여 원래의 중간선 절개를 다시 절개합니다.
가위를 사용하여 근육 층으로 자르고 왼쪽 내측 내장 회전을 조심스럽게 수행하여 수리 된 시그모이드 결장이 노출됩니다. 수리에 사용되는 폴리프로필렌 봉합사의 꼬리를 찾아 수리 시력을 식별합니다. 항자 접착을 수리하는 광경에서 벗어나 마취를 방해하지 않도록 주의하십시오.
콜론 세그먼트를 제거하기 전에 마킹 펜을 사용하여 결장의 시간 별 테두리를 구분합니다. 다음으로 가위를 사용하여 해부학의 광경에서 최대 1센티미터의 내림체 결장(한 쌍에서 1센티미터)을 횡단하여 횡단합니다. 수술 후 조직은 매우 깨지기 쉽고 외과 적 루프뿐만 아니라 조직의 부드럽고 세심한 취급하는 경향이 있으며 외과 적 해부학의 중단을 보장하는 데 도움이됩니다.
미세 한 가위를 사용하여 결장의 후방 경계를 따라 부착 된 장간에서 결장결을 급격히 해부하여 시그모이드 세그먼트를 제거하십시오. 그리고 세로 방식으로 막질 테두리의 길이를 따라 잘라, 이전에 제거 된 원통형 표본에서 결장의 직사각형 부분을 만들 수 있습니다. 그리고 마킹 맞은편에 있는 결장의 길이를 따라 세로 컷을 만듭니다.
그런 다음 조직학 및 면역 염색에 필요한 시료 조직을 수정, 침수 및 절단합니다. 조직학적 분석, 부상 후 7 일, 섬유성 치유 반응을 밝혀, 부드러운 근육 알파 액틴 양성 근섬유 세포에 의해 중재. 이 절차를 시도하는 동안, 정상적인 식염수 아래에 잠긴 해부학으로 부전 검사를 수행하고, 해부학의 가빈성을 확인하고, 누출이 발생하지 않도록하는 것이 중요합니다.
이 절차는 당뇨병 또는 면역 억제 마우스와 같은 상처 치유 장애를 가진 유전자 변형, 또는 병원성 마우스에 수행 될 수있다, 아나스토모이누설에 기여하는 요인에 대한 추가 질문에 대답하기 위해. 이 절차에 따라, 면역 조직 화학 및 세포 배양은 수술 후 특정 시점에서 수확된 아나스토모성 조직에서 수행될 수 있으며, 관련된 세포와 마취 치유 과정에서의 역할에 대한 더 나은 이해를 제공합니다. 이소플루란과 함께 일하는 것은 매우 위험할 수 있으며, 이 절차를 수행하는 동안 탄소 여과 및 환기 후드 사용과 같은 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.
