이 작품은 국방부 (W81XWH-13-01-0243)과 국립 보건원 (R37 AG008796)에 의해 투자되었다. 우리는 머리를 고정 실린더 장치를 구축하기위한 노스 웨스턴 대학의 기계 공장에서 앨런 베이커 감사합니다. 우리는 MATLAB 및 솔리드 웍스에서 자신의 지침 박사 Shoai 핫토리 감사합니다. 우리는 실험을 제어 LabVIEW 소프트웨어에 대한 닥터 존 전원을 감사합니다.

마우스와 관련된 모든 절차는 건강의 국립 연구소에서 발행 한 가이드 라인에 따라 노스 웨스턴 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인 된 프로토콜에 따라 수행 하였다. 1. 실린더 (그림 2A) <ol><li> Chettih 등. 그리고 Heiney 등에 의해 설명 된 바와 같이 실린더를 구축합니다. 긴 거품 실린더 14 ~ 15에서. 실린더의 10cm 길이를 잘라 축 직경 금속 막대 12.7 mm (0.5합니다.)에 맞게 중앙에 구멍을 드릴. Heiney 등. 또는 다른 지원 (예를 들어, 플렉시 유리) (15)에 의해 설명 된 바와 같이 금속 광학 브레드 보드에 자사의 축과 실린더를 탑재합니다. </li><li> 실린더의 양측에 직경 12.7 mm의 두 개의 수직 금속봉 발기. </li><li> 금속 막대에 두 직각 마운트를 연결합니다. </li><li> 직각 마운트를 통해 (5cm 길이, 직경 12.7 mm)이 더 막대를 고정합니다. 베벨 일전자는이 막대 끝과 실린더 (그림 2G)의 중심 위에 자신의 끝을 수준. </li><li> 드릴 및 장소 (그림 2G)에서 커넥터의 날개를 개최한다이 4-40 기계 나사에 맞게로드의 수평 끝 부분에 구멍을 누릅니다. </li></ol> 2. 조립 위스커 자극 시스템 (그림 2B) <ol><li> 일반 머리 빗에서 빗의 10 치아 세그먼트를 잘라. </li><li> 슬릿을 잘라 2 ~ 3 mm 폭 약 5mm 2 층 사각 굽힘 액츄에이터를 수용 할 수있는 빗의 상단 부분에 깊은. </li><li> 굽​​힘 액츄에이터의 각면에 하나의 전선을 납땜. 제조업체가 제공하는 솔더 및 플럭스를 사용합니다. 전류에서 마우스와 사용자를 보호하기위한 전기 테이프 액츄에이터 땜납 커버. </li><li> 굴곡 액츄에이터 스트립 빗의 평면에 수직 앉는되도록 빗으로 절단 슬릿에 액츄에이터 스트립 슬립. 각도가 4 기울어 지도록 빗5 °보다 자연스럽게 마우스의 얼굴의 곡선을 따른다. </li><li> 빠른 경화 에폭시와 빗살의 상단에 액추에이터 스트립의 단부를 고정. 참고 : 굽힘 액츄에이터 스트립에 납땜 와이어 액추에이터 40 볼트를 제공하는 가감 저항기에 연결해야합니다. 이전 실험은 40 볼트 조절에 효과가 있지만 놀라게 응답을 연상하지 않는 것으로 나타났습니다. </li><li> 굽​​힘 액츄에이터 및 이동 가능한 마운트에 빗를 놓습니다. 같은 일반적으로 체외 전기 생리학 설비에 사용되는 자기베이스에 부착 된 피펫 홀더는 잘 작동합니다. </li></ol> 3. 실린더 위에 막대에 마운트 커넥터 조립 (그림 2C, 2E) 주 : 커넥터가 3-D는 바이스 Disterhoft 및 갈베스 등에 의한 테더에 사용되는 암 페놀 221 시리즈 나일론 스트립 모델 7 구멍 스트립 인쇄 10,17한다. <ol><li> 0-80 X-1 스트립의 첫 번째 구멍을 누릅니다&quot;기계 나사.이 커넥터에 헤드 피스를 고정하는 잠금 나사 될 것입니다. 손으로 나사를 돌릴 용이하게하기 위해 cyanoacrylic 접착제와 잠금 나사의 머리에 0-80 너트를 붙입니다. </li><li> 합니다 (0-80 기계 너트를위한 공간을 허용하도록) 탭 구멍 후 비어있는 구멍을두고 나머지 5 구멍을 통해 오 금 도금 relia - 전술 소켓을 누릅니다. </li><li> 소켓의 단부에 다섯 긴 와이어 (이더넷 케이블에서 얻은 와이어) 및 솔더 오프 코팅을 벗겨. 주 : 처음 두 와이어는 증폭기로부터의 신호를 필터링 및 증폭 후속하는 eyeblink 응답을 검출 할 근전도 (EMG) 신호를 기록하기 위해 사용된다. 두 번째 두 자극 아이솔레이터에서 충격 신호를 제공합니다. 마지막 전선은 접지 연결 될 것입니다. 이 전선은 시간 제한 CS-US 전달에 사용되는 시스템에 연결됩니다. </li><li> 멀티 포트와 전선 및 소켓 사이의 전기적 연결을 보장imeter. 연속성 설정에 멀티 미터를 넣고 와이어의 제거 끝까지 핀과 다른 프로브 프로브 중 하나를 누르십시오. 저항이 낮고, 멀티 미터 톤을 방출 할 때 핀이 상기 배선에 전기적으로 접속된다. <ol><li> 멀티 미터 연속성 설정이없는 경우 또는, 상기 핀과 와이어 사이의 저항을 측정한다. 측정 거의 저항이있는 경우 전기적 연속성이있다. </li></ol></li><li> 두 TO-220 스타일의 트랜지스터에서 커넥터의 날개를 준비합니다. 트랜지스터의 에미 터,베이스, 및 콜렉터 리드를 잘라와는 커넥터에 부착 될 수 있도록 표면 수준. </li><li> 탭이 나사의 헤드 아래에 슬립 할 수 있도록 구멍을 위반 마운팅 탭의 모서리를 잘라. </li><li> 커넥터에 에폭시 트랜지스터. 마운팅 탭 구멍은 상기 실린더로드에 커넥터를 고정하는 데 사용된다. </li><li> PR 와이어의 기재에 에폭시 적용소켓에서 otruding 에폭시 건조 할 수 있습니다. 에폭시는 절연 및 연결을 보호 할 것입니다. </li></ol> 4. 투구를 준비한다 (그림 2D, 2E) 참고 :. 헤드 피스 스트립 3-D는 와이즈와 Disterhoft 및 갈베스 등 10,17에 의해 헤드 피스에 사용되는 암 페놀 221 시리즈 나일론 스트립에서 모델 7 홀 스트립을 인쇄합니다. 이 작품은 더 이상 상업적으로 제조되지 않습니다. 프린터 파일은이 저널의 웹 사이트에서 다운로드 할 수 있습니다. <ol><li> 0-80 × 1 &quot;기계 나사의 스트립의 첫 번째 구멍을 누르고 첫 번째 구멍 후 비어있는 구멍을 둡니다. </li><li> (좁은 끝을 통해) 나머지 5 구멍의 바닥을 통해 오 금 도금 핀을 밀어 넣습니다. 균등 스트립에 핀을 밀어 용이하게하기 위해 바이스를 사용합니다. </li><li> 열 스트리퍼를 사용하여, (직경. 0.005)을 스테인레스 스틸 와이어의 단부 오프 폴리이 미드 코팅의 약 0.5 cm를 제거 w의 벗겨진 단부 솔더핀 중 하나의 개구부에 반사성 및 0.6-0.7 cm에 와이어를 잘랐다. </li><li> 동물에게 전달하는 현재 허용하는 와이어의 단부로부터 약 0.2 cm 스트립. </li><li> 반복 나머지 3 개의 와이어에 대한 4.3-4.4 단계를 반복합니다. 참고 : 두 번째 두 동물에 충격을 전달하는 역할을합니다 동안 처음 두 와이어는 EMG 응답을 기록합니다. </li><li> 마지막 (제 5) 와이어 접지선 될 것 같이, (0.005 인치 직경) 코팅 된 스테인레스 스틸 와이어의 약 5cm를 절단하고, 나머지 핀 땜납. </li><li> 전선 및 멀티 미터와 핀 사이의 연속성을 확인합니다. (코팅 그라운드 와이어의 경우, 멀티 프로브는 와이어를 따라 삽입 될 수있다.) </li></ol> 5. 수술 준비 (그림 2 층) <ol><li> 헤드 피스를 포함한 모든 수술 도구를 소독. 알코올에 몸을 담근 후 멸균 식염수로 세척하여 헤드 피스를 멸균. </li><li> 3~4% v의 유도 챔버에 마우스를 마취분당 산소를 1 ~ L의 유속으로 혼합 된 이소 플루 란을 aporized. </li><li> 동물이 발가락 핀치와 완전히 마취 된 것을 확인. 는 발가락 핀치에 반사적으로 반응하지 않을 때 마우스가 완전히 마취 된 것입니다. </li><li> 동물이 완전 마취되면, 동물의 머리 상단 면도, 진통제 (0.05 ㎎ / ㎏, SC)로서 부 프레 노르 핀 히드로 클로라이드의 투여 량을 주사 정위 프레임의베이스 상에 피복 가열 패드에 놓고 상기 동물이 완전 마취되어 있는지 확인하고, 상기 프레임에 헤드를 고정. 분당 산소를 1 ~ L의 유량으로 2 %로 전환 동물을 이소 플루 란 증기의 흐름을 유지한다. 각막에 안연고 소량을 적용한다. </li><li> 둘 사이의 교류, 포비돈 - 요오드 알코올 세 시간 각각 두피를 소독. </li><li> 숫자 10 또는 15 메스 블레이드, t의 전면에서 두개골을 노출 두피의 정중선을 따라 절개를interparietal 뼈 (~ 1.5 cm) 과거에 그는 눈을. </li><li> 마이크로 클립 피부의 플랩을 다시 누릅니다. 좌우 두개골의 뒷면 (즉, 모두 여섯 클립을 사용)에 하나의 눈 위의 클립, 주동이의 - 꼬리 축 가운데를 따라 하나 하나를 놓습니다. 투구 찢김을 방지하기 위하여, 측면 및 후면을 포함 가능한 두개골만큼 노출. 이 접착제 합착 시멘트의인가에 대한 표면적을 증가시킬 것이다. </li><li> 메스를 사용하여 골막을 제거하고, 깨끗하고 건조한 가공면을 확보하기 두개골의 상단 긁어. 3 % 과산화수소로 3 회 두개골 상부를 청소한다. </li><li> 00-90 나사를 받아들이 크기 34 역 콘 버 또는 1.6 mm 조각 커터 드릴 비트와 함께 (에 0.0625을. 긴) 두개골에 두 개의 구멍을 뚫습니다. 나사는 전기 접지 연결을 제공합니다. 때 맞 조절 한 브레 그마 앞 구멍과 람다의 앞에 다른 장소, 정중선의 왼쪽t 눈. 각 구멍에 나사 하나를 놓습니다. 각 전체 회전의 두개골에 나사 0.28 mm를 낮 춥니 다; 이 전체 회전이 충분하다. </li><li> 시멘트에 대한 표면적 및 악력을 증가시키기 위해 두개골에 직경이 약 0.75 mm의 여러 작은 디봇 만든다. </li><li> 완성 된 투구를 타고있는 두 개의 나사 주위에 그림 8 구성에서 접지선을 바람. 접지선의 투구가 제대로 나중에 배치 할 수 있도록 약간의 여유 (헤드 피스와 나사 사이에 1.5 cm가 ~)를 허용합니다. 주 : 그림 8은 보통 와이어와 접지 나사 사이의 양호한 전기 접속을 보장한다. 와이어는 전기 접속을 보장하기 위해 나사에 납땜 될 수있다. </li><li> 접착 성 합착 시멘트를 적용합니다. 접착 성 합착 시멘트를 혼합 제조업체의 지침에 따라 또는 감기 세라믹 혼합 접시에 L-분말 믹스의 4 숟가락, 기본 8 방울, 촉매 2 방울을 섞어 (온도 스트립 O를 보장n은 혼합 요리는 완전히 검은 색입니다.) 차가운 온도는 시멘트의 작업 시간을 연장한다. <ol><li> 코트는 두개골과 합착 시멘트로 자유롭게 나사 및 시멘트 건조 할 수 있습니다. 이것은 단지 몇 분 정도 소요됩니다. </li></ol></li><li> 시멘트 건조 후, 핀 두개골 위에 서와 수직 투구 위치. 커넥터와 유사한 홀더 장소에 투구를 잡고 참고 : 투구의 핀을 받기 위해 수 년 - 홀더는 필요 &quot;커넥터 조립 3.&quot;금도금 소켓과 함께 다섯 홀 스트립을 참조하십시오. 홀더는 고정대의 팔에 부착된다. 홀더와 팔의 사용은 투구와 와이어의 위치 설정을 용이하게한다. </li><li> 헤드 피스가 위치 된 후, 안와 주변 피부를 벗겨과 끝을 벗겨 0.2 cm가 EY 직접 꼬리를 피부 아래 휴식로부터 약 2 ~ 4 mm로 할 수 있도록 두 개의 충격 와이어를 위치이자형. 두 전선의 끝이 서로 접촉하는 것을 허용하지 않습니다. 눈 소켓 위의 근층 orbicularis 항진증에있는 두 개의 EMG 와이어를 배치합니다. <ol><li> 너무 긴 그들이 궤도에 상처 감염을 초래할 직접 할 수있는 것처럼 보일 경우 필요한 경우, 전선의 끝을 잘라. 와이어의 단부를 절단하는 경우, 노출 부족 나선이 있다는 것을 보장한다. 전선이 너무 긴 것 같다 경우 또는, 다시 그들이 헤드 피스에서 확장 기지에서 와이어를 구부리십시오. </li><li> 전선의 기본 시멘트 (즉, 헤드 피스 니어 엔드) 접착 성 합착 시멘트의 작은 확산 두개골에 장소와는 (앞에서 설명한 부분의 사용 반) 건조 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 마이크로 클립을 제거하고 부드럽게 다시 시멘트를 통해 피부의 플랩을 접어주십시오. 눈꺼풀의 왜곡을 방지하기 위해 피부에 피부의 일부에 장력을 방지하기 위해 자연적으로 정착 할 수 있도록 상기 eyeblink 반응의 예방그리고 동물에 고통. </li><li> 시멘트와 헤드 피스의 상단의 가장자리에 절개 피부에서 모든 것을 덮고, 치과 용 시멘트로 노출 된 영역을 밀봉합니다. 눈이나 투구의 핀에 시멘트 떨어지는 피하기 위해 여분의주의하십시오. 부분적으로 경화 된 시멘트는 부드럽게 및 치과 시멘트 용매에 적신 된 면봉으로 조작 할 수 있습니다. 시멘트가 헤드 피스 홀더를 분리하기 전에 완전히 건조하도록 허용합니다. </li><li> 동물은 케이지 다시 동물을 교체하기 전에 예열 표면에 마취에서 회복 할 수 있습니다. Metacam (1 ㎎ / ㎏, SQ)를 관리하고 다시 새장에 동물을 배치합니다. </li><li> 시험 또는 교육 전에 동물 복구 5-7 일 수 있습니다. 교육 기관의 지침에 따라 동물에 표준 수술 후 치료를 유지한다. 이 수술에서 회복 된 후 동물은 적어도 하루에 한 번 점검해야한다. 가난한 식사 및 / 또는 음주와 마음이 내키지 않는 행동의 흔적을보세요. 고통 경우완화까지 의심, Metacam 매 24 시간 (수술후의 끝에서와 동일 량)을 제공한다. 리도카인 국소 동물 긁힘이나 불편의 흔적이 경우 상처 부위에 적용될 수있다. </li></ol> 6. 실린더 및 교육 (그림 2G)에 마우스를 배치 <ol><li> 실린더에 마우스를 배치하려면, 다른와 집게 손가락과 엄지 손가락으로 어깨 뒤에 마우스를 잡고 다음 한 손으로 꼬리를 잡고 의해 간단히 손으로 마우스를 억제. 마우스의 복부와 몸통 주위 나머지 손가락을 감싸. </li><li> 손이 마우스를 억제하지으로 마우스의 머리에 헤드 피스에 커넥터를 연결하고 고정 나사를 켭니다. </li><li> 실린더에 부드럽게 마우스를 놓고 프레임에 커넥터를 연결하면서 제자리에 고정. 실린더 위의 막대에 커넥터를 고정하는 두 개의 나사를 사용합니다. </li><li> 커넥터가 실린더 프레임에 고정되면 rele마우스의 보류 ASE. 마우스를 실린더에 습관화의 두 세션의 일일를 제공합니다. 각 요법 이니 세션 각 조절 세션과 동일한 기간을 허용합니다. <ol><li> 기록 자발 깜박임 습관화 동안 레이트 및 사전 노출 놀람 반응의 발생을 최소화하기 위해 위스커 진동 CS에 마우스. 실제 컨디셔닝 세션 동안으로 CS를 적용하지만, 전기없이 미국을 충격. </li><li> 개별 수염을 통해 빗의 이빨을 미끄러지는 동안, 마우스의 조절 측에 피에조 시스템 가까운 (약 0.5 cm) (오른쪽)를 배치하여 수염 자극 CS를 적용합니다. 같은 수염이 날부터 하루에 같은 위치에 피에조 시스템을 배치하여 매일 매일을 자극되어 있는지 확인합니다. </li></ol></li><li> 고전적 조건에 마우스를 훈련을 시작합니다. 5 일 동안 하루 훈련의 두 세션을 제공합니다. 각 훈련 세션 사이 약 2 시간 둡니다. <ol><li> 컨디셔닝 그룹, 델리에(- WPI의 A385R 자극 아이솔레이터에서 제공 3mA, 0.3 mA) 100 밀리 긴 전기 펄스 US와 짝을 250 밀리 긴 수염 진동 CS (60 Hz에서)의 세션 당 삼십 시험 버전. (그림 1) 23 해마의 작업을 따라하기 위해 250 밀리 긴 자극이없는 추적 간격으로 CS와 미국을 분리합니다. </li><li> 깜짝이 유발 될 수 있도록 각 동물의 전기 충격의 강도를 조절합니다. 30 ~ 60 초 사이의 임의 intertrial 간격으로 분리 시험 (45 초, 세션 당 30 분의 총 기간의 평균.) </li><li> 혼자 삼십 짝 CS를 제공하고 미국 단독으로 시험 각 조절 된 그룹에 대한 언급과 같은 자극 매개 변수를 사용하여 pseudoconditioned 그룹 (육십 시험의 총). 어떤 자극이 연속으로 두 번 이상 제공되지 않는 것을 CS 혼자 미국 혼자 시험은 pseudorandomized되어 있는지 확인합니다. 22.5 초 평균 intertrial 간격으로 각각 재판을 분리합니다. </li></ol></li><li> 드순서 습관화 훈련 걸쳐 65dB에서 간 배경 잡음은 수염 자극에 의​​해 발생되는 진동 소음을 마스크. </li></ol>

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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vibrissa-signaled+eyeblink+conditioning+induces+somatosensory+cortical+plasticity.">Vibrissa-signaled eyeblink conditioning induces somatosensory cortical plasticity.</a> J Neurosci. 26 (22), 6062-6068 (2006).</li><li>Galvez, R., Weible, A. P., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+barrel+lesions+impair+whisker-CS+trace+eyeblink+conditioning.">Cortical barrel lesions impair whisker-CS trace eyeblink conditioning.</a> Learn &amp; Memory. 14 (1), 94-100 (2007).</li><li>Johnson, K. R., Zheng, Q. Y., Erway, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Major+Gene+Affecting+Age-Related+Hearing+Loss+Is+Common+to+at+Least+Ten+Inbred+Strains+of+Mice.">A Major Gene Affecting Age-Related Hearing Loss Is Common to at Least Ten Inbred Strains of Mice.</a> Genomics. 70 (2), 171-180 (2000).</li><li>Tseng, W., Guan, R., Disterhoft, J. F., Weiss, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trace+eyeblink+conditioning+is+hippocampally+dependent+in+mice.">Trace eyeblink conditioning is hippocampally dependent in mice.</a> Hippocampus. 14 (1), 58-65 (2004).</li><li>Joachimsthaler, B., Brugger, D., Skodras, A., Schwarz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spine+loss+in+primary+somatosensory+cortex+during+trace+eyeblink+conditioning.">Spine loss in primary somatosensory cortex during trace eyeblink conditioning.</a> J Neurosci. 35 (9), 3772-3781 (2015).</li><li>Boele, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+and+extracerebellar+involvement+in+mouse+eyeblink+conditioning:+the+ACDC+model.">Cerebellar and extracerebellar involvement in mouse eyeblink conditioning: the ACDC model.</a> Front in Cell Neurosci. 3 (19), (2010).</li><li>Koekkoek, S. K. E., Den Ouden, W. L., Perry, G., Highstein, S. M., De Zeeuw, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+kinetic+and+frequency-domain+properties+of+eyelid+responses+in+mice+with+magnetic+distance+measurement+technique.">Monitoring kinetic and frequency-domain properties of eyelid responses in mice with magnetic distance measurement technique.</a> J Neurophysiol. 88 (4), 2124-2133 (2002).</li><li>Ward, R. L., Flores, L. C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infragranular+barrel+cortex+activity+is+enhanced+with+learning.">Infragranular barrel cortex activity is enhanced with learning.</a> J Neurophysiol. 108 (5), 1278-1287 (2012).</li></ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이해 관계가 없음을 선언합니다.

클래식 eyeblink 컨디셔닝은 학습과 기억의 기초가되는 신경 기판을 이해하기위한 유용한 도구입니다 연관 학습의 한 형태이다. 이러한 쥐와 같은 설치류에 eyeblink 컨디셔닝 채용 이전 방법은 동물이 자유롭게 이동하도록 허용 챔버를 포함했다. 시겔 등.에 빛을 유발 추적 eyeblink 컨디셔닝 Chettih 등. 그리고 Heiney 등. 가장 최근에 사용에 의해 기술 된 장치를 사용하여 마우스 eyebli...

Eyeblink 컨디셔닝 파블로프 에어컨의 형태와 연관 학습 및 기억의 신경 메카니즘을 연구하기위한 모델 시스템이다. 이것은 인간, 토끼, 고양이, 쥐, 생쥐 등 다양한 종에서 조사되었다. 패러다임은 두 쌍의 자극의 프레 젠 테이션을 포함한다 : 중립 조건 자극 (CS; 예를 들면, 톤, 빛의 플래시, 또는 수염 자극) 및 돌출 무조건 자극 (US, 예를 들어, 눈에 에어 퍼프를, 또는 눈 주위 충격). 미국은 무조건, 재귀 eyeblink 응답 (즉, UR)를 이끌어. 결국, 한 쌍의 CS-미국의 여러 프리젠 테이션 후, 주제는 미국과 CS를 연결 배운다. 이 학습은 조건 반응 (CR), 미국의 프리젠 테이션을 앞에 혼자 CS에 의해 유도 eyeblink의 형태로 드러난다. 추적 형태로 Eyeblink 에어컨은 몇 시간의 자극이없는 간격을 포함연사와 미국 (그림 1)을 분리 undred (밀리 초). 이 자극 우발 1의 인식을 필요로하기 때문에 추적 에어컨은 선언적인 학습의 한 형태이다. 시간적 간격이 1-6 관련되기 위해 미국과 CS 위해서는 이러한 해마와 같은 전뇌 지역에서 CS의 신경 &#39;추적&#39;을 유지하기 위해 동물을 필요로한다. 전뇌 지역과 함께, 추적 컨디셔닝은 소뇌 (7)에 따라 달라집니다. Eyeblink 컨디셔닝 따라서, 인수, 합병 및 검색을 포함한 메모리의 여러 측면의 조사에 유용한 패러다임이다. eyeblink 컨디셔닝 동안, 동물의 제어 그룹은 미국 프리젠 테이션 혼자보다는 배운 CS-US 협회에 의해 발생 될 수있는 CS에 pseudoconditioning 또는 감작 반응을 테스트하기 위해 임의의 순서로 짝 자극되게된다. 일반적으로 사용되는 apparaTUS 설치류 eyeblink 컨디셔닝의 조사를 위해 설치류가 교육 과정 8 ~ 10시에 대해 자유롭게 이동하도록 허용하는 챔버입니다. 이러한 유형의 장치와 더불어, 테더는 보통 쥐의 두개골에 부착되는 헤드 피스에 부착된다. 테더는 US (때로는 CS)의 전달을 위해 그 자극 (즉, eyeblink 응답) 10 동물의 응답 송신을 허용한다. 테더 그 자체는 전달, 자극의 유형에 따라 변경 될 수 있으며 eyeblink 응답이 어떻게 기록된다. eyeblink 컨디셔닝은 &quot;자유롭게 움직이는&quot;닿는 마우스를 사용하는 이유는 마우스 구속에 어려움을 겪고 있다는 점이다. 다른 종의 억제에보다 의무가있을 수 있지만, eyeblink 컨디셔닝 실험에서 쥐를 사용하는 주요 이점은 가능한 유전자 재조합 변이주의 대부분이 마우스 균주된다는 것이다. 어려움을 겪고, 완벽한 입술에 추가마우스의 traint 급성 고통을 초래한다. 스트레스를 최소화하는 헤드 고정 마우스 제제 eyeblink 컨디셔닝 동안 획득 될 수있는 생리 정보를 증가시킬 것이다. 예를 들어,이 시스템은 2 광자 현미경 (11) 피질 뉴런의 이미징을 허용한다. 헤드 고정 제제는 또한 마우스 (11)에 eyeblink 컨디셔닝을위한 플랫폼으로, 사극 어레이, 두 광자 칼슘 이미징과 설치류의 뇌의 생체 전기 생리 녹음, 이동식 뇌 이식을 통해 피질의 광학 이미징을위한 이전 실험에 사용 된 -16. 머리 고정 시스템에서 신뢰할 수있는 자극과 녹음은 마우스 (그림 2)의 완전한 구속없이 보장된다. 자유롭게 구동 시스템에 사용되는 것과 같은 투구가 마우스 두개골에 부착된다. 트레이닝 동안, 헤드 피스를 통해 막대에 부착 된 커넥터에 부착순서 원통형 디딜 방아는 설치류의 머리 (그림 2A)를 안정. 원통형 디딜 방아는 마우스가 편안하게 휴식 할 수 있지만 마우스가 그렇게 원한다면, 또한 실행하거나 산책 할 수 있습니다. 이 시스템의 사용으로, 마우스는 CS와 US 같은 온화한 안와 감전 등의 위스커 진동 (도 1)을 훈련 할 수있다. 미국은 수술로 눈에 피부의 측면 아래에 배치 전선을 통해 전달된다. 연사는 2 층 직사각형 굽힘 액츄에이터 (도 2B)에 부착 된 빗 통해 전달된다. 빗살 굽힘 액츄에이터 후 훈련 동안 적절한 위치로 이동하고, 각 동물에 대한 최적의 전달을 위해 조정되는 자성 기재에 부착된다. 빗살 선택된 수염을 걸치도록 위치된다. 연사의 배달 동안, 신호는 빗 변위와 수염 (17)의 진동에 이르게 굽힘 액츄에이터로 전송됩니다. 16,18,19에서 마우스 효과 조건화 된 자극으로 사용되어왔다. 그 이유 수염 자극이 실험 패러다임에서 CS에 대한 선택 탐사 중 체성 감각 정보 입력에 대한 자신의 코털 (vibrissae)에 쥐과 동물의 의존성이다. 수염 자극 안정적이고 효과적인 CS (20)로 도시되었다. 연사는 eyeblink 컨디셔닝 (20, 21) 학습과 관련된 대뇌 피질의 변화와 소성을 매핑하기위한 우아한 도구를 제공하기 때문에 또한, 코털 (vibrissae) 시스템 (즉, 배럴 피질), 수염 자극의 잘 설립 및 조직 대뇌 피질의 기판을 제공. 머리 고정 시스템은 자극 신경 세포와 비 자극 수염로부터의 입력을 수신하는 뉴런 사이의 응답을 비교 선택 수염의 정확한 자극 수 있습니다. 마지막으로, 생쥐의 많은 변종은 연령과 관련된 청력 손실이 상대적으로 젊은 성인을 전시 <su(시각적 CS는 놀라게 응답 16 문제를 개선하기는하지만) 조절 된 점멸하는 동안 P&gt; (22), 그리고 눈꺼풀 폐쇄는 시각적 인 CS를 변경합니다. 수염 자극은 이러한 합병증 중 하나에 의해 영향을받지 않습니다. 독특하고 중요한 CS와 US 전달을위한 방법을 포함 eyeblink 에어컨, 다른 머리 고정 준비에 따라 수정하고 eyeblink 응답의 인수는 여기에 표시됩니다. 이 장치 및 eyeblink 컨디셔닝 훈련 패러다임의 신뢰성을 조절 마우스 및 pseudoconditioned 대조군 (도 7a)에서 상대적으로 평평한 학습 곡선에서 곡선을 학습에 의해 입증된다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1351">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Exervo TeraNova Foam Roller 36&#34; x 6&#34;&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Amazon</td>
			<td style="width:181px;">B002ONUM0E</td>
			<td style="width:377px;">For cylinder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Plexiglas</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Custom-made; 1 cm thick</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Metal Rods (12.7mm diameter)</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">4-40 machine screw (.25 in long)</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>&#160;B00F33Q8QO</td>
			<td>For cylinder</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:436px;">Classic Design Hair Comb</td>
			<td style="width:357px;">Conair</td>
			<td style="width:181px;">93505WG-320</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">2-Layer Rectangular Bending Actuator</td>
			<td style="width:357px;">Piezo Systems</td>
			<td>T220-A4-303X&#160;</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Solder and Flux Kit</td>
			<td style="width:357px;">Piezo Systems</td>
			<td>MSF-003-NI</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:357px;">Thor Labs</td>
			<td style="width:181px;">MB175</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Threaded rod for magnetic base</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">Strips based on 221 series nylon strip connectors from Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>Custom-made, based on Weiss and Disterhoft, 2008</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">TO-220 Style Transistor</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>B0002ZPZYO&#160;</td>
			<td>For connector; for the wings</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Relia-Tac Sockets</td>
			<td style="width:357px;">Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:181px;">220-S02</td>
			<td>For connector</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Relia-Tac Pins</td>
			<td style="width:357px;">Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:181px;">220-P02</td>
			<td>For headpiece</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">0-80 stainless steel machine screw (1 in. long)</td>
			<td>Amazon Supply</td>
			<td>B000FN68EE</td>
			<td>Locking Screw</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">0-80 stainless steel machine screw hex nut (5/32 in. thick)</td>
			<td>Amazon Supply</td>
			<td>B000N2TK7Y</td>
			<td>Locking Screw Head</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Loctite Super Glue-Liquid</td>
			<td>Loctite</td>
			<td>1365896</td>
			<td>Cyanoacrylic glue; for the locking screw</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Quick Setting Epoxy</td>
			<td style="width:357px;">Ace Hardware</td>
			<td>18613</td>
			<td>For connector and whisker stimulation system</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Ethernet Cable Wires</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Ethernet cable can be taken apart to use the individual wires for the connector</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">Polyimide coated stainless steel wires (2 in. long, .005 in. diameter)</td>
			<td style="width:357px;">PlasticsOne</td>
			<td>005sw/2.0 37365 S-S&#160;</td>
			<td>For headpiece, EMG and shock wires</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel uncoated wire (.005 in. diameter)</td>
			<td style="width:357px;">AM Systems</td>
			<td>792800</td>
			<td>For headpiece, ground wires</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Tenma Variable Autotransformer</td>
			<td style="width:357px;">Tenma</td>
			<td>72-110</td>
			<td>For the whisker stimulation; rheostat to adjust current to the bending actuator</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Amplifier</td>
			<td style="width:357px;">A-M Systems</td>
			<td>1700</td>
			<td>Amplifier for filtering and amplifying EMG signals</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">WPI A385R stimulus isolator</td>
			<td style="width:357px;">World Precision Instruments</td>
			<td>31405</td>
			<td>For the electrical shock</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:436px;">Isothesia (Isoflurane)</td>
			<td style="width:357px;">Henry Schein: Animal Health</td>
			<td style="width:181px;">50031</td>
			<td>For surgery; anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:436px;">Buprenex Injectable CIII</td>
			<td style="width:357px;">Reckett Benckiser Pharmaceuticals Inc</td>
			<td style="width:181px;">NDC 12496-0757-1</td>
			<td>For surgery; analgesic</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Akwa Tears: Lubricant Ophthalmic Ointment&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Akorn</td>
			<td style="width:181px;">NDC 17478-062-35</td>
			<td>Artificial tear ointment to prevent dry eyes while under anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Povidine-Iodine Prep Pads</td>
			<td style="width:357px;">PDI</td>
			<td>NDC 10819-3883-1</td>
			<td>For surgery; antiseptic</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Alcohol Prep Pads</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>May be purchased from any standard pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel surgical scalpel handles (no.3)</td>
			<td style="width:357px;">Integra Miltex&#160;</td>
			<td>4-7.</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel surgical scalpel blades</td>
			<td style="width:357px;">Integra Miltex</td>
			<td style="width:181px;">4-310 or 4-315</td>
			<td>For surgery; number 10 or 15 scalpel blade</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">3% Hydrogen Peroxide</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>May be purchased from any standard pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Micro Clip</td>
			<td style="width:357px;">Roboz</td>
			<td style="width:181px;">RS-5459</td>
			<td>For surgery, to hold back skin</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">00-90 stainless steel machine screw (0.0625 in. long)&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>B002SG89X4&#160;</td>
			<td>For surgery, to wrap ground wire around</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Professional Rotary Tool</td>
			<td style="width:357px;">Walnut Hollow</td>
			<td>29637</td>
			<td>Hand drill for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Inverted Cone Burr</td>
			<td style="width:357px;">Roboz</td>
			<td>RS-6282C-34</td>
			<td>Inverted cone burr size 34; for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Engraving Cutter Drill Bit</td>
			<td style="width:357px;">Dremel</td>
			<td>106</td>
			<td>Engraving cutter; 1.6 mm bit; for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System &#34;B&#34; Quick Base</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S398</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System Clear L-Powder</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S399</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System &#34;C&#34; Universal TBB Catalyst 0.7 ml</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S371</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System Ceramic Mixing Dish with temperature strip</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S387</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:436px;">Swiss Tweezers, style #5</td>
			<td style="width:357px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:181px;">504506</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Puritan Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td style="width:357px;">VWR International</td>
			<td>10806-005&#160;</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Dental Caulk Grip Cement Kit</td>
			<td style="width:357px;">Dentsply</td>
			<td>675570</td>
			<td>For surgery; dental cement</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whisker-signaled eyeblink classical conditioning in head-fixed mice

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive repertoire of scientific techniques available to study learning and memory at the cellular level, it is ideal to have a stable cranial platform. Because mice do not readily tolerate restraint, they are usually trained while moving about freely in a chamber. Conditioned stimulus (CS) and unconditioned stimulus (US) information are delivered and eyeblink responses recorded via a tether connected to the mouse's head. In the head-fixed apparatus presented here, mice are allowed to run as they desire while their heads are secured to facilitate experimentation. Reliable conditioning of the eyeblink response is obtained with this training apparatus, which allows for the delivery of whisker stimulation as the CS, a periorbital electrical shock as the US, and analysis of electromyographic (EMG) activity from the eyelid to detect blink responses.

8~10주 세 남성 C57BL6 / J 마우스는 머리를 고정 원통형 디딜 방아 장치에 대한 추적 eyeblink 컨디셔닝에 대한 교육을했다. 8 마우스가 페어링 CS-US 프리젠 테이션 (에어컨 그룹)와 9 마우스와 함께 훈련을받은이 부대 CS 미국 프리젠 테이션 (pseudoconditioned 그룹)와 함께 훈련을했다. 컨디셔닝 된 마우스에서 반응 조건의 예 EMG ?...

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Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice

The preparation presented here for whisker-signaled eyeblink conditioning in head-fixed mice precisely stimulates specific whiskers while allowing mice to ambulate on a cylindrical treadmill. A whisker stimulation conditioned stimulus (CS) paired with a periorbital shock unconditioned stimulus (US) results in reliable associative learning on this apparatus.

머리 고정 쥐의 수염-신호 Eyeblink 클래식 컨디셔닝

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive ...

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Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Behavior

12.9K 조회수.  Northwestern University. The preparation presented here for whisker-signaled eyeblink conditioning in head-fixed mice precisely stimulates specific whiskers while allowing mice to ambulate on a cylindrical treadmill. A whisker stimulation conditioned stimulus (CS) paired with a periorbital shock unconditioned stimulus (US) results in reliable associative learning on this apparatus.

비디오: Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association between environmental cues and aversive experiences. In this test, mice are placed into a conditioning chamber and are given parings of a conditioned stimulus (an auditory cue) and an aversive unconditioned stimulus (an electric footshock). After a delay time, the mice are exposed to the same conditioning chamber and a differently shaped chamber with presentation of the auditory cue. Freezing behavior during the test is measured as an index of fear memory. To analyze the behavior automatically, we have developed a video analyzing system using the ImageFZ application software program, which is available as a free download at http://www.mouse-phenotype.org/. Here, to show the details of our protocol, we demonstrate our procedure for the contextual and cued fear conditioning test in C57BL/6J mice using the ImageFZ system. In addition, we validated our protocol and the video analyzing system performance by comparing freezing time measured by the ImageFZ system or a photobeam-based computer measurement system with that scored by a human observer. As shown in our representative results, the data obtained by ImageFZ were similar to those analyzed by a human observer, indicating that the behavioral analysis using the ImageFZ system is highly reliable. The present movie article provides detailed information regarding the test procedures and will promote understanding of the experimental situation.

This article presents a protocol for a contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system to assess fear learning and memory in mice.

마우스에서 비디오 분석 시스템을 사용하여 콘텐츠 및 시작됨 공포 컨디셔닝 테스트

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

연구

행동분석학

A Fully Automated Rodent Conditioning Protocol for Sensorimotor Integration and Cognitive Control Experiments

Rodents have been traditionally used as a standard animal model in laboratory experiments involving a myriad of sensory, cognitive, and motor tasks. Higher cognitive functions that require precise control over sensorimotor responses such as decision-making and attentional modulation, however, are typically assessed in nonhuman primates. Despite the richness of primate behavior that allows multiple variants of these functions to be studied, the rodent model remains an attractive, cost-effective alternative to primate models. Furthermore, the ability to fully automate operant conditioning in rodents adds unique advantages over the labor intensive training of nonhuman primates while studying a broad range of these complex functions.
Here, we introduce a protocol for operantly conditioning rats on performing working memory tasks. During critical epochs of the task, the protocol ensures that the animal's overt movement is minimized by requiring the animal to 'fixate' until a Go cue is delivered, akin to nonhuman primate experimental design. A simple two alternative forced choice task is implemented to demonstrate the performance. We discuss the application of this paradigm to other tasks.

A fully automated protocol for rodent operant conditioning is proposed. The protocol relies on precise temporal control of behavioral events to investigate the extent to which this control influences neural activity underlying sensorimotor integration and cognitive control experiments.

감각 운동 통합 및인지 제어 실험을 위해 완전 자동화 된 설치류 컨디셔닝 프로토콜

Rodents have been traditionally used as a standard animal model in laboratory experiments involving a myriad of sensory, cognitive, and motor tasks. ...

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

생쥐의 공포 컨디셔닝을 추적

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered shuttle boxes were equipped with two operant levers (left and right) and a food receptacle in one chamber, which was then divided from the second chamber by an automated guillotine door covered by a wire grid. Different stimulus mice, rotated across testing days, served as a social stimulus behind the wire grid, and were only visible following the opening of the guillotine door. Test mice were trained to lever press in order to open the door and gain access to the stimulus partner for 15 sec. The number of lever presses required to obtain the social reward progressively increased on a fixed schedule of 3. Testing sessions ended after test mice stopped lever pressing for 5 consecutive minutes. The last reinforced ratio or breakpoint can be used as a quantitative measure of social motivation. For the second paradigm, test mice were trained to discriminate between left and right lever presses in order to obtain either a food reward or the social reward. Mice were rewarded for every 3 presses of each respective lever. The number of food and social rewards can be compared as a measurement of the value placed upon each reward. The ratio of each reward type can also be compared between mouse strains and the change in this ratio can be monitored within testing sessions to measure satiation with a given reward type. Both of these operant conditioning paradigms are highly useful for the quantification of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

This article describes a new protocol for the quantitative measurement of social motivation in mice using operant conditioning for a social reward. The protocol is useful for the measurement of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

조건화를 사용하여 마우스 사회적 동기 부여를 정량화

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

Classical Short-Delay Eyeblink Conditioning in One-Year-Old Children

Classical eyeblink conditioning (EBC) refers to the learned association between a conditioned stimulus (an auditory tone) and an unconditioned stimulus (a puff of air to the cornea). Eyeblink conditioning is often used experimentally to detect abnormalities in cerebellar-dependent learning and memory that underlies this type of associative learning. While experiments in adults and older children are relatively simple to administer using commercial equipment, eyeblink conditioning in infants is more challenging due to their poor compliance, which makes correct positioning of the equipment difficult. To achieve conditioning in one-year-old infants, a custom-made or an adapted commercial system can be used to deliver the air puff to the infant's cornea. The main challenge lies in successfully detecting and classifying the behavioral responses. We report that automated blink detection methods are unreliable in this population, and that conditioning experiments should be analyzed using frame-by-frame analysis of supplementary video camera recordings. This method can be applied to study developmental changes in eyeblink conditioning and to examine whether this paradigm can detect children with neurological disorders.

This protocol describes an eyeblink conditioning paradigm appropriate for experiments with one-year-old infants. Commercial or custom-made equipment can be used to deliver the stimuli, and data collection and analysis should be performed on the video recordings.

Classical eyeblink conditioning (EBC) refers to the learned association between a conditioned stimulus (an auditory tone) and an unconditioned stimulus (a ...

Visual Classical Conditioning in Wood Ants

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, studies implementing classical conditioning paradigms with harnessed insects have been important for investigating the exact cues that individuals learn and the neural mechanisms underlying learning and memory formation. Here we present a protocol for evoking visual associative learning in wood ants through classical conditioning. In this paradigm, ants are harnessed and presented with a visual cue (a blue cardboard), the conditional stimulus (CS), paired with an appetitive sugar reward, the unconditional stimulus (US). Ants perform a Maxilla-Labium Extension Reflex (MaLER), the unconditional response (UR), which can be used as a readout for learning. Training consists of 10 trials, separated by a 5-minute intertrial interval (ITI). Ants are also tested for memory retention 10 minutes or 1 hour after training. This protocol has the potential to allow researchers to analyze, in a precise and controlled manner, the details of visual memory formation and the neural basis of learning and memory formation in wood ants.

We present a protocol for the classical conditioning of harnessed ants that permits researchers to study visual learning and memory formation at a level of analysis not possible with freely moving individuals.

나무 개미에 비주얼 고전 컨디셔닝

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, ...

Fear Incubation Using an Extended Fear-Conditioning Protocol for Rats

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the relationships between aversive events and otherwise neutral stimuli. The most-widely utilized procedures for studying emotional memories entail fear conditioning in rats. In these tasks, the unconditioned stimulus (US) is a footshock presented once or several times across single or several sessions, and the conditioned response (CR) is freezing. In a version of these procedures, called cued fear conditioning, a tone (conditioned stimulus, CS) is paired with footshocks (US) during the training phase. During the first test, animals are exposed to the same context in which training took place, and freezing responses are tested in the absence of footshocks and tones (i.e., a context test). During the second test, freezing is measured when the context is changed (e.g., by manipulating the smell and walls of the experimental chamber) and the tone is presented in the absence of footshocks (i.e., a cue test). Most cued fear conditioning procedures entail few tone-shock pairings (e.g., 1-3 trials in a single session). There is a growing interest in less common versions involving an extensive number of pairings (i.e., overtraining) related to the long-lasting effect called fear incubation (i.e., fear responses increase over time without further exposure to aversive events or conditioned stimuli). Extended fear-conditioning tasks have been key to the understanding of fear incubation&#8217;s behavioral and neurobiological aspects, including its relationship with other psychological phenomena (e.g., post-traumatic stress disorder). Here, we describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

We describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

쥐에 대 한 확장 된 공포 컨디셔닝 프로토콜을 사용 하 여 공포 잠복

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the ...

Operant Conditioning Task to Measure Song Preference in Zebra Finches

An operant conditioning paradigm is used to test the song preference of female zebra finches. Finches are placed in a two-chambered cage with a connecting opening and indicate their preference for a song by landing on a perch within each chamber. By interrupting the infrared beam from a photoelectric sensor above each perch, the bird activates the playback of a song through a speaker located on each side of the cage. Freely available software is used to trigger the song playback from each perch. To determine the song preference of each animal, her chamber preference is first identified by triggering no song playback when she lands on each perch. This chamber preference is then compared to her song preference. A minimum activity threshold is set to ensure the preference is real. Using this method, we show that paired females prefer the song of their partner. This method was used to understand the contribution of dopamine to the formation and maintenance of song preference.

We describe a technique to evaluate song preference in zebra finches. Females are placed in a two-chambered cage and song preference is measured by the number of times she triggers the playback of one song by landing on a perch within one chamber, compared with triggering a different song in the second chamber. Perch landings are counted using infrared sensors.

Zebra 핀치에서 노래 선호도를 측정하는 작동 컨디셔닝 작업

An operant conditioning paradigm is used to test the song preference of female zebra finches. Finches are placed in a two-chambered cage with a connecting ...

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal model of epilepsy, we generated pilocarpine-treated chronic epileptic mice. We present a protocol for three different behavioral tests using these epileptic mice: novel object location (NL), novel object recognition (NO), and pattern separation (PS) tests to evaluate learning and memory for places, objects, and contexts, respectively. We explain how to set the behavioral apparatus and provide experimental procedures for the NL, NO, and PS tests following an open field test that measures the animals&#8217; basal locomotor activities. We also describe the technical advantages of the NL, NO, and PS tests with respect to other behavioral tests for assessing memory function in epileptic mice. Finally, we discuss possible causes and solutions for epileptic mice failing to make 30 s of good contact with the objects during the familiarization sessions, which is a critical step for successful memory tests. Thus, this protocol provides detailed information about how to assess epilepsy-associated memory impairments using mice. The NL, NO, and PS tests are simple, efficient assays that are appropriate for the evaluation of different kinds of memory in epileptic mice.

This article presents experimental procedures for assessing memory impairments in pilocarpine-induced epileptic mice. This protocol can be used to study the pathophysiologic mechanisms of epilepsy-associated cognitive decline, which is one of the most common comorbidities in epilepsy.

필로카핀 유도 간질 마우스에 있는 기억 기능의 평가

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...