外傷性脳損傷における出血と炎症を研究するための刺し傷マウスモデル

私たちは、TVIの出血を止め、炎症を抑制する方法の開発に興味を持っているため、針だけで簡単にTVI質量モデルを作るためのプロトコルを確立しました。当社の刺し傷TVIモデルは、出血と灰色の活性化を滑らかにするため、有益です。私たちのプロトコルには、他の技術と比較して3つの主要な利点があります。

特別な機器や工具は必要ありません。簡単かつ迅速に行うことができ、傷がとても小さいためマウスの行動に影響を与えないため、誰でも高い再現性でこれを行うことができます。当研究室では、外傷性脳損傷の修復における神経細胞、灰色細胞、グリア細胞、寄生虫のコミュニケーションに焦点を当てます。

コミュニケーションは修理において重要な役割を果たします。しかし、今のところ完全には理解されていません。私たちのプロトコルは、通信の分析に非常に役立ちます。

まず、麻酔をかけたマウスをペーパータオルの腹側に置きます。マウスがつま先のピンチテストで深く麻酔されていることを確認します。ベタジンと70%エタノールスクラブを交互に3回スクラブして、手術部位を消毒します。.

次に、鈍い鉗子で後頭の皮膚をつかみ、幅1〜1.5ミリメートルの切開を行って、頭蓋骨や臓器に損傷を与えることなく後頭骨を露出させます。次に、切開部を静かにゆっくりと開き、頭蓋骨を通じて大脳皮質と小脳の境界を観察します。マウス開頭術を行うには、後頭骨の右半球に針で小さな穴を開けます。

針をゆっくりと回転させて刺し傷ニードリングの挿入点を作り、脳実質を傷つけないように注意します。刺し傷は挿入点から適切な針を差し込み、吻側尾軸に沿って大脳皮質を刺します。最後に、半円形の針でナイロン3-0縫合糸を使用して皮膚切開部を縫合します。

処置後の創傷は顕微鏡検査で確認した。IGGの血管外漏出は、損傷の1日後にピークに達し、その後、漸進的な回復が続き、3日後、5日後、7日後に染色強度が低下しました。エヴァンの脳実質への青色色素の漏出は、損傷直後に発生し、その濃度は1時間でピークに達しました。

色素濃度は1日後、3日後に徐々に減少しました。IBA1陽性ミクログリアとGFAP陽性アストロサイトのピーク蓄積は、それぞれ損傷後5日と3日で発生し、その存在は7日減少しました。腫瘍壊死因子α、インターロイキン6、インターロイキン1ベータなどの炎症性サイトカインは、損傷後1日でmRNA発現のピークを示し、トランスフォーミング成長因子ベータ1は損傷後3日でピークを示しました。