オルガノイド研究のためのマウス腸陰窩および単一幹細胞からのオルガノイドの3D培養

腸管陰窩の底に存在する幹細胞生物学、特に腸幹細胞に焦点を当てた私たちの研究。腸内の幹細胞が恒常性をどのように維持しているのかを答えることを目的としています。腸管幹細胞に由来するこの3D臓器培養は、幹細胞の増殖、分化、および維持を研究するための強力なツールを提供します。

臓器技術は、自己複製と分化の可能性を保持することにより、腸幹細胞の培養を長期間支援します。オルガノイドは、腸の脆弱性と過去の脆弱性に関する基礎的およびトランスレーショナル研究に広く使用されています。現在の課題は、腸管上皮細胞や幹細胞に関わる冠神経系を理解することです。

客観的なクローニングによって引き起こされる生物学的プロセスを理解することは非常に重要です。私たちの重要な発見の1つは、クローニングによるシグナル伝達が腸上皮の成長と分化の恒常性を維持することです。私たちのプロトコルは、小腸陰窩を一貫して分離する方法と、その後の3Dオルガノイドの培養により、陰窩放出速度を向上させる方法について説明しています。

EDTA処理後の激しい振とうを伴う機械的分離法を確立します。EDTAと機械的解離を組み合わせることで、暗号収率を向上させることができます。さらに、適切なスキルはウイルス汚染を最小限に抑え、暗号の数を増やすことができます。

我々の知見は、筋肉受容体と生物受容体を介したシグナル伝達が、腸管上皮の成長と分化における恒常性を維持するために一緒に働いているように見えることを示唆しています。これは、非神経冠状動脈炎系が腸幹細胞ニッチの緩和に重要な役割を果たしたという仮説を立てることを奨励します。