פרוטוקול זה מתאר פרדיגמת שתייה סטנדרטית של שני בקבוקים בכלוב ביתי לבחירה לסירוגין כדי להדגים צריכת אלכוהול מרצון בחולדות. בנוסף, הוא מספק הוראות שלב אחר שלב להגדלת הפרוטוקול הסטנדרטי עם מערכת זיהוי ליקוק עשה זאת בעצמך המאפשרת ניתוח מיקרו-מבני של התנהגות השתייה. שתיית כלוב ביתי עם שני בקבוקים היא פרדיגמה פרה-קלינית בשימוש נרחב לחקר צריכת אלכוהול במכרסמים.
בעלי חיים נותנים גישה לשני בקבוקי שתייה, אחד עם מים ואחד עם אתנול. ניתן ליישם אותו בקלות כדי למדוד צריכת אלכוהול מרצון בהעדפה ללא ציוד מיוחד או ניתוח. הרזולוציה של נתוני השתייה המתקבלים בגישה זו מוגבלת על ידי התדירות שבה החוקר מודד את משקל הבקבוק.
כתוצאה מכך, הגישה הסטנדרטית אינה מסוגלת ללכוד דפוסי שתייה, הידועים כמשפיעים הן על הסיכון והן על חומרת הפרעת השימוש באלכוהול. הפרוטוקול שלנו עונה על הצורך להגדיל את רזולוציית הנתונים במודלים פרה-קליניים על ידי הרחבת פרדיגמת הבחירה הסטנדרטית של שני בקבוקים עם מערכת ליקומטר ביתית בעלות נמוכה. חוקרים יוכלו ללכוד בקלות מדדים שונים של מיקרו-מבנה שתייה ולקבל הערכות מדויקות של צריכת אתנול ברזולוציה זמנית גבוהה.
פרוטוקול זה מעניק לחוקרים את הגמישות להשתמש בבקבוקים סטנדרטיים או במכשיר המצויד בליקומטר כדי למדוד את השתייה בהתאם לצרכי הניסוי שלהם. חשוב לציין, מדידת מיקרו-מבנה השתייה מאפשרת לחוקרים לחקור הבדלים אינדיבידואליים בדפוסי השתייה וכיצד דפוסי השתייה משתנים בתגובה להתערבות ניסויית. כדי להתחיל, הסר את צמרות המסנן מהכלובים.
בימים שני, רביעי ושישי, הסר את הבקבוקים של שלישי, חמישי ושבת מצמרות הכלוב. שקלו ורשמו את המשקל ההתחלתי של בקבוקי האתנול והמים עבור מפגש השתייה של היום. כדי להתחיל את הפגישה, הניחו את בקבוקי ימי שני, רביעי ושישי על החלק העליון של הכלוב של כל חולדה עם סרט פונה כלפי מעלה כדי למנוע מהחולדה ללעוס את תוויות הבקבוקים.
בימי שלישי, חמישי ושבת, הסר את בקבוקי שני, רביעי ושישי מכל כלוב. שקלו כל בקבוק ורשמו את המשקל הסופי עבור סשן השתייה הקודם. לאחר מכן, מדדו את משקל הגוף של כל חולדה.
הניחו את בקבוקי המים של יום שלישי, חמישי ושבת על כל חלק עליון של כלוב עם סרטים הפונים כלפי מעלה כדי למנוע מהחולדה ללעוס את תוויות הבקבוקים. כדי להתחיל בבניית יחידת חיישן A, כסו כבל מחבר נקבה דו-פיני בצינורות אדומים לכיווץ חום. הכנס את קצוות החוטים האדומים והשחורים של הכבל לפין 0 ופין 1 בלוח החיישן והלחם אותם למקומם.
באופן דומה, הלחמו חמישה כבלים נוספים עם צינורות כיווץ חום בצבע מובהק. כדי להרכיב יחידת חיישן A חבר את לוח החיישן A לנקודת קצה של פריצת תקשורת עם כבל בעל ארבעה פינים. לאחר מכן, חבר את נקודת הקצה לפלט 3 וולט של מעביר הרמה.
יחידת חיישן בית A לתוך המארז המודפס בתלת מימד וסגור בעדינות את החלק העליון. לאחר בניית יחידות חיישנים B ו-C באופן דומה, שרשר את כל שלוש יחידות החיישנים באמצעות כבלי Ethernet כדי להשלים את הגדרת החיישן. כדי להגדיר את ממשק המיקרו-בקר, ערמו את לוגר הנתונים שהשתנה על המיקרו-בקר.
לאחר מכן, ערמו את מסך המגע שהשתנה על לוגר הנתונים. הכנס את כרטיס ה-microSD והמתאם לתוך לוגר הנתונים. חבר את חוטי המגשר עם ארבעה פינים וחוט הארקה נוסף למיקרו-בקר.
אכלס את ממשק המיקרו-בקר המורכב במלואו בתוך המארז המודפס בתלת מימד עם חוטי המגשר עם ארבעה פינים וחוט הארקה מושחלים דרך הפתח בחלקו העליון. כדי להתקין את מערכת LIQ HDR ברכיבי כלוב, חבר את הליקומטר ואת הלוח האקרילי החתוך בלייזר לחלק העליון של הכלוב באמצעות שני סטים של ברגים ואומים. לאחר מכן, התקן את חוסם הלגימה המורכב על החלק העליון של הכלוב באמצעות סט ברגים, וודא ששני חוסמי הלגימה מתיישרים כראוי עם פתחי הלגימה.
כדי להשתמש במערכת LIQ HDR בוויווריום, התקן כל יחידת חיישן על מדפי הוויווריום. סדרו ואבטחו את כל כבלי המחברים הנקביים כדי למנוע חפיפה או כיפוף מוגזם. התקן את ממשק המיקרו-בקר ליד יחידת החיישן A וחבר את המחבר שלו למעביר המפלס המחובר ליחידת החיישן A. השתמש בסרט חשמלי כדי להדק את חוט ההארקה הנוסף למדפי המתכת.
חבר בצורה מאובטחת את כל כבלי מחבר הליקומטר הזכריים לכבלי מחבר חיישן הנקבה התואמים. חבר את ספק הכוח כדי להפעיל את ממשק המיקרו-בקר. כדי להתחיל בהליך בחירת שני בקבוקים המצויד בליקומטר, השתמש בלגימה כדי לכסות את פתחי הלגימה בכל הכלובים.
לפני ההקלטה, בחר את הצד הניסיוני הנכון בדף ה-GUI הראשי המתאים לצד עם בקבוק האתנול לאותו יום. לאחר התקנת כל הבקבוקים בימי שני, רביעי ושישי, הקש על התחל בעמוד הראשי כדי להתחיל בכיול החיישן. לאחר השלמת הכיול, המערכת תציג את ספירת הליקוקים המצטברת עבור כל בקבוק בדף ההקלטה.
הרם את כל חוסמי הלגימה מעל צמרות הכלוב כדי לאפשר לחולדות גישה ללוגמים. החזר בעדינות את כל צמרות המסנן לכלובים. הקש על רענן על המסך כדי לעדכן את ספירת הליקוקים.
בימי שלישי, חמישי ושבת, הקש על שמור יציאה כדי להפסיק את ההקלטה ולחזור לדף ממשק המשתמש הגרפי הראשי. כדי להסיר את כרטיס ה-SD לצורך העברת נתונים, הקישו על הוצאת SD. הכנס את כרטיס ה-SD למחשב. לאחר מכן, צור עותק של קובץ נתוני ה-CSV עם תאריך הפעלת ההקלטה למחשב.
כדי להתכונן לפגישת ההקלטה הבאה, הכנס מחדש את כרטיס ה-SD לממשק והקש על הר SD. צריכת אתנול בחולדות הראתה דפוס של הסלמה במהלך הימים הראשונים של גישה לבחירת שני בקבוקים, ואחריה מישור. חולדות רבות הפגינו צריכת אתנול דמוית בולמוס זמן קצר לאחר תחילת השתייה. העדפת אתנול הייתה גבוהה משמעותית ממים במהלך שתייה מופרזת, אך לעתים קרובות נותרה מתחת ל-50% כאשר נמדדה במשך 24 שעות.
המספר המצטבר של הליקוקים שזוהה על ידי מערכת LIQ HDR נמצא בקורלציה חזקה עם השינוי במשקל הבקבוקים הן עבור אתנול והן עבור בקבוקי מים במשך 24 שעות. חולדות צרכו יותר אתנול ומים במהלך מחזור החושך בהשוואה למחזור האור, כפי שמתואר בדפוסי השתייה המחולקים למרווחים של 30 דקות. התנהגות שתייה דמוית בולמוס התרכזה בחמש הדקות הראשונות של סשן השתייה כפי שעולה מניתוח הנתונים ברזולוציה גבוהה יותר.
ריכוזי אתנול בדם שנלקחו 15 דקות לאחר תחילת הפגישה היו בקורלציה טובה עם מספר הליקוקים שזוהו, אפילו ברמות צריכת אתנול נמוכות. ניתוח מיקרו-מבני של שתייה חשף מספר דומה של ליקוקים והתקפי ליקוק בין חולדות זכרים ונקבות הקשורים לרמה דומה של צריכת אתנול.
