השתלת לבלב היא טיפול מרפא לאנשים עם סוכרת. עם זאת, איברים הם נדירים, אסטרטגיות כדי לשפר את מאגר התורמים נחוצים. Normothermic Ex Vivo Perfusion כבר היה מוצלח עבור איברים אחרים שעשויים לאפשר הערכה ותיקון של allografts הלבלב.
הלבלב הוא האיבר המושלך לרוב להשתלה. טכניקה זו יש פוטנציאל להגדיל את מאגר האיברים עבור אנשים החיים עם סוכרת מסובכת. שיטה זו גם תאפשר לנו להבין טוב יותר את הפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה, ולזהות סמנים ביולוגיים של נזק ללבלב.
ההתקנה יכולה להיות מעט מסובכת, ובהתחשב בכך שהלבלב הוא איבר רגיש מאוד, יש צורך בתרגול לשליפתו. כדי להתחיל, לחטא ולכסות את שדה הניתוח. לבצע חתך קו אמצע מהקסיפואיד לסימפיזת הערווה, ולהרחיב את שדה הניתוח עם חתך צדדי שמאלי לחשיפה טובה יותר.
לנתח את הווריד קאווה התחתון מן אבי העורקים הבטן. שחררו עוד יותר את אבי העורקים מהרקמה שמסביב, וקשרו את ענפי אבי העורקים המותניים הקטנים. לזהות ולמקם ליגטורות סביב שני עורקי הכליה.
ברגע שהחלק האחורי של אבי העורקים פנוי, העבירו סביבו שתי ליגטורות שבהן הליגטורה התחתונה תיקשר בסופו של דבר ממש מעל הביפורקציה של העורק האיליאק, והליגטורה העליונה תהיה קשורה חמישה סנטימטרים מעל הקשר הקודם. לאחר ניתוח הילום הכבד, לקשור את כל העורקים קרוב ככל האפשר לכבד. לאחר מכן זהה את צינור המרה המשותף.
מניחים שתי ליגטורות קרוב לכבד, ומחלקים את המבנה. לאחר מכן, לזהות ולנתח סביב החלק הכבד העליון של אבי העורקים ומניחים עניבה סביבו. לאחר מכן, פתחו את השק הקטן כדי לאפשר לקרח לקרר את הלבלב ולגייס את הלבלב כמה שפחות לפני השטיפה.
לאחר מכן לנהל 500 יחידות בינלאומיות של הפרין לכל קילוגרם של משקל התורם דרך הקו המרכזי, ולהתחיל איסוף דם בציטראט, פוספט, דקסטרוז, מלוחים, אדנין, גלוקוז ושקיות מניטול באמצעות קטטר jugular. לאחר קשירת ליגטורת אבי העורקים הנחותה, קנוס את אבי העורקים עם קו סומק מעל קשר ביפורקציה iliac. הדקו את הצינורית עם העניבה העליונה, וקשרו את שני עורקי הכליה.
לאחר שנאסף מספיק דם, קשרו את אבי העורקים הסופרצליאק והניחו מהדק מעל העניבה. לאחר מכן, התחל סומק עם פתרון שימור אוניברסיטת ויסקונסין. לאחר מכן חותכים פתח בווריד הפורטל וקאווה לאוורור.
לאחר שטיפה של ליטר אחד של פתרון אוניברסיטת ויסקונסין, להעריך את הלבלב, זנב ואת התריסריון C-loop. ולאחר סמוק כראוי, להתחיל דיסקציה על ידי זיהוי הידוק כלי mesenteric. אחזר את השתל הלבלב, ומקטע של וריד הקאווה או האיליאק, להרחבה של וריד הפורטל.
ומניחים את האיבר בתוך שקית איברים שמונחת בתוך אגן מלא קרח. לאחר הסרת קו ההדחה מהחלק הדיסטלי של אבי העורקים, סגור אותו עם עניבה, ומלא את שקית האיברים בתמיסת UW הנותרת. לאחר מכן, בצע הארכת ורידים פורטלית באמצעות קאווה או וריד איליאק שהתאושש בעבר עם 6-0 Prolene, ו cannulate את וריד הפורטל ואת אבי העורקים פרוקסימלי עם רבע כפול 3/8 Reducer.
לאחר מכן יש לערבב את החלק הדיסטלי של התריסריון בעזרת קטטר מאלקוט ועניבה. לאחר מכן הדקו את קצה הצנתר כדי למנוע שפיכת תוכן תריסריון, והשגיחו על כלי הדם המזנטריים עם 4-0 Prolene. לאחר רישום משקל השתל, שמור את השתל באחסון קר סטטי עד תחילת זילוח הלבלב Ex Vivo.
מניחים את תא הלבלב על שולחן מאיו, ומכניסים את הצינור העורקי והוורידי דרך החורים המיועדים למטרה זו. חברו והפעילו את יחידת החימום החיצונית. לאחר הנחת צינור היניקה בתוך משאבת הגלילה, חבר קצה אחד לצינור היוצא מהחדר כדי לאסוף את הנוזלים, ואת הקצה השני למאגר הוורידי כדי לאסוף את כל אובדן האיברים של פרבוסט.
לאחר מכן חבר את צינור החמצן למיכל הגז המכיל את תערובת הפחמן ואת המחמצן. לאחר מכן חבר את צינור יחידת משאבת החימום למחמצן. מהדק את קווי הזרימה העורקים והוורידים, כמו גם את זרימת המאגר הוורידי.
לאחר מילוי המאגר הוורידי עם perfusate, באמצעות משאבת מזרק אחד ברציפות לנהל את vasodilator בשמונה מיליליטר לשעה לתוך קו העורק. לאחר מכן באמצעות משאבת מזרק שנייה, ברציפות לנהל את מעכב האנזים ישירות לתוך המאגר הוורידי. לאחר הפעלת מכונת הלב-ריאה, הפעל את לוחות הלחץ, הטמפרטורה והטיימר.
לאחר מכן הפעל את משאבת החימום כדי לחמם את תמיסת הזילוח ל -38 מעלות צלזיוס, ופתח את אספקת החמצן פחמן דו חמצני. לאחר מכן הסר את מהדק הצינור שהונח על זרימת המאגר הוורידי, והתחל את המשאבה הצנטריפוגלית, לוקח אותו עד 1, 500 סל"ד. לאחר מכן, מהדק את הצינור תוך עקיפת מסנן העורק.
ולשחרר אוויר מהמסנן העורקי. לאחר מכן, אפס את קווי הלחץ העורקי והוורידי. לאחר פתיחת שקית האיברים שבה מאוחסן הלבלב, סומק עם 200 מיליליטר של אלבומין דרך צינורית העורק.
לאחר מכן להסיר את הלבלב מן הקרח, ולמקם אותו בתוך חדר האיברים, להבטיח כי צינורות עורקי ורידי הם ללא אוויר. לאחר מכן, לאחר שחרור המהדק מהצד העורקי, מהדקים את קיצור הדרך בין הצינור העורקי לווריד. ברגע שהדם מתחיל לצאת מהצינורית העורקית, חברו את הקו לצינורית העורקית.
לאחר מכן הגדר את לחץ העורקים ל -20 עד 25 מילימטרים של כספית על ידי ויסות מהירות המשאבה הצנטריפוגלית, וחבר צינורות ורידיים ברגע שהדם מתחיל לצאת מהצינורית הוורידית. לאחר מכן, לנהל בקבוקון אחד של verapamil ישירות לצד העורקי כאשר הלבלב מחובר לחלוטין ולא דימומים מידה נצפים. לאחר רישום הפרמטרים השונים כמתואר בכתב היד.
קח את הדגימות לניתוח. נתק צינורות עורקיים וורידיים עם סיום הזילוח. לאחר הסרת השתל מתא האיברים, יש לשטוף בתמיסת אוניברסיטת ויסקונסין קרה, ולשקול.
לאחר מכן אחסנו את השתל על קרח בשקית איברים סטרילית עד לרגע ההשתלה. הלחץ והזרימה נמדדו לאורך כל הזילוח, והתוצאות הראו שהוא נשאר יציב. הפעילות המטבולית נאמדה על ידי חישוב צריכת החמצן הממוצעת של השתל.
התוצאות מראות כי מדידות pH, נתרן, סידן וביקרבונט היו בתוך הערכים הפיזיולוגיים במהלך כל הזילוח. נצפה כי רמות הלקטט והאשלגן ירדו במהלך הזילוח והשיגו ערכים קרובים לנורמליים לאחר שלוש שעות. מכיוון שהמעגל הוא מערכת סגורה, רמות העמילאז והליפאז היו צפויות לעלות במהלך הזילוח.
עם זאת, נראה כי העלייה ברמות אינה מתואמת עם הנזק לשתל. חשוב מאוד לזכור כי הלבלב חייב להיות מניפולציה כמה שפחות לפני סומק במהלך החילוץ. אנו מקווים שבעתיד מודל זה יאפשר התערבויות טיפוליות לתיקון איברים שאינם מתאימים להשתלה.
טכניקה זו תאפשר לחוקרים להמשיך לחקור פגיעה באיסכמיה של הלבלב, שימור, הערכה ובסופו של דבר תיקון.
