מודל זה של דימום תת-עכבישי מסייע לנו להבין טוב יותר את המנגנונים הפתופיזיולוגיים ואת ההשלכות. יש לקוות שזה יביא ליצירת טיפולים, שיפחיתו את נטל המחלה בחולים החולים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שלה מאוד לשחזור, כמו כמות קבועה של דם מוזרק.
יתר על כן, הוא דומה לדימום תת-עכבישי אנושי בפרמטרים מרכזיים. כדי להפוך את הבדיקה ICP, לשרוף קצה אחד של חתיכת 20 מ"מ של צינור פוליתן, ביצוע צלחת עגולה ושמירה על לומן פתוח. לאחר מכן החליקו טבעת צינורות סיליקון של מילימטר אחד מעל צינור הפוליתן לפני חיבור חתיכת צינורות סיליקון בקוטר 10 מ"מ לקצה צינורות הפוליתן.
לאחר מכן, יש להרדים, לבצע אינטובציה ולצנתר חולדה מסוג Sprague Dawley לפני הכנסתה למסגרת סטריאוטקסית. לאחר מתן הרדמה מקומית, יש לבצע חתך עור בקוטר שמונה מ"מ מניקוב המחט בקו האמצע. תחת מיקרוסקופ ניתוח, לנתח את כל השרירים בצורה בוטה בשכבות כדי לזהות את הממברנה atlantooccipital.
לאחר מכן השתמש בזרוע retractor כדי לרסן את שרירי הצוואר, הצבת retractor caudally במידת הצורך. לאחר בדיקה שבדיקת ICP סטרילית מחוברת למתמר ICP, שטפו את בדיקת ICP במי מלח, וודאו שאין בועות אוויר בבדיקה. באמצעות מחט 23 מד, לחתוך את הממברנה atlantooccipital, עושה חור כדי לשדל בעדינות את בדיקת ICP דרך הממברנה.
משכו קלות את הגשושית וודאו שהיא מראה עקומה פועמת שנעה בין אפס לחמישה מילימטרים של כספית. אם לא, הסר את הבדיקה, בדוק מחדש את החיבור למתמר ואשר את הזרימה דרך הלומן. באזור שבו הקרום האטלנטו-אוקסיפיטלי עוטף את הבדיקה, יש למרוח שתי טיפות של דבק רקמות.
לאחר מכן הזיזו את צינור הסיליקון בקוטר מילימטר אחד קדימה לכיוון הממברנה, לפני מריחת דבק נוסף כדי למזער את הסיכון לתזוזה של בדיקת ICP. לאחר הדבקת בדיקת ICP, הסר את המשענת. לאחר מכן, באמצעות תפר מונופילמנט 4-0 שאינו ניתן לספיגה חוזרת, הניחו תפר מזרן אופקי אחד בקצה הקאודלי של החתך ותפר אחד פשוט קטוע בקצה הצפלי.
כדי למקם את גשושית דופלר הלייזר, בצע חתך של 15 מ"מ באופן קאודלי בקו האמצע, החל ממש קדמי לעיניים. לאחר הסרת רקמת החיבור והשרירים בעזרת מלקחיים, השתמשו בקצה צמר גפן סטרילי כרוגין כדי לזהות את הברגמה ואת התפרים העטרתיים. לאחר הנחת המשענת החמושה, הניחו מחט עמוד שדרה של 25 מד במסגרת הסטריאוטקסית בדיוק על הברגמה ושימו לב למיקום.
לאחר מכן, להסיר את המחט מן bregma. הזז את המסגרת קדימה ב- 6.5 מילימטרים. לאחר מכן החלף את המחט בקו האמצע כדי לסמן את צד הקידוח.
מקדחים עד לזיהוי הדורה מאטר מתחת לעצם. בעזרת מלקחיים ישרים, הסר בעדינות את שברי העצם. ואז למלא את החלל עם שעווה עצם.
לאחר מכן, שלושה עד ארבעה מילימטרים לרוחב מימין לברגמה ורק קדמי לתפר העטרה עבור דופלר הלייזר, לקדוח חור נוסף. נזהרים לא לחדור את הדורה מאטר. חפש את כלי הדם שבהם דופלר הלייזר יכול למדוד את זרימת הדם.
מניחים את דופלר הלייזר ובודקים את הערכים. נדרש ערך מינימלי של 100 יחידות שטף. אם הערכים נשארים קבילים לאחר הסרת המיקרוסקופ, הוסף טיפה אחת של דבק כדי לתקן את הבדיקה.
בדוק שוב אם הערך הוא מעל 80 יחידות שטף. כדי לגרום לדימום תת-עכבישי, הכנס את המחט בעדינות דרך הגולגולת בקו האמצע בין ההמיספרות עד שתורגש התנגדות עקב בסיס הגולגולת. משכו את המחט במילימטר אחד כדי להבטיח מיקום נכון רק קדמית לכיאזמה האופטית.
כדי להבטיח את התוצאה הומוגנית ביותר בעת הזרקת הדם, סובב את המחט בכיוון השעון על ידי 90 מעלות כך קצה המחט מצביע ימינה. לאחר מכן להסיר את סטילטו. לאחר שיווי משקל של 15 דקות, התאם את רמת ההרדמה כדי לקבל לחץ דם עורקי ממוצע בטווח של 80 עד 100 מילימטרים של כספית.
לאחר מכן בצע ניתוח גז דם כדי לאשר כי ה- pH, לחץ חלקי של פחמן דו חמצני ולחץ חלקי של חמצן נמצאים בתוך פרמטרים פיזיולוגיים. לאחר מכן, באמצעות מזרק של מיליליטר אחד עם מחט קהה של 23 מד, למשוך 500 מיקרוליטר דם מקטטר הזנב. כדי למנוע הזרקת אוויר, מלא את החלל המת של חדר מחט עמוד השדרה בדם.
לאחר התאמת נפח הדם במזרק ל -300 מיקרוליטר, חבר את המזרק למחט עמוד השדרה. לאחר מכן, אחיזה חזקה סביב המזרק, להזריק את הדם באופן ידני כדי לעלות על לחץ העורקים הממוצע. שימו לב לעלייה תלולה בלחץ התוך-מוחי ולירידה תלולה במקביל בזרימת הדם במוח.
30 דקות לאחר השראת דימום תת-עכבישי, הסר את המחט ואת בדיקת דופלר הלייזר. וממלאים את החללים בשעוות עצם. באמצעות תפר מונופילמנט 4-0 שאינו ניתן לספיגה חוזרת, סגור את החתך עם שני תפרי מזרן אופקיים.
כדי להשתמש בבדיקת ICP להזרקות לתוך מגנה cisterna, להסיר את צינור סיליקון ולהכניס מתאם יציאת פין לצינורות פוליאתן. כדי לבצע מתן intrathecal בזמן החיה ערה, מניחים מזרק יציאת סיכה על מזרק מדויק. לאחר מכן נהל את הטיפול באמצעות מתאם יציאת הסיכה.
אם אין צורך לבצע ממשלים intrathecal, לחתוך את התפר פשוט קטוע. לאחר מכן, באמצעות מספריים, לקצר את בדיקת ICP ככל האפשר ולהדביק את הקצה כדי למנוע דליפת נוזל השדרה. סגור את החתך בתפר מונופילמנט 4-0 שאינו נספג.
בהערכת התפקוד המוטורי התחושתי הגס באמצעות מבחן המוט המסתובב, חולדות עם דימום תת-עכבישי המושרה בניסוי הציגו ביצועים גרועים משמעותית 24 ו-48 שעות לאחר הניתוח בהשוואה לחיות דמה. הרגישות לאנדותלין-1, אגוניסט ממשפחת קולטני אנדותלין-1, עלתה משמעותית יומיים לאחר דימום תת-עכבישי בבזילר ובעורקי המוח האמצעיים של חולדות הניסוי בהשוואה לאלה של קבוצת הביקורת המזויפת. שני העורקים של חולדות הניסוי הראו גם עלייה דומה ברגישות ל-5-carboxamidotryptamine, אגוניסט ממשפחת קולטני 5-hydroxytryptamine.
לאחר ההליך, ניתן לבצע בדיקות נוירו-התנהגותיות וכן ניתוח רקמות כולל אימונוהיסטוכימיה, PCR, מנתח כתמים מערבי כדי לנתח השלכות ומנגנונים.
